北京化工大學(xué)分子生物學(xué)期末考試總結(jié).doc

簡(jiǎn)答題第一章 染色體與DNA：一、真核生物基因組特征1.真核基因組龐大，一般遠(yuǎn)大于原核生物的基因組。2.真核基因組存在大量的重復(fù)序列。3.真核基因組大部分為非編碼序列，占整個(gè)基因組序列的90%以上，這是真核生物與原核生物的重要區(qū)別。4.真核基因組的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順?lè)醋印?.真核基因是斷裂基因，有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)。6.真核基因組存在大量的順式作用元件。7.真核基因組中存在大量的DNA多態(tài)性。8.真核基因組具有端粒結(jié)構(gòu)。二、原核生物基因組特征1結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)練：DNA中的大部分結(jié)構(gòu)是用來(lái)編碼蛋白質(zhì)2存在轉(zhuǎn)錄單元：在原核生物中功能相關(guān)的蛋白的基因往往集中在基因組的一個(gè)或幾個(gè)特定部位如大腸桿菌乳糖操縱子3有重疊基因：兩種或兩種以上的基因公用部分DNA序列，則這些基因互稱(chēng)重疊基因三、真核生物DNA復(fù)制特點(diǎn)1、真核生物每條染色體上有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，多復(fù)制子（約150bp左右）；2、復(fù)制叉移動(dòng)的速度較慢（約50bp秒），僅為原核生物的110。3、真核生物染色體在全部復(fù)制完之前,各個(gè)起始點(diǎn)不再重新開(kāi)始DNA復(fù)制；真核生物快速生長(zhǎng)時(shí)，往往采用更多的復(fù)制起點(diǎn)。4、真核生物有多種DNA聚合酶。5、真核生物DNA復(fù)制過(guò)程中的引物及岡崎片段的長(zhǎng)度均小于原核生物。（真核岡崎片段長(zhǎng)約100-200bp，原核岡崎片段長(zhǎng)約1000-2000bp。）6、真核生物線性DNA末端具有端粒結(jié)構(gòu)四、原核和真核生物DNA的復(fù)制特點(diǎn)比較復(fù)制起點(diǎn)（ori）：原核一個(gè)，真核多個(gè)；復(fù)制子：原核一個(gè)，真核多個(gè)；復(fù)制子長(zhǎng)度：原核長(zhǎng)；真核短；復(fù)制叉：原核多個(gè)；真核多個(gè)；復(fù)制移動(dòng)速度：原核較快；真核較慢；真核生物染色體在全部完成復(fù)制前，各起始點(diǎn)的DNA復(fù)制不能再開(kāi)始。而在快速生長(zhǎng)的原核生物中，復(fù)制起點(diǎn)上可以連續(xù)開(kāi)始新的DNA復(fù)制。原核生物染色體的復(fù)制與細(xì)胞分裂同步，可以多次復(fù)制；真核生物染色體的復(fù)制發(fā)生在S期，是細(xì)胞分類(lèi)的特定時(shí)期，而且僅此一次。五、大腸桿菌復(fù)制體完成復(fù)制的過(guò)程1雙鏈的解開(kāi)2 RNA引物的合成3 DNA鏈的延伸4切除RNA引物，填補(bǔ)缺口，連接相鄰的DNA片段六、P-轉(zhuǎn)座子特征1.當(dāng)p轉(zhuǎn)座子在轉(zhuǎn)座酶的催化下，會(huì)導(dǎo)致不育。2.p型果蠅存在p轉(zhuǎn)座子，m型沒(méi)有。3.p型果蠅在細(xì)胞質(zhì)中存在一個(gè)可遺傳的、抑制轉(zhuǎn)座酶表達(dá)的因子，m型沒(méi)有七、轉(zhuǎn)座引起的遺傳學(xué)效應(yīng)1.插入突變2.轉(zhuǎn)座產(chǎn)生新基因3.轉(zhuǎn)座產(chǎn)生染色體畸變4.轉(zhuǎn)座引起生物進(jìn)化八、端粒的結(jié)構(gòu)與功能結(jié)構(gòu)：是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的復(fù)合體，由多個(gè)串聯(lián)在一起的非轉(zhuǎn)錄序列(TTAGGG)組成。功能：1、保證線性DNA的完整復(fù)制2、保護(hù)染色體末端不受核酸酶水解和不發(fā)生染色體的異常重組九、DNA的修復(fù)DNA修復(fù)系統(tǒng)功能錯(cuò)配修復(fù)恢復(fù)錯(cuò)配堿基切除修復(fù)切除突變的堿基核甘酸切除修復(fù)修復(fù)被破壞的DNADNA直接修復(fù)SOS系統(tǒng)修復(fù)嘧啶二體或甲基化DNADNA的修復(fù)，導(dǎo)致變異第二章 轉(zhuǎn)錄與剪接：一、大腸桿菌轉(zhuǎn)錄終止子的分類(lèi)和特點(diǎn)1.強(qiáng)終止子內(nèi)部終止子（intrinsic terminator）又稱(chēng)為不依賴(lài)Rho ()因子的轉(zhuǎn)錄終止特點(diǎn)：1）終止位點(diǎn)上游一般存在一個(gè)富含GC堿基的二重對(duì)稱(chēng)區(qū)，轉(zhuǎn)錄生成的RNA形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)；2）在終止位點(diǎn)前面有一段由4-8個(gè)A組成的序列，所以轉(zhuǎn)錄的RNA的3端為寡聚U。2.弱終止子需要因子（rho factor）又稱(chēng)為依賴(lài)性終止子（Rho-dependent terminator）1）當(dāng)RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄到發(fā)夾結(jié)構(gòu)時(shí)發(fā)生一定時(shí)間的停頓，這時(shí)如果沒(méi)有因子，轉(zhuǎn)錄將會(huì)繼續(xù)下去；只有當(dāng)因子存在時(shí)，轉(zhuǎn)錄才終止2）因子是一個(gè)相對(duì)分子質(zhì)量為2.0105的六聚體蛋白，它能水解各種核苷三磷酸，實(shí)際上是一種NTP酶。由于催化了NTP的水解，因子能促使新生的RNA鏈從三元轉(zhuǎn)錄復(fù)合物中解離出來(lái)，從而終止轉(zhuǎn)錄。3）依賴(lài)因子的終止“窮追”模型（hot pursuit）二、真核生物內(nèi)含子種類(lèi)及其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1 tRNA 內(nèi)含子：長(zhǎng)度和序列沒(méi)有共同性，一般有1646個(gè)核苷酸；位于反密碼子下游；內(nèi)含子與外顯子間的邊界沒(méi)有保守序列；2 mRNA 內(nèi)含子：1）GU-AG主要內(nèi)含子 細(xì)胞核 5端有一保守序列（5-GUPuAGU-3）,3端AG附近有一富含嘧啶的區(qū)域2）AU-AC次要內(nèi)含子 細(xì)胞核3）類(lèi)自剪接內(nèi)含子 線性?xún)?nèi)含子4）類(lèi)自剪接內(nèi)含子 套索狀結(jié)構(gòu)三、轉(zhuǎn)錄的基本過(guò)程1、模板識(shí)別：RNA聚合酶與啟動(dòng)子DNA雙鏈相互作用并與之相結(jié)合的過(guò)程2、轉(zhuǎn)錄起始：就是RNA鏈上第一個(gè)核苷酸鍵的產(chǎn)生RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合后，使啟動(dòng)子附近的DNA雙鏈解離，形成轉(zhuǎn)錄泡，為RNA合成提供單鏈模板，并按堿基配對(duì)原則，結(jié)合核苷酸，在核苷酸之間形成磷酸二脂鍵（起始復(fù)合物）。3、RNA鏈的延伸：亞基脫落，RNApol聚合酶核心酶變構(gòu)，與模板結(jié)合松弛，沿著DNA模板前移；在核心酶作用下，NTP不斷聚合，RNA鏈不斷延長(zhǎng)4、轉(zhuǎn)錄終止：當(dāng)RNA鏈延伸到轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)時(shí)，RNA聚合酶不再形成新的磷酸二酯鍵，RNA-DNA雜合物分離，轉(zhuǎn)錄泡瓦解，DNA恢復(fù)雙鏈狀態(tài)，而RNA聚合酶和RNA鏈都被從模板上釋放出來(lái)，這就是轉(zhuǎn)錄的終止。四、真核生物的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物必須經(jīng)過(guò)哪些加工過(guò)程才能成為成熟mRNA，做為蛋白質(zhì)合成模板1、5端加帽：通過(guò)鳥(niǎo)苷酸轉(zhuǎn)移酶在mRNA5端加上一個(gè)甲基化鳥(niǎo)嘌呤，使mRNA免遭核酸酶破壞2、3端加尾：提高mRNA在細(xì)胞質(zhì)中的穩(wěn)定性3、RNA的剪接：從mRNA前體分子中切除內(nèi)含子的非編碼區(qū)，并拼接外顯子的編碼區(qū)形成成熟mRNA的過(guò)程4、RNA的編輯：是指轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。5、再編碼及化學(xué)修飾第三章 表達(dá)和修飾：一、真核生物蛋白質(zhì)復(fù)制起始與原核生物的區(qū)別原核生物：起始tRNA：fMet-tRNAfMet（氨酰-tRNA合成酶）所需成分：30S小亞基、50S大亞基、模板mRNA、fMet-tRNAfMet、GTP、Mg2+步驟：30S小亞基+fMet-tRNAfMet+50S大亞基復(fù)合物翻譯起始因子：IF-1、IF-2、IF-3真核生物：起始tRNA：Met-tRNAMet步驟：40S小亞基+Met-tRNAMet+60S大亞基=復(fù)合物起始因子(eIF)比較多二、原核生物的復(fù)制起始因子IF1、IF2、IF3的功能分別是什么？IF-1：僅作為完整的起始復(fù)合物的一部分，與30S亞基結(jié)合。它的結(jié)合在A位，能阻止氨酰-tRNA的進(jìn)入。它的定位還可以阻止30S亞基和50S亞基的結(jié)合。IF-2：是特異和fMet-tRNAfMet結(jié)合并把它帶到核糖體上；IF-3：輔助30S亞基與mRNA上起始位點(diǎn)特異性結(jié)合三、肽鏈延伸過(guò)程可以分幾步？1、AA-tRNA與核糖體A位點(diǎn)結(jié)合(需要消耗GTP，并需EF-Tu、EF-Ts兩種延伸因子)2、肽鍵形成：是由轉(zhuǎn)肽酶/肽基轉(zhuǎn)移酶催化(此時(shí)A位點(diǎn)的AA-tRNA轉(zhuǎn)移到P位點(diǎn))3、移位：核糖體向mRNA3端方向移動(dòng)一個(gè)密碼子，需要消耗GTP，并需EF-G延伸因子四、原核生物延伸因子EF-Ts、EF-Tu、EF-G的功能是什么，真核生物的延伸因子的功能和作用？五、肽鏈的終止釋放因子（原核生物）：RF1：識(shí)別終止密碼子UAA和UAG釋放因子RF2：識(shí)別終止密碼子UAA和UGARF3：具GTP酶活性，刺激RF1和RF2活性，協(xié)助肽鏈的釋放釋放因子（真核生物）：eRF1：識(shí)別終止密碼子UAA,UAG和UGAeRF3：與RF3相似六、蛋白質(zhì)合成抑制劑四環(huán)素類(lèi) 阻止AA-tRNA與核糖體結(jié)合鏈霉素,新霉素,卡那霉素 干擾AA-tRNA與核糖體結(jié)合而引起讀碼錯(cuò)誤氯霉素 阻止mRNA與核糖體結(jié)合嘌呤霉素 結(jié)合在核糖體的A位，抑制AA-tRNA的進(jìn)入白喉毒素 抑制EF-Tu的功能七、蛋白質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制1、翻譯-運(yùn)轉(zhuǎn)同步機(jī)制信號(hào)肽假說(shuō)，信號(hào)肽常指新合成多肽鏈中用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)跨膜轉(zhuǎn)移的N-末端氨基酸序列（有時(shí)不一定在N端）。信號(hào)序列特點(diǎn)：（1）一般帶有10-15個(gè)疏水氨基酸；（2）在靠近該序列N-端常常有1個(gè)或數(shù)個(gè)帶正電荷的氨基酸；（3）在其C-末端靠近蛋白酶切割位點(diǎn)處常常帶有數(shù)個(gè)極性氨基酸，離切割位點(diǎn)最近的那個(gè)氨基酸往往帶有很短的側(cè)鏈（丙氨酸或甘氨酸）。2、翻譯后運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制(1)線粒體蛋白質(zhì)跨膜運(yùn)轉(zhuǎn)(2)核定位蛋白的運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制第四章 分子生物學(xué)技術(shù)一、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的原理1、原理：a、在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)累積實(shí)現(xiàn)了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析的方法。b、實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增，在擴(kuò)增的指數(shù)期對(duì)起始模板進(jìn)行定量c、Ct值的定義：擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)過(guò)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)。此時(shí)擴(kuò)增是呈對(duì)數(shù)期d、數(shù)學(xué)原理：X Ct:熒光擴(kuò)增信號(hào)達(dá)到閾值強(qiáng)度時(shí)擴(kuò)增產(chǎn)物的量；在閾值線設(shè)定以后,它是一個(gè)常數(shù),我們?cè)O(shè)為MX Ct=X0(1+Ex) Ct=M Log M=logX0(1+Ex) Ct log X0= -log(1+Ex) *Ct+ log M 結(jié)論：Log X0與Ct呈線性關(guān)系，根據(jù)樣品擴(kuò)增的Ct值就可計(jì)算出樣品中所含的模板量。2、方法1）SYBR Green法工作機(jī)理：SYBR Green只有和dsDNA結(jié)合后才發(fā)熒光變性時(shí)，DNA雙鏈分開(kāi)，無(wú)熒光在延伸結(jié)束階段采集熒光信號(hào)。SYBR Green也能和非特異的雙鏈DNA結(jié)合發(fā)光，所以必須在反應(yīng)結(jié)束時(shí)做熔解曲線分析優(yōu)點(diǎn)：對(duì)DNA模板沒(méi)有選擇性，適用于任何DNA使用方便，不必設(shè)計(jì)復(fù)雜探針?lè)浅ｌ`敏便宜缺點(diǎn)：容易與非特異性雙鏈DNA結(jié)合，產(chǎn)生假陽(yáng)性。但可以通過(guò)熔解曲線的分析，優(yōu)化反應(yīng)條件對(duì)引物特異性要求較高2）TaqMan法工作機(jī)理：5端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R)，如FAM、VIC等3端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)(Quencher, Q)探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收，無(wú)熒光，R與Q分開(kāi)，發(fā)熒光（相隔太近，熒光共振能量轉(zhuǎn)移）Taq酶有53外切核酸酶活性，可水解探針優(yōu)點(diǎn)：對(duì)目標(biāo)序列的高特異性，陰性結(jié)果確定設(shè)計(jì)相對(duì)簡(jiǎn)單，與目標(biāo)序列某一區(qū)域互補(bǔ)缺點(diǎn)：只適合一個(gè)特定的目標(biāo)委托公司標(biāo)記，價(jià)格較高不易找到本底低的探針重復(fù)性比較好二、Sanger雙脫氧鏈終止法1、原理1）利用單鏈DNA模板，合成DNA互補(bǔ)鏈；2）利用2，3雙脫氧核苷三磷酸作底物，參入到寡核酸鏈的末端，從而終止DNA鏈的生長(zhǎng)2、步驟1）同時(shí)加入引物和模板、DNA聚合酶1、一種ddNTP、以及四種dNTP（有一種帶放射性標(biāo)記）。2）變性膠電泳分離反應(yīng)混合物。3）放射自顯影術(shù)，檢測(cè)單鏈DNA片段的放射性帶。4）結(jié)果判讀，從放射性X光底片上，直接讀出DNA的核酸順序5）分別確定A、G、C、T的位置最后組合到一起三、Sanger雙脫氧-M13體系DNA序列分析法1、引物合成缺點(diǎn)：這些供作序列測(cè)定的DNA片段絕大多數(shù)都僅為數(shù)百個(gè)核酸。因此需要用物理方法分離大量的DNA片段。費(fèi)時(shí)費(fèi)錢(qián)，因?yàn)樯唐诽峁┑暮怂醿?nèi)切限制酶的價(jià)格是十分昂貴。2、原理：將不同限制酶消化切割的DNA限制片段，隨機(jī)地克隆到載體分子上。選用天然的單鏈DNA噬菌體，例如M13作為載體，重組體噬菌體的DNA分子，可直接用作模板3、步驟：四、RNA干擾（RNA interference RNAi）1、定義：RNA干擾是一種雙鏈RNA誘導(dǎo)信使RNA降解的基因沉默現(xiàn)象2、作用機(jī)制：1）雙鏈RNA降解生成特殊結(jié)構(gòu)的RNA，長(zhǎng)度約為2123bp，具有5單磷酸和3羥基末端，.3端均有一個(gè)23bp 的單鏈突出（Dicer 核酸酶）2）小干擾RNA誘導(dǎo)基因沉默復(fù)合物(siRNA induced silencing complex,RISC)特異識(shí)別并降解同源mRNA，導(dǎo)致靶基因沉默。3、特征：1）RNA干擾的普適性，存在于大多數(shù)生物中2）RNA干擾的特異性，特異識(shí)別同源mRNA,導(dǎo)致靶基因沉默。第五章 原核生物基因表達(dá)調(diào)控一、乳糖操縱子1、結(jié)構(gòu)：CAP結(jié)合位點(diǎn)：結(jié)合cAMP-CAP復(fù)合物（葡萄糖濃度高會(huì)阻止cAMP形成）（屬于正調(diào)控）啟動(dòng)序列（P區(qū)）：結(jié)合RNA聚合酶操縱序列（O區(qū)）：結(jié)合阻遏蛋白（異構(gòu)乳糖可與之結(jié)合使阻遏蛋白離開(kāi)操縱區(qū)）（屬于負(fù)調(diào)控）LacZ：編碼-半乳糖苷酶：將乳糖水解成葡萄糖和半乳糖（可生成異構(gòu)乳糖）LacY：編碼-半乳糖苷透過(guò)酶：使外界的-半乳糖苷（如乳糖）能透過(guò)大腸桿菌細(xì)胞壁和原生質(zhì)膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。LacA：編碼-半乳糖苷乙酰基轉(zhuǎn)移酶：乙酰輔酶A上的乙酰基轉(zhuǎn)到-半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。2、運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制3、一些問(wèn)題誘導(dǎo)物需要穿過(guò)細(xì)胞膜才能與阻遏物結(jié)合，而轉(zhuǎn)運(yùn)誘導(dǎo)物需要透過(guò)酶，后者的合成又需要誘導(dǎo)。解釋?zhuān)阂恍┩高^(guò)酶可以在沒(méi)有誘導(dǎo)物的情況下合成真正的誘導(dǎo)物是異構(gòu)乳糖而非乳糖，前者是在-半乳糖甘酶的催化下由乳糖形成的，因此，需要有-半乳糖甘酶的預(yù)先存在。解釋?zhuān)罕镜姿降慕M成型合成：非誘導(dǎo)狀態(tài)下有少量的lac mRNA合成。：葡萄糖對(duì)lac操縱子的阻遏作用稱(chēng)分解代謝阻遏，糖酵解的某些產(chǎn)物是腺苷酸環(huán)化酶（生成cAMP）的抑制劑。lac基因產(chǎn)物數(shù)量上的比較 -半乳糖苷酶：透過(guò)酶：乙酰基轉(zhuǎn)移酶=1：0.5：0.2原因如下：（1）lac mRNA可能與翻譯過(guò)程中的核糖體相脫離，從而終止蛋白質(zhì)鏈的翻譯；（2）在lac mRNA分子內(nèi)部，A基因比Z基因更容易受內(nèi)切酶作用發(fā)生降解。4、結(jié)論：?jiǎn)渭內(nèi)樘谴嬖跁r(shí)，細(xì)菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在時(shí)，細(xì)菌首先利用葡萄糖。二、色氨酸操縱子1、結(jié)構(gòu)色氨酸操縱子的結(jié)構(gòu)基因包括5個(gè)：trpE、D、C、B、A在trpE前是啟動(dòng)子（promoter），操縱子（operater）及兩個(gè)區(qū)（前導(dǎo)區(qū)、弱化子）色氨酸操縱子中產(chǎn)生阻遏物基因?yàn)閠rpR，距trp結(jié)構(gòu)基因較遠(yuǎn)(1)trpR和trpABCDE不連鎖；(2)操縱基因在啟動(dòng)子后(3)有衰減子(attenuator)/弱化子(4)啟動(dòng)子和結(jié)構(gòu)基因不直接相連，二者被前導(dǎo)序列(Leader)所隔開(kāi)2、負(fù)控阻遏系統(tǒng)3、trp操縱子的弱化作用（attenuation）前導(dǎo)序列：在trp mRNA5端trpE基因的起始密碼前一個(gè)長(zhǎng)162bp的mRNA片段，包括前導(dǎo)肽與弱化子，發(fā)現(xiàn)該區(qū)mRNA通過(guò)自我配對(duì)可以形成莖-環(huán)結(jié)構(gòu)，有典型的終止子特點(diǎn)，其中有1、2、3、4等四個(gè)片段可以有兩種配對(duì)方式，一個(gè)是2-3配對(duì)，這是一種抗終止構(gòu)型；另一個(gè)是1-2、3-4配對(duì)，3-4屬于終止轉(zhuǎn)錄發(fā)夾構(gòu)型（位于終止密碼識(shí)別區(qū)）。弱化子：DNA中可導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄過(guò)早終止的一段核甘酸序列，前導(dǎo)區(qū)中的3、4區(qū)段前導(dǎo)肽：前導(dǎo)序列中除去弱化子的片段，在第10位與第11位有相鄰的兩個(gè)色氨酸密碼子作用機(jī)制：trp濃度低Trp-tRNATrp少核糖體移動(dòng)速度慢核糖體停留在1、4區(qū)2-3配對(duì)trp濃度高Trp-tRNATrp多核糖體移動(dòng)速度快核糖體快速到達(dá)2區(qū)3-4配對(duì)弱化作用原因：細(xì)菌通過(guò)弱化作用彌補(bǔ)阻遏作用的不足，因?yàn)樽瓒糇饔弥荒苁罐D(zhuǎn)錄不起始，對(duì)于已經(jīng)起始的轉(zhuǎn)錄，只能通過(guò)弱化作用使之中途停下來(lái)。阻遏作用的信號(hào)是細(xì)胞內(nèi)色氨酸的多少；弱化作用的信號(hào)則是細(xì)胞內(nèi)載有色氨酸的tRNA的多少。4、遺傳學(xué)模型1）增強(qiáng)終止：前導(dǎo)肽合成起始密碼子AUG突變?yōu)锳UA，導(dǎo)致核糖體不能翻譯前導(dǎo)肽，于是形成1-2，3-4穩(wěn)定的二級(jí)結(jié)構(gòu)，從而終止增強(qiáng)2）突變恢復(fù)：如在3-4之間又發(fā)生一次突變或多聚U區(qū)在發(fā)生突變，使終止解除。三、其他操縱子1、半乳糖操縱子(galactose operon)雙啟動(dòng)子2、阿拉伯糖操縱子（arabinose operon）第六章 真核生物基因表達(dá)調(diào)控一、真核生物基因表達(dá)調(diào)控的種類(lèi)1、瞬時(shí)調(diào)控或稱(chēng)為可逆性調(diào)控，它相當(dāng)于原核細(xì)胞對(duì)環(huán)境條件變化所做出的反應(yīng)2、發(fā)育調(diào)控或稱(chēng)不可逆調(diào)控，是真核基因調(diào)控的精髓部分，它決定了真核細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、發(fā)育的全部進(jìn)程。二、真核生物DNA水平上的基因表達(dá)調(diào)控1、基因丟失：在細(xì)胞分化過(guò)程中，可以通過(guò)丟失掉某些基因而去除這些基因的活性2、基因擴(kuò)增：基因擴(kuò)增是指某些基因的拷貝數(shù)專(zhuān)一性增大的現(xiàn)象，在短期內(nèi)產(chǎn)生大量的基因產(chǎn)物以滿(mǎn)足生長(zhǎng)發(fā)育的需要，是基因活性調(diào)控的一種方式。3、基因重排：將一個(gè)基因從遠(yuǎn)離啟動(dòng)子的地方移到距它很近的位點(diǎn)從而啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄4、DNA的甲基化與基因調(diào)控：CpG島5、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)與基因表達(dá)調(diào)控三、真核生物轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá)調(diào)控1、真核基因轉(zhuǎn)錄1）真核基因結(jié)構(gòu)2）順式作用元件：?jiǎn)?dòng)子(TATABOX、CAATBOX、GCBOX)、增強(qiáng)子、沉默子3）反式作用因子：能直接或間接地識(shí)別或結(jié)合在各類(lèi)順式作用元件核心序列上，參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。2、結(jié)構(gòu)(1)DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域：a、螺旋-轉(zhuǎn)折-螺旋b、鋅指結(jié)構(gòu)(ZineFinger):由一個(gè)含有大約30個(gè)氨基酸的環(huán)和一個(gè)與環(huán)上的4個(gè)Cys或2個(gè)Cys和2個(gè)His配位的Zn構(gòu)成，形成的結(jié)構(gòu)像手指狀c、堿性-亮氨酸:亮氨酸之間相互作用形成二聚體，形成“拉鏈”。肽鏈氨基端20