免疫組化結(jié)果判斷及常見(jiàn)問(wèn)題的分析ppt課件.pptVIP

免疫組化結(jié)果判斷及常見(jiàn)問(wèn)題分析 1 2 肝臟 CK8理想著色 膽管上皮細(xì)胞強(qiáng)陽(yáng)性 肝細(xì)胞呈不同層次陽(yáng)性 3 panCK AE1 AE3 在肝臟理想的染色 采用了熱修復(fù) 肝細(xì)胞膜 膽管強(qiáng)而清晰的著色 背景干凈 4 一 特異性染色的判斷 1 特定的定位細(xì)胞陽(yáng)性 根據(jù)靶抗原不同而呈現(xiàn)胞膜型 胞漿型或胞核型間質(zhì)陽(yáng)性 表現(xiàn)為細(xì)胞外著色 局限性或彌散性2 染色的不均一性陽(yáng)性細(xì)胞的染色分布不均 片狀或點(diǎn)狀散在分布染色強(qiáng)弱不等 顏色深淺反映抗原量的多少3 排除人為造成的非特異性染色切片的折疊 刀痕 色素沉著 組織細(xì)胞壞死 4 顆粒性顯色DAB顯色在高倍鏡下呈顆粒狀而非均勻著色 5 免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化照片 6 7 8 9 10 11 合格的免疫組化染色切片是正確判斷染色結(jié)果的基礎(chǔ)和前提不合格的免疫組化染色切片容易導(dǎo)致誤判 12 C erbB 2 優(yōu) 良 中 差 13 4 3 2 1 ER 14 子宮內(nèi)膜PR染色 修復(fù)不足子宮內(nèi)膜PR染色 修復(fù)良好 PR 15 二 染色結(jié)果的判斷 16 PCNA S P 400 S P 400 1 dayCM 4 dayCM 陽(yáng)性強(qiáng)度20 10視野下 隨機(jī)選取5個(gè)視野 測(cè)100個(gè)陽(yáng)性細(xì)胞的平均光密度即為此片的陽(yáng)性強(qiáng)度 三 結(jié)果分析 17 P53 陽(yáng)性細(xì)胞百分比計(jì)數(shù)100個(gè)瘤細(xì)胞 其中陽(yáng)性細(xì)胞的比例 5 5 30 30 50 50 18 PCNA Barnes法A 瘤細(xì)胞顯色有無(wú)及深淺0 不著色 1 淺黃色 2 棕黃色 3 棕褐色 B 顯色細(xì)胞的比例1 1 10 2 11 50 3 51 80 4 80 評(píng)分 A B0分 陰性1 4分 弱陽(yáng)性 4分 強(qiáng)陽(yáng)性 19 膠原染色 陽(yáng)性面積百分比40 10視野 選取5個(gè)視野 計(jì)算陽(yáng)性區(qū)域面積占整個(gè)參考面積的百分率 20 CD34 Weidner法 MVD計(jì)數(shù) 孤立的棕黃色細(xì)胞族代表一條微血管 低倍鏡下找到組織內(nèi)密度最高區(qū)域 40 10視野下計(jì)數(shù)微血管數(shù)目 21 K ras VEGF 22 附 定量分析 圖象處理系統(tǒng) 1 圖象處理 利用儀器按照不同的目的進(jìn)行圖象的修正 變換 特征提取和測(cè)量 1 狹義 指消除圖象的模糊不清部分 校正畸變 2 廣義 包括對(duì)圖象的結(jié)構(gòu)分析 提取特征進(jìn)行測(cè)量 23 2 圖象處理系統(tǒng)組成圖象輸入 顯微鏡 掃描儀 圖象處理運(yùn)算 病理圖文分析軟件 圖象 數(shù)據(jù)輸出 24 3 圖象處理系統(tǒng)功能幾何形態(tài)學(xué)定量分析細(xì)胞核 漿的大小 面積 核漿比 細(xì)胞分布密度 個(gè)數(shù) 血管 腺體的面積 密度 間質(zhì)的面積免疫組織化學(xué)分析按著色灰度分類 計(jì)算陽(yáng)性 陰性細(xì)胞的面積含量DNA倍體分析計(jì)算正常細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞DNA含量 給出倍體參數(shù) DNA參數(shù)分布直方圖AgNOR分析顆粒分析 數(shù)目 大小 面積 比例 25 26 四 免疫組化異常著色及對(duì)策 1 非特異性著色及其對(duì)策 27 內(nèi)源性生物素 腎小管 28 內(nèi)源性生物素 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性甲狀腺腺癌 29 蛻膜組織部分胞核PR陽(yáng)性 血管內(nèi)紅細(xì)胞過(guò)氧化物酶顯色 30 嗜酸性粒細(xì)胞中細(xì)胞色素顯色 31 吞噬細(xì)胞內(nèi)含鐵血黃素 32 壞死組織著色 AE1 AE3 33 壞死組織著色 34 交叉反應(yīng) 乳腺ki 67組織細(xì)胞胞漿著色 35 黑色素瘤 細(xì)胞內(nèi)含黑色素 呈紫黑色 HE染色 36 灶狀著色 機(jī)械原因著色 37 CyclinD1套細(xì)胞淋巴瘤 全片著色 38 全片著色 39 邊緣著色 40 陰陽(yáng)臉 著色 41 氣泡 42 非特異性著色及其對(duì)策 43 無(wú)信號(hào)片 CD30 44 2 染色的假陰性及其對(duì)策 45 無(wú)色或淺色片 MCL理想的CD5著色 所有的瘤細(xì)胞都著色很強(qiáng) 散在的T細(xì)胞著色比瘤細(xì)胞深 MCL的CD5染