2020版高考生物總復習第33講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用教案中圖版.docx

第33講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用考綱考情知考向核心素養(yǎng)提考能最新考綱1.微生物的分離和培養(yǎng)2.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用3.某種微生物數(shù)量的測定4.微生物在其他方面的應(yīng)用科學思維分析培養(yǎng)基的成分及其作用，比較平板劃線法和稀釋涂布平板法的異同近三年考情2018全國卷(37)、2018全國卷(37)、2018全國卷(37)、2017全國卷(37)、2016全國卷(39)、2016全國卷(39)科學探究設(shè)計實驗探究微生物培養(yǎng)的條件社會責任關(guān)注有害微生物的控制及宣傳健康生活考點一微生物的實驗室培養(yǎng)1.培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)營養(yǎng)組成：一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。此外，還需要滿足微生物生長對pH、氧氣以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求。(3)種類按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。按照成分的來源可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。按照功能用途可分為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。2.無菌技術(shù)(1)含義：在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。(2)常用方法3.大腸桿菌的純化培養(yǎng)(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(2)純化大腸桿菌的方法純化培養(yǎng)原理：想方設(shè)法在培養(yǎng)基上得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的菌落，即可獲得較純的菌種。純化大腸桿菌的關(guān)鍵步驟：接種。常用的微生物接種方法有兩種a.平板劃線法：是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。如圖所示b.稀釋涂布平板法：是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。(3)菌種的保存方法對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法。對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。(1)(中圖版選修一P3“實踐案例”拓展)請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合適的方法。培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿玻棒、試管、燒瓶和吸管實驗操作者的雙手提示需要滅菌；需要消毒。(2)(中圖版選修一P6“鞏固提高”T2改編)為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？提示通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。1.(2018全國卷，37)生物選修1：生物技術(shù)實踐在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：(1)在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是_。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能。在照射前，適量噴灑，可強化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度，最可能的原因是。解析(1)在實驗室中，能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬材質(zhì)的實驗器具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點表現(xiàn)為在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)紫外線照射能消毒的原因是其能夠破壞微生物細胞中的DNA分子。在利用紫外線照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可強化消毒效果。(4)自來水通常采用氯氣消毒。(5)采用高壓蒸汽滅菌時，若壓力達到設(shè)定要求，而溫度未達到相應(yīng)要求，最可能的原因是沒有排盡高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的冷空氣。答案(1)可以(2)在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡2.(2018河北衡水中學七調(diào))下列表格是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基配方，請結(jié)合所學知識，回答下列相關(guān)問題。成分含量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g顯色劑(伊紅美藍)0.2 g瓊脂12.0 g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL(1)根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細菌，需對培養(yǎng)基做出的最關(guān)鍵的調(diào)整是，若還需鑒定分解尿素的細菌.需做出的調(diào)整是。(2)從培養(yǎng)基的成分上看，大腸桿菌的同化類型為。該培養(yǎng)基能否用于分離篩選出大腸桿菌？為什么？_。(3)在實驗室培養(yǎng)微生物時，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是，紫外線可對空氣進行滅菌的原因是_。(4)某同學嘗試純化大腸桿菌，其中一個平板的菌落分布如上圖，推測該同學接種時可能的操作失誤是_。解析(1)伊紅美藍是鑒定大腸桿菌的試劑，因此該培養(yǎng)基從用途上分屬于鑒別培養(yǎng)基；若要分離能分解尿素的細菌，則需要保證培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源，即將蛋白胨換成尿素；鑒定分解尿素的細菌，需要使用酚紅指示劑。(2)大腸桿菌需要從培養(yǎng)基中獲得碳源，因此其同化作用類型是異養(yǎng)型；由于表格中的培養(yǎng)基中的碳源種類很多，可供多種微生物生存，因此該培養(yǎng)基不能用于分離篩選出大腸桿菌。(3)微生物培養(yǎng)時，關(guān)鍵是防止外來雜菌的感染；空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能讓蛋白質(zhì)變性，同時還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)。(4)由題圖可知，接種時該同學采用的是稀釋涂布平板法，但菌落比較集中，沒有很好地分散開來，可能是涂布不均勻?qū)е碌?。答?1)鑒別將蛋白胨換成尿素將伊紅美藍換成酚紅指示劑(2)異養(yǎng)型不能，原因是培養(yǎng)基中的碳源種類很多，可供多種微生物生存(3)防止外來雜菌的感染紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)(4)涂布不均勻走出微生物培養(yǎng)的5個誤區(qū)(1)不是所有微生物培養(yǎng)基中均需加入特殊營養(yǎng)物質(zhì)。碳源、氮源、水分、無機鹽是微生物生長必需的四大營養(yǎng)成分，有些微生物可自行合成特殊營養(yǎng)物質(zhì)，而對那些合成能力有限或不能合成特殊營養(yǎng)物質(zhì)的微生物(如乳酸菌)，則需在培養(yǎng)基中添加諸如維生素等物質(zhì)。(2)平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。劃線結(jié)束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。(3)倒平板的溫度一般在50 左右適宜，溫度過高會燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會凝固。平板冷卻凝固后需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成培養(yǎng)基污染?？键c二微生物的篩選和計數(shù)1.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)(1)原理與流程(2)統(tǒng)計菌落數(shù)目時，培養(yǎng)基表面生長的1個菌落，來源于樣品稀釋液中1個活菌。為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)。(3)從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)的計算方法是(平均菌落數(shù)C涂布的稀釋液體積V稀釋倍數(shù)M)點悟利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計菌落數(shù)目的關(guān)鍵是恰當?shù)南♂尪?4)實驗結(jié)果分析與評價2.分解纖維素的微生物的分離(1)纖維素酶及纖維素分解菌篩選原理、方法(2)實驗流程(3)分離纖維素分解菌所用的兩種培養(yǎng)基比較分離纖維素分解菌的實驗中先用選擇培養(yǎng)基，再用鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長。鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，為固體培養(yǎng)基，細菌可在該培養(yǎng)基上形成肉眼可見的菌落。剛果紅染色法應(yīng)用于鑒別(選擇、鑒別)培養(yǎng)基。(2019河南天一大聯(lián)考)“互聯(lián)網(wǎng)餐飲”為大眾生活帶來了諸多改變，動動手指點外賣已經(jīng)成為普通大眾的生活方式。為檢測外賣糕點中微生物指標，食品監(jiān)管人員通過無菌操作，將25 g樣品以及225 mL磷酸鹽緩沖液一起置于均質(zhì)器中以8 00010 000 r/min的速度處理1 min，獲得均勻稀釋液待用。請回答下列問題：(1)配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時，在各成分都溶化后和倒平板前，要進行的操作是、分裝和滅菌。對培養(yǎng)基進行滅菌的常用工具是_。倒平板時，一般需冷卻至50 左右，并在酒精燈火焰旁進行操作。接種之前進行的一系列稀釋操作，目的是在培養(yǎng)基表面形成，這種接種方法是。(2)若培養(yǎng)基上平均有40個菌落，則1 g樣品中大致的活菌數(shù)量是個。該結(jié)果往往較實際值偏小，原因是_。有人認為，此處統(tǒng)計的菌落總數(shù)實際上僅為糕點樣品中總細菌數(shù)的一部分，理由是_。答案(1)調(diào)pH高壓蒸汽滅菌鍋單個菌落稀釋涂布平板法(2)4106少數(shù)菌落可能是由兩個或多個細菌形成的每種細菌需求的營養(yǎng)物質(zhì)和生長條件不同，培養(yǎng)時需滿足其營養(yǎng)、溫度、pH、需氧性等條件，因而實際只能獲得糕點樣品細菌中的一部分(答案合理即可)澄清易錯易混強化科學思維易錯易混易錯點1混淆兩種“對照組”與“重復組”點撥(1)兩種對照組作用比較判斷培養(yǎng)基中“是否有雜菌污染”，需將未接種的培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)。判斷選擇培養(yǎng)基“是否具有篩選作用”，需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目，進行對比得出結(jié)論。(2)重復組的設(shè)置及作用為排除偶然因素對實驗結(jié)果的干擾，在每一稀釋度下宜設(shè)置3個平板作重復組，選擇菌落數(shù)均在30300且數(shù)目相差不大的三個平板，用“平均值”代入計數(shù)公式予以計算菌落數(shù)。易錯點2不清楚為什么測定活菌的數(shù)量不能用平板劃線法？點撥由于在所劃的線中，一般只有最后一次劃線的末端才會形成只由一個細菌形成的菌落，而其他一些菌落往往由兩個細菌或多個細菌繁殖而成，而在計數(shù)時一個菌落對應(yīng)著一個細菌，這樣在劃線所得的平板中，菌落數(shù)目遠低于活菌的實際數(shù)值，所以不能用平板劃線法測定活菌數(shù)量。易錯點3易混淆選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基點撥(1)選擇培養(yǎng)基允許特定的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長。土壤中分解尿素的細菌的分離利用的是選擇培養(yǎng)基。(2)鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種特殊的化學物質(zhì)，某種微生物在培養(yǎng)基中生長后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物，而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊化學物質(zhì)發(fā)生特定的化學反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征性變化，根據(jù)這種特征性變化，可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開來的培養(yǎng)基。用于篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基就是鑒別培養(yǎng)基。深度糾錯(2018湖北長望瀏寧四縣一模)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤。為修復被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌。已知該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明。請分析回答：(1)微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作技術(shù)，該技術(shù)的核心是_。(2)在選育過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一的培養(yǎng)基上。通過比較單菌落周圍的大小，可篩選出高效的目的菌。實驗結(jié)果如上圖顯示的AE五種菌株中，是最理想菌株。(3)若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數(shù)，可采用的接種方法是。將1 mL土壤溶液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度各在3個平板上分別接入0.1 mL稀釋液，經(jīng)過適當培養(yǎng)后，6個平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58和2、7、5，空白對照組的平板上沒有菌落，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為個。實際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計所得的這一數(shù)值要大，因為_。(4)科研人員用放射線處理該細菌，獲得突變株A和B，然后對突變株A和B進行實驗，結(jié)果如下表所示：接種的菌種一般培養(yǎng)基實驗處理及結(jié)果A不生長添加營養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長B不生長添加營養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長AB能生長不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲、乙，能生長請分析突變株A和B混合在一起接種于一般營養(yǎng)基中能生長的最可能原因。_。解析(1)微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌污染。(2)已知該除草劑為含氮有機物，在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明；降解該除草劑的細菌能分解培養(yǎng)基中的該除草劑，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈?？梢姡谶x育能降解該除草劑的細菌的過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上。通過比較單菌落周圍透明圈的大小，可篩選出高效的目的菌。實驗結(jié)果圖顯示的AE五種菌株中，E菌落周圍的透明圈最大，因此E是最理想菌株。(3)對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數(shù)，可采用稀釋涂布平板法進行接種。統(tǒng)計菌落數(shù)目時，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)，因此應(yīng)選擇稀釋度為10倍的、分別接入0.1 mL稀釋液的3個平板上的菌落數(shù)(分別為59、57、58)進行統(tǒng)計，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為(595758)310(0.1103)5.8106(個)。由于統(tǒng)計結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的，當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以實際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計所得的這一數(shù)值要大。(4)分析表中信息可知：突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙，據(jù)此可推知，突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因是：突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供。答案(1)防止雜菌污染(無菌操作)(2)氮源透明圈E(3)稀釋涂布平板法5.8106統(tǒng)計結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的，當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落(4)突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供隨堂真題&預測1.(2018全國卷，37)生物選修1：生物技術(shù)實踐將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}：(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有(答出兩點即可)。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有(答出兩點即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_。(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認為這兩位同學的結(jié)果中，乙同學的結(jié)果可信度低，其原因是。解析(1)在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。若M培養(yǎng)基是用于真菌的篩選，則應(yīng)加入鏈霉素以抑制細菌的生長，其屬于選擇培養(yǎng)基。(2)馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、無機鹽、水等多種物質(zhì)，因此，除氮源外其中還有微生物生長所需要的碳源、無機鹽等營養(yǎng)要素。進入細胞的氮源可參與合成蛋白質(zhì)、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(3)加入顯色劑碘液后，淀粉遇碘變藍，而淀粉的水解產(chǎn)物則不發(fā)生這種反應(yīng)。若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，土壤中能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可將淀粉分解，菌落周圍就會出現(xiàn)透明圈，這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選能產(chǎn)淀粉酶的微生物了。(4)乙同學的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，結(jié)果的重復性太差，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。答案(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈(4)乙同學的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復性差2.(2020高考預測)纖維素酶在生物燃料制作、布料處理中起重要作用。目前，利用微生物提高纖維素酶產(chǎn)量是主要發(fā)展方向。如圖甲，用紫外線照射含有纖維素分解菌的土樣，分離、培養(yǎng)，再檢測各菌株的纖維素酶的產(chǎn)生量。請回答下列相關(guān)問題：甲乙(1)紫外線照射的目的是，A0組未經(jīng)紫外線處理，其作用是作為_。(2)經(jīng)高壓滅菌鍋滅菌的培養(yǎng)基，需要冷卻后才能用來倒平板。常用于估計培養(yǎng)基已冷卻到50 左右的簡便方法為_。(3)上述培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除含有水和無機鹽、酵母膏、水解酪素、瓊脂等外，還應(yīng)有，目的是選擇纖維素分解菌。(4)上述檢測結(jié)果如圖乙所示。由圖可知，(填字母)組酶含量與A0組相同，最可能的原因是_。(5)纖維素酶還常應(yīng)用于植物細胞工程，以去除細胞壁，這是利用了酶的性。解析(1)紫外線屬于誘發(fā)基因突變的物理因素，通過紫外線照射后細菌突變頻率大大提高，從而可能篩選出人類需要的高產(chǎn)菌株；A0組未經(jīng)紫外線處理，為對照組。(2)用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶剛剛不燙手時的溫度是50 左右。(3)以纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基上只有產(chǎn)纖維素酶的細菌才能存活。(4)據(jù)圖乙可知A5組纖維素酶的含量與對照組相同，由于基因突變具有低頻性的特點，該組可能沒有發(fā)生基因突變。(5)植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，利用酶具有專一性的特點可用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，獲得原生質(zhì)體。答案(1)誘發(fā)基因突變，提高突變頻率，獲得高產(chǎn)的纖維素分解菌對照(2)用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶剛剛不燙手(3)纖維素(4)A5沒有發(fā)生基因突變(5)專一課后強化訓練(時間：35分鐘)1.(2018全國卷，37)生物選修1：生物技術(shù)實踐回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落，菌落的含義是_。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進行厭氧培養(yǎng)，可促進(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是_。解析(1)酵母菌為異養(yǎng)型生物，通常使用麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)；培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體稱為菌落。(2)酵母菌為兼性厭氧型生物，有氧條件利于其繁殖，無氧條件下其進行酒精發(fā)酵。(3)酵母菌分解葡萄糖可產(chǎn)生二氧化碳，使面包松軟多孔。答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟2.(2019河南安陽市調(diào)研)沙門氏菌是一類常見的食品致病菌，可使人得胃腸炎、傷寒等。食品安全法要求其限量值為0，即樣品中不得檢出這類病菌，現(xiàn)要檢測某批次的火腿腸中是否含有沙門氏菌，要用到1號和2號兩種培養(yǎng)基。請回答下列問題：1號培養(yǎng)基名稱含量(/1 000 mL)牛肉膏粉5 g蛋白胨5 g三號膽鹽3.5 g檸檬酸鈉8.5 g煌綠0.000 33 g乳糖10 g三號膽鹽、檸檬酸鈉和煌綠抑制大多數(shù)菌群，但不影響沙門氏菌的生長 2號培養(yǎng)基名稱含量(/1 000 mL)牛肉膏粉5 g蛋白胨5 g瓊脂15 g硫代硫酸鈉8.5 g檸檬酸鐵1 g乳糖10 g硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵用于檢測硫化氫的產(chǎn)生，使沙門氏菌菌落中心呈黑色(1)抽取火腿腸檢測樣品要遵循原則。1號培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上看屬于培養(yǎng)基，從功能上看屬于培養(yǎng)基；檢測樣品要先用1號培養(yǎng)基培養(yǎng)， 目的是_。(2)配制2號培養(yǎng)基的步驟是：計算稱量溶化滅菌倒平板。為保證目的菌正常的生命活動，需要將培養(yǎng)基pH調(diào)至7.2，pH調(diào)節(jié)應(yīng)在之前。(3)如圖采用的是法分離細菌，接種好的培養(yǎng)皿在恒溫箱中培養(yǎng)時要(填“正”或“倒”)置；培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個菌落在生態(tài)學中被稱為。答案(1)隨機取樣液體選擇增加沙門氏菌(目的菌)的濃度(或抑制其他細菌)(2)滅菌(3)平板劃線倒種群3.(2019廣東廣州執(zhí)信中學期中)某同學配制含瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基后，對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行高壓蒸汽滅菌，當培養(yǎng)基溫度下降到50 時，在酒精燈火焰附近倒平板，待培養(yǎng)基冷卻至室溫，按如表處理：組別處理A組打開培養(yǎng)皿蓋，距地面0.3 m處暴露15 minB組打開培養(yǎng)皿蓋，距地面0.6 m處暴露15 minC組打開培養(yǎng)皿蓋，距地面0.9 m處暴露15 minD組打開培養(yǎng)皿蓋，距地面1.2 m處暴露15 minE組不打開培養(yǎng)皿蓋將處理完畢的培養(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)23天，觀察每個培養(yǎng)皿中的菌落特征和數(shù)目?；卮鹣铝袉栴}：(1)上述實驗的目的是_，若E組的培養(yǎng)基表面有菌落生長，說明了_。(2)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為微生物生長提供和?！霸诰凭珶艋鹧娓浇边M行相關(guān)操作是為了_。(3)實驗過程特別強調(diào)溫度控制，請簡要說明下列溫控措施的目的：“待培養(yǎng)基冷卻至室溫”的目的有_?！皩⑻幚硗戤叺呐囵B(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)”的目的是_。(4)培養(yǎng)微生物時將培養(yǎng)皿倒置的目的是_。實驗結(jié)束后，對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進行處理。解析(1)根據(jù)表格可知，該實驗的自變量是距離地面的高度，因此該實驗的目的是探究不同高度空氣中微生物的種類和數(shù)量；若E組的培養(yǎng)基表面有菌落生長，說明培養(yǎng)基滅菌不合格(受到雜菌污染)。(2)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為微生物生長提供碳源和氮源。在酒精燈火焰附近進行相關(guān)操作可避免周圍環(huán)境中微生物的污染。(3)接種時需待培養(yǎng)基冷卻至室溫，培養(yǎng)基凝固，以防止培養(yǎng)基溫度過高殺死接種在其上的微生物。將培養(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)可讓細菌在適宜的溫度下生長繁殖。(4)培養(yǎng)微生物時要將培養(yǎng)皿倒置，從而防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。實驗結(jié)束后，對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進行滅菌處理。答案(1)探究不同高度空氣中微生物的種類和數(shù)量培養(yǎng)基滅菌不合格(受到雜菌污染)(2)碳源氮源避免周圍環(huán)境中微生物的污染(3)使培養(yǎng)基凝固，防止培養(yǎng)基溫度過高殺死接種在其上的微生物讓細菌在適宜的溫度下生長(繁殖)(4)防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上(污染培養(yǎng)基和破壞菌落)滅菌4.(2019安徽省黃山市質(zhì)檢)農(nóng)作物秸稈中含有的纖維素阻礙了堆肥技術(shù)在處理有機固體廢物領(lǐng)域的發(fā)展。為提高堆肥品質(zhì)，科研人員探究了溫度對纖維素分解菌分解能力的影響，實驗步驟如下：纖維素分解菌的篩選、分離及純化纖維素分解菌菌株數(shù)量測定纖維素酶活力測定和降解濾紙能力的檢測。請回答下列問題：(1)步驟中，若用稀釋涂布平板法接種，則必須將菌液進行一系列的，接種所需的培養(yǎng)基中通常加入制成固體培養(yǎng)基。已知纖維素酶的最適溫度在4565 之間，欲從4565 的恒溫箱中篩選出能高效分解纖維素的細菌， 請寫出測定纖維素酶的最適溫度的實驗思路：_。(2)步驟中，在條件適宜的環(huán)境下培養(yǎng)細菌10 d后，用(填一種實驗用具)在顯微鏡下可計算細菌數(shù)量。此方法中的“條件”至少包括：適宜溫度、以作為唯一碳源的(填“固態(tài)”“半固態(tài)”或“液態(tài)”)培養(yǎng)基等。可用臺盼藍染液鑒定視野中細菌是否死亡，原理是_。(3)步驟中，酶活力可用培養(yǎng)基上菌落直徑及來表示。解析(1)用稀釋涂布平板法接種時，需將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋梯度的菌液分別涂抹在瓊脂培養(yǎng)基表面。制作固體培養(yǎng)基時通常需添加瓊脂。測定4565 范圍內(nèi)纖維素酶的最適溫度，需先設(shè)置一系列溫度梯度，接種細菌后放在適宜條件下培養(yǎng)相同時間，然后測定菌落周圍透明圈的大小，透明圈越大，表明該溫度下酶活性越高。(2)對細菌計數(shù)時可以采用稀釋涂布平板法和血細胞計數(shù)板計數(shù)法，前者可通過肉眼計數(shù)菌落數(shù)，后者需借助顯微鏡觀察。實驗目的是統(tǒng)計纖維素分解菌的數(shù)量，因此培養(yǎng)基只能以纖維素作為唯一碳源。血細胞計數(shù)板必需滴加菌液才能統(tǒng)計，因此培養(yǎng)基需是液態(tài)的?？捎门_盼藍染液鑒定視野中細菌是否死亡，原理是活細菌的細胞膜具有選擇透過性，臺盼藍不是細菌需要的物質(zhì)，無法進入活細胞，而死細胞的細胞膜失去選擇透過性，臺盼藍可以進入死細胞。(3)酶活力可用培養(yǎng)基上菌落直徑及菌落周圍透明圈大小來表示。答案(1)梯度稀釋瓊脂取若干以纖維素為唯一碳源的剛果紅培養(yǎng)基，在其上接種等量的纖維素分解菌，分別置于4565 的不同溫度的恒溫箱中培養(yǎng)，一段時間后，分別測定各培養(yǎng)基上菌落周圍的透明圈大小(答案合理即可)(2)血細胞計數(shù)板纖維素液態(tài)活細菌的細胞膜具有選擇透過性，不能被臺盼藍染色(答案合理即可)(3)菌落周圍透明圈大小5.(2018鄭州三測)硝基苯酚是工業(yè)污水中的重要污染物，某同學欲從污水處理廠污泥中分離分解硝基苯酚的細菌。請回答下列有關(guān)問題：(1)為了篩選污泥中可分解硝基苯酚的細菌，在配制培養(yǎng)基時應(yīng)選擇(填“硝基苯酚”“硝基苯酚牛肉膏”或“硝基苯酚葡萄糖”)作為碳源，不采用其他兩組的原因是_。(2)純化菌株時，通常使用的劃線工具是。劃線的某個平板經(jīng)培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。分析造成第一條線無菌落的可能原因有_；_。(3)進行梯度稀釋時的一般操作是將1 mL菌液移入盛有mL的無菌水中；常用法進行活菌計數(shù)，其原理是，但統(tǒng)計的菌落數(shù)往往(填“多于”或“少于”)稀釋液中的活菌數(shù)，原因是_(答出兩點)。(4)實驗數(shù)據(jù)顯示，當培養(yǎng)基中加入碳源葡萄糖時，該細菌降解速率明顯提高，原因可能是_。解析(1)從污水處理廠污泥中篩選分解硝基苯酚的細菌，因此應(yīng)以硝基苯酚為唯一碳源，而其他兩組中的牛肉膏、葡萄糖都能為細菌提供碳源。(2)純化菌株時，通常使用接種環(huán)進行平板劃線。第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，可能原因是劃線未從第一區(qū)域劃線的末端開始或接種環(huán)灼燒后未冷卻。(3)進行梯度稀釋時的一般操作是將1 mL菌液移入盛有9 mL的無菌水中，這樣就剛好稀釋了10倍?；罹嫈?shù)常用稀釋涂布平板法，因為稀釋后培養(yǎng)基表面的一個菌落通常來源于稀釋液中的一個活菌，菌落數(shù)量就代表了細菌數(shù)量。但是有時候個別菌落可能由2個或多個細菌形成，或有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡，因此統(tǒng)計結(jié)果往往會小于實際的活菌數(shù)量。(4)當培養(yǎng)基中加入碳源葡萄糖時，細菌碳源和能源充足，細菌大量增殖，因此會提高降解速率。答案(1)硝基苯酚其他兩組分別含有其他碳源，不能保證硝基苯酚是唯一碳源(2)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻劃線未從第一區(qū)域劃線的末端開始(3)9稀釋涂布平板培養(yǎng)基表面的一個菌落來源于(稀釋液中的)一個活菌少于有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡；個別菌落可能是由2個或多個細菌形成(4)能源充足，細菌代謝繁殖加快6.(2019湖南長郡中學調(diào)研)小麥赤霉病是河南省小麥生產(chǎn)中的一種重大病害，是小麥在抽穗揚花期感染雪腐鐮刀菌等真菌引起的，該真菌的代謝產(chǎn)物脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON，分子式為C15H20O6)會嚴重影響禽畜生產(chǎn)和人體健康。某生物興趣小組為篩選專一降解DON的真菌進行了相關(guān)實驗，具體實驗如表所示，其他條件均適宜。請回答下列問題：實驗步驟取樣培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果土壤樣品葡萄糖，(NH4)2SO4，K2HPO43H2O，KH2PO4，NaCl，CaCl2，MgSO47H2O，加水定容培養(yǎng)液a1 mL培養(yǎng)液a同步驟菌落挑取單菌落真菌培養(yǎng)基培養(yǎng)液b(1)為實現(xiàn)篩選目的，步驟所使用的培養(yǎng)基配方中，應(yīng)去除并加入。制備培養(yǎng)基時，滅菌和調(diào)pH的先后順序是_。(2)為實現(xiàn)目的菌的分離和計數(shù)，在(1)的基礎(chǔ)上，步驟所使用的培養(yǎng)基中還應(yīng)加入制成固體平板。采用的接種方法是。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，可推測出樣品中大約含有的活菌數(shù)，其原理是。步驟的目的是_。答案(1)葡萄糖DO