GB5009.148-2014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物性食品中游離棉酚的測定.pdf

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) GB 5009.1482014 2014-12-01 發(fā)布 2015-05-01 實(shí)施 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物性食品中游離棉酚的測定 GB 5009.1482014 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替 GB/T 5009.1482003植物性食品游離棉酚的測定 。 本標(biāo)準(zhǔn)與 GB/T 5009.1482003 相比，主要變化如下： 修改了原理； 修改了檢出限； 增加了附錄 A 中樣品加標(biāo)液相色譜圖 A.2。 GB 5009.1482014 1 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物性食品中游離棉酚的測定 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了植物油或以棉籽餅為原料的其他液體食品中游離棉酚的測定方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物油或以棉籽餅為原料的其他液體食品中游離棉酚的測定。 2 原理 植物油中游離棉酚經(jīng)無水乙醇提取，利用高效液相色譜法檢測，色譜峰保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 以棉籽餅為原料的水溶性液體樣品中的游離棉酚經(jīng)無水乙醚提取，濃縮至干，再加入乙醇溶解，利用高效液相色譜法檢測，色譜峰保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 3 試劑和材料 注：除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682 規(guī)定的一級水。 3.1 試劑 3.1.1 磷酸（H3PO4）。 3.1.2 無水乙醇（CH3CH2OH）。 3.1.3 丙酮（C3H6O）。 3.1.4 氮?dú)猓∟2）。 3.1.5 甲醇（CH3OH）。 3.2 試劑配制 磷酸溶液：取300 mL水，加6.0 mL磷酸，混勻，經(jīng)0.45 m濾膜過濾。 3.3 標(biāo)準(zhǔn)品 棉酚(C32H34O10) 標(biāo)準(zhǔn)品：純度95%。 3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 3.4.1 棉酚標(biāo)準(zhǔn)儲備液（1.0 mg/mL）：準(zhǔn)確稱取0.1 g（精確到0.0001 g）棉酚純品，用丙酮溶解，并定容至100 .00mL。 3.4.2 棉酚中間標(biāo)準(zhǔn)溶液（50g/mL）：取1 mg/mL棉酚儲備液5.0 mL于100 mL容量瓶中，用無水乙醇定容至刻度。 3.4.3 棉酚標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取 1.00mL、2.00 mL、5.00 mL、8.00 mL 棉酚標(biāo)準(zhǔn)溶液于 10 mL 容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，此溶液相應(yīng)于 5 g/mL、10 g/mL、25 g/mL、40 g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)系列。 GB 5009.1482014 2 4 儀器和設(shè)備 4.1 高效液相色譜儀：帶紫外檢測器或者二極管陣列檢測器。 4.2 濃縮儀。 4.3 離心機(jī)：3000 r/min。 5 分析步驟 5.1 試樣制備 5.1.1 植物油：稱取油樣 1g（精確至 0.01g）于離心試管中，加入 5 mL 無水乙醇，劇烈振搖 2 min，靜置分層（或冰箱過夜） ，取上清液濾紙過濾，4000 r/min 離心 10 min，上清液過 0.45 m 濾膜，即為試樣液。 5.1.2 以棉籽餅為原料的水溶性液體樣品： 稱取樣品 10 g （精確至 0.01g） 于離心試管中， 加入 10 mL無水乙醇，振搖 2 min，靜置 5 min，取上層乙醚層 5 mL，用氮?dú)獯蹈?，?1.0 mL 無水乙醇定容，過0.45 m 濾膜，即為試樣液。 5.2 色譜測定 5.2.1 參考色譜條件 色譜柱：C18柱，250 mm 4.6 mm，5 m，或具同等性能的色譜柱。 流動(dòng)相：甲醇磷酸溶液=8515。 流速：1.0 mL/min。 柱溫： 40 1。 測定波長：235 nm。 進(jìn)樣體積：10 L。 5.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別將棉酚標(biāo)準(zhǔn)工作液注入高效液相色譜儀中，記錄峰高或峰面積。以峰高或者峰面積為縱坐標(biāo)，以棉酚標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（標(biāo)準(zhǔn)溶液液相色譜圖參見附錄A中圖A.1）。 5.2.3 試樣測定 將試樣液注入高效色譜儀中，記錄峰高或者峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算的待測液中棉酚的濃度（樣品加標(biāo)液相色譜圖參見附錄A中圖A.2）。 6 分析結(jié)果的表述 試樣5.1.1中游離棉酚含量按公式（1）計(jì)算： mcX5 （1） 式中： X試樣中棉酚的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）； m試樣的質(zhì)量，單位為克（g）； c測定試樣液中棉酚的含量，單位為微克每毫升（g/mL）； 5為 5.1.1 折合所用無水乙醇的體積，單位為毫升（mL） 。 GB 5009.1482014 3 試樣 5.1.2 中游離棉酚含量按公式（2）計(jì)算： mcX2 （2） 式中： X試樣中棉酚的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）； m試樣的質(zhì)量，單位為克（g）； c測定試樣液中棉酚的含量，單位為微克每毫升（g/mL）； 2為 5.1.2 折合所用無水乙醇的體積，單位為毫升（mL） 。 計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留二位有效數(shù)字。 7 精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的 10 % 。 8 其他 植物油體樣品取樣 1.0 g 時(shí)，檢出限為 2.5 mg/kg ，定量限為 7.5 mg/kg。以棉籽餅為原料的水溶性液體樣品取樣 10 g 時(shí)，檢出限為 0.25 mg/kg，定量限為 0.75 mg/kg。 GB 5009.1482014 4 附錄 A 棉酚標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品加標(biāo)色譜圖 A.1 棉