屆高三生物復(fù)習(xí) 生物技術(shù)在組織培養(yǎng)、dna和蛋白質(zhì)分離.ppt

第十一單元,生物技術(shù)實(shí)踐,第 43 課時(shí),生物技術(shù)在組織培養(yǎng)、DNA和蛋白質(zhì)分離及有 效成分提取中的應(yīng)用,突破考點(diǎn)提煉方法,考點(diǎn)1 生物技術(shù)實(shí)踐應(yīng)用植物組織培養(yǎng),1植物組織培養(yǎng)的過(guò)程,(1)菊花組織培養(yǎng)過(guò)程,(2)月季的花藥培養(yǎng),2. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的異同,提醒 同一株綠色植物不同部分的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因相同。,3植物激素與組織培養(yǎng) (1)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點(diǎn)： 在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。 使用順序不同，結(jié)果不同，具體如下：,用量比例不同，結(jié)果也不同,4影響植物組織培養(yǎng)的因素 (1)材料：植物的種類(lèi)、材料的年齡和保存時(shí)間的長(zhǎng)短等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。 (2)營(yíng)養(yǎng)：常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。,提醒 培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓。,(3)環(huán)境條件：pH、溫度、光照等環(huán)境條件。如菊花組織培養(yǎng)所需pH為5.8，溫度為1822，光照條件為每日用日光燈照射12小時(shí)。,1(2011江蘇卷，16)下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是 ( ) A愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞 B二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株 C用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子 D植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得,對(duì)位訓(xùn)練,答案 D 解析 在普通培養(yǎng)基中添加適量的NaCl，制成選擇培養(yǎng)基，可用來(lái)篩選植物耐鹽突變體，故選項(xiàng)D正確。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞；二倍體植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)后得到單倍體植株，該單倍體高度不育，不能穩(wěn)定遺傳；用人工薄膜將胚狀體等進(jìn)行包裝可制成人工種子，愈傷組織不能作為制作人工種子的材料，故選項(xiàng)A、B、C錯(cuò)誤。,排雷 (1)菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇未開(kāi)花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝；月季花藥的離體培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇花粉發(fā)育過(guò)程中的單核靠邊期的花粉進(jìn)行培養(yǎng)。 (2)植物組織培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該在無(wú)菌的條件下進(jìn)行，外植體消毒所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1 %的氯化汞溶液，所使用的清洗液是無(wú)菌水。 (3)組織培養(yǎng)時(shí)不用天然激素而是用人工合成的激素，是因?yàn)橹参镏写嬖谙鄳?yīng)的分解天然激素的酶而沒(méi)有分解相應(yīng)的人工合成激素的酶，所以天然激素在植物體內(nèi)作用和存在的時(shí)間短，人工合成激素的作用和存在的時(shí)間長(zhǎng)，作用效果明顯。 (4)在初期，菊花的組織培養(yǎng)需光照，月季花藥的離體培養(yǎng)不需光照，而在后期均需光照。,考點(diǎn)2 生物技術(shù)實(shí)踐應(yīng)用DNA的粗提取與鑒定,1原理、方法和目的,2.實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng) (1)步驟：提取血細(xì)胞核物質(zhì)(蒸餾水漲破)溶解(2 mol/L的NaCl溶液)過(guò)濾(除雜質(zhì))析出(滴蒸餾水，降NaCl溶液濃度至0.14 mol/L)過(guò)濾再溶解(2 mol/L的NaCl溶液)過(guò)濾進(jìn)一步提純(體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精)鑒定。 (2)鑒定,(3)注意事項(xiàng) 制備雞血細(xì)胞液時(shí)，要在取雞血的同時(shí)加入檸檬酸鈉，靜置后上層是血清，下層為所需要的血細(xì)胞。 兩次加蒸餾水的目的不同，一是漲破細(xì)胞，二是稀釋溶液。 鑒定DNA時(shí)需沸水浴加熱。 二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則會(huì)影響鑒定的效果。,對(duì)位訓(xùn)練,2(2010江蘇卷，32)某生物興趣小組開(kāi)展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)，具體步驟如下： 材料處理：稱(chēng)取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20、另一組置于20條件下保存24 h。 DNA粗提?。?第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過(guò)濾，取濾液備用。 第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入 20 mL 體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。,第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測(cè)：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表：,(注：“”越多表示藍(lán)色越深) 分析上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程，回答下列問(wèn)題：,(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題的名稱(chēng)是 _。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為減少。 (3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。 結(jié)論1：與20相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在20條件下保存，DNA的提取量較多。 結(jié)論2：_ 。 針對(duì)結(jié)論1，請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專(zhuān)篲 。 (4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對(duì)DNA影 響極小。為了進(jìn)一步提高粗提取時(shí)DNA 的純度，在第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟：,溫度對(duì)DNA提取量的影響,DNA斷裂,等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，,活性，DNA降解速率慢,探究不同材料和不同保存,從蒜黃提取的DNA量最多,低溫抑制了相關(guān)酶的,_，然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。,將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合， 靜置一段時(shí)間， 吸取上清液,解析 根據(jù)步驟中選擇了不同的材料，在不同溫度下的處理，可判斷出本實(shí)驗(yàn)的目的是探究不同材料和不同溫度對(duì)DNA提取量的影響，是DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用；“緩緩地”攪拌能夠有效防止因DNA斷裂而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；結(jié)論可以從表格中顏色深淺得出，低溫下獲得的DNA含量較多是因?yàn)榈蜏匾种屏讼嚓P(guān)酶的活性，使DNA降解速率減慢；依據(jù)氯仿的特性，可以在第三步獲得的溶液中加入等量氯仿，靜置并吸取蛋白質(zhì)含量較少的DNA上清液，獲得純度更高的DNA。,排雷 (1)實(shí)驗(yàn)材料 動(dòng)物 雞血細(xì)胞 液的優(yōu)點(diǎn),提醒：人和哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒(méi)有DNA，不適于作為DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。,植物：新鮮菜花、蒜黃、菠菜等。 (2)步驟中注意問(wèn)題： 實(shí)驗(yàn)中有多個(gè)步驟要用到玻璃棒攪拌，使用時(shí)注意玻璃棒不要碰到燒杯底。 實(shí)驗(yàn)中所用的二苯胺是一種有毒性的試劑，使用時(shí)注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位。,考點(diǎn)3 生物科技新手段PCR擴(kuò)增技術(shù),1原理：DNA復(fù)制。 2條件：模板、原料、酶、ATP。 3場(chǎng)所：體外PCR擴(kuò)增儀。 4方向：DNA復(fù)制的具體過(guò)程涉及DNA雙鏈的方向。DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，為了明確地表示DNA的方向，通常將DNA的羥基(OH)末端稱(chēng)為3端，兩磷酸基團(tuán)的末端稱(chēng)為5端。DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，而只能從3端延伸DNA鏈，因此，DNA復(fù)制需要引物。當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的3端開(kāi)始延伸DNA鏈，DNA的合成方向總是從子鏈的5端向3端延伸。,5過(guò)程 (1)變性：當(dāng)溫度上升到90以上時(shí)，雙鏈DNA解旋為單鏈，如下圖： (2)復(fù)性：溫度下降到50左右，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，如下圖：,(3)延伸：溫度上升到72左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，如下圖： 6檢測(cè)PCR擴(kuò)增效果 (1)將樣品進(jìn)行50倍稀釋?zhuān)喝? L PCR反應(yīng)液，加入 98 L蒸餾水。 (2)以蒸餾水作為空白對(duì)照，在波長(zhǎng)260 nm處，將紫外分光光度計(jì)的讀數(shù)調(diào)節(jié)至零。 (3)將步驟中的DNA稀釋液加入到厚度為1 cm的比色杯中，測(cè)定其在260nm處的光吸收值(用A260nm表示)。,注意 DNA在260nm的紫外線(xiàn)波段有一強(qiáng)烈的吸收峰，可以利用DNA的這一特點(diǎn)進(jìn)行DNA含量的測(cè)定。 (4)根據(jù)下面的公式計(jì)算DNA含量。DNA含量(g/mL)50A260nm稀釋倍數(shù) 注意 據(jù)測(cè)定，1 g/mL的DNA在厚度為1 cm比色杯中，OD260為1相當(dāng)于50 g/mL的雙鏈DNA。以此為標(biāo)準(zhǔn)，可以計(jì)算出樣品中的DNA濃度。,7PCR技術(shù)的應(yīng)用 PCR技術(shù)模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程，實(shí)現(xiàn)對(duì)某一段DNA的擴(kuò)增。PCR技術(shù)能在幾小時(shí)內(nèi)將極微量的DNA特異性地?cái)U(kuò)增上百萬(wàn)倍，從而有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的難題，大大提高了對(duì)DNA分子的分析和檢測(cè)能力，被廣泛地應(yīng)用于基因克隆、基因序列分析、遺傳病診斷、古生物學(xué)研究以及刑偵破案、親子鑒定等諸多方面。,3多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。請(qǐng)回答下列有關(guān)PCR技術(shù)的基本原理及應(yīng)用問(wèn)題。 (1)DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，通常將_的末端稱(chēng)為5端，當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的開(kāi)始延伸DNA鏈。 (2)PCR利用DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈的問(wèn)題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新問(wèn)題。到20世紀(jì)80年代，科學(xué)家從一種Taq細(xì)菌中分離到_，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問(wèn)題。要將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)，所用的培養(yǎng)基叫_。,對(duì)位訓(xùn)練,磷酸基團(tuán),3端,耐高溫的Taq DNA聚合酶,選擇培養(yǎng)基,(3)PCR的每次循環(huán)可以分為三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在5次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個(gè)這樣的DNA片段。 (4)請(qǐng)用簡(jiǎn)圖表示出一個(gè)DNA片段PCR反應(yīng)中第二輪的產(chǎn)物。 (5)簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用。,遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測(cè)定(要求3項(xiàng)以上)。,解析 (1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已經(jīng)存在的核酸的3羥基上，與DNA母鏈結(jié)合的引物就提供這個(gè)羥基。 (2)因PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈的問(wèn)題，所以用于催化DNA復(fù)制過(guò)程的DNA聚合酶要具有耐高溫的特性。用選擇培養(yǎng)基可將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)。 (3)DNA復(fù)制時(shí)兩條鏈均作為模板，進(jìn)行半保留式復(fù)制，所以復(fù)制5次后得到的子代DNA分子數(shù)為2532個(gè)。 (4)新合成的DNA鏈帶有引物，而最初的模板DNA的兩條鏈不帶有引物。 (5)PCR技術(shù)可以對(duì)DNA分子進(jìn)行擴(kuò)增，所以可用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測(cè)定等方面。,排雷 PCR擴(kuò)增技術(shù)和DNA復(fù)制的比較,考點(diǎn)4 生物科技實(shí)踐應(yīng)用血紅蛋白的提取和分離,1蛋白質(zhì)分離的依據(jù) 蛋白質(zhì)各種特性的差異，如分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力等，可以用來(lái)提取和分離不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)。 2凝膠色譜原理 (1)識(shí)圖析圖 凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理,圖A，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)由于擴(kuò)散作用進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部而被滯留；相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)被排阻在凝膠顆粒外面，在顆粒之間迅速通過(guò)。 圖B，蛋白質(zhì)混合物上柱；洗脫開(kāi)始，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)擴(kuò)散進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)；相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)則被排阻于顆粒之外；相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)被滯留，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)向下移動(dòng)；相對(duì)分子質(zhì)量不同的分子完全分開(kāi)；相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)行程較短，已從層析柱中洗脫出來(lái)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)還在行進(jìn)中。 相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。,(2)列表比較 提醒 凝膠色譜柱的直徑大小不影響分離效果，但直徑過(guò)大造成洗脫液體積大，樣品稀釋度大；凝膠色譜柱的高度與分離度有關(guān)。,3凝膠電泳法原理 凝膠電泳法的原理是不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同，在電場(chǎng)中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)方向和運(yùn)動(dòng)速率不同。如下表：,4.實(shí)驗(yàn)操作流程 樣品的處理 粗分離透析(去除小分子雜質(zhì)) 純化凝膠色譜法進(jìn)行分離和純化 純度鑒定SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量,提醒 紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中，洗滌三次后，上清液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則無(wú)法除去血漿蛋白；離心時(shí)轉(zhuǎn)速要低，時(shí)間要短，否則白細(xì)胞等會(huì)一同沉淀，達(dá)不到分離效果。 血紅蛋白釋放過(guò)程中，蒸餾水的作用是使紅細(xì)胞吸水漲破，甲苯的作用主要是溶解細(xì)胞膜。 為了加快干凝膠的膨脹，可將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，逐漸升溫至接近沸騰，通常只需12 h。這種方法不但節(jié)約時(shí)間，而且可以除去凝膠中可能帶有的微生物，排除膠粒內(nèi)的空氣。 滴加樣品時(shí)，吸管管口要貼著管壁環(huán)繞移動(dòng)，防止破壞凝膠面。,4(2011廣東卷，5)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是 ( ) A洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂 B豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少 C血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè) D在凝膠色譜法分離過(guò)程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動(dòng)慢,對(duì)位訓(xùn)練,答案 D,解析 豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少，是提純血紅蛋白的理想材料。提純血紅蛋白分四步：紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析，其中洗滌紅細(xì)胞時(shí)，要用生理鹽水反復(fù)洗滌，既要將紅細(xì)胞洗滌干凈，又要不破壞紅細(xì)胞，然后再用蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白。分離提純血紅蛋白時(shí)用凝膠色譜法，其原理是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來(lái)分離蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)移動(dòng)速率較快；血紅蛋白的顏色可用于觀察紅色區(qū)帶的移動(dòng)情況，并據(jù)此判斷分離效果。,排雷 (1)血紅蛋白的提取和分離時(shí)紅細(xì)胞分層不明顯，可能是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的原因。此外，離心速率過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細(xì)胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。 (2)凝膠的裝填標(biāo)準(zhǔn)是緊密、均勻。檢測(cè)凝膠色譜柱的裝填是否成功可以在凝膠柱旁放一支與凝膠柱垂直的日光燈，檢查凝膠是否裝填得均勻。此外，還可以加入大分子的有色物質(zhì)，觀察色帶移動(dòng)的情況。如果色帶均勻、狹窄、平整，說(shuō)明凝膠色譜柱的性能良好。如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時(shí)要重新裝柱。 (3)G75：“G”代表凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5 g。 (4)裝填完后,立即用洗脫液洗脫的目的是使凝膠裝填緊密。,(5)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固；低速、短時(shí)離心防止白細(xì)胞沉淀；緩慢攪拌防止紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。 (6)檢測(cè)血紅蛋白的分離是否成功的方法：如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說(shuō)明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)。,考點(diǎn)5 生物技術(shù)實(shí)踐應(yīng)用植物芳香油的提取,1植物芳香油的基本知識(shí) (1)成分：組成較復(fù)雜，主要包括萜類(lèi)化合物及其衍生物。 (2)特點(diǎn)：具有很強(qiáng)的揮發(fā)性，易溶于有機(jī)溶劑。 (3)應(yīng)用：玫瑰精油是制作高級(jí)香水的主要成分，能使人產(chǎn)生愉悅感；橘皮精油的主要成分是檸檬烯，具誘人的橘香味，是食品、化妝品和香水配料的優(yōu)質(zhì)原料。 2玫瑰精油的提取流程與關(guān)鍵,(1)安裝裝置順序：從左到右，自下而上。 (2)溫度計(jì)位置：溫度計(jì)水銀球的上限與蒸餾燒瓶支管的下限處在同一水平線(xiàn)上。 (3)冷凝管中的水流向：從下方進(jìn)水，上方出水，與蒸氣流向相反。 (4)加熱時(shí)防暴沸：墊石棉網(wǎng)，向液體中加入幾粒沸石或碎瓷片。 (5)燒瓶?jī)?nèi)液體量：燒瓶容積的1/32/3。 (6)除水：加入無(wú)水Na2SO4后，放置時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)些。 (7)溫度及時(shí)間：為提高產(chǎn)品質(zhì)量，要嚴(yán)格控制蒸餾溫度，可適當(dāng)延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間。,3橘皮精油的提取流程與關(guān)鍵 石灰水浸泡漂洗壓榨過(guò)濾靜置再次過(guò)濾橘皮油 (1)橘皮的處理：干燥后一定要用石灰水浸透，時(shí)間至少 10 h以上。 (2)壓榨液的處理：可以先用普通布袋過(guò)濾除去固體物和殘?jiān)?，然后離心進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物，再用分液漏斗或吸管將上層的橘皮油分離出來(lái)。,5(2010課標(biāo)全國(guó)卷，37)下列是與芳香油提取相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答： (1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液_(是、不是)純的玫瑰精油，原因是 _。 (2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾過(guò)程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí)，提取量隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢(shì)是 。 (3)如果蒸餾過(guò)程中不進(jìn)行冷卻，則精油提取量會(huì)_，原因是。,對(duì)位訓(xùn)練,易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,不是,油與水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，所得到的是油水混合物,蒸餾溫度,提取量隨蒸餾時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，一定時(shí)間后提取量不再增加,減少,部分精油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)而流失,玫瑰精,在一定時(shí)間內(nèi),(4)密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好存放在溫度_的地方，目的是。 (5)某植物花中精油的相對(duì)含量隨花的不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的變化趨勢(shì)如圖所示。提取精油時(shí)采摘花的最合適時(shí)間為_(kāi)天左右。 (6)從薄荷葉中提取薄荷油時(shí)(能、不能)采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是_ 。,較低,減少揮發(fā),a,能,薄荷油與玫瑰精油的化學(xué),性質(zhì)相似,解析 由于玫瑰精油易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，因此可以用水蒸氣蒸餾法提取，冷卻后必然含有水；蒸餾的提取效果與蒸餾的溫度與蒸餾的時(shí)間有關(guān)，隨著蒸餾時(shí)間的延長(zhǎng)，原料中含的精油減少，提取的量也會(huì)減少直至再也提不出精油。蒸餾過(guò)程如果不冷卻，提取后的混合液溫度較高，由于精油易揮發(fā)，其含量會(huì)減少；保存時(shí)，環(huán)境溫度應(yīng)較低為好，防止精油揮發(fā)；第(5)小題為信息題，主要考查學(xué)生的讀圖、識(shí)圖及圖文轉(zhuǎn)化能力，根據(jù)圖像可知，玫瑰精油在蓓蕾期、開(kāi)放期之間精油的含量較高，應(yīng)在此時(shí)采收；由于薄荷精油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似，可以采用相同的提取方法。,排雷 (1)植物芳香油的提取方法主要有水蒸氣蒸餾法、壓榨法、萃取法。水蒸氣蒸餾是植物芳香油提取的常用方法，但會(huì)導(dǎo)致原料焦糊或有效成分水解等，若植物有效成分易水解，則不宜采用此法。玫瑰精油、橘皮精油、胡蘿卜素的提取分別采用水蒸氣蒸餾法、壓榨法、萃取法。 (2)水蒸氣蒸餾可用明火加熱，萃取過(guò)程應(yīng)該避免明火加熱，采取水浴加熱，這是因?yàn)橛袡C(jī)溶劑都是易燃物，直接用明火加熱容易引起燃燒、爆炸。 (3)用于萃取的有機(jī)溶劑必須事先精制，除去雜質(zhì)，否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量。 (4)在用水蒸氣蒸餾法制取玫瑰乳濁液提純過(guò)程中油水混合物中要加入氯化鈉的目的是增大鹽水的密度，有利于玫瑰精油與水的分層,加入無(wú)水Na2SO4的目的是吸收精油中殘留的水分。,(5)橘皮精油的提取過(guò)程中，橘皮洗凈晾干后，要浸泡在pH大于12、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7%8%的石灰水中1624 h，其目的是防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率。,考點(diǎn)6 生物科技實(shí)踐應(yīng)用胡蘿卜素的提取,1萃取劑的選擇與影響萃取的因素 (1)萃取劑的選擇 有機(jī)溶劑分為水溶性和水不溶性?xún)煞N。乙醇和丙酮能夠與水混溶，是水溶性有機(jī)溶劑；石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳等不能與水混溶，是水不溶性有機(jī)溶劑。 萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有較高的沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，且不與水混溶。另外還要考慮對(duì)人體是否有毒等安全問(wèn)題。因乙醚沸點(diǎn)較低，苯和四氯化碳對(duì)人體有毒，所以本實(shí)驗(yàn)選用石油醚或乙酸乙酯作為萃取劑。 (2)影響萃取的因素 主要因素：萃取劑的性質(zhì)和使用量。 次要因素：原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的,溫度、萃取的時(shí)間等。 總之，溶解越充分，效果越好。 2胡蘿卜素的萃取方法 (1)胡蘿卜素提取裝置的設(shè)計(jì) 提取裝置：由鐵架臺(tái)、酒精燈、 水浴鍋、燒瓶、冷凝管等構(gòu)成。安裝順 序：從左到右，由下而上。拆除時(shí)相反。 裝置如圖所示。 由于有機(jī)溶劑易燃，直接使用明 火加熱易引起燃燒、爆炸故采用水浴加熱法。 為防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑的揮發(fā)在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置。,(2)紙層析鑒定步驟 制作層析濾紙：在18cm30cm濾紙下端距底邊2cm處做一條基線(xiàn)，在基線(xiàn)上取A、B、C、D四點(diǎn)。 點(diǎn)樣：用最細(xì)的注射器針頭分別吸取0.10.4 mL溶解在石油醚中的標(biāo)準(zhǔn)樣品和提取樣品，分別在A、D和B、C點(diǎn)上點(diǎn)樣。點(diǎn)樣應(yīng)該快速細(xì)致，在基線(xiàn)上形成直徑為2 mm左右的圓點(diǎn)。 層析：等濾紙上的點(diǎn)樣液自然揮發(fā)干后，將濾紙卷成圓筒狀，置于裝有1 cm深的石油醚的密封玻璃瓶中。等各種色素完全分開(kāi)后，取出濾紙，讓石油醚自然揮發(fā)。 觀察：與標(biāo)準(zhǔn)樣品的胡蘿卜素層析帶相比較，觀察提取效果。,提醒 此實(shí)驗(yàn)的目的是探究是否提取到了胡蘿卜素，而必修教材中色素的提取與分離實(shí)驗(yàn)則是提取并分離四種色素，探究色素的種類(lèi)和顏色。,6.如圖為提取胡蘿卜素的裝置圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1) 的作用是 。 (2)_內(nèi)加入的萃取液一般是_，原料在加入前，一般要進(jìn)行、處理。 (3)該萃取過(guò)程采用的是水浴加熱，其目的是_。 (4)為了取得最佳萃取效果，萃取的時(shí)間應(yīng)該_(“長(zhǎng)”或“短”)。,對(duì)位訓(xùn)練,冷凝管,防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā),燒瓶,石油醚,粉碎,干燥,避免有機(jī)溶劑明火加熱引,長(zhǎng),降溫，,起燃燒、爆炸,解析 圖示裝置為萃取裝置，其中為冷凝管，其作用是降溫，以防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)，是燒瓶，其內(nèi)裝有萃取劑，胡蘿卜素的適宜萃取劑是石油醚，為防止有機(jī)溶劑明火加熱時(shí)引起燃燒、爆炸，萃取時(shí)有必要采用水浴加熱，而不用明火加熱。,排雷 (1)層析時(shí)注意選擇干凈的濾紙，為了防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染，應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙，可以戴手套進(jìn)行操作。 (2)點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)注意點(diǎn)樣斑點(diǎn)不能太大(直徑應(yīng)小于0.5 cm)，如果用吹風(fēng)機(jī)吹干，溫度不宜過(guò)高，否則斑點(diǎn)會(huì)變黃。 (3)將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀，卷紙時(shí)注意濾紙兩邊不能相互接觸，以免因毛細(xì)現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快，溶劑前沿不齊，影響結(jié)果。 (4)層析液不可沒(méi)及樣品原點(diǎn)，以免色素溶解于層析液中，使鑒定失敗。 (5)層析是否提取到胡蘿卜素，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)樣品中的胡蘿卜素作對(duì)比予以確認(rèn)。,考綱能力 技術(shù)實(shí)踐應(yīng)用能力 考題1 血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，負(fù)責(zé)血液中O2和部分CO2的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問(wèn)題。,考題鏈接 1.蛋白質(zhì)的提取與分離技術(shù),(1)將實(shí)驗(yàn)流程圖補(bǔ)充完整：A為_(kāi)，B為。凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)分離蛋白質(zhì)的有效方法。 (2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除，洗滌次數(shù)過(guò)少，無(wú)法除去；離心速率過(guò)快和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是。釋放血紅蛋白的過(guò)程中起作用的是。 (3)在洗脫過(guò)程中加入物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)的目的是 。如果紅色區(qū)帶，說(shuō)明色譜柱制作成功。,血紅蛋白的釋放,樣品的加入和洗脫,量的大小,雜蛋白(血漿蛋白),血漿蛋白,胞和淋巴細(xì)胞,離心后的上清液中沒(méi)有黃色,蒸餾水和甲苯,準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持,均勻一致的移動(dòng),體外的pH和體內(nèi)的一致,相對(duì)分子質(zhì),白細(xì),體會(huì) (1)實(shí)驗(yàn)原理：依據(jù)蛋白質(zhì)的各種特性可以將不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)分離。 (2)常用方法 凝膠色譜法：根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。 電泳：利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子 本身大小、形狀的不同產(chǎn)生不同的遷移速率，由此將各種分子分離。 (3)蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。,考綱能力 實(shí)踐應(yīng)用能力 考題2 (2011山東卷，34)研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白質(zhì))均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。 (1)柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，該過(guò)程得到的糊狀液體可通過(guò)除去其中的固體雜質(zhì)。,考題鏈接 2.芳香油的提取,壓榨,過(guò)濾,(2)篩選乳酸菌A時(shí)可