饑餓處理對(duì)江黃顙魚血液pH值的影響論.doc

畢節(jié)學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）畢 業(yè) 論 文題 目： 饑餓處理對(duì)江黃顙魚血 液pH值的影響姓 名： 李能勛學(xué) 號(hào)： 08110901008教 學(xué) 院： 地理與生命科學(xué)學(xué)院專業(yè)班級(jí)： 生物科學(xué)2009級(jí)指導(dǎo)教師： 肖玲遠(yuǎn)（副教授）完成時(shí)間： 2013年 05月 20日 畢節(jié)學(xué)院教務(wù)處制 目 錄摘要iAbstractii1.引言11.1簡(jiǎn)介11.2黃顙魚生理學(xué)研究進(jìn)展11.3黃顙魚研究的目的和意義12.研究的材料和方法22.1材料22.1.1實(shí)驗(yàn)魚22.1.2器材和試劑22.2方法22.2.1購(gòu)魚22.2.2馴養(yǎng)22.2.3分組處理22.2.4預(yù)實(shí)驗(yàn)32.2.5正式實(shí)驗(yàn)43.結(jié)果與分析53.1第一階段處理10天，實(shí)驗(yàn)組，饑餓處理，對(duì)照組，正常投食，血液PH值變化53.2第二階段處理20天，實(shí)驗(yàn)組,饑餓處理，對(duì)照組正常投食，血液PH值的變化53.3結(jié)果64.討論7主要參考文獻(xiàn)9致謝10饑餓處理對(duì)江黃顙魚血液PH值的影響 作者姓名：李能勛 專業(yè)班級(jí)：2009級(jí)生物科學(xué)專業(yè)學(xué)號(hào)：08110901008 指導(dǎo)教師：肖玲遠(yuǎn)（副教授） 摘要：將市場(chǎng)上購(gòu)買的江黃顙魚數(shù)十條在實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖1015天，待其體內(nèi)各項(xiàng)生理指標(biāo)穩(wěn)定后，選取形態(tài)大小相似的江黃顙魚40條，隨機(jī)分成兩組（各20條）：一組為實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行饑餓處理，第一階段處理10天，第二階段處理20天后分別抽取血液，并用PH計(jì)測(cè)定其PH值。另一組為對(duì)照組，進(jìn)行正常喂食，同樣在10d、20d后分別取血測(cè)定其pH值。最終發(fā)現(xiàn)，饑餓對(duì)江黃顙魚血液PH有一定的影響，實(shí)驗(yàn)組（饑餓處理）血液PH值要小于對(duì)照組（給予正常投食），進(jìn)一步觀察可以發(fā)現(xiàn)，第二階段饑餓20d后血液pH值比第一階段饑餓10d后的血液PH值下降的要多，由此可得出，在一定條件下，饑餓可使江黃顙魚血液PH值降低，并且隨著饑餓時(shí)間的延長(zhǎng)，其PH值下降的越明顯。 關(guān)鍵字：饑餓；江黃顙魚；血液；PH值iEffects of pH of blood with Hunger Treatment on Pseudographs ChellianCandidate: Nengxun Li Major: 09 session of Biological SciencesStudent No.:08110901008 Advisor:LingyuanXiao(Associate Professor）Abstract: 40 specimen of Pseudographs Chellian bought from the market, placed in the laboratory and cultured 10 to 15 d,When their blood index was steady, Divided them into two groups, one was experimental group, the other was control group. Experimental group was hunger treatment, the control group was given food, Treating them with two stage, the first stage treated 10 d, the second stage treated 20 d and then through extracted blood from the P. Chellian The pH meter was used to determine, The results of experiment finally found that hunger has certain influence on P. Chellian blood PH, The experimental group (hunger treatment) blood pH is smaller than that of the control group (given normal feeding), and further observation can be found, the second stage blood pH of experimental group declined much more than the first stage. Based on these situation can draw such a conclusion, on some condition, hunger had a decreasing tendency on blood pH of P. Chellian, and the pH value declined much more with the contention of hunger. Key words: Pseudographs Chellian；hunger；pH of bloodii1.引言1.1簡(jiǎn)介黃顙魚，又名黃臘丁，屬鲇形目，鲿科，黃顙魚屬，有四種：岔尾黃顙魚，江黃顙魚，光澤黃顙魚，瓦氏黃顙魚。黃顙魚體呈黃色，背面稍黑，腹面呈白色，頭較大且扁，須四對(duì)，大多數(shù)種上頜須比較長(zhǎng)。口下位，屬無鱗魚，背鰭和胸鰭的硬刺很發(fā)達(dá)，很尖，并且刺尖部帶有毒性，為淡水刺毒魚類中毒性較強(qiáng)的魚類之一。另外黃顙魚在搬運(yùn)時(shí)容易相互之間劃傷，劃傷后，傷口容易感染，最終導(dǎo)致死亡。黃顙魚多在靜水中或緩慢流動(dòng)的河水中活動(dòng)，并沿底棲水底生活，白天底棲在湖泊水底，夜晚并游到水上面覓食。對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力較強(qiáng)。但其耐氧能力不是很強(qiáng)，在缺氧的狀況下，其會(huì)出現(xiàn)浮頭，如果在極低氧濃度環(huán)境中的話，就會(huì)窒息而死亡。因此在實(shí)驗(yàn)室放養(yǎng)時(shí)，應(yīng)時(shí)刻用充氧泵充氧?；蛘邔⑵浞湃胙h(huán)水中。黃顙魚為雜食性動(dòng)物，并且主要以肉食性為主，其取食多數(shù)在夜間進(jìn)行，主要取食對(duì)象為：小魚，蝦，各種陸生或者是水生的昆蟲，小型的軟體動(dòng)物和其他的水生無脊椎動(dòng)物。而我們?cè)趯?shí)驗(yàn)時(shí)主要給予投喂黃粉蟲，約兩天給予投喂一次，每次投喂2條（34g/條）。黃顙魚的食性隨著季節(jié)的變化而變化，并且不同種的黃顙魚其食性也有很大的差異。1.2黃顙魚生理學(xué)研究進(jìn)展有關(guān)黃顙魚生理生化方面的研究目前已有報(bào)道，如對(duì)瓦氏黃顙魚血清的鱗組分的測(cè)定1；黃顙魚消化器官蛋白酶和淀粉酶活性測(cè)定分析2；淡水白鯧、團(tuán)頭魴、黃顙魚的主要消化酶活性對(duì)比研究3；中華倒刺鲃、黃顙魚和華鯪的消化酶活性的比較分析4；黃顙魚不同組織中同工酶的表達(dá)模式的研究等5；黃顙魚血清免疫球蛋白的純化及分子量的初步測(cè)定；紅細(xì)胞脆性和Hb與水體pH值的關(guān)系6等。但對(duì)饑餓處理對(duì)江黃顙魚血液pH值影響的研究還未見報(bào)道。1.3黃顙魚研究的目的和意義黃顙魚，又名黃臘丁，其肉質(zhì)鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，深受廣大消費(fèi)者所喜愛。但因?yàn)槠渖L(zhǎng)緩慢，且又容易患其它疾病，容易劃傷，分布較為狹窄，死亡率高等等，因此得不到大規(guī)模的養(yǎng)殖和推廣，致使其價(jià)格較為昂貴，使廣大群眾難于購(gòu)買。為此本實(shí)驗(yàn)研究饑餓對(duì)黃顙魚血液PH影響，其目的就是為了豐富黃顙魚在飼養(yǎng)、疾病防治等方面基礎(chǔ)知識(shí)，從而為黃顙魚大面積養(yǎng)殖及提高經(jīng)濟(jì)效益和食用推廣提供理論依據(jù)。2.研究的材料和方法2.1材料2.1.1實(shí)驗(yàn)魚實(shí)驗(yàn)魚為江黃顙魚，雌雄兼有，形狀大小基本相似（體長(zhǎng)約1012厘米），身體健壯，并且在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)了一段時(shí)間，其體內(nèi)各項(xiàng)生理指標(biāo)已穩(wěn)定。2.1.2器材和試劑 器材：PH計(jì)(上海今邁儀器儀表有限公司生產(chǎn))，燒杯，溫度計(jì)，濾紙，吸水紙，試管，注射器（帶針頭），解剖器，玻璃棒，容量瓶，酒精燈，石棉網(wǎng)，滴管。 試劑：PH計(jì)緩沖液，蒸餾水，肝素鈉溶液,復(fù)合電極的外參比補(bǔ)充液。2.2方法2.2.1購(gòu)魚 購(gòu)買體型大小、健康狀況一致的江黃顙魚數(shù)十條，在搬運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室的過程中要在容器里多放點(diǎn)水，盡量減少震動(dòng)，以防止體表劃傷而引起感染。2.2.2馴養(yǎng) 由于剛夠買回來的魚進(jìn)入了一個(gè)新的環(huán)境，其體內(nèi)的很多生理指標(biāo)還不穩(wěn)定，需要一定的適應(yīng)過程，因此必須先進(jìn)行侍養(yǎng)性喂養(yǎng)。在剛買過來的頭幾天，首先必須對(duì)魚進(jìn)行消毒處理，消毒劑可選用高錳酸鉀、孔雀石綠，高錳酸鉀濃度為10ppm，孔雀石綠濃度為2ppm，消毒時(shí)間大約一周，每天一次。消毒處理結(jié)束后，將其放入循環(huán)水中，循環(huán)設(shè)備可以不斷更新水質(zhì)，清理雜質(zhì)，并且還可以清理水里面的一些細(xì)菌等，使魚能夠更好，更平安的生存。當(dāng)養(yǎng)殖到其能夠吃東西時(shí)（投喂黃粉蟲、蚯蚓），即已表明其體內(nèi)各項(xiàng)生理指標(biāo)基本穩(wěn)定，可以進(jìn)行分組處理了。2.2.3分組處理將魚在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)了一段時(shí)間(約半個(gè)月左右)，待其能夠吃食物時(shí)，表明其體內(nèi)的各項(xiàng)血液生理指標(biāo)已基本穩(wěn)定，即可進(jìn)行分組，分組時(shí)一定要注意隨機(jī)性，這樣才能保證每一組中的魚體型大小基本一樣。分成兩組，一組為實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行饑餓處理；另一組為對(duì)照組，給予正常投食，讓其正常生活，約每?jī)商焱段挂稽S粉蟲。處理兩個(gè)階段：第一階段處理10天，第二階段處理20天。在處理過程中，應(yīng)隨時(shí)注意觀察其吃食等生活狀態(tài)。2.2.4預(yù)實(shí)驗(yàn)為了確保實(shí)驗(yàn)?zāi)軌虺晒Γ瑸榱四軌虻玫奖容^精確的數(shù)據(jù)，在實(shí)驗(yàn)之前，必須多次進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，以盡可能的熟悉實(shí)驗(yàn)操作，并盡可能的減少誤差。在預(yù)實(shí)驗(yàn)過程中，著重掌握PH計(jì)的使用，還有抽血、取血等基本操作過程。PH計(jì)的使用：本次實(shí)驗(yàn)所選用的PH計(jì)為PHS3C型實(shí)驗(yàn)室PH計(jì)（上海今邁儀器儀表有限公司生產(chǎn)），該儀器測(cè)量精度高（為0.01級(jí)），且反應(yīng)非常靈敏，測(cè)量非常方便。PH計(jì)在測(cè)量之前應(yīng)進(jìn)行標(biāo)定（以減少測(cè)量結(jié)果精準(zhǔn)性）。標(biāo)定用緩沖液為混合物磷酸鹽、鄰笨二甲酸氫鉀、四硼酸納。標(biāo)定之前事先配好這三種標(biāo)準(zhǔn)的緩沖溶液。 標(biāo)定的緩沖溶液一般第一次用PH6.86的溶液，即0.025molkg混合物磷酸鹽溶液，第二次選用接近待測(cè)溶液pH值的緩沖液。如果待測(cè)溶液為酸性，就應(yīng)選pH4.00鄰笨二甲酸氫鉀緩沖液，如果待測(cè)溶液為堿性，就應(yīng)選pH9.18四硼酸納緩沖液。一般情況下，儀器在24h內(nèi)不需要標(biāo)定。標(biāo)定完成后，用清水清洗電極后即可對(duì)待測(cè)溶液進(jìn)行pH值測(cè)量。 PH值測(cè)量：標(biāo)定后的儀器，即可測(cè)量待測(cè)溶液的pH值。但這里要注意如果待測(cè)溶液溫度與標(biāo)定溶液溫度相同時(shí)或者是不同時(shí)，它們所進(jìn)行的測(cè)量步驟也不盡相同。其具體操作步驟如下：待測(cè)溶液溫度與標(biāo)定溶液溫度相同時(shí)，測(cè)量方法如下：用蒸餾水清洗電極的頭部，再用待測(cè)溶液清洗一次。用玻璃棒攪動(dòng)待測(cè)溶液，并搖動(dòng)，使溶液混合均勻，再將電極插入待測(cè)溶液中，這時(shí)就能在顯示屏上讀出待測(cè)溶液的pH值。待測(cè)溶液溫度與標(biāo)定溶液溫度不相同時(shí)，其操作方法如下：用蒸餾水清洗電極的頭部，再用待測(cè)溶液清洗一次。用溫度計(jì)測(cè)出待測(cè)溶液的溫度值。按pH計(jì)上的“溫度”鍵，使儀器顯示為待測(cè)溶液的pH值，然后再按確認(rèn)鍵。用玻璃棒攪動(dòng)待測(cè)溶液，并搖動(dòng)，使溶液混合均勻，再將電極浸入待測(cè)溶液中，這時(shí)在顯示屏上就可以讀出待測(cè)溶液的pH值。數(shù)據(jù)測(cè)量結(jié)束后，應(yīng)將電極保護(hù)套套上，并且電極保護(hù)套內(nèi)應(yīng)加少量的外參比補(bǔ)充液。以保持電極的玻璃球濕潤(rùn)，切記浸泡到蒸餾水中，復(fù)合電極的外參比補(bǔ)充液為濃度3molL的氯化鉀溶液。抽血和取血：取血部位一般為尾靜脈和靠近心臟的主大動(dòng)脈。首先將魚固定住，然后解剖，解剖時(shí)應(yīng)十分小心，不要剪破心臟主大動(dòng)脈，用玻璃分針找到心臟的主大動(dòng)脈，找到后將已用肝素浸潤(rùn)過的注射器插入靠近心臟的大動(dòng)脈中，緩慢的抽取血液，抽完后又繼續(xù)找到尾靜脈，又再抽取。抽血時(shí)應(yīng)格外的小心，不要將血液往外流，以保證血量。另外抽血時(shí)務(wù)必不要抽取流到外面的血液，因?yàn)橥饷娴难阂呀?jīng)和組織液相混，血液已被稀釋，這樣測(cè)出來的pH值已經(jīng)不在是血液本身的pH值。另外在抽取血液的整個(gè)過程中，動(dòng)作要快，以保證血液的新鮮，防止血液的凝固。因此在預(yù)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)多次反復(fù)的練習(xí)。2.2.5正式實(shí)驗(yàn)預(yù)實(shí)驗(yàn)之后，并已對(duì)抽血、取血，以及實(shí)驗(yàn)儀器等各項(xiàng)操作非常熟悉的情況下，開始正式實(shí)驗(yàn)。分組處理10天以后，即第一階段實(shí)驗(yàn)正式開始。第一天做實(shí)驗(yàn)組，第二天做對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)時(shí)，用干凈一次性注射器從黃顙魚心臟大動(dòng)脈和尾靜脈處抽血，抽血時(shí)，動(dòng)作要迅速，以防凝固，抽出的血量應(yīng)足以浸沒PH計(jì)復(fù)合電極玻璃泡，這樣才能真實(shí)地測(cè)出其血液的PH值。將抽取出的血液依次放在PHS3C型PH計(jì)下測(cè)量其血液PH值。在測(cè)完一個(gè)數(shù)據(jù)以后，在進(jìn)行下一個(gè)數(shù)據(jù)測(cè)量之前。PH計(jì)電極需洗干凈，并且應(yīng)用蒸餾水清洗，清洗后，應(yīng)待其晾干，或用吸水紙吸干外面的水珠，方可進(jìn)行測(cè)定。否則血液將會(huì)被稀釋了。導(dǎo)致測(cè)得的數(shù)據(jù)不精準(zhǔn)，將會(huì)增大誤差。在將血液放入PH計(jì)電極下測(cè)量時(shí)，讀數(shù)時(shí)，應(yīng)待其示數(shù)穩(wěn)定后，即（PH計(jì)顯示屏上的數(shù)字停止跳動(dòng)時(shí)），即為該條魚血液的PH值，至少應(yīng)停留2到3分鐘。最后將以上測(cè)得的實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。3.結(jié)果與分析3.1第一階段處理10天，實(shí)驗(yàn)組，饑餓處理，對(duì)照組，正常投食，血液PH值變化表一：饑餓處理對(duì)黃顙魚血液PH值影響序 號(hào)PH值分 組 第一階段（處理10天后血液PH值）第二階段（處理20天后血液PH值）實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組17.027.356.897.1226.917.056.846.8537.497.527.566.7846.886.936.737.4456.837.196.267.5667.027.757.077.4076.847.426.227.2187.096.896.476.9496.936.776.517.09106.977.246.737.33均數(shù)6.9987.2116.728*7.172注：* 表示差異顯著 * 表示差異極顯著實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)excel統(tǒng)計(jì)軟件處理并用雙樣本異方差t檢驗(yàn)可知，第一階段處理10天（實(shí)驗(yàn)組饑餓10天，對(duì)照組給予正常投食）后，P(T=t) 雙尾 =0.083101451,大于0.05，由此可知兩組魚血液pH指標(biāo)有一定的差異，但不是很顯著，實(shí)驗(yàn)組血液pH指標(biāo)要略小于對(duì)照組。結(jié)果表明饑餓處理后的江黃顙魚血液pH值有降低趨勢(shì)。 3.2第二階段處理20天，實(shí)驗(yàn)組,饑餓處理，對(duì)照組正常投食，血液PH值的變化第二階段，處理20天后，將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)excel統(tǒng)計(jì)軟件處理并用雙樣本異方差t檢驗(yàn)可知，P(T=t) 雙尾 = 0.009721382，小于0.01，由此可知兩組魚血液pH指標(biāo)值存在明顯的差異，實(shí)驗(yàn)表明隨饑餓時(shí)間延長(zhǎng)江黃顙魚血液pH值降低越為顯著。3.3結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)excel統(tǒng)計(jì)軟件處理并用雙樣本異方差t檢驗(yàn)可知，第一階段處理10天，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照之間不存在顯著差異；而在第二階段處理20天當(dāng)中，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照之間存在極顯著差異。由圖1、2觀測(cè)值還可看出，第二階段所得的數(shù)據(jù)波動(dòng)比第一階段所得的數(shù)據(jù)要大一些，出現(xiàn)波動(dòng)的原因可能是魚與魚之間個(gè)體的差異導(dǎo)致。 0第n條魚124567891036.206.406.606.807.407.007.207.607.70血液pH值實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組圖1 第一階段處理，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血液pH數(shù)值變化波動(dòng)情況 0第n條魚124567891036.206.406.606.807.407.007.207.607.70血液pH值實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組圖2 第二階段處理，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血液pH數(shù)值變化波動(dòng)情況4.討論魚類的各項(xiàng)血液生理指標(biāo)正常穩(wěn)定對(duì)于魚的正常生長(zhǎng)發(fā)育均起著極其重要的作用，因此魚類血液的各項(xiàng)指標(biāo)可以作為衡量魚類機(jī)體健康狀況的重要參數(shù)之一，然而魚類的血液指標(biāo)容易受各方面因素的影響，從而影響到其正常的生長(zhǎng)發(fā)育和生存。這些因素如：饑餓、溫度（高溫或低溫）、溶氧量、鹽濃度、重金屬離子、還有不同的生態(tài)環(huán)境等，這些因素的改變，終將導(dǎo)致魚體正常生理及生化等相關(guān)指標(biāo)改變【7】。魚類一般能經(jīng)受住長(zhǎng)時(shí)間的饑餓，如有些黃顙魚能饑餓到長(zhǎng)達(dá)65天左右的時(shí)間，在饑餓的過程中，其體內(nèi)將發(fā)生一系列生理生化的變化，以滿足其生命活動(dòng)狀態(tài)，尤其是一些血液方面的指標(biāo)，如血液pH值、血紅蛋白、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、紅細(xì)胞脆性、全血比重等，較容易受其影響。如饑餓對(duì)月鱧幾項(xiàng)血液指標(biāo)的影響【8】，饑餓對(duì)養(yǎng)殖鱸魚血液生理生化指標(biāo)的影響【9】。血液pH值即血液內(nèi)氫離子濃度的負(fù)對(duì)數(shù)，凡是細(xì)胞內(nèi)生化的改變均與血液pH有密切的關(guān)系，只有當(dāng)血液的pH值維持在相對(duì)恒定范圍時(shí)，機(jī)體才能維持正常的代謝及生理功能活動(dòng)，如果超出這個(gè)范圍，就會(huì)導(dǎo)致魚體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)失調(diào)，終將導(dǎo)致其體內(nèi)正常代謝及生理功能發(fā)生紊亂，進(jìn)而對(duì)其生長(zhǎng)和生活造成影響，嚴(yán)重者甚至?xí)?dǎo)致機(jī)體死亡。導(dǎo)致機(jī)體血液PH值降低的原因常見有代謝及呼吸性酸中毒【10】，另外還有食物方面，進(jìn)食酸性食物過多，可造成血液偏酸性。試驗(yàn)結(jié)果表明，在饑餓初期，機(jī)體由于通過自身適應(yīng)性機(jī)能調(diào)整，血中PH幾乎無明顯改變，但隨著饑餓時(shí)間延長(zhǎng)，血液PH值發(fā)生明顯改變。研究資料表明，饑餓狀態(tài)下瓦氏黃顙魚對(duì)身體儲(chǔ)能物質(zhì)的動(dòng)用在饑餓后期主要為脂肪【11】， 而脂的有氧氧化化結(jié)果將導(dǎo)致體內(nèi)脂肪酸含量升高，脂肪酸氧化釋能同時(shí)，也會(huì)致體內(nèi)CO2升高。在饑餓狀態(tài)下, 對(duì)瓦氏黃顙魚的氨氮排泄率測(cè)定結(jié)果表明, 瓦氏黃顙魚的氨氮排泄率在饑餓前期先升高后下降; 在饑餓 1020 d氨氮排泄率無顯著變化，20 d后氨氮排泄率呈下降趨勢(shì)【11】。氨氮排泄下降，致使體內(nèi)血中氨氮含量升高，而氨氮升高使魚體鰓組織破壞，且降低血液載氧能力，使呼吸機(jī)能下降【7】，呼吸機(jī)能下降將導(dǎo)致體內(nèi)CO2積聚，血PH下降。綜上所述，餓使江黃顙魚血液PH降低原因，可能是饑餓使體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)及能源物質(zhì)缺乏，導(dǎo)致魚體呼吸機(jī)能減弱，酸性物質(zhì)在體內(nèi)積聚過多而致，但具體發(fā)生機(jī)制還有待進(jìn)一步探討和研究。 參考文獻(xiàn)1 葉勤，李云，廖戎等. 瓦氏黃顙魚血清磷組分的測(cè)定及應(yīng)用. 化學(xué)研究與應(yīng)用，2002， 14（2）：239231.2 余濤，史立才，曲東風(fēng)等. 黃顙魚消化酶活性的初步研究. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué) 報(bào)，2002，24（5）：9294.3 陳章寶，鄭