高中生物選修1《生物技術實踐》復習知識梳理

1、專題1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用課題1 果酒和果醋和制作一、基礎知識（一）果酒制作的原理1菌種主要是 ，屬于 生物，新陳代謝類型 ， 有氧時，進行 ，大量繁殖，反應式為： 無氧時，能進行 發(fā)酵，反應式為： 。2酵母菌繁殖的最適溫度20左右，酒精發(fā)酵一般控制在 。3自然發(fā)酵過程中，起作用的主要是 。也可以在果汁中 加入人工培養(yǎng)的酵母菌。（二）果醋制作的原理1菌種主要是 ，屬于 生物，新陳代謝類型為 。只有在 氧氣充足時，才能進行旺盛的生命活動。變酸的酒表面觀察到的菌膜就是 在 液面大量繁殖形成的。2 當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的 分解成 ，當缺少糖源時，醋 酸菌將 變?yōu)?，再變?yōu)?，反應簡

2、式為 。3醋酸菌的最適合生長溫度為 。4菌種來源：到生產(chǎn)食醋的工廠或菌種保藏中心購買，或從食醋中分離醋酸菌。二、實驗設計1、流程圖挑選葡萄 沖洗 榨汁 發(fā)酵 發(fā)酵 2、制作實例實驗材料：葡萄、榨汁機、紗布、醋酸菌（或醋曲）、發(fā)酵瓶（如右圖）、 氣泵、體積分數(shù)為70%的酒精等。實驗步驟1 對發(fā)酵瓶、紗布、榨汁機等實驗用具進行清洗并消毒。先用溫水反復 沖洗幾次，再用體積分數(shù)為 的酒精擦拭消毒，晾干待用。2取葡萄500g，去除枝梗和腐爛的子粒。3用清水沖洗葡萄12遍除去污物。（注意不要反復多次沖洗，原因是 ）4用榨汁機榨取葡萄汁后，將其裝入發(fā)酵瓶中。（如果沒有合適的發(fā)酵 裝置，可用500mL的塑料瓶

3、替代。但注入的果汁量不要超過塑料瓶總體積的 ，留 有 的空間，目的是 。）5將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度（ ）下發(fā)酵。6由于發(fā)酵旺盛期CO2的產(chǎn)量非常多，因此需要及時排氣，以防止發(fā)酵瓶爆裂。（如果 是簡易發(fā)酵裝置，每天 瓶蓋24次，進行排氣。這樣做的目的是 。）710天后，取樣檢驗。例如，可以檢驗 、 的含量、進行酵母菌的鏡檢等工作。8 當果酒制成以后，可在發(fā)酵液中加入醋酸菌（或醋曲），然后移至 條件 下發(fā)酵，適時用氣泵向發(fā)酵液中 。（如果沒有充氣裝置，可以將瓶蓋 打開，在瓶口上蓋上紗布。）三、操作提示（一）材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進行 ，然后 。（二）防止發(fā)酵液被污染1、榨汁

4、機要清洗干凈，并晾干。 2、發(fā)酵瓶要清洗干凈，用體積分數(shù) 的酒 精消毒。3、裝入葡萄汁后，封閉充氣口。4、果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用 來檢驗。在 條件下，重鉻 酸鉀與酒精反應呈現(xiàn) 。請分析此裝置中的充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接？結合果酒、果醋的制作原理，你認為應該如何使用這個發(fā)酵裝置？答：充氣口是在 發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出 的；出料口是用來取樣的（可根據(jù)所取樣液的 來判斷取樣的先后順序）。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是 。使用該裝置制酒時，應該 充氣口；制醋時，應將充氣口連接氣

5、泵，輸入 。課題2 腐乳的制作一、基礎知識腐乳制作的原理1 腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用，其中起主要作用的是 ，它是一種 生物，新陳代謝類型是 。2 等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的 分解成小分子的 和 ； 脂肪酶可以將 水解成 和 。3 現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的 條件下，將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上， 這樣可以避免其他菌種的污染，保證產(chǎn)品的質量。二、實驗設計1、實驗流程讓豆腐 加 腌制加 裝瓶 腌制。2、制作實例實驗材料：含水量 的豆腐，粽葉，盤子，鹽，黃酒，米酒，糖，香辛料等，廣口玻璃瓶，高壓鍋等。實驗步驟1將豆腐切成3cm3cm1cm若干塊。2將豆腐塊平放在鋪有干粽葉的盤內(nèi)（粽葉可

6、以提供菌種，并能起到保溫的作用），每塊豆腐等距離排放，周圍留一定的空隙。豆腐上面再鋪上干凈的粽葉。氣候干燥時，將平盤用保鮮膜包裹，但不要封嚴，以免濕度太高，不利于毛霉的生長。3將平盤放在溫度為 的地方，毛霉逐漸生長，大約5d后，豆腐表面叢生直立菌絲。4當毛霉生長旺盛，并呈淡黃色時，去除保鮮膜及鋪在上面的粽葉，使豆腐塊的熱量和水分能夠迅速散失，同時散去霉味，這一過程一般持續(xù)36h以上。5豆腐涼透后，將豆腐間的連在一起的菌絲拉斷，并整齊排在容器內(nèi)，準備腌制。6長滿毛霉的豆腐塊（以下稱毛坯）分層擺放，分層加鹽，并隨層高而 ，在接近瓶口表面鹽要鋪 一些，以 ，約腌制8d。（豆腐與鹽質量分數(shù)比為51）7

7、將黃酒、米酒和糖、香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在 左右為宜。8將廣口玻璃瓶刷洗干凈，用高壓鍋在1000C蒸汽滅菌30min，將腐乳成坯擺入瓶中，加入鹵湯和輔料后，將瓶口用酒精燈加熱滅菌，用膠條密封。在常溫下，一般六個月即可以成熟。三、操作提示 （一）控制好材料的用量1、用鹽腌制時，注意控制鹽的用量。鹽的濃度過低， ，可能導致豆腐腐?。畸}的濃度過高，會 。2、乳湯中酒的含量應控制在 左右。酒精含量過低， ，可能導致豆腐腐??；酒精含量過高，會 。（二）防止雜菌污染1、用來腌制腐乳的玻璃瓶，刷干凈后要用沸水消毒。2、裝瓶時要迅速小心；加入乳湯后要用膠條將瓶口密封；封瓶時，最好將瓶口通過酒精

8、燈的火焰，防止瓶口被污染。四、產(chǎn)物鑒定 可根據(jù) 來判斷腐乳的品質。 專題二 微生物的實驗室培養(yǎng)1、培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質，是進行微生物培養(yǎng)的物質基礎。2、培養(yǎng)基按照物理性質可分為液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂（是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。3、按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學物質配制而成，其中成分的種類比例明確，可重復性好，常用于微生物的分離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學成分不明的天然物質配制而成，取材方便，常用于實際工業(yè)生產(chǎn)

9、。3、按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學物質，以抑制不需要的微生物生長，促進所需要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。4、培養(yǎng)基的化學成分包括 、 、 、 等。 碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質。如CO2、NaHCO3等無機碳源；糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。異養(yǎng)微生物只能利用 碳源。單質碳不能作為碳源。 氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質。如N2、NH3、NO3-、NH4+（無機氮源）蛋白質、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機氮源

10、）等。只有固氮微生物才能利用 。 培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加 ，培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至 性，培養(yǎng)細菌是需要將pH調(diào)至 性；培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供 的條件。5、無菌技術獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止外來雜菌的入侵，要注意以下幾個方面：對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行 。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行 。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在 附近進行。實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無菌技術除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？答：

11、無菌技術還能有效避免 。6、消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對于一些不耐高溫的液體）還有化學藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有 。 滅菌方法：接種環(huán)、接種針、試管口等使用 ；玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用滅菌方法是 ； 培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用滅菌方法是 。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈 。比較項理化因素的作用強度消滅微生物的數(shù)量芽孢

12、和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強烈全部微生物能7、制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（1）方法步驟：配制培養(yǎng)液（計算、 、溶化）、調(diào)節(jié) 、（分裝、包扎）、 、 擱置斜面或 。（2）倒平板操作的步驟： 將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出 棉塞。 右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。 用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培 養(yǎng)基（約1020mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。 等待平板冷卻凝固，大約需510min。然后，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在 下、皿底在上。倒平板操作的討論 1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷

13、卻到 左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？ 2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？ 3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分 ，又可以防止 。4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？ 答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。8、分離純化大腸桿菌（1）微生物分離的方法最常用的是 和 。（2）平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐 步

14、稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來 的肉眼可見的子細胞群體，這就是 。（3） 稀釋涂布平板法是將菌液進行 ，然后將不同稀釋度的菌液分 別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩 步。（4） 用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個 細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成 ，以便于分離純化菌種。（5）平板劃線法操作步驟：將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。將試管口通過火焰。將 的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過火焰，并塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種

15、的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條 平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。 接種環(huán)，待其 后，從第一區(qū)域劃線的 開始往第二區(qū)域內(nèi)劃 線。重復以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線 。將平板 放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。平板劃線操作的討論1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減

16、少，以便得到菌落。劃線結束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？ 答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？ 答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。（6）涂布平板操作的步驟：將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻810s。 用涂布器將菌液均勻地涂布在培

17、養(yǎng)基表面。涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應在 附近進行。9、菌種的保存（1）對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法。 臨時保藏方法 將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。當菌落長成 后，將試管放入4的冰箱中保藏。以后每36個月，都要重新將菌種從舊的培 養(yǎng)基上轉移到新鮮的培養(yǎng)基上。 缺點：這種方法保存的時間不長，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。（2）對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。 在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在20的冷凍箱中保存。10、確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法 將未接種的培養(yǎng)基在恒溫

18、箱中保溫12天（對照），無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。專題4 酶的研究與應用課題1 探討加酶洗衣粉的洗滌效果一、基礎知識1加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類： 、 、 和 。其中，應用最廣泛、效果最明顯的是 和 。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質水解成可溶性的 或小分子的 ，使污跡從衣物上脫落。同樣道理，其他酶也是將大分子物質分解為小分子物質，從而使洗衣粉具有更好的去污能力。2、使用加酶洗衣粉時，影響酶活性的因素有 、 、 等，為此，科學家通過 生產(chǎn)出了特殊的酶，并制成酶制劑，解決了這個問題。3、加酶洗衣粉可以降低 和 的用量，使洗滌

19、劑朝 的方向發(fā)展，減少對環(huán)境的污染。二、實驗設計項目實驗探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果探究溫度對加酶洗衣粉洗滌效果的影響探究不同類型加酶洗衣粉洗滌效果的影響自變量自變量處理因變量因變量觀察指標無關變量無關變量的控制實驗結果實驗結論課題2 酵母細胞的固定化課題背景1、 問題：酶對環(huán)境條件敏感，易失活；溶液中的酶很難回收，不能再次利用，提高了生 產(chǎn)成本；反應后的酶會混合在產(chǎn)物中，如不除去，會影響產(chǎn)品質量。設想：將酶固定在 上。優(yōu)點：使酶既能與反應物 ，又能與產(chǎn)物 ，同時，固定在載體上的酶還可 以 。2、 問題：一種酶只能催化一種化學反應，而在生產(chǎn)實踐中，很多產(chǎn)物的形成都是通過 一系列的酶促反

20、應才能得到的。設想：將合成酶的 直接固定。優(yōu)點：成本 ，操作 。一、基礎知識固定化技術1、固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術，包括 、 和 。2、一般來說，酶更適合采用 和 固定，而細胞多采用 固定化。這是因為細胞體積比酶分子的體積大；體積大的細胞難以被 或 ，而個小的酶容易從包埋材料中 。3、包埋法法固定化細胞，即將微生物細胞均勻地包埋在 的載體中。常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。4、從操作的角度考慮，固定化酶和固定化細胞兩種技術中，更為容易的是 ，對酶活性影響更小的是 。固定化細胞固定的是 （一種或一系列）酶。如果想將微生

21、物的發(fā)酵過程變成連續(xù)的酶反應，應選擇 技術。如果反應物是大分子，應該采用 技術。二、實驗操作（一）制備固定化酵母細胞1酵母細胞的活化活化就是處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復正常的生活狀態(tài)，活化劑是 。2配制物質的量的濃度為0.05mol/L的CaCl2溶液3配制海藻酸鈉溶液加熱溶化海藻酸鈉時要注意 加熱，重復幾次，并不斷 ，直到海藻酸鈉熔化為止。如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生 。4海藻酸鈉溶液與酵母菌細胞混合 將海藻酸鈉溶液 ，加入 的海藻酸鈉溶液，進行充分攪拌，使其混合均勻，在轉移至注射器中。5固定化酵母細胞以 的速度 地將注射器中的溶液 到剛配制好的CaCl2溶液中，并浸泡30min（時間）左右

22、。（二）用固定化酵母細胞發(fā)酵1將固定好的酵母細胞（凝膠珠）用 沖洗2-3次（目的是 ）。2將10%葡萄糖溶液轉移至錐形瓶中，加入固定好的酵母細胞，置于 下發(fā)酵24h（時間）。三、結果分析與評價（一）觀察凝膠珠的顏色和形狀如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉濃度濃度 ，該種凝膠珠包埋的酵母細胞數(shù)目 ，影響實驗效果；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉濃度濃度 ，制作失敗，需要再作嘗試。（二）觀察發(fā)酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母細胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精，可以看到產(chǎn)生了很多氣泡，同時會聞到酒味。四、課題延伸工業(yè)生產(chǎn)中，細胞的固定化技術是在嚴格的 條件下進行的。類型優(yōu)點不足直接使用酶催化效

23、率高，低耗能、低污染等。對環(huán)境條件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產(chǎn)成本；反應后酶會混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質量。固定化酶酶既能與反應物接觸，又能與產(chǎn)物分離，同時，固定在載體上的酶還可以被反復利用。一種酶只能催化一種化學反應，而在生產(chǎn)實踐中，很多產(chǎn)物的形成都通過一系列的酶促反應才能得到的。固定化細胞成本低，操作更容易。固定后的酶或細胞與反應物不容易接近，可能導致反應效果下降等。專題5 DNA的粗提取與鑒定一、基礎知識（一）提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學性質的生物大分子。對于DNA的粗提取而言，就是要利用D

24、NA與RNA、蛋白質和脂質等在物理和化學性質方面的差異，提取DNA，去除其他成分。（1）DNA的溶解性：l DNA和蛋白質等其他成分在 中溶解度不同，利用這一特點，選擇適當?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的。（請畫出DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關系曲線圖）l 此外，DNA 酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分離。（2）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解 ，但是對DNA 影響。大多數(shù)蛋白質不能忍受 oC的高溫，而DNA在 以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解 ，但對DNA 影響。（二）DNA的鑒定在

25、條件下，DNA遇 會被染成 色，因此 可以作為鑒定DNA的試劑。二、實驗設計（一）實驗材料的選取 凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大。（二）破碎細胞，獲取含DNA的濾液 動物細胞的破碎比較容易，以雞血細胞為例，在雞血細胞液中加入一定量的 ，同時用玻璃棒 ，過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞，需要先用 。例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ，進行充分的 ，過濾后收集研磨液。（三）去除濾液中的雜質 方案一 利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中 的不同，通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質。方案二 直接在濾液中加入嫩肉

26、粉，反應1015min，嫩肉粉中的 能夠分解蛋白質。方案三 將濾液放在 的恒溫水浴箱保溫1015min，注意嚴格控制溫度范圍。（四）DNA的析出與鑒定 1、將處理后的溶液過濾，加入與濾液 ，靜置23min，溶液中會出現(xiàn) ，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。2、取 支20ml的試管，各加入物質的量濃度為 的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入 試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向 支試管中各加入4ml的 試劑?；旌暇鶆蚝?，將試管置于 中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變 。實例：用雞血細胞液粗提取DNA

27、并鑒定步驟操作圖示1、提取雞血細胞的細胞核物質將制備好的雞血細胞液（已在課前配好）510mL，注入到50ml燒杯中。向燒杯中加入蒸餾水20mL，同時用玻璃棒沿一個方向快速攪拌5min，然后，用放有紗布的漏斗將血細胞過濾至1000mL的燒杯中，取其濾液。2、溶解細胞核內(nèi)的DNA將物質的量濃度為2molL的NaCl溶液40 mL加入到濾液中，并作玻璃棒沿一個方向攪拌1min，使其混合均勻，這時DNA在溶液中呈溶解狀態(tài)。3、析出含DNA的粘稠物沿燒杯內(nèi)壁緩緩加入蒸餾水，同時用玻璃棒沿一個方向不停地輕輕攪拌，這時燒杯中有絲狀物出現(xiàn)。繼續(xù)加入蒸餾水，溶液中出現(xiàn)的黏稠物會越來越多。當黏稠物不再增加時停止加

28、入蒸餾水。4、濾取含DNA的粘稠物用放多層紗布的漏斗，過濾溶液至1000 mL的燒杯中。取紗布上的黏稠物。5、將DNA的粘稠物再溶解取一個50 mL燒杯，向燒杯內(nèi)注入物質的量濃度為2molL的NaCl溶液20 mL。用鈍頭鑷子將紗布上的黏稠物夾至NaCl溶液中，用玻璃棒沿一個方向不停地攪拌3min，使黏稠物盡可能多地溶解于溶液中。6、過濾含DNA的氯化鈉溶液取一個100 mL燒杯，用放有兩層紗布的漏斗過濾以上溶液。取其濾液（DNA溶于濾液中）。7、提取含雜質較少的DNA在上述濾過的溶液中，加入冷卻的、體積分數(shù)為95的酒精溶液50 mL（加入時動作要慢），并作用玻璃棒沿一個方向攪拌，溶液中會出現(xiàn)

29、含雜質較少的絲狀物。當玻璃棒上出現(xiàn)絲狀物纏繞時，繼續(xù)慢慢攪拌，至不再增加時，用玻璃棒將絲狀物卷起，并用濾紙吸取上面的水分。8、DNA的鑒定取兩支20 mL的試管，各加入物質的量濃度為0.015molL的NaCl溶液5mL，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4 mL的二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜诜兴屑訜?min，等試管冷卻后，觀察并且比較兩支試管中溶液顏色的變化。三、操作提示1、以血液為實驗材料時，每100ml血液中需要加入3g ，防止 。2、加入洗滌劑后，動作要 ，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作

30、要 ，以免加劇 ，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3、二苯胺試劑要 ，否則會影響鑒定的效果。（2009江蘇）3、下列關于固定化酶和固定化細胞的敘述，正確的是 A固定化細胞技術在多步連續(xù)催化反應方面優(yōu)勢明顯B固定化酶的應用中，要控制好pH、溫度和溶解氧C利用固定化酶降解水體中有機磷農(nóng)藥，需提供適宜的營養(yǎng)條件 D利用固定化酵母細胞進行發(fā)酵，糖類的作用只是作為反應底物（2010江蘇）7右圖表示果酒和果醋制作過程中的物質變化過程，下列敘述正確的是A.過程和都只能發(fā)生在缺氧條件下B.過程和都只發(fā)生在酵母細胞的線粒體中C.過程和都需要氧氣的參與D.過程所需的最適溫度基本相同（2010江蘇）19、根據(jù)下列相

31、關實驗操作預期結果合理的是 A、實驗 B實驗 C實驗 D實驗（2010江蘇）25右圖1表示制備固定化酵母細胞的有關操作，圖2是利用固定化酵母細胞進行酒精發(fā)酵的示意圖下列敘述正確的是 A剛溶化的海藻酸鈉應迅速與活化的酵 母菌混合制備混合液 B圖1中X溶液為氯化鈣溶液，其作用 是使海藻酸鈉形成凝膠珠 C圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是為了使 培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸 D圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后 再轉移到圖2裝置中（2011年江蘇卷）3下列與果酒、果醋和腐乳制作相關的敘述，正確的是 A腐乳制作所需要的適宜溫度最高 B果醋發(fā)酵包括無氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵 C使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 D使用的菌

32、種都具有細胞壁、核糖體、DNA和RNA（11年新課標卷）39.有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株。回答問題：（1） 在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體 培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。（2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即 和 。 （3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降 解能力 。（4） 通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和 。無菌技術要求試驗操作應在酒精燈 附近進 行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。（

33、2011年江蘇卷）15下列有關酶的制備和應用的敘述，正確的是 A酶解法和吸水漲破法常用于制備微生物的胞內(nèi)酶 B透析、電泳和酸解等方法常用于酶的分離與純化 C棉織物不能使用添加纖維素酶的洗衣粉進行洗滌 D多酶片中的胃蛋白酶位于片劑的核心層（2012江蘇卷）17下列關于酶和固定化酵母細胞的研究與應用的敘述，錯誤的是 A從酶的固定方式看，吸附法比化學結合法對酶活性影響小 B作為消化酶使用時，蛋白酶制劑以口服方式給藥 C尿糖試紙含有固定化的葡萄糖酶和過氧化氫酶，可以反復使用 D將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗，目的是洗去CaCl2和雜菌（2012江蘇卷）18下列關于“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述，正確的

34、是 A洗滌劑能瓦解細胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍 C常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取 D用玻棒緩慢攪拌濾液會導致DNA獲得量減少（2012江蘇卷）21下列關于制作果酒、果醋和腐乳的敘述，合理的是 A在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長 B條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸 C果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會逐漸減小 D將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加大用鹽量（2012海南卷）30.回答下列關于腐乳制作的問題：（1） 腐乳是豆腐經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品。多種微生物參與了該發(fā)酵過程，其中起主 要作用的微生物是

35、 ，其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解為 和 ；其產(chǎn)生的 能將豆腐中的脂肪水解為 和 。（2）發(fā)酵完成后需加鹽腌制，加鹽還可以抑制 生長。（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配置而成的鹵湯。鹵湯具有一定的防腐作 用外，還能使腐乳具有獨特的 。（2012上海卷）9酶在大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化應用中的核心問題是固定化技術，而酶固定化所依據(jù)的基本原理在于酶具有 A熱穩(wěn)定性 B催化高效性 C催化特異性 D可反復使用性（2012上海卷）高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖15所示。（1）過程稱為_，過程是為了_。來源:中國教育出版網(wǎng)zzs

36、（2）號培養(yǎng)基稱為_(按功能分)；該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外，還需加入 另一種重要的營養(yǎng)成分_。 A瓊脂 B葡萄糖 C硝酸銨 D碳酸氫鈉（3）一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了_。在高溫淀粉酶運用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對該酶的最佳溫度范圍進行測定。圖16中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖16中的曲線。（4） 根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度 范圍是_。 A40一50 B50一60 C60一70 D70-80（5）據(jù)圖判斷下列敘述錯誤的是

37、_。 A該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測出活性 B曲線35數(shù)據(jù)點是在80時測得的 C曲線表明80是該酶活性最高的溫度 D曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在70之后急劇下降來源:中教網(wǎng)（2013江蘇卷）4. 某同學用洋蔥進行DNA 粗提取和鑒定實驗，操作錯誤的是A. 加入洗滌劑后用力進行快速、充分的研磨 B. 用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的 DNAC. 加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D. 加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱（2013江蘇卷）6. 下列有關固定化酶和固定化細胞的敘述，正確的是A. 可用包埋法制備固定化酵母細胞 B. 反應產(chǎn)物對固定化酶的活性沒有影響C. 葡萄糖異構酶固定前后專一性不同D. 固定化細胞可以催

38、化各種反應底物的一系列反應（2013江蘇卷）14. 某研究性學習小組以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發(fā)酵實驗。下列相關敘述正確的是A. 酵母菌是嗜溫菌，所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度較高B. 先供氧進行果醋發(fā)酵，然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵C. 與人工接種的發(fā)酵相比，自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質更好D. 適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長繁殖（2013江蘇卷）17.將圖中果酒發(fā)酵裝置改裝后用于探究酵母菌呼吸方式的實驗，下列相關操作錯誤的是A.探究有氧條件下酵母菌呼吸方式時打開閥aB.經(jīng)管口3取樣檢測酒精和CO2的產(chǎn)生情況C.實驗開始前對改裝后整個裝置進行氣密性檢查D.改裝時將盛有澄清石灰水的試劑瓶與

39、管口2連通（2013江蘇卷）18.某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌 B.轉換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D.培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次（2013新課標II卷）39.臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：（1） 為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用 法或 法將樣本接種 于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。（2） 取該單菌落適當稀釋，用 法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37培養(yǎng)箱中 培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板。（3） 為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙 片均勻至于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈， 說明該致病菌對抗生素A ；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明 該致病菌對抗生素B ；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說 明 ；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一 個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的 。（4）根據(jù)上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好應選用抗生素 。（2014