髓系_淋巴系細(xì)胞

1、1.造血細(xì)胞：造血細(xì)胞(hematopoietic cells)廣義地分為髓系和淋系兩大類。由造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cell， HSC)分化和發(fā)育為系定向髓系祖細(xì)胞(如CFU-GM，CFU-E，CFU-MK)，髓系祖細(xì)胞再進(jìn)一步分化發(fā)育為形態(tài)上可識別的髓系細(xì)胞(myeloid cells)。髓系在廣義上包括粒系細(xì)胞、紅系細(xì)胞、巨核系細(xì)胞和單核系細(xì)胞，是狹義的造血細(xì)胞，而把淋巴系細(xì)胞視為非造血細(xì)胞(見后)。應(yīng)該指出，“myeloid cells”這個名詞有兩個不同含義：一個是指由髓系前階段幼稚細(xì)胞分化的所有髓細(xì)胞；另一個含義是指粒系細(xì)胞，但常用的粒：紅比例(myelo

2、id:erythroid ratio)只表示粒、紅系細(xì)胞增減情況，正常骨髓粒：紅比例為1.5-3：1。 粒系細(xì)胞：在關(guān)鍵性調(diào)節(jié)因子GM-CSF，G-CSF和IL-3和骨髓微環(huán)境作用下在骨小梁旁分化，增殖，發(fā)育成熟。成熟的粒細(xì)胞逐漸向小梁之間移動，所以，隨著粒細(xì)胞發(fā)育分化成熟，組織學(xué)上可見越靠近骨小梁的粒細(xì)胞越幼稚，形成較窄的23層幼稚細(xì)胞帶，越遠(yuǎn)離骨小梁越成熟。骨髓標(biāo)本超微結(jié)構(gòu)也顯示未分化幼稚細(xì)胞靠近骨小梁(正常早期粒系生成的部位)，支持這些的前體細(xì)胞來自骨內(nèi)膜細(xì)胞。如出現(xiàn)原始粒細(xì)胞叢(3個)或簇(5個)遠(yuǎn)離骨小梁時，則稱之為“幼稚前體細(xì)胞異常定位 ”(abnormal localizatio

3、n of immature precursor,ALIP )(圖3)。(1) 粒系細(xì)胞有6個發(fā)育階段，3個系列，即中性粒細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞： 圖3 骨髓活檢組織 小梁之間幼稚前體細(xì)胞異常定位(ALIP)。視野中央可見 4個原始粒細(xì)胞。塑料切片 H-Giemsa-E 400 原始粒細(xì)胞( myeloblast)：在組織切片中原始粒細(xì)胞胞體中等大小，胞漿較少，嗜堿性，無顆粒。胞核呈圓形或卵圓形，有1多個核仁，核膜厚，染色質(zhì)淡染。表達(dá)CD34+，CD33+，CD13+，HLA-DR+。這類細(xì)胞數(shù)目較少。 早幼粒細(xì)胞( promyelocyte )： 形態(tài)學(xué)上基本上與前者相似，主要區(qū)別在

4、于胞漿中出現(xiàn)粉紅色細(xì)顆粒，胞核呈圓形或橢圓形，居中或偏位。有核旁空暈及高爾基氏器區(qū)，染色質(zhì)開始聚集，表達(dá)CD33+，CD13+，CD15+，CD34-，HLA-DR-。 因嗜堿性顆粒溶于水，在切片上不能分辨出嗜堿性粒細(xì)胞(basophil)。嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophil)從早幼階段到成熟階段，胞核形態(tài)變化與嗜中性粒細(xì)胞一致，胞漿充滿粗大橘黃色的顆粒是其特點(diǎn)。過敏性疾病嗜酸細(xì)胞可明顯增多，急性與慢性嗜酸細(xì)胞白血病可見較多早幼嗜酸細(xì)胞。中幼粒細(xì)胞(myelocyte)及晚幼粒細(xì)胞(metamyelocyte)：隨著細(xì)胞發(fā)育成熟，胞漿嗜中性顆粒明顯增多，核仁消失，核分裂停止，染色質(zhì)逐漸增多，胞

5、核形狀由半圓形(中幼粒細(xì)胞)發(fā)育成腎形。 晚幼粒細(xì)胞，胞核比中幼粒小，最后形成桿狀(bandform)及分葉核粒細(xì)胞(segmented form)釋放入外周血或進(jìn)入組織。(2)紅系細(xì)胞：紅系細(xì)胞造血雖然沒有粒系細(xì)胞造血那樣復(fù)雜，但調(diào)節(jié)過程也是很復(fù)雜的，除生長因子(GM-CSF 、IL-3和IL-11)外，主要是紅細(xì)胞生成素(EPO)，它是一種誘導(dǎo)定向的紅系祖細(xì)胞增殖發(fā)育成熟的蛋白質(zhì)，是由腎細(xì)胞對缺氧反應(yīng)而產(chǎn)生的糖蛋白，對紅系祖細(xì)胞起著促分裂及生存的作用。EPO受體在原始紅細(xì)胞上很多，但在成熟紅細(xì)胞上缺乏。血紅蛋白和腫瘤壞死因子起負(fù)反饋調(diào)節(jié)，使骨髓微環(huán)境減少紅系細(xì)胞生成，紅系中最不易識別的幼稚

6、紅細(xì)胞是原始紅細(xì)胞，這些幼稚紅細(xì)胞表達(dá)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體和血型糖蛋白A。LCA和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗原表達(dá)隨著紅細(xì)胞成熟而下降，血型蛋白表達(dá)仍很高。只有中幼以上階段紅系細(xì)胞有核分裂能力，網(wǎng)織紅細(xì)胞通過骨髓竇壁內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)，成為成熟紅細(xì)胞后可存活120天。在體內(nèi)平衡狀態(tài)下大約每天產(chǎn)生紅細(xì)胞34109個/kg體重。原始紅細(xì)胞逐步分化為早幼紅、中幼紅、晚幼紅細(xì)胞。最終，核染色質(zhì)凝聚、固縮排出，形成無核成熟紅細(xì)胞。骨髓中有核紅細(xì)胞隨年齡變化較大，10%40%不等。 紅系細(xì)胞有5個發(fā)育階段 ，在組織切片中各階段紅系細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)有： 原始紅細(xì)胞( pronormoblast)：胞體大而圓，胞漿嗜堿性，核圓形

7、居中，核膜薄，核仁13個不等，染色質(zhì)顆粒不清，核切面呈淡灰藍(lán)色。 早幼紅細(xì)胞( Basophilic normoblast):胞體圓，核圓，居中。有時核周胞漿可見一圈線狀空暈，染色質(zhì)出現(xiàn)凝集，核染色深淺不一，胞漿嗜雙色。 中幼紅細(xì)胞( polychromatophili normoblast)：胞體圓，核圓，居中。胞漿紅色，核染色質(zhì)呈粗塊狀，龜背樣，無核仁。 晚幼紅細(xì)胞( orthochromatic normoblast):胞體小，胞漿豐富，紅色，核濃染，看不清染色質(zhì)顆粒和結(jié)構(gòu)，無核仁。切片中不能見到網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticlocyte)。 成熟紅細(xì)胞，胞漿嗜酸性，無核，在切片中見不到網(wǎng)織紅細(xì)

8、胞。 (3)巨核系細(xì)胞：巨核細(xì)胞有兩個顯著特點(diǎn)與其它系細(xì)胞不同：a.過去文獻(xiàn)報告認(rèn)為巨核細(xì)胞從原始到成熟階段一般不伴有絲分裂，而是經(jīng)核內(nèi)復(fù)制使胞核分葉增多而無細(xì)胞分裂，即胞核倍體數(shù)增多，體積增大，核葉增多，胞核數(shù)量不增加；但從骨髓組織學(xué)上是?？梢娋藓思?xì)胞核分裂的。b.最早可在光鏡下識別的原始巨核細(xì)胞為8倍體(8N)細(xì)胞(而其它系細(xì)胞為2N細(xì)胞)，因此，胞體較其它細(xì)胞大，直徑約2040m，隨著巨核細(xì)胞發(fā)育成熟而倍體數(shù)增多。 如巨核細(xì)胞分化或發(fā)育異常，胞核倍體增多或增多不明顯，但胞核不分葉而呈單圓核巨核細(xì)胞，包括淋巴樣小巨核細(xì)胞，也可呈多圓核巨核細(xì)胞。常見于骨髓增生異常綜合征和慢性粒細(xì)胞白血病。前

9、原始巨核細(xì)胞(巨核祖細(xì)胞)是一種胞體很小，胞漿少，核圓，染色質(zhì)細(xì)的巨核細(xì)胞，在細(xì)胞涂片上無形態(tài)特征性。除表達(dá)HLA-DR外，這些細(xì)胞還表達(dá)CD34，CD33，及不同程度表達(dá)CD41細(xì)胞表面粘附分子。在電鏡下于核周池及內(nèi)漿網(wǎng)可測到血小板過氧化酶(PPO)。成熟巨核細(xì)胞從竇壁細(xì)胞間隙伸出胞漿突起(偽足)，這些偽足脫落形成血小板進(jìn)入血液循環(huán)，巨核細(xì)胞也可進(jìn)入循環(huán)。 巨核細(xì)胞多在竇樣結(jié)構(gòu)旁，距骨小梁有一定距離，連續(xù)切片顯示，在正常骨髓所有巨核細(xì)胞均連續(xù)著竇樣結(jié)構(gòu)，并將其胞漿突起深入竇內(nèi)皮細(xì)胞間隙，巨核細(xì)胞胞漿逐步脫落形成血小板進(jìn)入血液循環(huán)，巨核細(xì)胞就成為“裸巨核”。巨核細(xì)胞的形態(tài)：正常情況下，巨核細(xì)胞

10、是骨髓三系細(xì)胞中數(shù)量最少的，體積是最大的，約占有核細(xì)胞的1%。在組織切片中巨核細(xì)胞有六種形態(tài)。 a.多葉核巨核細(xì)胞(multilobated nuclear megakaryocyte)：胞體大小懸殊，胞漿豐富，胞核明顯扭曲或分葉，無核仁。一般組織切片HE染色不見血小板，但免疫組化染色方法可見血小板形成。 b.多核性巨核細(xì)胞(multinuclear megakaryocyte)：胞體中等大小，兩個以上的圓形核，互不相連，胞漿與染色質(zhì)形態(tài)與單圓核相一致。 c.單圓核巨核細(xì)胞(mononuclear megakaryocyte)：細(xì)胞直徑大于20m，其中又可分為小單圓核，中單圓核和大單圓核巨核細(xì)

11、胞。胞體圓形或不規(guī)則形，胞漿較豐富，嗜酸性。核呈圓形，核染色質(zhì)粗，不見核仁(圖4)。這類細(xì)胞多見于MDS患者，也常見于慢性粒細(xì)胞白血病和急性白血病等。 d.小巨核細(xì)胞(micromegakaryocyte)：胞體直徑約在6-20m大小，其中又可分為淋巴樣小巨核細(xì)胞(在涂片上較典型)。呈圓形，胞漿豐富可有突起，嗜堿性或嗜多色性，核染色質(zhì)粗，豐富，分布均勻，核深染，核仁不明顯，核無凹陷或分葉，CD41單抗免疫組化染色陽性。這類細(xì)胞在正常骨髓中很少見。主要見于病理狀態(tài)，尤其是在MDS時具有一定診斷參考價值。小巨核細(xì)胞增多是由于巨核細(xì)胞分化發(fā)育障礙所致。 e.裸核巨核細(xì)胞(denuded nuclea

12、r megakaryocyte)：為衰老退化的巨核細(xì)胞。無胞漿，核多固縮，可見扭曲，折疊或分葉核等特點(diǎn)。這類細(xì)胞多見于特發(fā)性血小板減少性紫癜和骨髓纖維化等。 f.無核巨核細(xì)胞：僅見成熟巨核細(xì)胞的胞漿，無細(xì)胞核。因在涂片中不易觀察到這種現(xiàn)象，故可能是制片時未切到細(xì)胞核所致。 圖 2-4 單圓核巨核細(xì)胞 視野中央兩個單個圓核巨核細(xì)胞，胞漿較豐富，核呈圓形，無核仁。塑料切片 H-Giemsa-E 染色 400 巨核細(xì)胞在電鏡下有特征性的血小板過氧化物酶(PPO+)，免疫組化示CD41，CD42(1/4的巨核細(xì)胞)， CD61(在石蠟切片上也可測到)等抗原陽性。 (4)單核系細(xì)胞：單核系細(xì)胞與粒系細(xì)胞

13、是同一祖細(xì)胞分化、發(fā)育而成的，其發(fā)育過程與粒細(xì)胞完全一樣，胞體外形也相似，在PCF固定，塑料包埋病理切片中與粒系細(xì)胞最明顯的區(qū)別是胞漿無顆粒，核膜薄，核染色淺。在正常人骨髓中單核細(xì)胞數(shù)量較少，無特定的分布位置。原始單核細(xì)胞(monoblast)：直徑1522m，胞體圓形，胞核圓形或橢圓形。核染色淺，染色質(zhì)顆粒細(xì)致，均勻分布。核仁明顯(12個)，核膜薄，胞漿豐富弱嗜堿性，無顆粒。正常骨髓不易見到。 幼稚(前)單核細(xì)胞(promonocyte)：直徑1525m，圓形或不規(guī)則形，核有凹陷或切跡，其它特點(diǎn)與原始單核細(xì)胞相似。 單核細(xì)胞(monocyte)：直徑1220m，胞漿豐富淡染，無顆粒，很容易與

14、粒細(xì)胞相區(qū)別，核圓形者少見，絕大部分呈腎形、凹陷、切跡、扭曲、佛手狀、胎兒狀、分葉狀與肥胖的桿狀，核染色質(zhì)細(xì)，核仁明顯，嗜酸性，核膜薄。單核細(xì)胞有酸性磷酸酶、過氧化酶、芳香硫酸酶、溶菌酶、非特異性酯酶及氟化鈉抑制實(shí)驗(yàn)陽性。電鏡下有游離核糖體，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，線粒體較多。免疫組化示CD14+ 、CD68+/- 、MAC387+/- 溶菌酶、-胰蛋白酶、-糜蛋白酶等抗原陽性。 (5 ) 淋巴系細(xì)胞：正常骨髓中淋巴細(xì)胞數(shù)量是隨年齡變化的，幼兒骨髓涂片細(xì)胞分類淋巴細(xì)胞約占30%40%，成人骨髓淋巴細(xì)胞較少，約占有核細(xì)胞10%30% ，成熟和幼稚兩者兼有，如造血細(xì)胞減少(如再生障礙性貧血)則淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞

15、相對增多，甚至成熟淋巴細(xì)胞高達(dá)80%以上。不能認(rèn)為是淋巴細(xì)胞增殖性疾病。成人患者可見在骨小梁之間(非小梁旁)有淋巴細(xì)胞集簇、淋巴小結(jié)或淋巴濾泡，隨著年齡增大，淋巴小結(jié)有增多趨勢。此時需要與淋巴瘤累及骨髓相鑒別。 成熟淋巴細(xì)胞，胞體較小，胞漿少，透明，核圓，染色質(zhì)稍粗，核膜厚，有或無核仁。淋巴細(xì)胞含有酸性磷酸酶和糖原( PAS 染色呈大顆?；蛐≈闋铌栃?是其特征。 T細(xì)胞表達(dá)CD1、CD38、CD2、CD3、CD4/8、CD5、CD7、CD45RO等，但正常骨髓CD1、CD38是罕見的。 B細(xì)胞表達(dá)CD22、CD19、CD20、CD21、CD23、CD45R及CD79等，但正常骨髓CD19+B細(xì)

16、胞是罕見的。病理情況下淋系和髓系細(xì)胞的抗原可出現(xiàn)共表達(dá)(coexpression)現(xiàn)象。 (6)漿細(xì)胞：漿細(xì)胞是淋巴細(xì)胞終末分化階段的細(xì)胞，骨穿時多在骨髓小粒內(nèi)，組織切片中可散在于骨髓細(xì)胞之間，亦可與巨噬細(xì)胞一起位于毛細(xì)血管周圍，或沿血管旁排列(偶爾在骨髓涂片中也可見此現(xiàn)象)。成熟漿細(xì)胞胞核偏位，核染色質(zhì)凝聚呈塊，分布在核膜周邊呈車輪狀，無核仁，胞漿嗜堿性，近核側(cè)有月牙狀淡染空暈區(qū)，有時呈晚霞或火焰狀空暈。 正常骨髓涂片中漿細(xì)胞不到有核細(xì)胞的1%，如3%、10%稱漿細(xì)胞反應(yīng)性增多。10%就可能是腫瘤性的了(如骨髓瘤等)，如見到有核仁的漿細(xì)胞也可能是腫瘤性的漿細(xì)胞，如見到核內(nèi)包函體可能是感染了E

17、B病毒。漿細(xì)胞表達(dá)CD38，K/L(胞漿陽性)，很少表達(dá)成熟B細(xì)胞抗原。 (7)肥大細(xì)胞：在正常骨髓分類中少見，多集中在骨髓小粒中，HE染色切片不能辨認(rèn)，因其顆粒不著色。在Giemsa染色切片易于識別，胞體呈多角形，胞核呈圓形，橢圓或桿狀，胞漿中含有大量紫紅色的嗜堿顆粒，對甲苯胺藍(lán)染色呈異染性(即胞漿顆粒呈紫紅色)。它在骨髓腔中的分布不定，近骨內(nèi)膜處數(shù)量較多，并存在于小血管外膜和淋巴小結(jié)周圍，有時聚集一起。再生障礙性貧血，過敏性疾病等肥大細(xì)胞可增多。 2.非造血細(xì)胞 (1)巨噬細(xì)胞：來自單核細(xì)胞，無特定分布方式，胞體大，胞漿豐富，淡染，胞核較小，分化成熟。如吞噬異物便成為巨噬細(xì)胞，組織細(xì)胞和巨

18、噬細(xì)胞因在不同的部位以及因吞噬不同的物體而具有不同的名稱或不同的形態(tài)，在骨髓常見吞噬含鐵血黃素(鐵染色陽性)，吞噬脂類物質(zhì)胞漿呈泡沫狀。巨噬細(xì)胞胞漿融合可成為多核巨噬細(xì)胞。如較多巨噬細(xì)胞吞噬紅細(xì)胞，伴有血細(xì)胞減少等癥狀有可能為噬血細(xì)胞綜合征。 (2)脂肪細(xì)胞：來自未分化間葉細(xì)胞，胞體大，胞漿充滿中性脂肪呈透明狀，核被脂肪擠向胞膜而呈狹長弧形或無胞核(與切面有關(guān))，胞漿蘇丹黑染色陽性。無胞膜的脂肪空泡為脂肪滴而不是脂肪細(xì)胞。正常成人骨髓脂肪細(xì)胞數(shù)量與造血細(xì)胞數(shù)量約各占一半，如脂肪細(xì)胞增多，造血細(xì)胞必然減少，反之亦然。骨髓病理學(xué)上以此來評價骨髓增生程度(見后)。 (3)纖維母細(xì)胞及纖維細(xì)胞：纖維母細(xì)胞又稱成纖維細(xì)胞(fibroblast cell)，來自未分化間葉細(xì)胞，胞體中等大，梭形，兩端尖，核梭形，有核仁。 纖維母細(xì)胞發(fā)育為纖維細(xì)胞后胞體細(xì)長，胞漿嗜酸性兩端有分叉，即形成膠原纖維，胞核細(xì)桿狀，兩端尖，無核仁。 在膠原纖維形成之前已有網(wǎng)硬蛋白(reticulin)或網(wǎng)狀纖維形成，由纖維細(xì)胞、纖維母細(xì)胞及膠原纖維構(gòu)成的組織稱纖維組織。骨髓壞死后、骨髓轉(zhuǎn)移瘤、腫瘤或白血病放或化療后常引起骨髓纖維組織反應(yīng)性增生。纖維組織增生主要受血小板釋放的纖維母細(xì)胞刺激因子及其它多種因子的影響?？捎肕asson三色染色法顯示病理切片