應(yīng)用-ADME成藥性評價與非臨床藥動學(xué)研究PPT演示幻燈片

1、1,體內(nèi)藥物分析應(yīng)用,ADME早期成藥性評價 與非臨床藥代動力學(xué)研究,2,Productivity trend during 2009 and 2010. The clinical rate of success is depicted as percentage surviving at each clinical phase based on attrition observed during 2009 and 2010.,Ish Khanna,Drug discovery in pharmaceutical industry: productivity challenges and tr

2、ends,Drug Discovery Today Volume 17, Issues 19?20 2012 1088 - 1102,/10.1016/j.drudis.2012.05.007,High cost high failure,新藥發(fā)現(xiàn)、開發(fā)的風(fēng)險,NDA：new drug application,IND: investigational new drug,3,Shifting paradigm in drug failures during the past two decades. The clinical phase (I-III) failu

3、re of drugs is divided based on reasons of failure in the years 1991 (a) and 2000 (b) . Abbreviation : DMPK: drug .,Ish Khanna,Drug discovery in pharmaceutical industry: productivity challenges and trends,Drug Discovery Today Volume 17, Issues 19?20 2012 1088 - 1102,/10.1016/j.drudis

4、.2012.05.007,DMPK在新藥開發(fā)中的重要性,新藥在臨床被淘汰的原因比較,4,早期成藥性評價,早期藥效成藥性評價 早期毒理成藥性評價 早期ADME成藥性評價 合適的半衰期 較好的生物利用度（口服） 靶部位濃度較高 較小代謝性藥物相互作用（酶、轉(zhuǎn)運體）,5,6,Absorption Barriers,未被吸收 （nonabsorption) 外排 (active efflux) 腸道代謝(intestinal metabolism),肝臟代謝 (hepatic metabolism) 膽汁排泄 (biliary excretion),藥物損失（drug loss),F: 進入體循環(huán)的藥

5、物量 fa: 從小腸腸腔吸收的藥物量 fg: 小腸代謝后剩余的藥物量 fh: 肝臟代謝后剩余的藥物量,7,小腸轉(zhuǎn)運的體外模型,Transwell System,將待考察物加入AP側(cè)，孵育后測定 BL側(cè)藥物，計算Papp APBL 將待考察物加入BL側(cè)，孵育后測定AP側(cè)藥物，計算Papp BLAP 計算Papp BLAP /Papp APBL 考察給予轉(zhuǎn)運體抑制劑時 （Papp / inhibitor),透過性大小的判斷依據(jù)：Papp （cm/s）,1010-6 , 吸收良好,普萘洛爾Papp AB為 510-6cm/s 熒光黃Papp AB 110-6cm/s,對照,dQ/dt 表示單位時間內(nèi)

6、接收室中藥物出現(xiàn)的量；A為膜面積（1.13cm2）；C0為給藥室藥物初始濃度。,8,selected human transport proteins for drugs and endogenous substances,Membrane transporters in drug development. Nature Reviews, Drug Discovery 2010,9: 215-236.,9,創(chuàng)新藥物研究中對藥物轉(zhuǎn)運體研究的要求,10,US FDA 創(chuàng)新藥物研究中要求考察的CYP,CYP1A2 CYP3A4 CYP2B6 CYP2C8 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6,

7、11,實例1,12,實例2,XY-1,XY-1在血漿中的穩(wěn)定性（37）,大鼠iv20.0 mg/kg XY-1后全血中藥物的平均濃度-時間曲線,13,實例3,TCDMN,TCDMN對腫瘤細(xì)胞毒性的IC50 很小，但口服給藥無活性,？,大鼠灌胃給藥后血漿及組織中均測不到原型藥物TCDMN，但是能測到TCDML,14,實例3,TCDMN在大鼠肝微粒體（A）、空腸組織提取物（B）及血漿（C）中的水解及其產(chǎn)物（TCDML）生成的時間曲線,15,TCDMN與大鼠肝微粒體、S9、腸道蛋白及血漿孵育后，TCDMN的減少及TCDML的生成（mmol/mg protein/min） 比較，數(shù)據(jù)以meanSE,

8、n=3,iv是否可行？,16,大鼠靜注17.5mg/kg TCDMN 4小時后，各組織中水解產(chǎn)物TCDML的濃度（meanSD, n=5）,大鼠靜注 17.5mg/kg TCDMN 后血漿中TCDML平均濃度-時間曲線，圖中數(shù)據(jù)以meanSE 表示，n=3.,17,iv TCDMN后腫瘤組織中原型藥物濃度很低 抑瘤率仍不高,1.從制劑著手進行改進,2. 與水解酶抑制劑合用,iv TCDMN后腫瘤組織中原型藥物濃度很低 抑瘤率仍不高,放棄,18,實例4,雞尾酒探針底物法結(jié)果,19,JS-001對人肝微粒體主要CYP酶亞型抑制的IC50及Ki （mol/L）,預(yù)測依據(jù)（FDA指南）,20,JS-0

9、01對重組人CYP酶的抑制作用,21,實例5,AS-0010在培養(yǎng)21天的單層Caco-2細(xì)胞轉(zhuǎn)運,22,AS-0010在MDCK-mock及MDCK-MDR1中的積聚及Verapamil（100mol/L）及elacridar（20mol/L）對積聚的影響,AS-0010在LLC-PK1及LLC-PK1-BCRP中的積聚及cyclosporin A（100mol/L）及elacridar（20mol/L）對積聚的影響,23,實例6-SWK-002,雄性大鼠口服SWK-002制劑及制劑后血漿中SWK-002濃度-時間變化曲線,雄性大鼠靜脈注射SWK-002 5 mg/kg后血漿中SWK-002

10、濃度-時間變化曲線,24,實例7,大鼠口服XHT-0X 50mg/kg）后的血漿藥物濃度-時間曲線（meanSD, n=4）,大鼠灌胃50 mg/kg XHT-0X后組織中藥物濃度,25,XWT-0X（10M）及陽性抑制劑對CYP亞型的抑制 （meanSD, n=3）,26,實例8-YP-128,YP128在大鼠血漿中 37(A)的穩(wěn)定性,化合物(100 mol/L) 在混合的正常人肝微粒體（1.0 mg protein/mL）中孵育60 min后的I相代謝消除率(mean),化合物(100 mol/L) 在混合的正常人肝微粒體（1.0 mg protein/mL）中孵育4 h后的II相代謝消

11、除率(mean),27,大鼠灌胃67 mg/kg YP128后平均血漿藥物濃度-時間曲線,大鼠灌胃67 mg/kg YP128后組織中YP128的濃度,28,非臨床藥代動力學(xué)研究,創(chuàng)新藥物非臨床藥代動力學(xué)研究,1,2,非創(chuàng)新藥物動物生物利用度與生物等效性評價,3,特殊注射劑的非臨床藥代動力學(xué)研究,29,化學(xué)藥物非臨床藥代動力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則,藥物非臨床藥代動力學(xué)研究 技術(shù)指導(dǎo)原則 (第二稿) 二0一三年四月,30,研究目的,通過動物體內(nèi)、外和人體外的研究方法，揭示新藥在體內(nèi)的動態(tài)變化規(guī)律 獲得新藥的基本藥代動力學(xué)參數(shù), 闡明藥物的吸收、分布、代謝和排泄的過程和特點 闡明藥效或毒性大小的基礎(chǔ)，

12、和提供藥物對靶器官的效應(yīng)（藥效或毒性）的依據(jù) 提供評價藥物制劑特性和質(zhì)量的重要依據(jù)； 為設(shè)計和優(yōu)化臨床研究給藥方案提供有關(guān)信息 為藥物結(jié)構(gòu)改造和設(shè)計提供結(jié)構(gòu)與動力學(xué)關(guān)系的信息,31,研究的基本原則,非臨床藥代動力學(xué)研究，要遵循以下基本原則： 試驗?zāi)康拿鞔_ 分析方法可靠 試驗設(shè)計合理 所得參數(shù)全面，滿足評價要求 對試驗結(jié)果進行綜合分析與評價 具體問題具體分析,32,試驗設(shè)計的總體要求-1,試驗藥品 應(yīng)提供受試藥物的名稱、劑型、批號、來源、純度 保存條件及配制方法 使用的受試藥物及劑型應(yīng)盡量與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究使用的一致 研制單位應(yīng)提供質(zhì)檢報告,33,試驗動物 一般采用成年和健康的動物。常用動物種

13、屬有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型豬和猴等。選擇動物的原則如下: 首選動物：盡可能與藥效學(xué)和毒理學(xué)研究一致 盡量在清醒狀態(tài)下試驗，動力學(xué)研究最好從同一動物多次采樣 創(chuàng)新藥應(yīng)選用兩種或兩種以上的動物，其中一種為嚙齒類動物；另一種為非嚙齒類動物（如犬、小型豬或猴等）。其它類型的藥物，可選用一種動物，建議首選非嚙齒類動物 經(jīng)口給藥不宜選用兔等食草類動物,試驗設(shè)計的總體要求-2,藥動學(xué)實驗前先進行體外篩選，選擇與人代謝情況比較接近的動物進行體內(nèi)藥動學(xué)實驗,34,代謝穩(wěn)定性研究,35,代謝穩(wěn)定性研究,36,3 劑量選擇,試驗劑量 動物體內(nèi)藥代動力學(xué)研究應(yīng)設(shè)置至少三個劑量組，其高劑量最好接近最大耐受劑量，

14、中、小劑量根據(jù)動物有效劑量的上下限范圍選取。 主要考察在所試劑量范圍內(nèi)，藥物的體內(nèi)的動力學(xué)過程是屬于線性還是非線性，以所得結(jié)果有利于解釋藥效學(xué)和毒理學(xué)研究中的發(fā)現(xiàn)，并為新藥的進一步開發(fā)和研究提供信息,盡可能與臨床用藥一致,給藥途徑,試驗設(shè)計的總體要求-3,37,研究項目內(nèi)容,血藥濃度-時間曲線 藥物的吸收 藥物的分布 藥物的排泄（物質(zhì)平衡） 藥物與血漿蛋白的結(jié)合 藥物的生物轉(zhuǎn)化 對藥物代謝酶活性的影響 藥代動力學(xué)與毒代動力學(xué),38,1 血藥濃度-時間曲線,受試動物數(shù) 以血藥濃度-時間曲線的每個時間點有不少于6個數(shù)據(jù)為限計算所需動物數(shù)。最好從同一動物多次取樣。如由多只動物的數(shù)據(jù)共同構(gòu)成一條血藥濃

15、度-時間曲線，應(yīng)相應(yīng)增加動物數(shù)，以反映個體差異對試驗結(jié)果的影響。 建議受試動物采用雌雄各半，如發(fā)現(xiàn)動力學(xué)存在明顯的性別差異，應(yīng)增加動物數(shù)以便認(rèn)識試驗藥物的藥代動力學(xué)的性別差異。 單一性別用藥，可選擇與臨床用藥一致的性別,39,給藥前需采血作為為空白樣品 給藥后的一個完整的血藥濃度-時間曲線，采樣時間點的設(shè)計應(yīng)兼顧藥物的吸收相、平衡相（或峰濃度附近）和消除相 一般在吸收相至少需要2-3個采樣點，平衡相在峰濃度附近至少需要3個采樣點，消除相需要4-6個采樣點。對于吸收快的藥物，應(yīng)盡量避免第一個點是Cmax 整個采樣時間至少應(yīng)持續(xù)到3-5個半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為Cmax的1/10-1/20 正式

16、試驗前，選擇2-3只動物進行預(yù)試驗以確定合理的采血點,采樣點的確定,口服給藥：一般在給藥前應(yīng)禁食12小時以上，以排除食物對藥物吸收的影響。在試驗中應(yīng)注意根據(jù)具體情況統(tǒng)一給藥后禁食時間，以避免由此帶來的數(shù)據(jù)波動及食物的影響,40,藥代動力學(xué)參數(shù)的估算,將試驗中測得的各受試動物的血藥濃度-時間數(shù)據(jù)分別進行藥代動力學(xué)參數(shù)的估算，求得受試物的主要藥代動力學(xué)參數(shù)。 靜脈注射給藥，應(yīng)提供t1/2（消除半衰期）、Vd（表觀分布容積）、AUC（血藥濃度-時間曲線下面積）、CL或CL/f（清除率）等參數(shù)值； 血管外給藥， 除提供上述參數(shù)外, 尚應(yīng)提供Cmax和Tmax等參數(shù)，以反映藥物吸收的規(guī)律。 提供一些統(tǒng)計

17、矩參數(shù)，如:MRT、AUC(0-t)和AUC(0-)等，對于描述藥物藥代動力學(xué)特征的描述也有意義,一般需要AUC(0-t) 80%AUC(0-),41,應(yīng)提供的數(shù)據(jù),單次給藥 各個（和各組）受試動物的血藥濃度-時間數(shù)據(jù)（列表）及曲線和其平均值、標(biāo)準(zhǔn)差。 各個（和各組）受試動物的主要藥代動力學(xué)參數(shù)及平均值、標(biāo)準(zhǔn)差。 對受試物單次給藥非臨床藥代動力學(xué)的規(guī)律和特點進行討論和評價。 多次給藥 各個（和各組）受試動物首次給藥后的血藥濃度-時間數(shù)據(jù)及曲線和主要藥代動力學(xué)參數(shù) 各個（和各組）受試動物的3次穩(wěn)態(tài)谷濃度數(shù)據(jù)及平均值、標(biāo)準(zhǔn)差 各個（和各組）受試動物血藥濃度達穩(wěn)態(tài)后末次給藥的血藥濃度-時間數(shù)據(jù)和曲線

18、，及其平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和曲線 比較首次與末次給藥的血藥濃度-時間曲線和有關(guān)參數(shù) 各個（和各組） 平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度及標(biāo)準(zhǔn)差,42,大鼠灌胃不同劑量的菊花提取物后后血漿中Luteolin及Apigenin的濃度-時間曲線,中國藥學(xué)雜志，2011,46(3)：214-218.,43,2 藥物的吸收,對于經(jīng)口給藥的新藥，應(yīng)進行整體動物試驗，盡可能同時進行血管內(nèi)給藥的試驗，提供絕對生物利用度 如有必要，可進行體外吸收模型（如Caco-2細(xì)胞模型）、在體或離體腸道吸收試驗以闡述藥物吸收特性 對于其它血管外給藥的藥物及某些改變劑型的藥物，應(yīng)根據(jù)立題目的，盡可能提供絕對生物利用度,44,3 藥物的分布,選用大鼠

19、或小鼠做組織分布試驗較為方便 選擇一個劑量（一般有效劑量）給藥后，至少測定藥物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨骼肌等組織的濃度，以了解藥物在體內(nèi)的主要分布組織 特別注意藥物濃度高、蓄積時間長的組織和器官，以及在藥效或毒性靶器官的分布（如對造血系統(tǒng)有影響的藥物，應(yīng)考察在骨髓的分布） 參考血藥濃度-時間曲線的變化趨勢，選擇至少3個時間點分別代表吸收相、平衡相和消除相的藥物分布 若某組織的藥物濃度較高，應(yīng)增加觀測點，進一步研究該組織中藥物消除的情況 每個時間點，至少應(yīng)有5個動物的數(shù)據(jù),抗腫瘤藥物的組織分布研究中，藥物在腫瘤組織內(nèi)的分布研究也十分必要,45,做組織分布試驗，必須注意取

20、樣的代表性和一致性 同位素標(biāo)記物的組織分布試驗，應(yīng)提供標(biāo)記藥物的放化純度、標(biāo)記率（比活性）、標(biāo)記位置、給藥劑量等參數(shù)；提供放射性測定所采用的詳細(xì)方法，如分析儀器、本底計數(shù)、計數(shù)效率、校正因子、樣品制備過程等；提供采用放射性示蹤生物學(xué)試驗的詳細(xì)過程，以及對生物樣品測定時對放射性衰變所進行的校正方程等 盡可能提供給藥后不同時相的整體放射自顯影圖像,46,4 藥物的排泄,尿和糞的藥物排泄：一般采用小鼠或大鼠，將動物放入代謝籠內(nèi)，選定一個有效劑量給藥后，按一定的時間間隔分段收集尿或糞的全部樣品，測定藥物濃度 糞樣品按一定比例制成勻漿，記錄總體積，取部分樣品進行藥物含量測定 計算藥物經(jīng)此途徑排泄的速率及

21、排泄量，直至收集到的樣品測定不到藥物為止 每個時間點至少有5只動物的試驗數(shù)據(jù),注意：收集過程中需考慮是否采用一定措施以免藥物或代謝物降解,47,應(yīng)采集給藥前尿及糞樣，并參考預(yù)試驗的結(jié)果，設(shè)計給藥后收集樣品的時間點，包括藥物從尿或糞中開始排泄、排泄高峰及排泄基本結(jié)束的全過程 膽汁排泄：一般用大鼠在乙醚麻醉下作膽管插管引流，待動物清醒后給藥，并以合適的時間間隔分段收集膽汁（總時長一般不超過三天），進行藥物測定,記錄藥物自糞、尿、膽汁排出的速度及總排出量（占總給藥量的百分比），提供物質(zhì)平衡的數(shù)據(jù),48,排泄研究實例-1,Glycine,ATP CoA,Kidney,如何在尿液中發(fā)現(xiàn)p-FBA，p-F

22、HA？,49,排泄研究,Cumulative excretion of p-FHA and both metabolites in urine after iv administration of fluorapacin(12.5mg/kg) in rats (n=6, mean meanS.E.),Mean cumulative excretion of metabolites equivalents in bile after iv administration of fluorapacin (12.5mg/kg) in rats (n=6, mean meanS.E.),50,排泄研究實

23、例-2,應(yīng)用LC-MS 檢測到的 糞便+尿液總排泄率50%,是否有簡便、快捷的方法考察排泄率？,51,5 藥物與血漿蛋白的結(jié)合,研究藥物與血漿蛋白結(jié)合試驗可采用多種方法，如平衡透析法、超過濾法、分配平衡法、凝膠過濾法、光譜法等 根據(jù)藥物的理化性質(zhì)及試驗室條件，可選擇使用一種方法進行至少3個濃度（包括有效濃度）的血漿蛋白結(jié)合試驗 每個濃度至少重復(fù)試驗三次，以了解藥物的血漿蛋白結(jié)合率是否有濃度依賴性。,52,一般情況下，只有游離型藥物才能通過脂膜向組織擴散，被腎小管濾過或被肝臟代謝，因此藥物與蛋白的結(jié)合會明顯影響藥物分布與消除的動力學(xué)過程并降低藥物在靶部位的作用強度 建議根據(jù)藥理毒理研究所采用的動

24、物種屬，進行動物與人血漿蛋白結(jié)合率比較試驗，以預(yù)測和解釋動物與人在藥效和毒性反應(yīng)方面的相關(guān)性 對蛋白結(jié)合率高于90%以上的藥物，建議開展體外藥物競爭結(jié)合試驗，即選擇臨床上有可能合并使用的高蛋白結(jié)合率藥物，考察對所研究藥物蛋白結(jié)合率的影響,53,6 藥物的生物轉(zhuǎn)化,對于創(chuàng)新性的藥物，尚需了解在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化情況，包括轉(zhuǎn)化類型、主要轉(zhuǎn)化途徑及其可能涉及的代謝酶 對于新的前體藥物, 除對其代謝途徑和主要活性代謝物結(jié)構(gòu)進行研究外, 尚應(yīng)對原形藥和活性代謝物進行系統(tǒng) 的藥代動力學(xué)研究; 對主要在體內(nèi)以代謝消除為主的藥物(原形藥排泄50%)，生物轉(zhuǎn)化研究則可分為兩個階段： 臨床前可先采用色譜方法或放射性核

25、素標(biāo)記方法分析和分離可能存在的代謝產(chǎn)物，并用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等方法初步推測其結(jié)構(gòu); 如果II期臨床研究提示其在有效性和安全性方面有開發(fā)前景，在申報生產(chǎn)前進一步研究并闡明主要代謝產(chǎn)物的可能代謝途徑、結(jié)構(gòu)及代謝酶。但當(dāng)多種跡象提示可能存在有較強活性的代謝產(chǎn)物時，應(yīng)盡早開展活性代謝產(chǎn)物的研究，以確定開展代謝產(chǎn)物動力學(xué)試驗的必要性,54,吉非替尼代謝產(chǎn)物及主要代謝酶的確定 雞尾酒探針底物法體外篩選吉非替尼對主要CYP酶的抑制作用 吉非替尼對CYP2D6底物美托洛爾藥代動力學(xué)的影響 CYP3A4抑制劑和誘導(dǎo)劑對吉非替尼藥代動力學(xué)的影響,抗腫瘤藥吉非替尼的代謝及藥物-藥物相互作用研究,吉非替尼,對藥物代謝酶

26、的影響,55,1.吉非替尼代謝產(chǎn)物及主要代謝酶的確定,14C-吉非替尼與人肝微粒體及重組CYP3A4 孵育后的代表性HPLC圖譜,生成數(shù)個一相代謝產(chǎn)物 CYP3A4為參與吉非替尼代謝的主要CYP酶,結(jié)論,56,2. 雞尾酒探針底物法體外篩選吉非替尼對主要CYP酶的抑制作用,吉非替尼對人肝微粒體主要CYP酶活性的影響,注：表中數(shù)據(jù)為未加吉非替尼時的酶活性的百分比,臨床應(yīng)用中，吉非替尼在人體的血藥濃度小于11.2mol/L，為患者以250mg/d進行治療時穩(wěn)態(tài)濃度的10倍 引起代謝性藥物相互作用的可能性不大,57,3.吉非替尼對CYP2D6底物美托洛爾藥代動力學(xué)的影響,腫瘤患者單獨及與吉非替尼合用

27、美托洛爾（CYP2D6底物）時，美托洛爾的血藥濃度-時間曲線,結(jié)論：吉非替尼與CYP2D6底物藥物合用時，對合用藥物未產(chǎn)生顯著的藥代動力學(xué)影響,58,4-1 CYP3A4誘導(dǎo)劑對吉非替尼藥代動力學(xué)的影響,單用及與利福平(CYP3A4誘導(dǎo)劑）合用時，健康志愿者口服500mg吉非替尼后的平均血藥濃度-時間曲線,單用及與利福平合用時，健康志愿者口服500mg吉非替尼后的藥代動力學(xué)參數(shù),59,4-2 CYP3A4抑制劑對吉非替尼藥代動力學(xué)的影響,吉非替尼單用及與伊曲康唑合用時的平均血藥濃度-時間曲線,吉非替尼單用及與伊曲康唑合用時的藥代動力學(xué)參數(shù),60,關(guān)于藥物制劑的藥代研究,劑型特征、具體制劑所使用

28、的輔料、制備工藝等也是重要的影響因素。制劑研究時，必須結(jié)合藥代動力學(xué)研究結(jié)果，利用或避開藥物的某些性質(zhì) 藥物的理化性質(zhì)包括溶解度、油水分配系數(shù)、酸堿度、粒度、晶型、滲透性以及藥物在胃腸道中的穩(wěn)定性等，劑型因素包括劑型、輔料和制備工藝以及不同劑型制劑的給藥途徑等 新的給藥系統(tǒng)在不斷發(fā)展，如脂質(zhì)體、納米給藥系統(tǒng)、透皮給藥系統(tǒng)、局部定位給藥系統(tǒng)、脈沖給藥系統(tǒng)等。研究者可根據(jù)不同的用藥需要，結(jié)合藥物及其制劑的特點，制訂合理、可行的藥代動力學(xué)研究方案 對于新的復(fù)方制劑，應(yīng)通過復(fù)方與單藥藥代動力學(xué)的比較，研究其相互作用，以考察組方的合理性,61,關(guān)于多次給藥的藥代研究,對于臨床需長期給藥且有蓄積傾向的藥物

29、，應(yīng)考慮進行多次給藥的藥代動力學(xué)研究 多次給藥試驗時, 一般可選用一個劑量(有效劑量)。 根據(jù)單次給藥藥代試驗結(jié)果求得的消除半衰期(t1/2)并參考藥效學(xué)數(shù)據(jù), 確定藥物劑量、給藥間隔和給藥天數(shù),62,多次給藥后的特定組織分布,以下情況可考慮進行多次給藥后的特定組織的藥物濃度研究： 藥物/代謝物在組織中的半衰期明顯超過其血漿消除半衰期，并超過毒性研究給藥間隔的兩倍 在短期毒性研究、單次給藥的組織分布研究或其它藥理學(xué)研究中觀察到未預(yù)料的，而且對安全性評價有重要意義的組織病理學(xué)改變 定位靶向釋放的藥物,63,關(guān)于體外藥代動力學(xué)研究,在進行藥代動力學(xué)研究時，除了體內(nèi)研究外，還可配合體外研究，如觀察動

30、物和人肝等組織勻漿、細(xì)胞懸液、微粒體或灌流器官對藥物的代謝作用 體外研究代謝途徑和動力學(xué)特點比較方便，節(jié)省動物，可以獲得更多的信息，例如分析代謝模式、代謝酶對藥物作用的動力學(xué)參數(shù)、藥物及其代謝物與蛋白、DNA等靶分子的親和力等,64,關(guān)于改變酸根、晶型的藥物,對于改變酸根、晶型的藥物，應(yīng)根據(jù)藥物的特點、改變的具體情況和立題依據(jù)，考慮是否應(yīng)進行與改變前藥物比較的藥代動力學(xué)研究 考察其生物利用度的變化,65,關(guān)于手性藥物的藥代研究,對映異構(gòu)體具有幾乎相同的物理性質(zhì)（旋光性除外）和化學(xué)性質(zhì)（在手性環(huán)境中除外），通常需要特殊的手性技術(shù)對它們進行鑒定、表征、分離和測定，但生物系統(tǒng)常常很容易區(qū)分它們（手性

31、環(huán)境） 手性可能導(dǎo)致不同的藥代動力學(xué)性質(zhì)（吸收、分布、代謝、排泄），以及藥理學(xué)、毒理學(xué)效應(yīng)的量或質(zhì)的區(qū)別 消旋體及2個對映體可看成不同的3個化學(xué)實體,66,為評價單一對映體或?qū)τ丑w混合物的藥代動力學(xué)，研究者應(yīng)在藥物開發(fā)前期，建立適用于體內(nèi)樣品對映體選擇性分析的定量方法，估計對映體之間相互轉(zhuǎn)化的可能性以及各自的吸收、分布、代謝和排泄 如果外消旋體已經(jīng)上市，研究者希望開發(fā)單一對映體，則應(yīng)測定該對映體轉(zhuǎn)化為另一對映體的程度是否顯著，以及該對映體單獨用藥是否與其作為外消旋體組分時的藥代動力學(xué)性質(zhì)一致 為檢測對映異構(gòu)體在體內(nèi)的相互轉(zhuǎn)化和處置，應(yīng)獲得單一對映體在動物體內(nèi)的藥代動力學(xué)曲線，并與其后在臨床I期

32、試驗中獲得的藥代動力學(xué)曲線相比較,67,生物等效性研究,68,基本概念-1,生物等效性（BE）：是指藥學(xué)等效制劑或可替換藥物在相同試驗條件下，服用相同劑量，其活性成分吸收程度和速度的差異無統(tǒng)計學(xué)意義 通常意義的BE 研究是指用BA 研究方法，以藥代動力學(xué)參數(shù)為終點指標(biāo)，根據(jù)預(yù)先確定的等效標(biāo)準(zhǔn)和限度進行的比較研究 在藥代動力學(xué)方法確實不可行時, 也可以考慮以臨床綜合療效、藥效學(xué)指標(biāo)或體外試驗指標(biāo)等進行比較性研究，但需充分證實所采用的方法具有科學(xué)性和可行性,69,BA 和BE 均是評價制劑質(zhì)量的重要指標(biāo) BA 強調(diào)反映藥物活性成分到達體內(nèi)循環(huán)的相對量和速度，是新藥研究過程中選擇合適給藥途徑和確定用

33、藥方案(如給藥劑量和給藥間隔)的重要依據(jù)之一 BE 重點在于以預(yù)先確定的等效標(biāo)準(zhǔn)和限度進行的比較，是保證含同一藥物活性成分的不同制劑體內(nèi)行為一致性的依據(jù)，是判斷后研發(fā)產(chǎn)品是否可替換已上市藥品使用的依據(jù),70,BA 和BE 研究在藥品研發(fā)的不同階段有不同作用： 在新藥研究階段，為了確定新藥處方、工藝合理性，通常需要比較改變上述因素后制劑是否能達到預(yù)期的生物利用度；開發(fā)了新劑型，要對擬上市劑型進行生物利用度研究以確定劑型的合理性，通過與原劑型比較的BA 研究來確定新劑型的給藥劑量，也可通過BE 研究來證實新劑型與原劑型是否等效； 在臨床試驗過程中，可通過BE 研究來驗證同一藥物的不同時期產(chǎn)品的前后

34、一致性，如：早期和晚期的臨床試驗用藥品，臨床試驗用藥品（尤其是用于確定劑量的試驗藥）和擬上市藥品等。 在仿制生產(chǎn)已有國家標(biāo)準(zhǔn)藥品時，可通過BE 研究來證明仿制產(chǎn)品與原創(chuàng)藥是否具有生物等效性，是否可與原創(chuàng)藥替換使用。 藥品批準(zhǔn)上市后，如處方組成成分、比例以及工藝等出現(xiàn)一定程度的變更時，研究者需要根據(jù)產(chǎn)品變化的程度來確定是否進行BE 研究，以考察變更后和變更前產(chǎn)品是否具有生物等效性。以提高生物利用度為目的研發(fā)的新制劑，需要進行BA 研究，了解變更前后生物利用度的變化,71,基本概念-2,藥學(xué)等效性 (Pharmaceutical equivalence)：如果兩制劑含等量的相同活性成分，具有相同的

35、劑型，符合同樣的或可比較的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，則可以認(rèn)為他們是藥學(xué)等效的。藥學(xué)等效不一定意味著生物等效，因為輔料的不同或生產(chǎn)工藝差異等可能會導(dǎo)致藥物溶出或吸收行為的改變 治療等效性 (Therapeutic equivalence)：如果兩制劑含有相同活性成分，且臨床上顯示具有相同的安全性和有效性，可以認(rèn)為兩制劑具有治療等效性。如果兩制劑中所用輔料本身并不會導(dǎo)致有效性和安全性問題，生物等效性研究是證實兩制劑治療等效性最合適的辦法。如果藥物吸收速度與臨床療效無關(guān),吸收程度相同但吸收速度不同的藥物也可能達到治療等效。而含有相同的活性成分只是活性成分化學(xué)形式不同（如某一化合物的鹽、酯等）或劑型不同（如片劑和膠

36、囊劑）的藥物制劑也可能治療等效,72,生物等效性研究方案設(shè)計（動物）,實驗動物：通常為Beagle犬，6只（或適當(dāng)增加） 給藥次數(shù)：通常單次給藥？ 實驗設(shè)計：雙周期雙交叉試驗設(shè)計方案，獲得受試制劑在Beagle犬體內(nèi)的藥動學(xué)特征，與參比制劑比較進行相對生物利用度計算及生物等效性評價 給藥間隔：至少10個半衰期 如果是緩釋制劑，還要考察其藥動學(xué)特征是否符合緩釋制劑要求 參考指南（SFDA） 化學(xué)藥物非臨床藥代動力學(xué) 化學(xué)藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則,73,74,生物等效性研究方法,體內(nèi)和體外研究方法 體內(nèi)方法（按方法的優(yōu)先考慮程度從高到低） 藥代動力學(xué)研究方法 藥效動力學(xué)研

37、究方法 臨床比較試驗方法 體外研究方法 一般不提倡用體外的方法來確定生物等效性，因為體外并不能完全代替體內(nèi)行為，但在某些情況下，如能提供充分依據(jù)，也可以采用體外的方法來證實生物等效性,75,生物等效性研究需報告的參數(shù),藥物濃度-時間曲線（Concentration-Time curve,C-T）來反映藥物從制劑中釋放吸收到體循環(huán)中的動態(tài)過程。 藥動學(xué)參數(shù) AUC、Cmax、Tmax、t1/2、CL、Vd、 FAUCTAUCR100 統(tǒng)計比較上述參數(shù)，判斷兩制劑是否生物等效 對于多次給藥的 BA 和BE 研究，提供受試制劑和參比制劑的三次谷濃度數(shù)據(jù)（Cmin），達穩(wěn)態(tài)后的AUCss、Css-ma

38、x、Css-min 、T ss-max、t1/2 、F等參數(shù)。當(dāng)受試制劑與參比制劑劑量相等時，F(xiàn) 值按下式計算：FAUCss TAUCss R100（式中AUCss T 和AUCss R 分別為T （test) 和R (reference) 穩(wěn)態(tài)條件下的AUC）,76,等效判斷,普遍采用主要藥代參數(shù)經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后以多因素方差分析（ANOVA）進行顯著性檢驗，然后用雙單側(cè)t 檢驗和計算90置信區(qū)間的統(tǒng)計分析方法來評價和判斷藥物間的生物等效性 等效判斷標(biāo)準(zhǔn)， 經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后的受試制劑的AUC0t 在參比制劑的80-125范圍， 受試制劑的Cmax 在參比制劑的70-143范圍 。根據(jù)雙單側(cè)檢驗的統(tǒng)計量，同時求得（12 ）%置信區(qū)間，如在規(guī)定范圍內(nèi)，即可有12 的概率判斷兩藥生物等效 必要時，應(yīng)對Tmax 經(jīng)非參數(shù)法檢驗，如無差異，可以認(rèn)定受試制劑與參比制劑生物等效,77,由其他給藥途徑改為注射途徑的藥物,由口