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文檔簡(jiǎn)介

1、多重耐藥菌的預(yù)防和管理及微生物培養(yǎng)藥敏試驗(yàn)報(bào)告的解讀,1,一、藥敏結(jié)果的解讀 藥敏試驗(yàn)采用全自動(dòng)微生物分析儀,為MIC法,有固定的藥敏組合。 二、微生物培養(yǎng) 目前均為有氧培養(yǎng),可以做的有:普通細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、支原體培養(yǎng)。 培養(yǎng)的目的:使用體外試驗(yàn)的方法檢測(cè)可能導(dǎo)致的病原菌并給以藥敏結(jié)果,為臨床醫(yī)生針對(duì)某一特定的臨床感染提供依據(jù)。但培養(yǎng)并不是萬能的。,2,藥敏試驗(yàn)結(jié)果的解讀,藥敏試驗(yàn)的目的: 使用體外試驗(yàn)的方法檢測(cè)細(xì)菌的耐藥性,預(yù)測(cè)抗菌藥物的臨床治療效果,并為臨床醫(yī)生針對(duì)某一特定的臨床感染問題選用藥物提供依據(jù)-實(shí)施個(gè)體化治療。,3,解讀注意事項(xiàng),1、藥敏試驗(yàn)是參照美國的CLSI推薦的標(biāo)準(zhǔn)制定

2、的。 2、細(xì)菌全自動(dòng)分析儀的藥敏組合是固定的。 3、某些細(xì)菌對(duì)某類抗生素天然耐藥,則不需要做藥敏試驗(yàn)。 4、試驗(yàn)的藥物代表一類藥,而不是一種藥。,4,解讀注意事項(xiàng),5、對(duì)葡萄球菌一代比三代頭孢治療效果好。 6、有些藥物不適用于單獨(dú)使用,僅用于聯(lián)合用藥,如利福平。,5,解讀注意事項(xiàng),7、因?yàn)槭求w外藥敏試驗(yàn),有些藥體外試驗(yàn)敏感,可能臨床治療無效。舉例說明: 頭孢哌酮在用藥1-3h后膽汁中的濃度是血液濃度的100倍; 環(huán)丙沙星在尿液的濃度可達(dá)200mg是血液的50倍; 左氧氟沙星在腎組織的濃度是血液的2-5倍 4。 因此如果在上述高藥物濃度部位感染時(shí),按CLSI制定的標(biāo)準(zhǔn)判斷敏感性就不能獲得體外藥敏

3、和體內(nèi)療效一致的結(jié)果。 同一菌株可能出現(xiàn)亞種,導(dǎo)致連續(xù)藥敏結(jié)果不吻合。 。,6,解讀注意事項(xiàng),8、同一菌株可能出現(xiàn)亞種,導(dǎo)致連續(xù)藥敏結(jié)果不吻合。,7,細(xì)菌耐藥概念,多重耐藥(MDR):主要是指對(duì)臨床使用的三類或三類以上結(jié)構(gòu)不同(作用機(jī)制不同)的抗菌藥物同時(shí)呈現(xiàn)耐藥的細(xì)菌。 泛耐藥( PDR):是指細(xì)菌對(duì)自身敏感的幾乎所 有類抗菌藥物同時(shí)呈現(xiàn)耐藥。但不包括多黏菌素B、多黏菌素E、替加環(huán)素,8,超級(jí)細(xì)菌:并非科學(xué)概念,一般指PDR與部分MDR,沒有確切定義,以下細(xì)菌屬于此列: MRSA/VRSA; VRE; MDR-PA,PDR-AB; ESBL(+)+AmpC(+) 腸桿菌 產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌(

4、產(chǎn)KPC酶、包括產(chǎn)NDM-1細(xì)菌),9,MRSA:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 VRSA: 耐萬古霉素金黃色葡萄球菌 VRE: 耐萬古霉素腸球菌 ESBLs: 超廣譜-內(nèi)酰胺酶 KPC酶: 產(chǎn)碳青霉稀酶的一種KPC型 NDM-1:型新德里金屬-內(nèi)酰胺酶 下面就以上幾種情況分別解讀,10,MRSA,11,MRSA,12,VRE,13,銅綠假單胞菌,14,產(chǎn)ESBL大 腸埃希菌,產(chǎn)ESBL大 腸埃希菌,15,16,CR-AB,17,泛耐藥,18,泛耐藥的銅綠,19,泛耐藥,20,21,超級(jí)細(xì)菌?,22,超級(jí)細(xì)菌?,23,關(guān)于細(xì)菌耐藥我們應(yīng)該知道什么?,天然耐藥的抗菌藥物(肯定無效) 可以選擇的抗菌藥物

5、(可能有效) 細(xì)菌藥敏試驗(yàn)可以提供哪些信息? 如何解讀細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果?,24,泛耐藥銅綠假單胞菌/不動(dòng)桿菌,對(duì)抗假單胞青霉素(替卡西林、哌拉西林),抗假單胞氨基糖苷(吉他霉素、妥布霉素),抗假單胞三代頭孢(頭孢哌酮、頭孢他啶)和亞胺培南、環(huán)丙沙星、氨曲南等均耐藥 可能有效的藥物 多粘菌素B(E) 米諾環(huán)素,多西環(huán)素 替加環(huán)素(銅綠假單胞菌耐藥) 大劑量舒巴坦 可根據(jù)被檢測(cè)菌的MIC,選擇聯(lián)合用藥,25,藥敏試驗(yàn)可以提供哪些信息,藥物種類的選擇(天然耐藥的抗菌藥物不做藥敏試驗(yàn)) 檢測(cè)耐藥機(jī)制,根據(jù)耐藥機(jī)制提示對(duì)其他抗菌藥物的敏感性 檢測(cè)標(biāo)志性藥物,提示對(duì)其他抗菌藥物的敏感性 檢測(cè)試驗(yàn)抗菌藥物的

6、敏感性,26,藥敏試驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告,選擇性藥敏結(jié)果選擇性報(bào)告 -A組:首選,常規(guī)試驗(yàn)和報(bào)告 -B組:首選抗生素,在下列情況下選擇使用 細(xì)菌對(duì)A組抗生素耐藥 病人對(duì)A組抗生素過敏 嚴(yán)重感染或多部位、多種細(xì)菌混合感染 控制傳染病流行 -C組:備選抗生素,在下列情況下使用 對(duì)一個(gè)或多個(gè)首選藥耐藥的地區(qū)流行株感染 對(duì)不常見菌感染的治療 控制傳染病的流行 -U組:包含某些僅用于或首選治療泌尿道感染的抗菌藥物,27,與臨床溝通中常見問題,1、我們想用的藥物在藥敏試驗(yàn)中 沒有做? 可能是天然耐藥 可能是藥物的敏感性被其他藥物所預(yù)報(bào),28,細(xì)菌的天然耐藥,有些菌屬或菌種對(duì)某些抗菌藥物天然耐藥或固有耐藥,該耐藥性

7、具有種屬特異性。 腸球菌:對(duì)除青霉素、氨芐西林以外的所有青霉素類、頭孢菌素類抗生素天然耐藥。 嗜麥芽窄食單胞菌:對(duì)亞胺培南(泰能)、美羅培南天然耐藥。,29,細(xì)菌的天然耐藥,肺炎鏈球菌:對(duì)氨基糖苷類抗生素天然耐藥 產(chǎn)氣腸桿菌和陰溝腸桿菌:對(duì)頭孢西丁天然耐藥。 克柔念珠菌:對(duì)氟康唑天然耐藥。 肺炎克雷伯菌:對(duì)氨芐西林天然耐藥。 銅綠假單胞菌:對(duì)氨芐西林、阿莫西林、阿莫西林棒酸、復(fù)方新諾明、頭孢1代、頭孢2代天然耐藥。,30,細(xì)菌的天然耐藥,更為特殊的是,銅綠假單胞菌對(duì)三代的頭孢噻肟和頭孢曲松即使藥敏試驗(yàn)敏感,在實(shí)際臨床治療中也需要超大劑量才會(huì)取得療效,但人體對(duì)超大劑量的三代頭孢不具有長時(shí)間的耐藥

8、性。銅綠假單胞菌有對(duì)很多藥物的誘導(dǎo)耐藥性,在初期可能沒有表現(xiàn)出來,一旦接觸某種抗生素,沉睡的基因被激活,耐藥性表現(xiàn)出來,這種特性在內(nèi)酰胺類抗生素中尤為明顯,可能在體外試驗(yàn)敏感,在實(shí)際治療中卻無效,所以采用頭孢噻肟和頭孢曲松進(jìn)行治療時(shí)就要冒險(xiǎn),這在臨床上是首先要規(guī)避的。,31,與臨床溝通中常見問題,2.為什么有的菌報(bào)告很多種藥物, 有的僅報(bào)告幾種藥物? 報(bào)告的藥物種類根據(jù)細(xì)菌種類的不同而有所不同,如銅綠假單胞菌報(bào)告的藥物較多,而嗜麥芽窄食單胞菌報(bào)告的藥敏較少,32,CLSI藥敏建議,33,與臨床溝通中常見問題,3、是否能將所用的藥都做藥敏試驗(yàn)? 沒有必要:通過耐藥機(jī)制和標(biāo)志性藥物可以預(yù)測(cè)其他抗菌

9、藥物的敏感性 沒有可能:不是所用藥物都可以做藥敏試驗(yàn)(需要藥物在體外穩(wěn)定,需要有操作標(biāo)準(zhǔn)和解釋標(biāo)準(zhǔn)),34,與臨床溝通中常見問題,4、在藥敏試驗(yàn)報(bào)告中MIC越小的抗菌藥物效果越好嗎?如何根據(jù)MIC聯(lián)合用藥? 感染菌對(duì)同一種藥物的MIC越小,效果越好 不同種抗菌藥物之間MIC無可比性 目前很多儀器報(bào)告的是檢測(cè)折點(diǎn),而不是真正的MIC,35,與臨床溝通中常見問題,5、培養(yǎng)陽性的細(xì)菌都需要用抗菌藥物治療嗎? 不是的 培養(yǎng)陽性感染,可能為污染(血培養(yǎng)),可能為定植(痰培養(yǎng)) 任何結(jié)果必須結(jié)合臨床情況進(jìn)行評(píng)價(jià)(很重要) 感染部位的清創(chuàng)、引流、換藥比使用抗菌藥物更加重要 改善患者全身情況:器官功能支持,糾

10、正酸堿平衡,電解質(zhì)紊亂,低蛋白血癥,高血糖等,36,與臨床溝通中常見問題,6、選擇藥敏報(bào)告敏感的藥物,為什么臨床治療無效? 體外藥敏試驗(yàn)只能預(yù)測(cè)體內(nèi)治療效果,并不等同; 一般來說,耐藥治療無效; 敏感治療有效。 可能不是真正的致病菌(污染或定植菌) 細(xì)菌本身因素(如誘導(dǎo)耐藥,生物被膜) 感染部位與藥代動(dòng)力學(xué)因素 細(xì)菌的MIC,給藥劑量和用藥方式 藥敏試驗(yàn)藥物中有些藥物單獨(dú)使用無效,但可以與其他藥物聯(lián)合用藥 藥物劑型及生物利用度(純品、商品),37,與臨床溝通中常見問題,7、涂片鏡檢結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果不吻合? 涂片鏡檢是報(bào)告所有檢見的細(xì)菌,而培養(yǎng)的目的是檢出致病菌。 一些苛氧菌需在特殊的環(huán)境或培養(yǎng)基

11、上才能生長。,38,與臨床溝通中常見問題,8、取的明顯就是膿液標(biāo)本,為何鑒定報(bào)告為無菌生長? 我們做的是有氧培養(yǎng),膿液可能為厭氧菌感染。 可能細(xì)菌被大量的中性粒細(xì)胞吞噬。,39,與臨床溝通中常見問題,9、鑒定結(jié)果明明寫著四聯(lián)球菌、革蘭氏陽性桿菌,為何沒有藥敏結(jié)果? 四聯(lián)球菌為微球菌,一般不引起人體致病,為非致病菌,故考慮污染可能。 藥敏結(jié)果參照CLSI標(biāo)準(zhǔn),目前革蘭氏陽性菌沒有參照標(biāo)準(zhǔn),故暫不能做藥敏試驗(yàn),若需治療可參照陽性球菌用藥。,40,與臨床溝通中常見問題,10、一般培養(yǎng)不是三天出結(jié)果嗎,今天第四天了怎么還沒出來? 一般培養(yǎng)經(jīng)48小時(shí)后,即第三天出報(bào)告,若需分離致病菌的則第四天出報(bào)告。,

12、41,42,與臨床溝通中常見問題,11、今天的培養(yǎng)結(jié)果怎么與前天的不一樣? 取材是否規(guī)范。 痰標(biāo)本,有時(shí)選優(yōu)勢(shì)菌做,就可能導(dǎo)致兩次不一樣。,43,與臨床溝通中常見問題,12.明顯稀便,培養(yǎng)結(jié)果為何正常? 大便普通培養(yǎng),通常只能鑒定志賀菌、沙門菌感染,致病性大腸桿菌我們沒有鑒定血清。 懷疑霍亂時(shí),需開霍亂弧菌培養(yǎng)。 可能病毒感染(輪狀病毒)。,44,小 結(jié),耐藥菌,尤其是多重耐藥菌的出現(xiàn),使臨床抗感染治療面臨著困難的用藥決策 細(xì)菌藥敏試驗(yàn)在選擇抗菌藥物種類上為臨床提供參考(經(jīng)驗(yàn)治療);可以指導(dǎo)臨床個(gè)體化治療。 臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)有自身的局限性 各科室間交流非常重要!,45,微生物培養(yǎng),微生物檢驗(yàn)標(biāo)本

13、的正確采集、運(yùn)送及處理,與細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定結(jié)果有十分密切的關(guān)系,醫(yī)生、護(hù)士、檢驗(yàn)人員均應(yīng)重視微生物標(biāo)本的正確采集的有關(guān)問題,并有責(zé)任向患者及家屬進(jìn)行正確采集標(biāo)本的宣傳和指導(dǎo)。,46,(一)微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集、運(yùn)送、驗(yàn)收和處理注意事項(xiàng),1、標(biāo)本采集 (1)申請(qǐng)單必須標(biāo)記清楚姓名、性別、年齡、病原號(hào)、標(biāo)本來源(具體寫明)、檢查項(xiàng)目(目的要明確)等,以便試驗(yàn)室能夠合理選擇培養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)基。 (2)盡量在抗生素應(yīng)用前采集標(biāo)本、以提高陽性檢出率和避免漏檢。 (3)標(biāo)本采集應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。 (4)采集標(biāo)本的容器必須經(jīng)滅菌處理,不可用消毒劑。,47,2、標(biāo)本運(yùn)送 (1)標(biāo)本采集后應(yīng)盡快運(yùn)送到細(xì)菌室。 (

14、2)標(biāo)本采集后在室溫下超過2小時(shí)未送到細(xì)菌室的,可視為不合格標(biāo)本。 3、標(biāo)本驗(yàn)收 (1)實(shí)驗(yàn)室只接受和處理合格標(biāo)本。 (2)實(shí)驗(yàn)室對(duì)不合格標(biāo)本退回必須說明原因、并及時(shí)與臨床聯(lián)系。,48,4、注意事項(xiàng) (1)微生物檢驗(yàn)樣本必須要求采集轉(zhuǎn)運(yùn),否則將影響檢查結(jié)果,并給評(píng)價(jià)其意義帶來麻煩甚至誤導(dǎo)。 (2)微生物樣本極易被污染,污染的樣本雜菌大量繁殖抑制病原菌生長,條件致病菌也是致病菌,如污染條件致病菌將誤導(dǎo)臨床,造成對(duì)患者的損害以及經(jīng)濟(jì)和時(shí)間的浪費(fèi)。 (3)某些標(biāo)本離體極易死亡,應(yīng)在床邊采取和接種或立即保溫送至實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。室溫放置或延遲送檢,可使檢出的陽性率降低;不能使用冷藏的樣本檢驗(yàn)。 (4)厭氧菌

15、樣本采取必須隔絕空氣,混入空氣的樣本影響檢驗(yàn)結(jié)果,不能使用。,49,(二)微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集和處理,1、血液及骨髓標(biāo)本 最常用的方法為血液增菌培養(yǎng)法。成人每瓶需8-10ML,兒童每瓶需1-3ML。另外,腦脊液和胸腹水也可用兒童血液培養(yǎng)瓶增菌,采集量同血液。 (1)為了提高陽性率,應(yīng)在抗生素治療前,病人寒戰(zhàn)或高熱時(shí)嚴(yán)格無菌靜脈采血后注入血培養(yǎng)瓶。 (2)于已用抗生素不能停用時(shí),可于48小時(shí)內(nèi)分別于下次用抗生素之前,采取3份血液標(biāo)本(要求雙管雙側(cè))立即送檢,如不能立即送檢,應(yīng)放置室溫保存,但不能超過8-9小時(shí)。 (3)必要時(shí)可取骨髓1-2ML,無菌注入血培養(yǎng)瓶中送檢。 注意:應(yīng)嚴(yán)格無菌操作避免污染

16、。一般病人在發(fā)病初期1-2天或發(fā)熱高峰時(shí)采集血液保本。,50,2、痰及下呼吸道標(biāo)本采集和處理,注意事項(xiàng):痰經(jīng)過口腔,所以患者應(yīng)用清水漱口數(shù)次,盡量排除口腔內(nèi)大量雜菌。 (1)自然咳痰法:以晨痰為佳,用冷開水漱口后用力深咳出肺部的痰,吐至無菌容器中送檢,痰量不得少于1ML。 (2)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上即可送檢。 (3)支氣管、支氣管穿刺、支氣管肺泡灌洗等采集法,均由醫(yī)生操作。其中氣管導(dǎo)管法:氣管插管吸取下呼吸道痰液。 (4)呼吸道標(biāo)本采集方法:鼻咽拭子法,清水漱口后,用壓舌板壓舌根,用棉拭子在病人咽后部涂抹數(shù)次,

17、放入無菌管中立即送檢。,51,3、尿液標(biāo)本采集和處理,通常留取晨尿,尿液采集后要及時(shí)送檢,并保證2小時(shí)內(nèi)接種;不能及時(shí)送檢和接種時(shí),尿液應(yīng)置2-6冰箱保存并于8小時(shí)內(nèi)接種。 (1)中段尿采集法:成年男性和女性分別用肥皂水或1:1000高錳酸鉀水溶液清洗尿道口和外陰部,再用冷涼白開水沖洗,排尿時(shí)棄去前段尿,收集中段尿10-20ML置于帶蓋的無菌容器內(nèi)立即送檢。 (2)導(dǎo)尿法:用導(dǎo)尿管留取10-20ML尿液置無菌容器中;長期留置導(dǎo)尿管者應(yīng)更換新導(dǎo)尿管留尿,留置導(dǎo)尿時(shí),用無菌消毒法消毒導(dǎo)尿管外部及導(dǎo)尿管口,用無菌注射器抽取尿液送檢(不可采集尿液收集袋中的尿液送檢)。,52,3、尿液標(biāo)本采集和處理,通

18、常留取晨尿,尿液采集后要及時(shí)送檢,并保證2小時(shí)內(nèi)接種;不能及時(shí)送檢和接種時(shí),尿液應(yīng)置2-6冰箱保存并于8小時(shí)內(nèi)接種。 (1)中段尿采集法:成年男性和女性分別用肥皂水或1:1000高錳酸鉀水溶液清洗尿道口和外陰部,再用冷涼白開水沖洗,排尿時(shí)棄去前段尿,收集中段尿10-20ML置于帶蓋的無菌容器內(nèi)立即送檢。 (2)導(dǎo)尿法:用導(dǎo)尿管留取10-20ML尿液置無菌容器中;長期留置導(dǎo)尿管者應(yīng)更換新導(dǎo)尿管留尿,留置導(dǎo)尿時(shí),用無菌消毒法消毒導(dǎo)尿管外部及導(dǎo)尿管口,用無菌注射器抽取尿液送檢(不可采集尿液收集袋中的尿液送檢)。,53,2、痰及下呼吸道標(biāo)本采集和處理,(1)自然咳痰法:以晨痰為佳,用冷開水漱口后用力深咳出肺部的痰,吐至無菌容器中送檢,痰量不得少于1ML。 (2)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上即可送檢。 (3)支氣管、支氣管穿刺、支氣管肺泡灌洗等采集法,均由醫(yī)生操作

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