腸桿菌科11章弧菌屬.ppt

1、第10章 腸桿菌科,概述,24個菌屬與醫(yī)學(xué)有關(guān), G+Cmol39-59 正常菌群 變形桿菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、沙雷菌 屬、多源菌屬、枸櫞酸菌屬、普羅威登菌屬、 摩根菌屬 致病菌 致病性大腸埃希菌、志賀菌屬、沙門菌屬、 耶爾森菌屬,第一節(jié) 埃希菌屬（ Escherichia）,一、生物學(xué)性狀 （一）形態(tài)與染色 G-短桿菌，周鞭毛、有菌毛,（二）培養(yǎng)特性,1.兼型厭氧，營養(yǎng)要求不高 2.普通瓊脂平板 圓形凸起、邊緣整齊、灰白色、光滑型菌落 3.SS平板 菌落呈粉紅色 4.液體培養(yǎng)基 混濁生長,大腸埃希菌于普通營養(yǎng)平板培養(yǎng)生長的菌落,血平板 MAC平板,大腸埃希菌菌落,大腸埃希菌IMViC（

2、+-） 右側(cè)對照,（三）生化反應(yīng),1.發(fā)酵多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣 2.IMViC試驗結(jié)果 +- 3.KIA：斜面、底層均產(chǎn)酸、 產(chǎn)氣、硫化氫-、 4.動力+,KIA：克氏雙塘鐵-高層斜面 乳糖、葡萄糖、硫代硫酸鈉、硫酸亞鐵、酚紅 細(xì)菌在雙糖鐵培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象 1.利用葡萄糖 底層變黃 2.利用乳糖 斜面和底層同時變黃 3.產(chǎn)生硫化氫 變黑 4.產(chǎn)生氣體 培養(yǎng)基斷裂或有氣泡 變黃用A表示 ，變紅用K表示,（四）抗原構(gòu)造,三種： O、H、K抗原 O：特異性多糖、170種、IgM H：鞭毛上、56種、IgG （五）抵抗力 較強，易產(chǎn)生耐藥性,二、所致疾病,腸道外感染 泌尿道感染最多見 化膿性感染 腸道

3、內(nèi)感染腹瀉,引起腹瀉的大腸埃希菌,腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌 enterotoxigenic E. coli ETEC 腸侵襲型大腸埃希菌 enteroinvasive E. coli EIEC 腸致病型大腸埃希菌 enteropathogenic EPEC E. coli 腸出血型大腸埃希菌 enterohemorrhagic EHEC E. coli 腸集聚型大腸埃希菌 enteroaggregative EAggEC E. coli,腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌（ETEC）,致病物質(zhì) 腸毒素 菌毛粘附素 內(nèi)毒素 K抗原 所致疾病 5歲以下嬰幼兒腹瀉 旅游者腹瀉,腸致病型大腸埃希菌（EPEC ）,致病物質(zhì)

4、 不產(chǎn)生腸毒素及其他外毒素 無侵襲力 所致疾病 嬰幼兒腹瀉,（2）腸致病型大腸埃希菌(EPEC) 致病物質(zhì) 粘附因子：質(zhì)粒介導(dǎo) 粘附類型 局限性粘附 病菌呈塊狀粘附 彌散型粘附 病菌單個分散附 機制 粘附和破壞腸粘膜微絨毛 上皮細(xì)胞排列紊亂，功能受損，導(dǎo)致腹瀉 所致疾病 嬰幼兒腹瀉,腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）,致病物質(zhì) 不產(chǎn)腸毒素，侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞 所致疾病 主要侵犯較大兒童和成人 腹瀉呈膿血便，有里急后重表現(xiàn) EIEC無動力、生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)類似志賀菌,（3）腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC) 較少見 致病物質(zhì) 外膜蛋白 質(zhì)粒編碼 機制 侵襲結(jié)腸粘膜上皮并繁殖 細(xì)菌死亡后釋放內(nèi)毒素，引

5、起炎癥 所致疾病 類似菌痢,腸出血型大腸埃希菌（EHEC）,亦稱為vero毒素大腸埃希菌 致病物質(zhì) 菌毛：粘附作用 毒素：vero毒素 所致疾病 出血性結(jié)腸炎 溶血性尿毒綜合征（HUS）,Vero毒素(志賀樣毒素)(溶原性噬菌體) 引起上皮細(xì)胞微絨毛破壞。 Vero毒素: 與志賀毒素基本相同; Vero毒素:與志賀毒素60%同源性。 1A-5B:B亞單位-特異糖脂受體結(jié)合 A亞單位裂解60S核糖體的28SrRNA,阻止與 tRNA結(jié)合,終止蛋白合成。 Vero毒素：破壞腎小球內(nèi)皮細(xì)胞,Intimate Adherence of EHEC to Epithelial Cells,The “l(fā)if

6、e cycle” of E. coli O157:H7,5-10% prevalence in animals 40% prevalence in farms,腸集聚型大腸埃希菌 EAggEC,致病物質(zhì) 毒素 腸集聚耐熱毒素（EAST） 聚集黏附菌毛 所致疾病 嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水，偶有血便,四、微生物檢驗,（一）腸道外感染標(biāo)本 1.檢驗程序 2.標(biāo)本采集 血液、痰、尿液、腦脊液、膿等 3.直接涂片鏡檢 4.分離培養(yǎng) 糞便、膿汁：選擇培養(yǎng)基 無菌部位：增菌、血平板 尿路感染：計數(shù)細(xì)菌數(shù),鑒定 生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定 （1）初步鑒定 KIA、MIU、IMViC、觸酶、氧化酶 、 硝酸鹽還原試驗 （

7、2）最后鑒定 腸桿菌科鑒定試劑盒 （3）血清學(xué)試驗 鑒定腸內(nèi)感染大腸埃希 菌ETEC、EPEC、EIEC、EHEC,三、微生物學(xué)檢查,（一）臨床標(biāo)本的檢查 腸道內(nèi)感染 涂片染色檢查 分離培養(yǎng) 鑒定 腸道外感染 接種于選擇培養(yǎng)基 大腸菌群：指在3724h內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的 腸道桿菌，包括埃希菌屬、枸櫞酸菌屬、克雷伯 菌屬及腸桿菌屬。,在環(huán)境和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便污染的檢測指標(biāo), 3個大腸菌群/1L飲水 100個細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水,（二）衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查,大腸菌群指數(shù),每1000ml水中大腸菌群數(shù),我國的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：,細(xì)菌總數(shù),每1ml或1g樣品中細(xì)菌總數(shù),第二節(jié) 志賀菌屬（shigella

8、）,一、生物學(xué)性狀 （一）形態(tài)與染色 G-小桿菌，由菌毛，無芽胞、鞭毛、莢膜,（二）培養(yǎng)特性,1、營養(yǎng)要求不高，兼性厭氧 2、普通瓊脂平板：中等大小、半透明的光 滑菌落（宋內(nèi)：扁平、粗糙型菌落） 3、選擇培養(yǎng)基 不發(fā)酵乳糖,（三）生化反應(yīng),分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不發(fā)酵乳糖； 無動力 （四）抗原構(gòu)造 只有O、K 抗原,根據(jù)O抗原分類,（五）抵抗力 較弱，對酸敏感，易產(chǎn)生耐藥性 （六）變異性 1、S R變異 2、耐藥性變異,二、致病性與免疫性,（一）致病物質(zhì) 1、侵襲力 菌毛粘附于回腸末端和結(jié)腸 粘膜上皮細(xì)胞 2、內(nèi)毒素 腸粘膜通透性 毒素吸收發(fā)熱、神志障礙、休克 破壞腸粘膜炎癥、潰瘍、膿血粘液

9、便 腸壁植物神經(jīng)腸蠕動失調(diào)、痙攣腹痛、里急后重 內(nèi)毒素血癥,3、外毒素 志賀毒素（ST）質(zhì)粒編碼 有3種毒性: 細(xì)胞毒性細(xì)胞壞死 神經(jīng)毒性損傷神經(jīng)系統(tǒng) 腸毒素毒性水樣腹瀉 蛋白質(zhì)合成中斷： 上皮細(xì)胞損傷、 腎小球內(nèi)皮損傷溶血性尿毒綜合癥 大質(zhì)粒：粘附、侵襲、胞內(nèi)繁殖、細(xì)胞間 擴散,（二）所致疾病,細(xì)菌性痢疾致病機理： 1、急性菌痢 細(xì)菌粘附腸粘膜 LPS、細(xì)胞因子 2、中毒性痢疾 釋放大量LPS 3、慢性痢疾 4、帶菌者,（三）免疫性 以粘膜免疫為主，易反復(fù)感染,三、微生物學(xué)檢查,及時送檢/暫用30%甘油緩沖鹽水保存,SS平板（無色透明小菌落）,血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集）,最后診斷,分離培養(yǎng),新鮮

10、膿血便/肛拭,雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng)）,快速診斷,熒光菌球試驗,協(xié)同凝集試驗,四、防治原則,1、控制傳染源，切斷傳播途徑 2、 Sd活疫苗：鏈霉素依賴株，是一種變 異株，環(huán)境中存在鏈霉素時能生長繁殖。 3、治療：易引起耐藥性，聯(lián)合用藥,第三節(jié) 沙門菌屬（Salmonella）,一大群人與動物腸道中的寄生菌，菌群菌型甚多，僅少數(shù)對人致病，其中許多為人畜共患病。,傷寒表現(xiàn),持續(xù)高熱 傷寒病容 玫瑰疹 肝脾腫大 相對緩脈,傷寒瑪麗,一、生物學(xué)性狀,（一）形態(tài)與染色 G-細(xì)長、直桿菌， 周身鞭毛、菌毛,（二）生化反應(yīng)與培養(yǎng)特性 培養(yǎng)特性 1.營養(yǎng)要求不高，兼性厭氧 2.普通瓊脂上 中等大小、無色半透明的

11、 S型菌落 3.選擇培養(yǎng)基上 小至中等，透明或半透 明菌落，不發(fā)酵乳糖 4.SS瓊脂上 中心黑色的菌落,生化反應(yīng) 1.不發(fā)酵乳糖和蔗糖 2.發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣 （傷寒沙門菌外） 3.IMViC-+-+ 4.產(chǎn)硫化氫，不分解尿素,傷寒沙門菌IMViC-+-+,（三）抗原構(gòu)造 有O、H兩種抗原，少數(shù)有Vi抗原 H抗原：分第1相和第2相 第1相：特異性高，又稱特異相，刺激機體 產(chǎn)生IgG，以小寫的英文字母表示 第2相：沙門菌所共有，稱非特異相，以阿 拉伯?dāng)?shù)字表示 雙相菌：同時具備H抗原兩相的細(xì)菌 單相菌：僅有一相的細(xì)菌,二、致病性與免疫性,（一）致病物質(zhì) 1.侵襲力 M（microfold）細(xì)胞:微

12、皺褶細(xì)胞，位于 回腸粘膜 細(xì)菌粘附M細(xì)胞 粘膜固有層 巨噬細(xì)胞內(nèi) 2.內(nèi)毒素：體溫升高、白細(xì)胞數(shù)、中毒性休克。 3.腸毒素：如鼠傷寒沙門菌,（二）所致疾病及致病機理 1.腸熱癥 傷寒、副傷寒 傷寒：傷寒沙門菌 副傷寒：甲型副傷寒沙門菌、肖沙門菌、希沙門菌 （1）初期： 淋巴結(jié)-血流-骨髓、肝、脾、膽、腎吞噬細(xì)胞,膽囊-腸道-糞排菌 皮膚-血栓出血-玫瑰疹 腎-尿 肝脾-腫大 骨髓,傷寒沙門和甲型副傷寒桿菌、肖氏沙門菌、希氏沙門菌,小腸上部粘膜,腸系膜淋巴結(jié),固有層淋巴結(jié),進入血液,再次進入血液,第一次菌血癥,第二次菌血癥,傷寒和副傷寒的致病機理,2.胃腸炎 （食物中毒） 3.敗血癥 4.無癥狀

13、帶菌者 重要傳染源 （三）免疫性 細(xì)胞免疫，免疫力牢固,三、微生物學(xué)檢查,標(biāo)本,SS平板,生化反應(yīng),血清學(xué)鑒定,血清學(xué)診斷 肥達反應(yīng) 原理：用已知傷寒沙門菌O、H抗原，以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希氏沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清作定量凝集試驗，測定受檢血清中有無相應(yīng)抗體及其效價的試驗。 用途：輔助診斷傷寒，副傷寒,結(jié)果判斷,一般是O凝集價1:80，H凝集價1:160 O IgM, 出現(xiàn)早，維持時間短，特異性差 H IgG, 出現(xiàn)遲，維持時間長，特異性強 O高 H高 腸熱癥可能性大 O低 H低 排除 O高 H低 早期或有交叉反應(yīng)的其它沙門菌感染 O低 H高 預(yù)防接種或曾患過

14、傷寒 動態(tài)觀察：恢復(fù)期效價增加4倍,第11章弧菌屬第一節(jié) 霍亂弧菌（V.cholerae）,一、生物學(xué)性狀 （一）形態(tài)染色 G-弧形或逗點形菌 單鞭毛、無芽胞、莢膜 魚群樣排列、運動活潑,（二）培養(yǎng)特性與生化反應(yīng) 1、兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高 2、耐堿不耐酸 3、堿性蛋白胨水和堿性瓊脂平板生長良好 4、堿性瓊脂平板 圓形、較大、扁平、無 色透明或半透明的露滴樣菌落 5、TCBS 黃色菌落 6、亞碲酸鉀 灰褐色菌落,（三）抗原結(jié)構(gòu)與分型 O抗原 O-1群霍亂弧菌： 非 O-1群霍亂弧菌 O139血清群 不典型O-1群霍亂弧菌 O-1群 3個血清型：稻葉型、小川型、彥島型（3個抗原因子A、B、C）

15、兩個生物型：古典生物型 ElTor生物型 （四）抵抗力 不耐酸,霍亂弧菌兩個生物型的鑒別,性 狀 古典型 ElTor生物型 溶血(羊RBC） d 血凝（雞RBC） + V-P試驗 + 多粘菌素B敏感試驗 + 噬菌體組裂解試驗 + 噬菌體組裂解試驗 +,二、致病性與免疫性,（一）致病物質(zhì) 1、霍亂腸毒素 （cholera enterotoxin CE） B亞單位結(jié)合GM1 A亞單位活化cAMP 米泔水樣便,2、侵襲力 鞭毛、菌毛、溶血-溶細(xì)胞蛋白 血凝素/蛋白酶 （二）所致疾病 霍亂 甲類傳染病 典型表現(xiàn)分為4個期 前驅(qū)期 吐瀉期 脫水虛脫期 恢復(fù)期 （三）免疫性 免疫力牢固，體液免疫為主,三、

16、微生物檢查,1.標(biāo)本采集 2.直接鏡檢 懸滴法-觀察動力 革蘭染色-觀察形態(tài) 3.分離培養(yǎng) 堿性蛋白胨水或平板 TCBS,四、防治原則,加強衛(wèi)生管理 接種疫苗 治療：及時補充液體和電解質(zhì) 應(yīng)用抗生素,第五節(jié) 副溶血弧菌,一、生物學(xué)性狀 （一）形態(tài)染色 G-直或微彎的桿菌，無芽胞、莢膜，單鞭毛 （二）培養(yǎng)特性 1、嗜鹽性，營養(yǎng)要求不高 2、無鹽培養(yǎng)基不生長 3、液體培養(yǎng)基 混濁生長，形成菌膜,（三）生化反應(yīng) 1、耐鹽試驗 不含NaCl和100g/LNaCl不生長 30g/LNaCl和70g/LNaCl生長 2、神奈川現(xiàn)象（KP） 副溶血弧菌在一種特殊培養(yǎng)基上能使人或兔紅 細(xì)胞溶血，而對馬紅細(xì)胞不

17、溶血的現(xiàn)象。 Wagatsuma agar培養(yǎng)基 3、氧化酶陽性、蔗糖陰性、脲酶陰性,二、致病性,1、菌毛 2、KP陽性菌株 耐熱直接溶血素 溶血作用 （TDH） 細(xì)胞致死活性 腸毒素作用 心臟毒性（致死活性） 耐熱相關(guān)溶血素（TRH）,三、診斷與防治,1、微生物檢查 2、防治：抗生素,第六節(jié) 幽門螺桿菌,一、生物學(xué)性狀 1、形態(tài)染色 G-彎曲桿菌，單端或雙端26根鞭毛，無芽胞,2、培養(yǎng)特性 （1）為需氧菌，營養(yǎng)要求高 （2）選擇培養(yǎng)基 改良的Skirrow瓊脂 3、生化反應(yīng) 不活潑，氧化酶和過氧化氫酶陽性 尿素酶試驗強陽性（鑒定依據(jù)） 4、抵抗力 較弱,二、致病性,1、致病物質(zhì) 侵襲因子：脲

18、素酶、鞭毛、菌毛 毒素：外毒素 空泡毒素A(VacA) 細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA) 胞外酶和蛋白：觸酶、磷脂酶、趨化蛋白,2、所致疾病 慢性胃炎、消化性潰瘍，誘發(fā)胃癌,三、微生物學(xué)檢查,1、標(biāo)本采集 胃鏡采活檢標(biāo)本 2、檢驗程序 3、檢驗方法 （1）直接鏡檢 （2）快速診斷 脲素酶試驗 13CO2呼氣試驗 血清學(xué)檢查 PCR檢測,第七節(jié) 彎曲菌屬,一、生物學(xué)性狀 1、形態(tài)染色 G-桿菌，弧形、螺旋形 海鷗形 一端或兩端單鞭毛 無芽胞、莢膜,2、培養(yǎng)特性 （1）為需氧菌，營養(yǎng)要求高 （2）最適生長溫度隨菌種而異 3、生化特性 不活潑，氧化酶陽性，不發(fā)酵任何糖 4、抗原構(gòu)造 O抗原、H抗原 5、抵抗力 較弱,二、致病性與免疫性,1、致病物質(zhì) 腸毒素、細(xì)胞毒素、內(nèi)毒素、粘附力 2、所致疾病 空腸彎曲菌：腸道感染，格林巴利綜合征 胎兒彎曲菌：腸道外感染,第八節(jié) 其他,一、克雷伯