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實驗 八-1 細胞超微結(jié)構(gòu)觀察與透射電子顯微鏡的使用,掌握透射電子顯微鏡的成像基本原理及其應(yīng)用,實驗?zāi)康呐c要求,一、透射電子顯微鏡的成像基本原理 在真空條件下,電子束經(jīng)高壓加速后,穿透樣品時形成散射電子和透射電子,它們在電磁透鏡的作用下在熒光屏上成像。,電鏡與光鏡的比較, 超薄切片技術(shù) 用于電鏡觀察的樣本制備 負染色技術(shù)(Negative staining) 染色背景,襯托出樣品的精細結(jié)構(gòu) 冰凍蝕刻技術(shù)(Freeze etching) 冰凍斷裂與蝕刻復(fù)型:主要用來觀察膜斷裂面的蛋白質(zhì)顆粒 和膜表面結(jié)構(gòu)。 電鏡三維重構(gòu)技術(shù) 電子顯微術(shù)、電子衍射與計算機圖象處理相結(jié)合而形成的 具有重要應(yīng)用前景的一門新技術(shù)。 電鏡三維重構(gòu)技術(shù)與X-射線晶體衍射技術(shù)及核磁共振 分析技術(shù)相結(jié)合,是當(dāng)前結(jié)構(gòu)生物學(xué)(Structural Biology) (主要研究生物大分子空間結(jié)構(gòu)及其相互關(guān)系)的主要實驗手段。 ,主要電鏡制樣技術(shù),超薄切片技術(shù)主要包括取材、固定、包埋、切片、染色等步驟。,二、作業(yè):試比較電子顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡的異同。,實驗八 -2 細胞超微結(jié)構(gòu)觀察與掃描電子顯微鏡的使用,利用二次電子信號成像來觀察樣品的表面形態(tài)。電子“探針”掃描,激發(fā)樣品表面放出二次電子,探測器收集二次電子成像。,一、實驗原理,瘧疾破壞的
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