血脂檢測方法及臨床意義課件

1、血脂及血漿脂蛋白測定,血脂是血漿中的中性脂肪（TG和TC）和類脂（磷脂、糖脂、固醇、類固醇）的總稱。 TG參與人體內(nèi)能量代謝，而膽固醇主要用于合成細(xì)胞膜性物質(zhì)、類固醇激素和膽汁酸,1,PPT學(xué)習(xí)交流,血漿脂蛋白的分類,1、乳糜微粒 2、極低密度脂蛋白 3、低密度脂蛋白 4、高密度脂蛋白 在病理狀態(tài)下，在VLDL和LDL之間出現(xiàn)中間密度脂蛋白（IDL）。,顆粒依次變小,2,PPT學(xué)習(xí)交流,血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu),3,PPT學(xué)習(xí)交流,載脂蛋白,脂蛋白的蛋白部分稱為載脂蛋白，具有結(jié)合與轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)及穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)的功能,4,PPT學(xué)習(xí)交流,血漿脂蛋白的代謝,甘油三酯的代謝途徑,5,PPT學(xué)習(xí)交流,膽固醇

2、代謝途徑,6,PPT學(xué)習(xí)交流,膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)途徑,7,PPT學(xué)習(xí)交流,高脂蛋白血癥WHO分型,8,PPT學(xué)習(xí)交流,引起繼發(fā)性高脂血癥的病因,1 、糖尿病 常表現(xiàn)為IV型高脂蛋白血癥。（胰島素的缺乏，不僅促使肝臟生成VLDL增加，而且因LPL活性降低，導(dǎo)致VLDL清除減少，主要表現(xiàn)為血清TG、VLDL水平升高，TG嚴(yán)重升高者有發(fā)生急性胰腺炎的危險(xiǎn)性。） 2、甲減 常表現(xiàn)為IIa或IIb型高脂蛋白血癥患者血TC水平升高可同時(shí)血TG水平升高（LPL活力降低，IDL代謝障礙、LDL受體功能下降、血漿LDL清除減慢等） 3、腎臟疾病 腎病綜合征時(shí)的高脂蛋白血癥由脂蛋白降解障礙和合成過多雙重機(jī)制引起。,9,

3、PPT學(xué)習(xí)交流,高脂蛋白血癥的因素,4、藥物：降壓藥，利尿劑，受體阻滯劑可TG 和HDL 長期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療可使TG、TC升高 5、其他：肝膽系統(tǒng)疾病、胰腺炎、長期過量飲酒,10,PPT學(xué)習(xí)交流,低脂蛋白血癥表現(xiàn),1、家族性低-脂蛋白血癥 （肝臟LDL受體上調(diào)，伴膽汁酸過度合成，使血漿中VLDL在轉(zhuǎn)化為LDL前已被肝臟分解代謝。） 2、-脂蛋白缺乏血癥 （ApoB合成分泌缺陷，使含ApoB的脂蛋白如CM、VLDL、LDL合成代謝障礙，伴隨脂肪吸收和代謝紊亂，血漿TC也非常低）,11,PPT學(xué)習(xí)交流,血脂檢測方法及臨床意義,總膽固醇(TC) 甘油三酯(TG) 高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)

4、 低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C) 載脂蛋白A1(ApoA1) 載脂蛋白B(ApoB),12,PPT學(xué)習(xí)交流,總膽固醇（TC）,化學(xué)測定法 L-B（ALBK）和Zak法 ALBK（美國CDC的脂類標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室協(xié)同有關(guān)學(xué)術(shù)組織對Abell法作了評價(jià)和實(shí)驗(yàn)條件最適化）采用正己烷抽提，L-B顯色 Abell法（血清加入醇溶性氫氧化鉀，使膽固醇從脂蛋白中分離出來，同時(shí)使膽固醇酯加水分解成游離膽固醇，加石油醚振搖、抽提，使膽固醇移入石油醚層，分離并取一定量的石油醚層，蒸發(fā)至干，再進(jìn)行Liebermann-Burchard 顯色反應(yīng)，620nm比色定量。該法可用于基本功訓(xùn)練及組織細(xì)胞膽固醇的提取定量。）

5、酶法 CEH-COD-PAP法（優(yōu)點(diǎn)：靈敏度，精確度，線性范圍寬。缺點(diǎn)：1.膽固醇酯酶對膽固醇酯水解不完全2.表面活性劑吐溫-40干擾酯酶的作用3.受還原性物質(zhì)影響如尿酸，膽紅素，VC）,13,PPT學(xué)習(xí)交流,CEH-COD-PAP法原理,用膽固醇酯酶水解膽固醇酯生成脂肪酸和膽固醇，膽固醇被膽固醇氧化酶氧化生成4-膽淄烯酮和過氧化氫，然后在過氧化物酶催化下，H2O2與4-氨基安替比林及酚結(jié)合，生成紅色醌亞胺。醌亞胺的最大吸收峰在500nm左右，吸光度與標(biāo)本中的膽固醇含量成正比。反應(yīng)方程式如下： 膽固醇酯+H2O 膽固醇+游離脂肪酸 膽固醇+O24-膽甾烯酮+H2O2 2H2O2+4-氨基安替比

6、林+酚醌亞胺,CEH,COD,POD,14,PPT學(xué)習(xí)交流,血清膽固醇參考范圍,TC5.20mmol/L 邊緣升高：5.235.69mmol/L 升高：5.72mmol/L,15,PPT學(xué)習(xí)交流,臨床意義,TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標(biāo)之外，不能作為其他任何疾病的診斷指標(biāo)，對于動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病而言，TC是一個(gè)明確的危險(xiǎn)因子，與冠心病的發(fā)病率呈正相關(guān)。 影響TC水平的因素：1、年齡與性別，(上升)2、長期高膽固醇、高飽和脂肪酸、高熱量的飲食3、遺傳4、缺少運(yùn)動(dòng)，精神緊張等,16,PPT學(xué)習(xí)交流,相關(guān)疾病,高TC血癥有原發(fā)和繼發(fā)兩類，原發(fā)的如家族性高膽固醇血癥，家族性apoB缺陷癥，多源性

7、高TC，混合性高脂蛋白血癥等，繼發(fā)的見于腎病綜合征，甲減，糖尿病，妊娠等。 低TC血癥原發(fā)和繼發(fā)，原發(fā)如家族性無或低脂蛋白血癥，繼發(fā)如甲亢，營養(yǎng)不良，慢性消耗性疾病等。,17,PPT學(xué)習(xí)交流,血清甘油三酯測定,酶法測定 磷酸甘油氧化酶法（靈敏度高，試劑穩(wěn)定，線性范圍比較寬） 乳酸脫氫酶法（結(jié)果準(zhǔn)確，靈敏度低，試劑不穩(wěn)定） 甘油氧化酶法（直接測定甘油的方法）,18,PPT學(xué)習(xí)交流,磷酸甘油氧化酶法原理,用脂蛋白酯酶（LPL）使血清中TG水解成脂肪酸和甘油，甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP）將甘油磷酸化，以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化3-磷酸甘油（G-3-P）產(chǎn)生H2O2，最后以Trinder

8、反應(yīng)顯色，A500nm的值與TG濃度成正比。 TG+H2O甘油+脂肪酸 甘油+ATPG-3-P+ADP G-3-P+O2磷酸二羥丙酮+H2O2 H202+4-AAP+4-氯酚苯醌亞胺非那腙+H2O2,19,PPT學(xué)習(xí)交流,甘油三酯臨床意義,原發(fā)性高TG血癥多有遺傳因素，包括家族性高TG血癥與家族性型高脂蛋白血癥等。繼發(fā)性高TG血癥見于糖尿病，糖原累積病，甲減，腎病綜合征，妊娠，口服避孕藥，酗酒等。富含TG的脂蛋白是冠心病的獨(dú)立的危險(xiǎn)因子，TG增加表明患者存在代謝綜合征，需進(jìn)行治療。甘油三酯降低很少見，甲亢，腎上腺皮質(zhì)功能減退和肝功能嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)可以見到甘油三酯降低。,20,PPT學(xué)習(xí)交流,甘油三

9、酯的參考范圍,TG1.70mmol/L 升高：1.70mmol/L,21,PPT學(xué)習(xí)交流,血清脂蛋白測定,HDL-C測定 LDL-C測定,22,PPT學(xué)習(xí)交流,HDL-C測定方法及原理,HDL直接測定法分三類 1、聚乙二醇/抗體包裹法 2、酶修飾法 3、選擇性抑制法（國內(nèi)應(yīng)用最多）,23,PPT學(xué)習(xí)交流,選擇性抑制法原理,分兩步：第一試劑用聚陰離子及分散型表面活性劑（反應(yīng)抑制劑），后者與LDL、VLDL、CM表面的疏水基團(tuán)有高度親和力，吸附在這些脂蛋白表面形成掩蔽層，但不發(fā)生沉淀，能抑制這類脂蛋白中的膽固醇與酶試劑反應(yīng)。第二試劑含膽固醇測定酶及具有對HDL表面的親水基團(tuán)有親和力的表面活性劑（反

10、應(yīng)促進(jìn)劑），使酶與HDL中的膽固醇起反應(yīng),24,PPT學(xué)習(xí)交流,HDL臨床意義,HDL-C與冠心病發(fā)病呈負(fù)相關(guān)，HDL-C低于0.9mmol/L是冠心病危險(xiǎn)因素。HDL-C大于1.55mmol/L被認(rèn)為是冠心病的“負(fù)”危險(xiǎn)因素。 HDL-C降低多見于腦血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高TG血癥往往伴以低HDL-C，肥胖者的HDL-C也多偏低。吸煙減低，適量飲酒、長期體力勞動(dòng)和運(yùn)動(dòng)會使HDL-C升高。,25,PPT學(xué)習(xí)交流,HDL-C參考范圍,HDL-C1.04mmol/L 減低：0.91mmol/L,26,PPT學(xué)習(xí)交流,LDL測定方法及原理,直接勻相法 一類是以-環(huán)糊精、硫酸葡聚糖、聚氧乙

11、烯-聚氧丙烯封閉共聚多醚（POE-POP），抑制非LDL脂蛋白以膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶的反應(yīng)（選擇性抑制），從而使LDL-C被酶水解并測定。 另一類是以不同的表面活性劑的雙試劑使非LDL-C與LDL-C分兩步水解，因先消除非LDL-C而被稱為消除法，（目前應(yīng)用較廣的）,27,PPT學(xué)習(xí)交流,LDL臨床意義,LDL-C增高是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的主要脂類危險(xiǎn)因素。由于TC水平同時(shí)也受HDL-C水平影響，所以最好以LDL-C代替TC作為冠心病危險(xiǎn)因素指標(biāo)。,28,PPT學(xué)習(xí)交流,LDL-C的參考范圍,LDL-C3.12mmol/L 邊緣升高：3.153.61mmol/L 升高：3.64mmol/

12、L,29,PPT學(xué)習(xí)交流,血清載脂蛋白測定,免疫散射比濁法 免疫透射比濁法,30,PPT學(xué)習(xí)交流,臨床意義,ApoA1是HDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，ApoB是LDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，因此，可以反映HDL/LDL的含量。在某些病理情況下，ApoA1與HDL和ApoB與LDL并非成正相關(guān)，同時(shí)測定載脂蛋白和脂蛋白對病理發(fā)生狀態(tài)的分析很有幫助。冠心病、腎病綜合征、糖尿病等都有ApoA1下降和ApoB升高。臨床上常將ApoA1和ApoB比值作為冠心病的危險(xiǎn)指標(biāo)。,31,PPT學(xué)習(xí)交流,載脂蛋白參考值,ApoA1：1.001.5g/L ApoB ：0.81.00g/L,32,PPT學(xué)習(xí)交流,糖的來源與去路,33

13、,PPT學(xué)習(xí)交流,葡萄糖的測定,葡萄糖氧化酶法（首選方法） 己糖激酶法 葡萄糖脫氫酶法,34,PPT學(xué)習(xí)交流,葡萄糖氧化酶法原理,葡萄糖氧化酶（GOD）將葡萄糖水解為葡萄糖酸和過氧化氫，后者在過氧化物酶（POD）和色素原性氧受體存在下，將過氧化氫分解為水和氧，同時(shí)使色素原性氧受體4-氨基安替比林和酚去氫縮合為紅色醌類化合物，即Trider反應(yīng)。其色澤深淺在一定范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正比。 葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸內(nèi)酯+H2O2 2H2O2+4-氨基安替比林+酚紅色醌類化合物,35,PPT學(xué)習(xí)交流,血糖的臨床意義,生理性或暫時(shí)性增高：餐后，攝入高糖飲食，情緒激動(dòng)等 病理性高血糖：糖尿病甲亢，腎

14、上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)等應(yīng)激性高血糖，如顱腦損傷，顱內(nèi)壓增高等脫水引起的血液濃縮，如嘔吐、腹瀉、高熱等嚴(yán)重的肝硬化不能使糖轉(zhuǎn)化為肝糖原儲存胰腺病變,36,PPT學(xué)習(xí)交流,血糖的臨床意義,生理性或暫時(shí)性低血糖 饑餓和劇烈運(yùn)動(dòng)等 病理性低血糖 可見于胰島細(xì)胞增生或腫瘤引起的胰島素分泌過多、嚴(yán)重肝病不能調(diào)節(jié)血糖。 藥物的影響血糖升高的藥物：口服避孕藥，兒茶酚胺，咖啡因，甲狀腺素，腎上腺素等血糖降低的藥物：降糖藥，酒精，普萘洛爾等,37,PPT學(xué)習(xí)交流,血糖參考值,成人：3.95.9mmol/L,38,PPT學(xué)習(xí)交流,糖耐量實(shí)驗(yàn),口服葡萄糖耐量試驗(yàn) 適應(yīng)癥： 空腹血糖水平在臨界值（67mmol/L）而又疑為糖尿病患者 空腹或餐后血糖正常，但有發(fā)展為糖尿病可能的人群 以前耐量試驗(yàn)異常的人群 妊娠性糖尿病的診斷 臨床上出現(xiàn)腎病，神經(jīng)病變，視網(wǎng)膜病無法給出解釋的,39,PPT學(xué)習(xí)交流,WHO標(biāo)準(zhǔn)化的OGTT,1.實(shí)驗(yàn)前三天，受試者每日食物中糖含量應(yīng)不低于150g，且維持正常活動(dòng)。 2.影響藥物應(yīng)在三天前停用，空腹10-16小時(shí)。 3