TGXAS-膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范編制說(shuō)明

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》（征求意見稿）編制說(shuō)明一、任務(wù)來(lái)源、起草單位、主要起草人根據(jù)《廣西標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)關(guān)于下達(dá)2024年第一批團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知》（桂標(biāo)協(xié)〔2024〕8號(hào)）文件精神，由廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院提出，廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院、廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院、玉林市中醫(yī)醫(yī)院、柳州市工人醫(yī)院、上海市第七人民醫(yī)院等單位共同起草的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》（項(xiàng)目編號(hào)：2024-0125）已獲批立項(xiàng)。主要起草人姓名及分工情況如下：序號(hào)姓名單位職務(wù)/職稱參與編制標(biāo)準(zhǔn)分工情況謝勝?gòu)V西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師統(tǒng)籌規(guī)范編制工作，組織人員進(jìn)行規(guī)范發(fā)布后的宣貫培訓(xùn)劉園園廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院副主任醫(yī)師指導(dǎo)規(guī)范文本及編制說(shuō)明編寫，質(zhì)量控制劉禮劍廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師對(duì)規(guī)范實(shí)施情況進(jìn)行總結(jié)分析，不斷對(duì)規(guī)范提出修正意見黎麗群廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院助理研究員對(duì)規(guī)范實(shí)施情況進(jìn)行總結(jié)分析，不斷對(duì)規(guī)范提出修正意見王榮輝廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作梁道業(yè)廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作林化廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作劉祖露廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主治醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作謝娟娟廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主治醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作譚金晶廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院副主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作黃曉燕廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作胡欽嗣廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作胡軍濤廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作林松柳州市工人醫(yī)院主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作雷鳴上海市第七人民醫(yī)院主任醫(yī)師協(xié)助起草規(guī)范草案，征求意見稿和規(guī)范編制說(shuō)明，送審稿及編制說(shuō)明的編寫工作二、制定標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義中西醫(yī)結(jié)合即將中醫(yī)學(xué)和西醫(yī)學(xué)的理論和實(shí)踐結(jié)合起來(lái)，以滿足全面的醫(yī)療需求。中西醫(yī)結(jié)合不僅可以更好地提高治療效果，而且可以提供更完善的健康保健服務(wù)，有助于提高全民健康水平，改善人們生活質(zhì)量，從而提高社會(huì)的整體素質(zhì)。國(guó)家一直十分重視。2019年，《中華人民共和國(guó)基本醫(yī)療衛(wèi)生與健康促進(jìn)法》第九條規(guī)定：國(guó)家大力發(fā)展中醫(yī)藥事業(yè)，堅(jiān)持中西醫(yī)并重、傳承與創(chuàng)新相結(jié)合。2023年，國(guó)務(wù)院辦公廳印發(fā)《中醫(yī)藥振興發(fā)展重大工程實(shí)施方案》，指出各地要支持組建區(qū)域中西醫(yī)協(xié)同醫(yī)療聯(lián)合體，將中西醫(yī)結(jié)合工作納入醫(yī)院等級(jí)評(píng)審和績(jī)效考核。項(xiàng)目單位要把建立中西醫(yī)協(xié)同機(jī)制和多學(xué)科診療體系納入醫(yī)院章程，將中西醫(yī)聯(lián)合查房、會(huì)診納入醫(yī)院管理制度，在各主要臨床科室配備中醫(yī)醫(yī)師，打造中西醫(yī)協(xié)同團(tuán)隊(duì)。為創(chuàng)新中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)療模式，促進(jìn)中醫(yī)和西醫(yī)強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合、優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，做到中西醫(yī)結(jié)合工作“有機(jī)制、有團(tuán)隊(duì)、有措施、有成效”。同年，國(guó)家中醫(yī)藥局、國(guó)家發(fā)展改革委、國(guó)家衛(wèi)生健康委聯(lián)合制定了《中西醫(yī)協(xié)同“旗艦”醫(yī)院建設(shè)試點(diǎn)項(xiàng)目管理辦法》（國(guó)中醫(yī)藥綜結(jié)合發(fā)〔2023〕4號(hào)），中西醫(yī)協(xié)同“旗艦”醫(yī)院建設(shè)正式啟動(dòng)。膿毒癥（sepsis）是由細(xì)菌等病原微生物侵入機(jī)體引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征。膿毒癥發(fā)生率高，全球每年有超過(guò)1800萬(wàn)嚴(yán)重膿毒癥病例，并且這一數(shù)字還以每年1.5％～8.0％的速度上升。膿毒癥的病情兇險(xiǎn)，病死率高，全球每天約14000人死于其并發(fā)癥。據(jù)國(guó)外流行病學(xué)調(diào)查顯示，膿毒癥的病死率已經(jīng)超過(guò)心肌梗死，成為重癥監(jiān)護(hù)病房?jī)?nèi)非心臟病人死亡的主要原因。近年來(lái)，盡管抗感染治療和器官功能支持技術(shù)取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步，膿毒癥的病死率仍高達(dá)30％～70％。相關(guān)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)在2017～2019年發(fā)生的6178318例膿毒癥死亡中，共有806728例(13.1％)為膿毒癥相關(guān)死亡，在膿毒癥相關(guān)死亡中，228852例(28.4％)發(fā)生在住院期間，而院內(nèi)死亡比例以2017年的27.0％持續(xù)上升至2019年的30.0％。膿毒癥治療花費(fèi)高，醫(yī)療資源消耗大，嚴(yán)重影響人類的生活質(zhì)量，已經(jīng)對(duì)人類健康造成巨大威脅。膿毒癥心肌損傷，是膿毒癥中最嚴(yán)重的并發(fā)癥及主要死因之一，直接影響膿毒癥患者的預(yù)后。膿毒性心肌病的特征是左室收縮力降低，最終與左室擴(kuò)張相關(guān)，伴或不伴右心室衰竭。不幸的是，廣泛的超聲檢查結(jié)果并不能反映對(duì)膿毒性心肌病的深刻理解，而是缺乏對(duì)其定義的共識(shí)。一些超聲心動(dòng)圖參數(shù)本質(zhì)上依賴于負(fù)荷條件(前負(fù)荷和后負(fù)荷)，因此可能很難區(qū)分哪些是原發(fā)的，哪些是由血流動(dòng)力學(xué)紊亂引起的。有研究顯示，伴有心功能障礙的膿毒癥患者的病死率高達(dá)70%，而無(wú)心功能障礙的膿毒癥患者病死率僅為20%。有效的心臟保護(hù)可改善膿毒癥患者的預(yù)后，降低其病死率。膿毒癥發(fā)病率高，并發(fā)癥多且重，病死率高，后遺癥多，預(yù)后差。近年來(lái)，國(guó)家強(qiáng)調(diào)要充分發(fā)揮中醫(yī)藥在重大疾病治療中的協(xié)同作用優(yōu)勢(shì)，但其優(yōu)勢(shì)未能充分發(fā)揮。研究膿毒癥中西醫(yī)病機(jī)及基于中西醫(yī)病機(jī)融通進(jìn)行中西醫(yī)協(xié)同救治組方，對(duì)降低該病病死率，改善預(yù)后意義重大。項(xiàng)目組應(yīng)用文獻(xiàn)研究和德爾菲法專家共識(shí)的研究方法，建立實(shí)用性強(qiáng)、公認(rèn)度高且操作方便的《基于西醫(yī)病理機(jī)理與中醫(yī)病機(jī)相融合救治膿毒癥的中醫(yī)組方模型》，推廣應(yīng)用于膿毒癥及其并發(fā)癥的中西醫(yī)協(xié)同組方，以期降低病死率，改善預(yù)后。現(xiàn)已在區(qū)內(nèi)20家醫(yī)療機(jī)構(gòu)得到應(yīng)用，147家醫(yī)療機(jī)構(gòu)宣傳推廣，并獲得眾多醫(yī)療機(jī)構(gòu)及行業(yè)專家好評(píng)?；谇捌谘芯浚槍?duì)膿毒癥具體并發(fā)癥，通過(guò)制定團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》，以標(biāo)準(zhǔn)為抓手，統(tǒng)一規(guī)范膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)要求，對(duì)提高膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)水平，進(jìn)一步提高該技術(shù)在全國(guó)的普適性、推廣性，推進(jìn)精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)模式的研究與實(shí)踐，鞏固和發(fā)揚(yáng)中西醫(yī)結(jié)合優(yōu)勢(shì)，促進(jìn)中西醫(yī)醫(yī)療事業(yè)發(fā)展，維護(hù)人民健康具有積極意義。三、項(xiàng)目編制過(guò)程（一）成立標(biāo)準(zhǔn)編制組團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》項(xiàng)目任務(wù)下達(dá)后，由廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院牽頭組織成立了標(biāo)準(zhǔn)編制組，制定了標(biāo)準(zhǔn)編寫方案，明確任務(wù)職責(zé)，確定工作技術(shù)路線，開展標(biāo)準(zhǔn)研制工作。具體編制工作由廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院、廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院、玉林市中醫(yī)醫(yī)院、柳州市工人醫(yī)院組成的標(biāo)準(zhǔn)編制組負(fù)責(zé)。編制組下設(shè)三個(gè)小組，分別是資料收集組、草案編寫組、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施組。資料收集組：負(fù)責(zé)國(guó)內(nèi)關(guān)于膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治相關(guān)文獻(xiàn)資料的查詢、收集和整理工作，查閱現(xiàn)存關(guān)于相關(guān)研究以及國(guó)內(nèi)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的制定。草案編寫組：負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)、征求意見、審定、報(bào)批等階段的標(biāo)準(zhǔn)文本及編制說(shuō)明的起草工作，包括標(biāo)準(zhǔn)制定過(guò)程各階段標(biāo)準(zhǔn)文本及相關(guān)材料的修改和完善。標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施組：負(fù)責(zé)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布后，組織相關(guān)部門、醫(yī)療機(jī)構(gòu)等，開展標(biāo)準(zhǔn)宣貫培訓(xùn)會(huì)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研討和詳細(xì)解讀，使相關(guān)人員了解標(biāo)準(zhǔn)，熟悉標(biāo)準(zhǔn)，并能熟練運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)；為確保標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施效果和綜合運(yùn)用率，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施情況進(jìn)行總結(jié)分析，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)提出持續(xù)改進(jìn)意見。收集整理文獻(xiàn)資料通過(guò)資料收集組對(duì)文獻(xiàn)資料的收集和整理，草案編寫組主要參考了以下國(guó)內(nèi)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)和期刊書籍：[1]T/CRHA022—2023膿毒癥診斷與治療規(guī)范[2]劉清泉,李志軍,沈洪,etal.膿毒癥中西醫(yī)結(jié)合診治專家共識(shí):2008全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合危重病、急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議[Z].中國(guó)天津:20088.[3]朱晴,張逸雪,劉洋,etal.膿毒癥的病理生理機(jī)制研究進(jìn)展[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志.2022,32(16):2551-2555.廖明喻,劉雪健,武免免,etal.膿毒癥病理生理機(jī)制及治療新方法的探索[J].醫(yī)學(xué)綜述.2019,25(03):475-479.[5]師靈靈,韓艷秋,任慧娟,etal.膿毒癥的病理生理機(jī)制研究進(jìn)展[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志.2016,26(08):1914-1916.[6]陳龍嬌.《黃帝內(nèi)經(jīng)》“火”“熱”釋義[J].江西中醫(yī)藥.2023,54(07):6-9.[7]董坤,張哲.毒邪致病中醫(yī)癥狀探討[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥.2019,15(05):194-196.[8]李湛,賈春華.“六氣皆從火化”的隱喻分析[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊.2023:1-13.[9]樊新榮,唐農(nóng),紀(jì)云西,etal.中醫(yī)學(xué)“內(nèi)生濁邪”本質(zhì)探討[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志.2015,35(08):1011-1014.[10]汪海東,馮強(qiáng),樓旭丹,etal.中醫(yī)學(xué)“火”的現(xiàn)代理解概說(shuō)[J].中醫(yī)雜志.2016,57(23):2052-2056.[11]中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)重癥醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì),中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師分會(huì)心臟介入專業(yè)委員會(huì).膿毒性心肌病中西醫(yī)結(jié)合診治專家共識(shí)[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志,2022,29(1):1-6.[12]LiangYW,ZhuYF,ZhangR,etal.Incidence,prognosis,andriskfactorsofsepsis-inducedcardiomyopathy[J].WorldJClinCases.2021,9(31):9452-9468.[13]Fleischmann-StruzekC,MellhammarL,RoseN,etal.Incidenceandmortalityofhospital-andICU-treatedsepsis:resultsfromanupdatedandexpandedsystematicreviewandmeta-analysis[J].IntensiveCareMed.2020,46(8):1552-1562.[14]HollenbergSM,SingerM.Pathophysiologyofsepsis-inducedcardiomyopathy[J].NatRevCardiol.2021,18(6):424-434.[15]SatoR,KuriyamaA,TakadaT,etal.Prevalenceandriskfactorsofsepsis-inducedcardiomyopathy:Aretrospectivecohortstudy[J].Medicine(Baltimore).2016,95(39):e5031.[16]DriessenR,vandePollM,MolMF,etal.Theinfluenceofachangeinsepticshockdefinitionsonintensivecareepidemiologyandoutcome:comparisonofsepsis-2andsepsis-3definitions[J].InfectDis(Lond).2018,50(3):207-213.[17]LakbarI,MunozM,PaulyV,etal.Septicshock:incidence,mortalityandhospitalreadmissionratesinFrenchintensivecareunitsfrom2014to2018[J].AnaesthCritCarePainMed.2022,41(3):101082.[18]IncidenceofseveresepsisandsepticshockinGermanintensivecareunits:theprospective,multicentreINSEPstudy[J].IntensiveCareMed.2016,42(12):1980-1989.[19]KadriSS,RheeC,StrichJR,etal.EstimatingTen-YearTrendsinSepticShockIncidenceandMortalityinUnitedStatesAcademicMedicalCentersUsingClinicalData[J].Chest.2017,151(2):278-285.（三）研討確定標(biāo)準(zhǔn)特色、創(chuàng)新點(diǎn)和主體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編制組在對(duì)收集的資料進(jìn)行整理研究之后，標(biāo)準(zhǔn)編制組召開了標(biāo)準(zhǔn)編制會(huì)議，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的整體框架結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的特色、創(chuàng)新點(diǎn)及關(guān)鍵性內(nèi)容進(jìn)行了初步探討。經(jīng)研究，標(biāo)準(zhǔn)的特色、創(chuàng)新點(diǎn)確定為：針對(duì)膿毒癥具體并發(fā)癥狀——心肌病，基于中西醫(yī)病機(jī)融通分析，明確在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)救治原則和措施的基礎(chǔ)上，給予基于中西醫(yī)病機(jī)融通的中醫(yī)組方救治，區(qū)別于傳統(tǒng)中醫(yī)或西醫(yī)針對(duì)膿毒癥的診療，本標(biāo)準(zhǔn)更具針對(duì)性，且經(jīng)臨床實(shí)踐應(yīng)用降低病死率明顯，能夠顯著改善預(yù)后?；趯?duì)心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通分析提出了對(duì)心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通的中醫(yī)救治：治法開宣心痹，益氣通絡(luò)、熄風(fēng)清火、化瘀利水?；谥形麽t(yī)病機(jī)融通的中醫(yī)組方：選擇宣重癥心痹方：旋覆花（包煎）、茜草、升麻、醋鱉甲、芍藥、當(dāng)歸、細(xì)辛、通草、醋郁金、射干、紫菀、瓜蔞、薤白、桂枝、法半夏、枳實(shí)、豬心血丹參、檀香（后下）、砂仁（后下）、姜竹茹、桑白皮、地骨皮、制何首烏、丹皮、柴胡、淡竹葉、連翹。以旋覆花降氣化痰、茜草活血通經(jīng)為主藥，輔以升麻升陽(yáng)舉陷、醋鱉甲軟堅(jiān)散結(jié)，共奏理氣活血、化痰散結(jié)之效。細(xì)辛、桂枝溫通心陽(yáng)，薤白、瓜蔞、法半夏寬胸化痰（仿瓜蔞薤白半夏湯意），共治胸痹氣滯痰阻。丹參、檀香、砂仁（丹參飲）活血行氣，治心胃疼痛。桑白皮、地骨皮清肺降火，竹茹、連翹、淡竹葉清熱化痰，兼顧上焦郁熱。紫菀、射干宣肺利咽，通草通利水道，制何首烏、丹皮益腎涼血，防溫燥傷陰。全方兼顧氣血痰瘀，共奏寬胸化痰、活血通絡(luò)、調(diào)和氣血之效，適用于胸痹心痛、痰瘀互結(jié)兼氣郁化熱之證。標(biāo)準(zhǔn)的主體內(nèi)容確定為術(shù)語(yǔ)和定義、診斷、中西醫(yī)病機(jī)融通救治、注意事項(xiàng)、不良反應(yīng)處理。調(diào)研，形成草案、征求意見稿2024年1月，標(biāo)準(zhǔn)編制組通過(guò)查閱了大量的國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)資料，對(duì)膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治的相關(guān)文件進(jìn)行系統(tǒng)總結(jié)。形成了標(biāo)準(zhǔn)的基本構(gòu)架，對(duì)主要內(nèi)容進(jìn)行了討論并對(duì)項(xiàng)目的工作進(jìn)行了部署和安排。2024年2月～4，在前期工作的基礎(chǔ)之上，通過(guò)理清邏輯脈絡(luò)，整合已有參考資料中有關(guān)膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治的內(nèi)容，并結(jié)合膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治實(shí)際要求的基礎(chǔ)上，按照簡(jiǎn)化、統(tǒng)一等原則編制完成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》（草案）。2024年5月～12月，標(biāo)準(zhǔn)編制組組織廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院、玉林市中醫(yī)醫(yī)院、柳州市工人醫(yī)院等單位多次召開標(biāo)準(zhǔn)研討會(huì)，收集反饋了大量意見，掌握膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治的基本要求。標(biāo)準(zhǔn)編制組對(duì)標(biāo)準(zhǔn)草案進(jìn)行了反復(fù)修改和研究討論。最終形成了團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》（征求意見稿）及其編制說(shuō)明。四、制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)，與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系，與有關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況（一）編制原則1.實(shí)用性原則本文件是在充分收集相關(guān)資料，分析當(dāng)前現(xiàn)狀、調(diào)研的實(shí)際情況，在現(xiàn)有文獻(xiàn)中參考與膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治相關(guān)內(nèi)容的基礎(chǔ)上，結(jié)合多年經(jīng)驗(yàn)而總結(jié)起草的。符合當(dāng)前膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治的需要，有利于行業(yè)的長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展，具有較強(qiáng)的實(shí)用性和可操作性。2.協(xié)調(diào)性原則本文件編寫過(guò)程中注意了與膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治相關(guān)法律法規(guī)的協(xié)調(diào)問(wèn)題，在內(nèi)容上與現(xiàn)行法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致。3.規(guī)范性原則本文件嚴(yán)格按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求和規(guī)定編寫本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容，保證標(biāo)準(zhǔn)的編寫質(zhì)量。4.前瞻性原則本文件在兼顧當(dāng)前膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治現(xiàn)實(shí)情況的同時(shí)，還考慮到了膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治快速發(fā)展的趨勢(shì)和需要，在標(biāo)準(zhǔn)中體現(xiàn)了個(gè)別特色性、前瞻性和先進(jìn)性條款，作為對(duì)開展膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治的指導(dǎo)。（二）與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系，與有關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容與現(xiàn)行的法律、法規(guī)及強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)無(wú)沖突，標(biāo)準(zhǔn)的編寫符合GB/T1.1—2020的要求。經(jīng)查閱，目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)關(guān)于膿毒性心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)。與“膿毒癥”相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)有：T/CRHA022—2023《膿毒癥診斷與治療規(guī)范》、T/CACM1270—2019《中醫(yī)內(nèi)科臨床診療指南膿毒癥》、T/CACM012—2017《中醫(yī)藥單用/聯(lián)合抗生素治療常見感染性疾病臨床實(shí)踐指南膿毒癥》，但上述標(biāo)準(zhǔn)并非具體治療膿毒癥心肌病并發(fā)癥，也未涉及中西醫(yī)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)有。廣西未制定有團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》。五、主要條款的說(shuō)明，主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗(yàn)驗(yàn)證的論述本標(biāo)準(zhǔn)主要章節(jié)內(nèi)容包括術(shù)語(yǔ)和定義、診斷、中西醫(yī)病機(jī)融通救治、注意事項(xiàng)、不良反應(yīng)處理。標(biāo)準(zhǔn)編制組在膿毒癥救治方面已積累了10年工作經(jīng)驗(yàn)，掌握了中西醫(yī)病機(jī)融對(duì)膿毒癥進(jìn)行中醫(yī)組方治療等危急重癥救治技術(shù)，平均治愈率91.86％。標(biāo)準(zhǔn)編制組前期應(yīng)用文獻(xiàn)研究和德爾菲法專家共識(shí)的研究方法，建立實(shí)用性強(qiáng)、公認(rèn)度高且操作方便的《基于西醫(yī)病理機(jī)理與中醫(yī)病機(jī)相融合救治膿毒癥的中醫(yī)組方模型》，推廣應(yīng)用于膿毒癥及其并發(fā)癥的中西醫(yī)協(xié)同組方，以期降低病死率，改善預(yù)后?，F(xiàn)已在區(qū)內(nèi)20家醫(yī)療機(jī)構(gòu)得到應(yīng)用，147家醫(yī)療機(jī)構(gòu)宣傳推廣，并獲得眾多醫(yī)療機(jī)構(gòu)及行業(yè)專家好評(píng)。標(biāo)準(zhǔn)編制組前期豐富的臨床及實(shí)踐情況，為本標(biāo)準(zhǔn)條款要求的確定奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，本標(biāo)準(zhǔn)具體依據(jù)來(lái)源說(shuō)明如下：術(shù)語(yǔ)和定義根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)編制組前期開展的《從“五痹”切入探討危急重癥的中西醫(yī)病機(jī)融通與組方思路》等相關(guān)研究，明確了“中西醫(yī)病機(jī)融通”的定義為：基于西醫(yī)疾病的病理生理變化、病理機(jī)理、癥狀體征及理化檢查的認(rèn)識(shí)，應(yīng)用中醫(yī)理論分析其病因、歸納其證候，詮釋中醫(yī)病機(jī)的演變規(guī)律，以達(dá)到中西醫(yī)病機(jī)互通的目的，科學(xué)指導(dǎo)中醫(yī)辨證論治。根據(jù)T/CRHA022—2023《膿毒癥診斷與治療規(guī)范》明確了“膿毒癥”的定義為：因感染引起的宿主反應(yīng)失調(diào)導(dǎo)致的危及生命的器官功能障礙。來(lái)源：T/CRHA022—2023《膿毒癥診斷與治療規(guī)范》根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)編制組前期開展的相關(guān)研究，明確了“膿毒癥心肌病”的定義為：由膿毒癥引發(fā)的全身性感染及炎癥反應(yīng)過(guò)程中，因過(guò)度炎癥因子釋放、氧化應(yīng)激、微循環(huán)障礙、線粒體功能障礙及心肌細(xì)胞代謝紊亂等機(jī)制，導(dǎo)致心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)或功能損害的一種病理狀態(tài)。“心痹”的定義為：由于因外邪侵襲、情志內(nèi)傷、臟腑失調(diào)等導(dǎo)致心脈閉阻，氣血運(yùn)行不暢，從而引起心悸、突發(fā)氣逆喘息、咽干、頻繁噯氣，甚則氣機(jī)上逆引發(fā)驚恐；或伴胸中積氣、納食受阻的一種病癥。診斷西醫(yī)診斷根據(jù)《中國(guó)膿毒癥/膿毒性休克急診治療指南(2018)》《膿毒癥中西醫(yī)結(jié)合診治專家共識(shí)》，明確了膿毒癥及膿毒癥心肌病的診斷條件。參考《膿毒性心肌病中西醫(yī)結(jié)合診治專家共識(shí)》在膿毒癥的基礎(chǔ)上，滿足以下條件之一，診斷為膿毒癥心肌病：a) 表現(xiàn)為急性全心功能障礙（收縮/舒張性），對(duì)液體復(fù)蘇及兒茶酚胺反應(yīng)差；b) 心電圖無(wú)特異性，常見竇速、房顫；c) 超聲心動(dòng)圖提示心臟收縮和/或舒張功能不全、心臟擴(kuò)張、EF降低＜50％，需鑒別心包積液、ACS、左室流出通道梗阻等；d) 心肌標(biāo)志物cTnI及BNP（或NT-proBNP）異常升高。膿毒癥心肌病參考《黃帝內(nèi)經(jīng)》《金匱要略》等典籍，結(jié)合“痹證日久，內(nèi)舍其合”的病機(jī)演變規(guī)律，闡明外邪侵襲、心脈痹阻的病理過(guò)程。依據(jù)臨床常見表現(xiàn)，總結(jié)心痹的核心癥狀（如心悸、胸痛）及伴隨癥狀（如情志異常、氣機(jī)失調(diào)），并分析其病機(jī)關(guān)聯(lián)。結(jié)合舌脈特征，提出分型及治療方向，以“通補(bǔ)兼施”為原則，兼顧祛邪與扶正。中西醫(yī)病機(jī)融通救治3.1中西醫(yī)病機(jī)融通分析標(biāo)準(zhǔn)編制組基于“中西醫(yī)病機(jī)融通”對(duì)膿毒癥進(jìn)行中醫(yī)組方治療的經(jīng)驗(yàn)，并結(jié)合開展的《從“五痹”切入探討危急重癥的中西醫(yī)病機(jī)融通與組方思路》等相關(guān)研究，明確了中西醫(yī)病機(jī)融通的分析。3.2中西醫(yī)病機(jī)融通救治方法3.2.1救治原則基于中西醫(yī)病機(jī)融通分析，明確在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)救治原則和措施的基礎(chǔ)上，給予基于中西醫(yī)病機(jī)融通的中醫(yī)組方救治。3.2.2西醫(yī)救治根據(jù)《膿毒癥中西醫(yī)結(jié)合診治專家共識(shí)》《膿毒性心肌病中西醫(yī)結(jié)合診治專家共識(shí)》明確了控制感染源的要求快速明確感染部位、致病菌和盡早清除感染灶或者感染灶充分引流。如皮膚軟組織感染壞死感染應(yīng)行清創(chuàng)術(shù)；膿腫或感染性積液應(yīng)充分引流等，因?yàn)閺?qiáng)調(diào)“快速明確感染源、盡早控制感染灶”是膿毒癥救治的關(guān)鍵措施，感染灶的徹底清除或引流可顯著降低病死率。其次明確了抗感染治療的要求確診膿毒癥后應(yīng)根據(jù)感染部位及可疑微生物，盡早啟動(dòng)經(jīng)驗(yàn)性治療，使用覆蓋可能病原菌的抗菌藥物。使用抗菌藥物前，應(yīng)留取相應(yīng)部位病原學(xué)標(biāo)本。獲取微生物檢查結(jié)果后應(yīng)轉(zhuǎn)為目標(biāo)治療，因?yàn)榻?jīng)驗(yàn)性抗感染治療應(yīng)基于感染部位、當(dāng)?shù)夭≡餍胁W(xué)及耐藥情況。微生物學(xué)檢查是優(yōu)化抗菌治療的基礎(chǔ)。還針對(duì)心肌靶向治療提出了要求，包括藥物和非藥物治療。心肌靶向治療是針對(duì)心肌病變（如心力衰竭、心肌缺血等）的精準(zhǔn)干預(yù)策略，旨在改善心臟功能并延緩疾病進(jìn)展。藥物治療是核心手段，其中正性肌力藥物通過(guò)增強(qiáng)心肌收縮力提升心輸出量，適用于急性心衰；負(fù)性頻率藥物通過(guò)降低心率減少心肌耗氧，尤其適用于竇性心律過(guò)快的慢性心衰患者。他汀類藥物則通過(guò)調(diào)脂、抗炎及改善內(nèi)皮功能發(fā)揮潛在心臟保護(hù)作用，部分研究顯示其可降低心衰再住院率。非藥物治療中，輔助循環(huán)技術(shù)如主動(dòng)脈內(nèi)球囊反搏通過(guò)機(jī)械輔助改善冠脈灌注，適用于心源性休克或高危PCI術(shù)支持；體外膜肺氧合則為終末期心衰或心臟術(shù)后患者提供臨時(shí)心肺替代，為后續(xù)治療爭(zhēng)取時(shí)間。臨床選擇需基于病因、病情嚴(yán)重度及患者個(gè)體特征，聯(lián)合多學(xué)科評(píng)估以優(yōu)化療效。3.2.3中西醫(yī)病機(jī)融通的中醫(yī)救治根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)編制組“中西醫(yī)病機(jī)融通”對(duì)膿毒癥進(jìn)行中醫(yī)組方治療的經(jīng)驗(yàn)，并結(jié)合《從“五痹”切入探討危急重癥的中西醫(yī)病機(jī)融通與組方思路》等相關(guān)研究及臨床和基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)情況，明確治法：核心病機(jī)為“宣痹清營(yíng)、通腑瀉濁、化瘀解毒”為法。標(biāo)準(zhǔn)編制組前期開展了膿毒性心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通中藥組方選取于2022年05月至2025年1月之間就診于廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院、南寧市第四人民醫(yī)院、玉林市中醫(yī)醫(yī)院、南寧武鳴區(qū)中醫(yī)醫(yī)院、桂平市中醫(yī)醫(yī)院、柳州市工人醫(yī)院、靈山縣中醫(yī)醫(yī)院確診為膿毒性心肌損傷40例，其中觀察組20例，對(duì)照組20例。對(duì)照組男性12例、女性8例，年齡均值47.52±4.62歲，病程為4.62±1.76天；觀察組男性9例、女性11例，年齡分布為46.71±4.85歲，病程為4.83±2.10天。兩組患者在性別構(gòu)成比、年齡差異及病程時(shí)長(zhǎng)等方面均未呈現(xiàn)顯著性差異（P＞0.05），滿足臨床對(duì)照研究可比性要求。（1）7天臨床療效比較觀察組顯效13例，有效12例，無(wú)效5例，總有效率83.33%。對(duì)照組顯效7例，有效10例，無(wú)效13例，總有效率56.67%。兩組總臨床有效率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（2）7天炎癥指標(biāo)比較兩種患者治療前TNF-α和IL-6水平比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。觀察組和對(duì)照組治療后的TNF-α和IL-6平均較治療前降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。觀察組治療后的TNF-α和IL-6水平均較對(duì)照組治療后的降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。表SEQ表\*ARABIC17天炎癥指標(biāo)比較組別治療時(shí)間TNF-α(ng/L)IL-6(ng/L)觀察組治療前16.38±3.4495.97±14.01治療后6.32±1.74*#23.41±4.67*#對(duì)照組治療前15.46±3.4196.13±14.64治療后9.99±2.11*#33.21±5.37*#（3）7天心肌功能指標(biāo)比較兩種患者治療前CI、MAP和LVEF水平比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。觀察組和對(duì)照組治療后的CI、MAP和LVEF水平均較治療前升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。觀察組治療后的CI、MAP和LVEF水平均較對(duì)照組治療后的升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2。表SEQ表\*ARABIC27天心肌功能指標(biāo)比較組別治療時(shí)間CI(L/min/㎡)MAP(mmHg)LVEF(%)觀察組治療前2.17±0.6443.13±4.3743.78±4.91治療后4.73±0.79*#64.35±5.32*#64.88±5.24*#對(duì)照組治療前2.19±0.3943.87±5.1244.39±5.47治療后3.57±0.57*#56.72±6.84*#58.33±6.32*#此外，標(biāo)準(zhǔn)編制組還進(jìn)行了《膿毒性心肌損傷中西醫(yī)病機(jī)融通中藥組方的中藥入血成分研究》《膿毒性心肌損傷中西醫(yī)病機(jī)融通中藥組方的中藥入血成分生物信息學(xué)研究》《膿毒性心肌損傷中西醫(yī)病機(jī)融通中藥組方的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證療效研究》，見附件1?；谇捌谙盗醒芯?，明確采用宣重癥心痹方進(jìn)行中醫(yī)方藥救治，以旋覆花降氣化痰、茜草活血通經(jīng)為主藥，輔以升麻升陽(yáng)舉陷、醋鱉甲軟堅(jiān)散結(jié)，共奏理氣活血、化痰散結(jié)之效。細(xì)辛、桂枝溫通心陽(yáng)，薤白、瓜蔞、法半夏寬胸化痰（仿瓜蔞薤白半夏湯意），共治胸痹氣滯痰阻。丹參、檀香、砂仁（丹參飲）活血行氣，治心胃疼痛；桑白皮、地骨皮清肺降火，竹茹、連翹、淡竹葉清熱化痰，兼顧上焦郁熱。紫菀、射干宣肺利咽，通草通利水道，制何首烏、丹皮益腎涼血，防溫燥傷陰。全方兼顧氣血痰瘀，共奏寬胸化痰、活血通絡(luò)、調(diào)和氣血之效，適用于胸痹心痛、痰瘀互結(jié)兼氣郁化熱之證。標(biāo)準(zhǔn)編制組結(jié)合中西醫(yī)病機(jī)融通救治心肌病實(shí)際，明確了組方中各藥材劑量并明確了無(wú)明確進(jìn)食禁忌癥，盡早予以100mL/1次，1d/2次鼻飼，鼻飼3d～5d再次予以評(píng)估的使用方法。注意事項(xiàng)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)編制組救治工作經(jīng)驗(yàn)，明確了SIC液體復(fù)蘇時(shí)采用“限制性補(bǔ)液策略”，30mL/kg初始復(fù)蘇后謹(jǐn)慎補(bǔ)液，應(yīng)避免容量過(guò)負(fù)荷加重心衰。不良反應(yīng)處理針對(duì)中藥治療膿毒癥心肌病可能出現(xiàn)的腹瀉和過(guò)敏反應(yīng)，制定規(guī)范化處理措施，以確保用藥安全。腹瀉處理：減少劑量或暫停用藥適用于持續(xù)腹瀉者，以避免水電解質(zhì)紊亂；過(guò)敏處理：對(duì)過(guò)敏體質(zhì)患者應(yīng)謹(jǐn)慎用藥，并密切監(jiān)測(cè)。本方案兼顧臨床可操作性及患者安全性，確保中藥治療膿毒癥心肌病的合理應(yīng)用。六、重大意見分歧的處理依據(jù)和結(jié)果本標(biāo)準(zhǔn)研制過(guò)程中無(wú)重大分歧意見。七、實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的措施團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》發(fā)布后，積極向各級(jí)相關(guān)行政部門、醫(yī)療機(jī)構(gòu)宣傳，向所有醫(yī)療機(jī)構(gòu)推薦執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)。八、其他應(yīng)當(dāng)說(shuō)明的事項(xiàng)無(wú)。團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《膿毒癥心肌病中西醫(yī)病機(jī)融通救治技術(shù)規(guī)范》標(biāo)準(zhǔn)編制組2025年5月16日附件1膿毒性心肌損傷中西醫(yī)病機(jī)融通中藥組方的中藥入血成分研究一、資料與方法（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選取6只SD雄性6-8周齡大鼠，體重180~220g，均購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。實(shí)驗(yàn)前在良好的飼養(yǎng)環(huán)境（溫度20~26℃、濕度50%~60%）下適應(yīng)性喂養(yǎng)7d，自由進(jìn)食進(jìn)水。采用隨機(jī)數(shù)字表法，將6只大鼠隨機(jī)分為宣痹溫膽湯入血成分測(cè)定空白組、宣痹溫膽湯入血成分測(cè)定中藥組，每組各3只。本實(shí)驗(yàn)獲得廣西中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均按照中華人民共和國(guó)科技部2006年頒布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》中的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行合理操作。（2）實(shí)驗(yàn)藥物重癥心痹方：旋覆花20g（包煎）、茜草15g、升麻15g、醋鱉甲10g（先煎）、芍藥20g、當(dāng)歸15g、細(xì)辛10g、通草10g、醋郁金15g、射干15g、紫菀20g、瓜蔞15g、薤白30g、桂枝15g、法半夏20g、枳實(shí)15g、豬心血丹參10g、檀香5g（后下）、砂仁5g（后下）、姜竹茹30g、桑白皮15g、地骨皮30g、制何首烏10g、丹皮20g、柴胡10g、淡竹葉10g、連翹10g。以上中藥均由廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院門診中藥房提供。制備方法：將上述中藥浸泡于5倍體積水中浸泡1h，武火煎煮10min，文火再煎煮20min后過(guò)濾；再加入3倍水煎煮20min后過(guò)濾，兩次過(guò)濾后的湯劑予以混合并濃縮至2.04758生藥/mL藥液。此外，將10mL的宣痹溫膽湯中藥原液置于4℃冰箱，以便后續(xù)中藥化學(xué)成分檢測(cè)分析。（3）主要實(shí)驗(yàn)儀器與試劑10%水合氯醛（福州韋伯康生物科技公司）、生理鹽水（青島海博生物技術(shù)有限公司）、碘伏（唐派醫(yī)療有限公司）、酒精（唐派醫(yī)療有限公司）、LC-MS/MS系統(tǒng)組合型四極桿Orbitrap質(zhì)譜儀（美國(guó)ThermoFisher公司）。主要實(shí)驗(yàn)儀器與試劑詳見表3-4。表SEQ表\*ARABIC3實(shí)驗(yàn)試劑列表名稱CAS純度甲醇（Methanol）67-56-1LC-MS級(jí)CNWTechnologies乙腈（Acetonitrile）75-05-8LC-MS級(jí)CNWTechnologies甲酸（Formicacid）64-18-6LC-MS級(jí)SIGMAL-2-氯苯丙氨酸（2-Chloro-L-phenylalanine）103616-89-3上海恒柏生物科技有限公司表SEQ表\*ARABIC4實(shí)驗(yàn)儀器列表儀器型號(hào)品牌超高效液相VanquishThermoFisherScientific高分辨質(zhì)譜OrbitrapExploris120ThermoFisherScientific離心機(jī)HeraeusFresco17ThermoFisherScientific天平BSA124S-CWSartorius研磨儀JXFSTPRP-24上海凈信科技有限公司純水儀明澈D24UVMerckMillipore超聲儀YM-080S深圳市方奧微電子有限公司色譜柱ACQUITYUPLCBEHC181.7μm2.1*100mmWaters（4）藥物干預(yù)所有動(dòng)物均在動(dòng)物房適應(yīng)性飼養(yǎng)7d后，隨機(jī)分組并給予以下藥物處理：重癥心痹方入血成分測(cè)定中藥組：采用重癥心痹方灌胃，生藥劑量參考《動(dòng)物實(shí)驗(yàn)管理與操作實(shí)用指南》，按照成人（70kg），每日中藥用量與體質(zhì)量折算系數(shù)的6.3倍計(jì)算給藥劑量，1次/d、連續(xù)7d。重癥心痹方方入血成分測(cè)定空白組：等體積生理鹽水灌胃，1次/d，連續(xù)7d。（5）動(dòng)物取材藥物干預(yù)7d后，采用10%水合氯醛（0.5mL/100g）麻醉全部大鼠。開始取材，采集的腹主動(dòng)脈血靜置2h后，開始低溫離心15min，提取上清，保存于-80℃冰箱，留作后續(xù)入血成分檢測(cè)。（6）代謝物提取中藥：樣本在冰上解凍；渦旋30s，將樣本4℃,12000rpm（離心力13800（×g），半徑8.6cm）離心15min；取上清300μL于EP管中，加入1000μL提取液（甲醇：水=4：1，內(nèi)標(biāo)濃度為10μg/mL）；渦旋30s，冰水浴超聲5min；-40℃靜置1h后將樣本4℃,12000rpm（離心力13800（×g），半徑8.6cm）離心15min；小心地取上清經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾；-80℃儲(chǔ)存直到上機(jī)檢測(cè)。血清：取300μL血清樣本，加入30μL鹽酸（2mol/L）；渦旋1min，4℃靜置15min；重復(fù)渦旋靜置四次后，加入1.2mL乙腈；渦旋5min，12000rpm（離心力13800（×g），半徑8.6cm）離心5min，取上清1350μL氮吹干燥；加入112.5μL80%甲醇（內(nèi)標(biāo)濃度為10μg/mL）復(fù)溶，渦旋5min，12000rpm（離心力13800（×g），半徑8.6cm）離心5min；取90μL上清到進(jìn)樣瓶中上機(jī)檢測(cè)。（7）上機(jī)檢測(cè)Vanquish（ThermoFisherScientific)超高效液相控制下按照下表中的流動(dòng)相參數(shù)進(jìn)行分析。所使用的色譜柱為購(gòu)自Waters的UPLCBEHC18色譜柱（1.7μm*2.1*100mm)。進(jìn)樣體積為5μL。注：時(shí)間單位為min，流速單位為μL/min，A和B相中都加入0.1%甲酸。詳見表5。表SEQ表\*ARABIC5液相色譜流動(dòng)相條件表時(shí)間流速A%水B%乙腈04009553.54008515640070306.5400703012400307012.540030701840001002240001002540001002640095530400955OrbitrapExploris120質(zhì)譜儀能夠在控制軟件（Xcalibur,ThermoFisherScientific）控制下基于FullScan-ddMS2功能進(jìn)行一級(jí)、二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集。詳細(xì)參數(shù)如下：Sheathgasflowrate:30Arb,Auxgasflowrate:10Arb,IonTransferTubeTemp:350℃,VaporizerTemp:350℃,Fullmsresolution:60000,MS/MSresolution:15000,Collisionenergy:16/32/48inNCEmode,SprayVoltage:5.5kV（positive)或-4kV（negative)。（8）數(shù)據(jù)處理使用XCMS軟件將質(zhì)譜原始導(dǎo)入。進(jìn)行保留時(shí)間矯正、峰識(shí)別、峰提取、峰積分、峰對(duì)齊等工作，利用自建二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)及相應(yīng)裂解規(guī)律匹配法對(duì)含有MSMS數(shù)據(jù)的峰進(jìn)行物質(zhì)鑒定。結(jié)果（1）組方入血成分檢測(cè)共檢測(cè)到232個(gè)入血化合物，前7化合物見下表6。表SEQ表\*ARABIC6血清藥物化學(xué)分析結(jié)果表(前7行)（2）血清藥物化學(xué)分析韋恩圖將空白組、中藥組和含藥組的代謝物結(jié)果以韋恩圖（vennplot）的方式進(jìn)行展示。韋恩圖每一個(gè)橢圓代表一個(gè)組，并用不同的顏色進(jìn)行映射，交集和非交集個(gè)數(shù)分別用數(shù)字進(jìn)行統(tǒng)計(jì)展示在圖中，韋恩圖常用于發(fā)現(xiàn)多組間共有的代謝物，可以直觀展示藥用成分入血情況。圖1顯示重癥心痹方有52種1級(jí)有效成分，1701種II級(jí)有效成分，88種III級(jí)有效成分。圖SEQ圖\*ARABIC1血清藥物化學(xué)分析韋恩圖（3）入血成分相關(guān)性分析相關(guān)性分析是指對(duì)兩個(gè)或多個(gè)具備相關(guān)性的變量元素進(jìn)行分析，從而衡量?jī)蓚€(gè)變量因素的相關(guān)密切程度，兩個(gè)變量之間的相關(guān)程度通過(guò)相關(guān)系數(shù)r來(lái)表示。相關(guān)系數(shù)r的值在-1和1之間，但可以是此范圍內(nèi)的任何值。正相關(guān)時(shí)，r值在0和1之間；負(fù)相關(guān)時(shí)，r值在-1和0之間。r的絕對(duì)值越接近1，兩變量的關(guān)聯(lián)程度越強(qiáng)，r的絕對(duì)值越接近0，兩變量的關(guān)聯(lián)程度越弱。詳見圖2。圖SEQ圖\*ARABIC2入血成分相關(guān)性熱圖（Correlationheatmapofthemetaboliteintoblood）圖中橫縱坐標(biāo)代表該組入血的代謝物，不同位置的色塊代表對(duì)應(yīng)位置代謝物間的相關(guān)系數(shù)大小，紅色表示正相關(guān)，藍(lán)色表示負(fù)相關(guān)，顏色越深代表相關(guān)性越強(qiáng)。同時(shí)非顯著性相關(guān)用叉號(hào)進(jìn)行標(biāo)注（4）前10正負(fù)離子入血成分前20化合物見下表7、圖3。表SEQ表\*ARABIC7入血成分前20化合物NameENNameCNFormulaCASKEGGid3,5,6,7,8-pentamethoxy-2-(4-methoxyphenyl)chromen-4-one3-甲氧基桔皮素C21H22O834170-18-8/(2S,4aS,6aS,6bR,10S,12aS,14bS)-10-hydroxy-2,4a,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-13-oxo-3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,14b-dodecahydro-1H-picene-2-carboxylicacid/C30H46O41449-05-4/Quercetin槲皮素C15H10O7117-39-5C00389AlisolB23-acetate23-乙酰澤瀉醇BC32H50O5//Forsythiaside連翹酯苷AC29H36O1579916-77-1/Licoricone甘草利酮C22H22O6//methyl(2S,3S,4S,5R,6S)-6-[5,6-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4-oxo-chromen-7-yl]oxy-3,4,5-trihydroxy-tetrahydropyran-2-carboxylate野黃芩苷甲酯C22H20O12119262-68-9/Verbascoside麥角甾苷C29H36O1561276-17-3/3-[4,6-dihydroxy-2-methoxy-3-(3-methylbut-2-enyl)phenyl]-7-hydroxy-chromen-4-one2',4',7-三羥基-6'-甲氧基-3'-異戊烯基異黃酮C21H20O6//Benzoylpaeoniflorin苯甲酰芍藥苷C30H32O1238642-49-8/Acteoside毛蕊花苷C29H36O1561276-17-3/SaikosaponinA柴胡皂苷AC42H68O1320736-09-8/SaikosaponinB1柴胡皂苷B1C42H68O1358558-08-0/Isoacteoside異毛蕊花糖苷C29H36O1561303-13-7/(9-hydroxy-8,8-dimethyl-2-oxo-9,10-dihydropyrano[2,3-f]chromen-10-yl)(Z)-2-methylbut-2-enoate/C19H20O6//Tricetin三粒小麥黃酮C15H10O7520-31-0C10192SaikosaponinB2柴胡皂苷B2C42H68O1358316-41-9/1,8-dihydroxy-3-methyl-6-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)tetrahydropyran-2-yl]oxy-anthracene-9,10-dione大黃素6-O-葡萄糖苷C21H20O1034298-85-6/2-(2,6-dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-chromone粘毛黃芩素IC15H10O792519-95-4/圖SEQ圖\*ARABIC3正離子模式XBT1樣本TIC標(biāo)峰圖圖SEQ圖\*ARABIC91負(fù)離子模式XBT1樣本TIC標(biāo)峰圖

膿毒性心肌損傷中西醫(yī)病機(jī)融通中藥組方的中藥入血成分生物信息學(xué)研究（1）前10化合物和膿毒癥共同靶點(diǎn)基因的的篩選及韋恩圖構(gòu)建從TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)（https：///tcmsp.php）中進(jìn)行前10化合物的靶點(diǎn)篩選，從Pubchem數(shù)據(jù)庫(kù)（/）中獲取化合物結(jié)構(gòu)式，再?gòu)腟wisstargetprediction數(shù)據(jù)庫(kù)（http://www.swisstargetprediction.ch/）中進(jìn)行前10化合物的靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，最后通過(guò)STRING數(shù)據(jù)庫(kù)（/）和Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)（/）轉(zhuǎn)換為統(tǒng)一的基因靶點(diǎn)名稱，得到的基因靶點(diǎn)合并去重后共得到477個(gè)化合物基因靶點(diǎn)。從德爾遺傳搜索（OMIM）數(shù)據(jù)庫(kù)（/search/advanced/geneMap）和GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)（/）中檢索“Sepsis”，其中在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選Relevancescore>1的膿毒癥相關(guān)基因。在OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索到283個(gè)膿毒癥相關(guān)基因靶點(diǎn)，在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選到398個(gè)膿毒癥相關(guān)基因靶點(diǎn)，合并去重后即得到膿毒癥的相關(guān)疾病靶點(diǎn)630個(gè)。從Venny2.1.0（/）中取得10個(gè)入血成分、膿毒性心肌病的共同靶點(diǎn)38個(gè)，并繪制韋恩圖（圖5）。圖SEQ圖\*ARABIC5韋恩圖（2）蛋白互作網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和分析將前10化合物、膿毒性心肌病的38個(gè)共同靶點(diǎn)基因輸入到STRING12.0（/）中，設(shè)定生物種類為“Homosapiens”，minimumreauiredinteractionscore選擇默認(rèn)值0.400。保存蛋白互作網(wǎng)絡(luò)（PPI）圖和TSV格式的數(shù)據(jù)文件，根據(jù)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)性質(zhì)將此文件導(dǎo)入Cytoscape3.9.1軟件進(jìn)行可視化展示。圖6-7，表8。圖SEQ圖\*ARABIC6蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖圖SEQ圖\*ARABIC7PPI網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋱D表SEQ表\*ARABIC8治療靶點(diǎn)及其對(duì)應(yīng)的度值NO.nameDegree1TP53322MAPK3303AKT1304EGFR275HIF1A276NFKB1267MMP9248PPARG239HSPA52110MAPK82111ACE2012MAPK12013MMP22014APP2015TLR21816NFE2L21817PPARA1718PLG1719HSPA81720HSPB11621MPO1522MAPK141523RPS6KB11524HDAC61325TLR91226PIK3CG1027ELANE1028HSF11029LMNA930CYP3A4831MIF832TEK833F2634PLK1435AVPR2336CAMK2G337FABP3238ABCC21（3）入血成分-治療靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖將重癥心痹方的入血成分及治療靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape3.9.1軟件，構(gòu)建“入血成分-治療靶點(diǎn)”可視化網(wǎng)絡(luò)。基因本體（GO）富集與京都基因和基因組百科全書（KEGG）通路分析。運(yùn)用R語(yǔ)言軟件包對(duì)38個(gè)重疊靶點(diǎn)基因進(jìn)行GO功能富集分析和KEGG富集分析。從3個(gè)方面描述38個(gè)靶點(diǎn)的生物學(xué)功能：生物過(guò)程（biologicalprocess，BP）、細(xì)胞組成（cellularcomponent，CC）和分子功能（Molecularfunction，MF）。GO功能列出富集結(jié)果前10的條目，BP主要涉及心臟收縮、心臟過(guò)程、血液循環(huán)調(diào)節(jié)、肌肉系統(tǒng)過(guò)程、心肌組織發(fā)育、心肌收縮、橫紋肌組織發(fā)育、心臟收縮的調(diào)節(jié)、橫紋肌收縮、肌肉組織發(fā)育。CC主要在肌小節(jié)、肌原纖維、收縮纖維、Z膜、I帶、閏盤、細(xì)胞-細(xì)胞接觸區(qū)、陽(yáng)離子通道復(fù)合體、離子通道復(fù)合體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。MF主要集中在CaM結(jié)合、受體配體活性、信號(hào)受體活化活性、支架蛋白結(jié)合、賦予彈性的結(jié)構(gòu)分子活性、生長(zhǎng)因子活性、通道活性、被動(dòng)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)活性、胰島素樣生長(zhǎng)因子受體結(jié)合、電壓門控鉀通道活性參與心肌細(xì)胞動(dòng)作電位復(fù)極化。圖8。圖SEQ圖\*ARABIC8前10GO富集條形圖KEGG通路富集分析篩選出84條相關(guān)的信號(hào)傳導(dǎo)通路（P＜0.01），將富集程度排名前20的通路制作條形圖，如圖所示，前20條通路包括肥大性心肌病、充血性心肌病、心肌細(xì)胞中的腎上腺素能信號(hào)、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路、瘧疾、腎素分泌、恰加斯病、CGMP-PKG信號(hào)通路、糖尿病心肌病、癌癥中的蛋白聚糖、流體剪切力與動(dòng)脈粥樣硬化、HIF-1信號(hào)通路、心肌收縮、致心律失常性右室心肌病、非洲錐蟲病、炎癥性腸病、阿米巴病、脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化、Apelin信號(hào)通路、胰島素抵抗。這提示潛在靶點(diǎn)可能參與調(diào)控AGE-RAGE信號(hào)通路、CGMP-PKG信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路、Apelin信號(hào)通路及病毒、細(xì)菌及傳染性疾病相關(guān)的通路。圖9、表9。圖SEQ圖\*ARABIC9KEGG富集氣泡圖表SEQ表\*ARABIC9KEGG通路與其對(duì)應(yīng)的治療靶點(diǎn)KEGG通路治療靶點(diǎn)HypertrophiccardiomyopathyTTN/ACE/IL6/MYH6/MYH7/TNF/PRKAG2/TNNT2/LMNA/TNNI3/RYR2/TGFB1/DMD/CACNA1C/MYBPC3/IGF1/AGT/DES/ACTC1/TPM1/TGFB3/MYL2/EDN1DilatedcardiomyopathyTTN/MYH6/MYH7/TNF/TNNT2/LMNA/TNNI3/RYR2/TGFB1/DMD/CACNA1C/MYBPC3/IGF1/ADRB1/AGT/DES/ACTC1/PLN/TPM1/TGFB3/MYL2AdrenergicsignalingincardiomyocytesSCN5A/MYH6/MYH7/TNNT2/TNNI3/RYR2/KCNQ1/CACNA1C/ADRB1/AGTR1/AGT/ADRB2/ACTC1/PLN/TPM1/MYL2/AKT1AGE-RAGEsignalingpathwayindiabeticcomplicationsIL6/TNF/TGFB1/NOS3/AGTR1/AGT/FN1/THBD/SERPINE1/MMP2/TGFB3/CCL2/EDN1/AKT1MalariaIL6/TNF/IL10/TGFB1/CD40LG/TLR4/IFNG/TGFB3/CCL2ReninsecretionACE/NPPA/REN/CACNA1C/ADRB1/AGTR1/KCNJ2/AGT/ADRB2/EDN1ChagasdiseaseACE/IL6/TNF/IL10/TGFB1/TLR4/IFNG/SERPINE1/TGFB3/CCL2/AKT1cGMP-PKGsignalingpathwayGATA4/MYH6/NPPA/MYH7/INS/NPPB/CACNA1C/ADRB1/NOS3/AGTR1/ADRB2/PLN/AKT1DiabeticcardiomyopathyACE/REN/TNNI3/RYR2/INS/TGFB1/NOS3/AGTR1/AGT/PLN/MMP2/TGFB3/CPT2/AKT1ProteoglycansincancerTNF/TGFB1/IGF1/TLR4/TP53/PTPN11/FN1/ANK2/FLNA/CAV3/MMP2/CAV1/AKT1FluidshearstressandatherosclerosisTNF/NOS3/TP53/IFNG/THBD/CAV3/MMP2/CCL2/CAV1/EDN1/AKT1HIF-1signalingpathwayIL6/NPPA/INS/IGF1/NOS3/TLR4/IFNG/SERPINE1/EDN1/AKT1CardiacmusclecontractionMYH6/MYH7/TNNT2/TNNI3/RYR2/CACNA1C/ACTC1/TPM1/MYL2ArrhythmogenicrightventricularcardiomyopathyLMNA/GJA1/RYR2/DMD/CACNA1C/DSP/DES/DSG2AfricantrypanosomiasisIL6/NPPA/TNF/IL10/APOA1/IFNGInflammatoryboweldiseaseIL6/TNF/IL10/TGFB1/TLR4/IFNG/TGFB3AmoebiasisIL6/TNF/IL10/TGFB1/TLR4/FN1/IFNG/TGFB3LipidandatherosclerosisIL6/TNF/CD40LG/NOS3/APOB/TLR4/TP53/PPARG/APOA1/CCL2/AKT1ApelinsignalingpathwayPRKAG2/RYR2/JAG1/NOS3/AGTR1/RYR1/SERPINE1/MYL2/AKT1InsulinresistanceIL6/TNF/PRKAG2/INS/NOS3/PTPN11/AGT/AKT1

膿毒性心肌損傷中西醫(yī)病機(jī)融通中藥組方的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證療效研究一、材料與儀器（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選取42只SD雄性6-8周齡大鼠，體重180~220g，均購(gòu)自北京華阜康生物科技股份有限公司。實(shí)驗(yàn)前在良好的飼養(yǎng)環(huán)境（溫度20~26℃、濕度50%~60%）下適應(yīng)性喂養(yǎng)7d，自由進(jìn)食進(jìn)水。本實(shí)驗(yàn)獲得廣西中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理號(hào)：DW20230324-122），所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均按照中華人民共和國(guó)科技部2006年頒布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》中的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行合理操作。（2）主要實(shí)驗(yàn)試劑和儀器異氟烷（深圳瑞沃德生命科技股份有限公司）、10%水合氯醛（福州韋伯康生物科技公司）、生理鹽水（青島海博生物技術(shù)有限公司）、碘伏（唐派醫(yī)療有限公司）、石蠟（沈陽(yáng)石蠟化工有限公司）、蘇木素染色液（北京索萊寶生物科技有限公司）、伊紅染色液（北京索萊寶生物科技有限公司）、核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（NLRP3，美國(guó)ThermoFisher公司）；凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白（ASC，美國(guó)ThermoFisher公司）；切割的胱天蛋白酶1（Cleaved-caspase1,美國(guó)ThermoFisher公司）；超薄切片機(jī)（德國(guó)Leica公司）；組織包埋機(jī)（美國(guó)ThermoFisher公司）；高速多用途離心機(jī)（美國(guó)ThermoFisher公司）；組織脫水機(jī)（浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司）；Bio-Rad蛋白電泳儀、轉(zhuǎn)膜儀、凝膠成像儀（美國(guó)Bio-Rad公司）；光學(xué)顯微鏡（德國(guó)Leica公司）；LC-MS/MS系統(tǒng)組合型四極桿Orbitrap質(zhì)譜儀（美國(guó)ThermoFisher公司）。（3）灌胃藥物和制備方法重癥心痹方：旋覆花20g（包煎）、茜草15g、升麻15g、醋鱉甲10g（先煎）、芍藥20g、當(dāng)歸15g、細(xì)辛10g、通草10g、醋郁金15g、射干15g、紫菀20g、瓜蔞15g、薤白30g、桂枝15g、法半夏20g、枳實(shí)15g、豬心血丹參10g、檀香5g（后下）、砂仁5g（后下）、姜竹茹30g、桑白皮15g、地骨皮30g、制何首烏10g、丹皮20g、柴胡10g、淡竹葉10g、連翹10g。以上中藥均由廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院門診中藥房提供。制備方法：將上述中藥浸泡于5倍體積水中浸泡1h，武火煎煮10min、文火再煎煮20min后過(guò)濾；再加入3倍水煎煮20min后過(guò)濾，兩次過(guò)濾后的湯劑予以混合并濃縮至2.0475g生藥/mL藥液。西藥：甲基潑尼松龍（廠家：麥克林；CAS：83-43-2），由廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院西藥房提供。配制方法：按照5mL/kg的給藥體積計(jì)算，取80mg甲基潑尼松龍，加入5mL二甲基亞砜（DMSO）、20mL聚乙二醇（PEG-300）、2.5mL聚山梨酯-80（Tween-80）以及生理鹽水定容至50mL。實(shí)驗(yàn)方法（1）造模方法及模型成功評(píng)定參照文獻(xiàn)采用盲腸結(jié)扎穿刺（CLP）的方法構(gòu)建膿毒癥心肌損傷大鼠模型：按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)選取12只大鼠，其中6只大鼠采用2%異氟烷+33%氧氣氣體麻醉后，腹部切口開腹，將盲腸移出腹腔，用無(wú)菌4號(hào)絲線結(jié)扎盲腸根部，并用21G無(wú)菌針頭在結(jié)扎部位與盲腸頂端的中點(diǎn)處進(jìn)行穿孔，擠出盲腸內(nèi)容物，隨后將盲腸推回腹腔，逐層縫合。6只假手術(shù)組僅操作腹部切口及縫合。所有大鼠術(shù)后禁食不禁水。在術(shù)后48h剖取心臟，通過(guò)HE染色觀察心組織病理?yè)p傷情況，以驗(yàn)證膿毒癥模型是否成功。模型成功評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：與假手術(shù)比較，CLP模型組心肌組織出現(xiàn)明顯的病理改變，包括心肌纖維排列紊亂、破裂溶解，部分細(xì)胞腫脹、壞死，細(xì)胞間隙擴(kuò)張，并見炎癥細(xì)胞明顯浸潤(rùn)（見圖10）。A：假手術(shù)組B：CLP模型組圖SEQ圖\*ARABIC10模型成功判定圖（×400倍）（2）動(dòng)物分組與干預(yù)大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)選取3只作為中藥干預(yù)組并予重癥心痹方灌胃，1次/d，連續(xù)5d；隨機(jī)選取3只大鼠作為空白組并予生理鹽水灌胃，1次/d，連續(xù)5d。干預(yù)結(jié)束后采集血清，并在-20℃冰箱保存，留做后續(xù)入血成分檢測(cè)。將造模成功的大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法分為CLP模型組、陽(yáng)性藥物+CLP模型組、重癥心痹方+CLP模型組，每組各6只。其中，陽(yáng)性藥物+CLP組給予腹腔注射甲基潑尼松龍（8mg/kg），1次/d，連續(xù)5d；重癥心痹方+CLP模型組予重癥心痹方灌胃，生藥劑量參考《動(dòng)物實(shí)驗(yàn)管理與操作實(shí)用指南》，按照成人（70kg），每日中藥用量與體質(zhì)量折算系數(shù)的6.3倍計(jì)算給藥劑量，1次/d，連續(xù)5d。假手術(shù)組和CLP模型組均予生理鹽水灌胃，1次/d，連續(xù)5d。（3）動(dòng)物取材采用10%水合氯醛（0.5mL/100g）麻醉全部大鼠。開始取材，采集的腹主動(dòng)脈血靜置1h后，以3000r/min低溫離心15min，提取上清，保存于-20℃冰箱，留作后續(xù)血清檢測(cè)。同時(shí)，充分暴露前胸部，解剖大鼠并取心臟。每組大鼠心組織分為2部分，一部分組織固定液固定，一部分則在-80℃冰箱保存，以備后續(xù)檢測(cè)。（4）觀察指標(biāo)①重癥心痹方入血成分及藥物化學(xué)檢測(cè)使用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)重癥心痹方入血成分和中藥原藥液進(jìn)行分析鑒定，色譜條件：流動(dòng)相A為10mmol/L乙酸銨0.25%醋酸，流動(dòng)相B為乙腈-甲醇-異丙醇（8：1：1），梯度洗脫：0-0.3min，5%B；0.3-0.5min，5%-10%B；0.5-2min，10%-5%B；2-3min，15%-30%B；3-6min，30%B；6-8min，30%-35%B；8-9min，35%-40%B；9-10min，40%B；10-15min，40%-75%B；15-15.5min，75%-100%B；15.5-16.2min，100%B；16.2-16.3min，100%-5%B；16.3-17min，5%B。進(jìn)樣量為5μL。質(zhì)譜條件：電噴霧電離源（ESI?）；柱溫30°C；樣品室溫度10°C；毛細(xì)管電壓2.0kV；離子源溫度150℃；洗脫溶劑溫度550℃；洗脫溶劑體積流量1000L/h。選用Masslynxv4.1軟件處理原始數(shù)據(jù)，對(duì)樣品所含膽汁酸進(jìn)行積分、建立標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量分析。選用iMAPv1.0軟件用于統(tǒng)計(jì)分析，包括主成分分析（principalcomponentanalysis，PCA）、正交偏最小二乘－判別分析（orthogonalpartialleastsquares-discriminantanalysis，OPLS-DA）和單維統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)等。PC