2020北京PCR考試試題及答案

2020北京PCR考試試題及答案

一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術(shù)的主要作用是（）A.基因表達(dá)分析B.基因克隆C.核酸擴(kuò)增D.蛋白質(zhì)合成答案：C2.在PCR反應(yīng)中，起到催化合成新DNA鏈作用的是（）A.引物B.dNTPC.Taq酶D.模板DNA答案：C3.PCR反應(yīng)的變性溫度一般為（）A.50-55℃B.72℃C.94-95℃D.60-65℃答案：C4.以下哪種物質(zhì)不是PCR反應(yīng)的基本成分（）A.RNA酶B.模板DNAC.引物D.dNTP答案：A5.PCR反應(yīng)中引物的長(zhǎng)度一般為（）A.10-20個(gè)核苷酸B.1-5個(gè)核苷酸C.30-50個(gè)核苷酸D.50-100個(gè)核苷酸答案：A6.以下關(guān)于PCR的描述錯(cuò)誤的是（）A.可以特異性擴(kuò)增目的基因B.反應(yīng)需要在一定的緩沖體系中進(jìn)行C.不需要模板即可進(jìn)行反應(yīng)D.具有很高的靈敏度答案：C7.在PCR反應(yīng)中，延伸階段的溫度通常為（）A.94-95℃B.50-55℃C.72℃D.60-65℃答案：C8.用于PCR反應(yīng)的模板DNA可以來源于（）A.基因組DNAB.質(zhì)粒DNAC.cDNAD.以上都可以答案：D9.如果PCR擴(kuò)增沒有得到預(yù)期的產(chǎn)物，可能的原因不包括（）A.引物設(shè)計(jì)錯(cuò)誤B.模板量過多C.反應(yīng)體系中沒有加入Taq酶D.退火溫度過低答案：D10.PCR技術(shù)是誰發(fā)明的（）A.KaryMullisB.JamesWatsonC.FrancisCrickD.RosalindFranklin答案：A二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)體系包括以下哪些成分（）A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTPE.緩沖液答案：ABCDE2.影響PCR擴(kuò)增特異性的因素有（）A.引物特異性B.退火溫度C.模板純度D.Taq酶的活性E.延伸時(shí)間答案：ABC3.以下哪些是PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域（）A.遺傳病診斷B.病原體檢測(cè)C.基因分型D.法醫(yī)學(xué)鑒定E.轉(zhuǎn)基因檢測(cè)答案：ABCDE4.在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)，需要考慮的因素有（）A.引物長(zhǎng)度B.引物的GC含量C.引物的特異性D.引物的退火溫度E.引物的溶解性答案：ABCD5.以下關(guān)于Taq酶的說法正確的是（）A.具有熱穩(wěn)定性B.是一種DNA聚合酶C.催化dNTP合成DNA鏈D.可以耐受高溫變性步驟E.對(duì)引物有較高的特異性要求答案：ABCDE6.PCR反應(yīng)中可能出現(xiàn)的問題有（）A.非特異性擴(kuò)增B.無擴(kuò)增產(chǎn)物C.擴(kuò)增產(chǎn)物量過少D.擴(kuò)增產(chǎn)物量過多E.引物二聚體形成答案：ABCDE7.以下關(guān)于PCR反應(yīng)緩沖液的作用說法正確的是（）A.提供合適的pH環(huán)境B.提供必要的離子C.穩(wěn)定Taq酶活性D.促進(jìn)引物與模板結(jié)合E.促進(jìn)dNTP合成DNA鏈答案：ABC8.以下哪些可以作為PCR反應(yīng)的模板（）A.血液中的DNAB.組織中的DNAC.細(xì)胞中的RNA（先反轉(zhuǎn)錄為cDNA）D.細(xì)菌中的DNAE.病毒中的DNA答案：ABCDE9.為了提高PCR反應(yīng)的特異性，可以采取的措施有（）A.優(yōu)化引物設(shè)計(jì)B.提高退火溫度C.降低模板濃度D.減少引物量E.更換Taq酶答案：ABD10.在PCR反應(yīng)中，引物的作用有（）A.提供起始合成的位點(diǎn)B.決定擴(kuò)增的特異性C.引導(dǎo)Taq酶合成DNA鏈D.提高反應(yīng)的靈敏度E.穩(wěn)定反應(yīng)體系答案：ABC三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)可以在常溫下進(jìn)行。（）答案：錯(cuò)誤2.引物在PCR反應(yīng)中是可以重復(fù)使用的。（）答案：錯(cuò)誤3.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反應(yīng)。（）答案：錯(cuò)誤4.PCR反應(yīng)中，退火溫度越高，特異性越好。（）答案：正確5.只要有足夠的dNTP，PCR反應(yīng)就可以無限進(jìn)行。（）答案：錯(cuò)誤6.模板DNA的純度對(duì)PCR反應(yīng)結(jié)果沒有影響。（）答案：錯(cuò)誤7.在PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間越長(zhǎng)，擴(kuò)增產(chǎn)物就越長(zhǎng)。（）答案：錯(cuò)誤8.引物的GC含量越高越好。（）答案：錯(cuò)誤9.PCR技術(shù)只能用于檢測(cè)DNA，不能用于檢測(cè)RNA。（）答案：錯(cuò)誤10.一個(gè)好的PCR反應(yīng)體系不需要進(jìn)行優(yōu)化就可以得到理想的結(jié)果。（）答案：錯(cuò)誤四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)的基本原理。答案：PCR反應(yīng)基于DNA的半保留復(fù)制原理。以DNA為模板，在Taq酶作用下，以四種dNTP為原料，在引物的引導(dǎo)下，經(jīng)過變性（使模板DNA雙鏈解開）、退火（引物與模板結(jié)合）、延伸（合成新的DNA鏈）三個(gè)步驟的多次循環(huán)，實(shí)現(xiàn)特定DNA片段的大量擴(kuò)增。2.請(qǐng)說明引物設(shè)計(jì)的基本原則。答案：引物長(zhǎng)度一般10-20個(gè)核苷酸；GC含量適中（40%-60%）；引物特異性要強(qiáng)，避免與非目的序列結(jié)合；引物之間不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，如引物二聚體；引物的退火溫度要合適，可根據(jù)公式計(jì)算。3.簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)中出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增的原因及解決方法。答案：原因：引物特異性差、退火溫度低、模板不純等。解決方法：重新設(shè)計(jì)特異性好的引物、提高退火溫度、純化模板等。4.說明Taq酶在PCR反應(yīng)中的作用。答案：Taq酶是一種熱穩(wěn)定的DNA聚合酶。在PCR反應(yīng)中，它以dNTP為原料，按照模板DNA的序列，在引物引導(dǎo)下合成新的DNA鏈，使PCR反應(yīng)得以進(jìn)行。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論P(yáng)CR技術(shù)在新型冠狀病毒檢測(cè)中的應(yīng)用及意義。答案：應(yīng)用：可特異性擴(kuò)增新冠病毒的核酸片段用于檢測(cè)是否感染。意義：快速、靈敏地檢測(cè)病毒，有助于早期診斷，控制疫情傳播，對(duì)患者的隔離、治療以及疫情防控策略的制定有著重要意義。2.如何優(yōu)化PCR反應(yīng)體系以提高擴(kuò)增效率？答案：優(yōu)化引物設(shè)計(jì)確保特異性和合適的退火溫度；調(diào)整模板和引物濃度；選擇合適的Taq酶；優(yōu)化反應(yīng)緩沖液成分；精確控制反應(yīng)的溫度和時(shí)間等。3.請(qǐng)闡述PCR技術(shù)在遺傳病診斷方面的重要性。答案：可擴(kuò)增與遺傳病相關(guān)的基