DB32/T 4234-2022水產(chǎn)品中副溶血性弧菌檢測實(shí)時(shí)熒光重組酶介導(dǎo)鏈替換核酸擴(kuò)增法

ICS6712030

CCSB.50.

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB32/T4234—2022

水產(chǎn)品中副溶血性弧菌檢測

實(shí)時(shí)熒光重組酶介導(dǎo)鏈替換核酸擴(kuò)增法

DetectionmethodforVibrioparahaemolyticusinaquatic—

Real-timefluorescencerecombinase-aidamplification

2022-03-18發(fā)布2022-04-18實(shí)施

江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版

DB32/T4234—2022

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)提出并歸口

。

本文件起草單位南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省淡水水產(chǎn)研究所上海海關(guān)動植物與食品檢測中心南京市

:、、、

產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院廣東省科學(xué)院微生物研究所杭州傲敏生物科技有限公司

、、。

本文件主要起草人薛峰朱曉華申進(jìn)玲蔣原張馳薛亮湯芳戴建君吳清平梁瑩任建鸞

:、、、、、、、、、、、

趙凱穎張正榮

、。

Ⅰ

DB32/T4234—2022

水產(chǎn)品中副溶血性弧菌檢測

實(shí)時(shí)熒光重組酶介導(dǎo)鏈替換核酸擴(kuò)增法

1范圍

本文件規(guī)定了水產(chǎn)品中副溶血性弧菌檢測實(shí)時(shí)熒光重組酶介導(dǎo)鏈替換核酸擴(kuò)增

(recombinase-aid

法的試劑和材料儀器和設(shè)備檢測程序操作步驟結(jié)果判定和報(bào)告檢出限生物

amplification,RAA)、、、、、、

安全措施及防止污染措施

。

本文件適用于水產(chǎn)品中副溶血性弧菌檢測及快速初篩

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)副溶血性弧菌檢驗(yàn)

GB4789.7

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB19489

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學(xué)檢測

GB/T27403

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

重組酶介導(dǎo)鏈替換核酸擴(kuò)增recombinase-aidamplificationRAA

;

一種利用重組酶單鏈結(jié)合蛋白和聚合酶代替了傳統(tǒng)的熱循環(huán)解鏈過程在恒溫下一

、DNAPCR,(

般為進(jìn)行核酸擴(kuò)增的技術(shù)

37℃~42℃),。

注表示脫氧核糖核酸表示聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

:DNA,PCR。

4原理

法利用重組酶單鏈結(jié)合蛋白和聚合酶代替了傳統(tǒng)的熱循環(huán)解鏈過程根據(jù)副

RAA、DNAPCR。

溶血性弧菌的特異性基因序列結(jié)合熒光探針檢測法對水產(chǎn)養(yǎng)殖及水體中副溶血性弧菌進(jìn)行判定經(jīng)

,。

實(shí)時(shí)熒光后根據(jù)樣品在內(nèi)是否出現(xiàn)擴(kuò)增曲線可判定樣品結(jié)果

RAA,30min,。

5試劑和材料

除另有規(guī)定外試劑為分析純或生化試劑試驗(yàn)用水符合的要求所有試劑均用無

,