教材筆記-臨床檢驗基礎

教材筆記-臨床檢驗基礎

?批注

?紅色：重點

?黃色：非重點，了解

?血液樣本采集

?1、血液生理概要

?1.1血漿與血清的區(qū)別：血清缺少某些凝血因子，如凝血因子I（纖維蛋白原）、n（凝血酶

原）、V、VIII等。

?1.2血漿適用于內分泌素測定：血漿除鈣離子外（如枸椽酸鈉把鈣離子絡合掉了），含有其他

全部凝血因子，也適用于血栓及止血檢直。血清適用于臨床化學和臨床免疫學檢查。全血適用

于臨床血液學檢查,如血細胞計數(shù)、分類和形態(tài)學檢查等。

?1.3成人血量約4~5L,其中血漿占55%,血細胞占45%。女性妊娠期間血量可增加23%~25%。

?1.4血液紅色來源于血紅蛋白。嚴重貧血血液紅色變淡，嚴重一氧化碳中毒或氧化物中毒者血

液呈櫻紅色。

?1.5正常人血液pH值7.35-7.45,動脈血pH7.40,靜尿血pH7.35o血漿滲透壓：正常人

290~310mOsm/（kg.H20）。

?1.6紅細胞呈均勻混懸狀態(tài)與唾液酸根、正常血漿成分、血漿黏度及血液動力學等因素有關。

血漿黏度受血漿中纖維蛋白原、球蛋白等大分子蛋白質的影響，濃度越高，血漿黏度越高。

?1-7血液生理功能：運輸功能、協(xié)調功能、維護機體內環(huán)境穩(wěn)定和防御功能。

?2、采血方法

?2.1采血部位多為體表淺靜脈。

?2.2皮膚采血法又稱為毛細血管采血法，含細胞間質和細胞內液。WH。推薦采血部位為左手無

名才旨指端內側。嬰幼兒可采集足跟等。

?2.3耳垂采血結果不夠恒定（紅細胞、白細胞、血紅蛋白和血細胞比容〔壓積〕等測定結果比

手指血或靜脈血高。）

?2.4手指采血第一滴血混有組織液,應拭去。采血順序依次為血小板計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅

蛋白測定、白細胞”數(shù)、血型鑒定等。

?2.5紫色（EDTA）用于全血細胞計數(shù)、淺藍色（枸椽酸鈉9:1）用于凝血檢查。黑色（絕緣酸

鈉4:1）用于血沉檢查。

?2.6皮膚采血結果重復性差、準確性不好。靜脈采血封用采血，有利于樣本采集運送和保存、

防止院內血源性傳染病。

?3、質量控制

?3.1止血帶結扎時間應小于lmin。

?3.2溶血：容器不潔、接觸水、震蕩等。使紅細胞計數(shù)、比容、血漿或血清化學成分（如鉀、

鎂、轉氨酶、膽紅素）等多項指標結果發(fā)生變化。

?3.3及時送檢；考慮藥物之間影響等。

?4、抗凝劑選擇

?4.1乙二胺四乙酸（EDTA）鹽：能與鈣離子結合成螯合物，使Ca離子失去凝血作用，阻止血

液凝固。EDTA對血細胞形態(tài)、血小板計數(shù)影響很小，適用于血液學檢查，尤其是血小板計數(shù)。

ICSH建議，CBC（全血檢查）抗凝劑用EDTA-K2-2H2O,量為1.5~2.2mg/ml血液。不適用

于凝血檢查、血小板功能試驗。

?4.2草酸鹽:不適合凝血項檢查。

?4.3雙草酸鹽抗凝劑：可使血小板聚集，影響白細胞形態(tài)，不適用于血小板計數(shù)、白細胞分類

計數(shù)。

?4.4肝素：力口強抗凝血酶（AT）滅活絲氨酸蛋白酶，阻止凝血酶形成，阻止血小板聚集作用。

肝素可引起白細胞聚集，是瑞氏染色背景變藍，不適告CBC、形態(tài)學檢杳。

?4.5枸椽酸鈉：與鈣離子結合形成螯合物。1:9混合測凝血,1:4測血沉,還是輸血保養(yǎng)液的成

分。

?血涂片的制備

?L血涂片的制備

?1.1手工推片法：推片與載玻片保持25?30度夾角。厚薄與血滴大小、夾角、速度、比容有關。

?2、血液細胞染色

?2.1瑞氏染料

?2.1.1材料：由酸性伊紅（E-）和堿性亞甲藍（M+）組成，溶于甲醇之中。

?2.1.2甲醇作用：①溶解伊紅和亞甲藍。②固定細胞形態(tài)。

?2.1.3原理：物理吸附作用和化學親和作用。血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質，與伊紅

結合染成粉紅色。細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜堿性粒細胞胞質為酸性，與亞甲藍結合染成

藍色。

?2.2pH值的影響

?2.2.1在偏酸性的環(huán)境中正電荷增多，易與伊紅結合，紅細胞和嗜酸性粒細胞染色偏紅，細

胞核呈淡藍色或不染色。

?2.2.2在偏堿性的環(huán)境中負電荷增多，易與美藍結合，所有細胞呈灰藍色，顆粒呈深暗，嗜

酸性顆粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性顆粒偏粗，呈紫黑色。

?2.3沖洗以流水沖洗,不能先倒掉染液，沖洗時間不能過久，以防脫色。染料顆粒沉積可滴加

甲醇。染色過淡可以復染，復染先加緩沖液再加染液。

?3、方法學評價

?3.1血涂片制備：手工法需要血量少，操作簡單。此外，瘧原蟲、微絲坳可用厚血膜涂片法。

?3.2染色

?3.2.1瑞氏染色法：最經(jīng)典、最常用的染色法。

?3.2.2吉姆薩染液：對細胞核、寄生蟲著色好，結構清晰。

?3.2.3瑞氏-吉姆薩復合染液:使胞質、胞核、顆粒均獲得滿意染色效果。

?4、質量控制

?4.1血細胞比容增高、血液黏度大時，應采用小血滴、小角度、慢推；血細胞比容減低、血液

較稀時，應采用大血滴、大角度、快推。

?4.2染色深淺與血涂片細胞數(shù)量、厚度、時間、染液濃度、pH值密切相關。

?紅細胞檢查

?1、概要

?1.1晚幼紅細胞通過脫核成為網(wǎng)織紅細胞，這一過程在骨髓中進行,約72h。

?1.2紅細胞平均壽命約120d,衰老細胞在脾破壞，分解為鐵、珠蛋白和膽紅素。

?2,血紅蛋白（Hh）

?2.1血紅蛋白分子由色素部分（亞鐵血紅素）和蛋白質部分（珠蛋白）組成。

?2.299%的鐵原子呈F1+狀態(tài)（還原Hb）,1%為高鐵血紅蛋白。只有Fe?+狀態(tài)的Hb才能

與氧結合,稱為氧合血紅蛋白。

?2.3血紅蛋白的合成受激素的調節(jié)：

?①紅細胞生成素（促進5-氨基，酮戊酸生成和鐵的利用，從而促進血紅素Hb的合成）

?②雄激素（促進S-MM-Y酮戊酸合成酶、紅細胞生成素的生成）

?2.4在人體生長各期，Hb種類與比例不同。

?2.4.1妊娠第8周，丫鏈合成最高峰,形成HbA（0（202）。

?2.4.2出生后3個月,HbA逐步占總量95%以上，成人后98%以上。

?2.4.3出生后HbA2（a2S2）占Hb總量的2%~3%。

?2.5血紅蛋白測定

?2.5.1原理：血液中血紅蛋白以各種形式存在，包括氧合血紅蛋白、碳氧血紅蛋白、高鐵血

紅蛋白或其他衍生吻。HICN測定法不能測定硫化血紅蛋白（SHb）,540nm處有吸收峰。

?2.5.2方法學評價

?HICN法為ICSH推薦參考方法。

?SDS法：無公害。

?多參數(shù)血細胞分析儀：精確1%。

?2.5.3質量控制

?①樣本：高蛋白質、高血脂、白細胞計數(shù)大于30xl0*9/L,干擾Hb測定。

?②采血部位：靜脈血比毛細血管血低10%~15%e

?2.5.4參考值

?成年男性：120?170g/L

?成年女性：110~150g/L

?2.5.5生理性變化：與紅細胞相似。上午七點為高峰，隨后下降。

?2.5.6病理性變化：和紅細胞相似。

?血紅蛋白和紅細胞濃度不一定正確反應全身紅細胞的總容量，和血液濃度有關（輸液后、

失水后都不準）。

?發(fā)生大細胞性貧血（Hb濃度相對偏高）或小細胞低色素性貧血（Hb減低,紅細胞計

數(shù)正常）時，紅細胞計數(shù)與血紅蛋白濃度不成比例。

?3、紅細胞計數(shù)（RBC）

?3.1手工法誤差原因：

?①樣本：血液發(fā)生凝固。

?②操作：稀釋、充池、計數(shù)不規(guī)范。

?③器材：微量吸管、計數(shù)板不標準。

?④固有誤差（計數(shù)域誤差）：本身細胞分布不均。

?3.2血液分析儀法：電阻抗計數(shù)法變異系數(shù)為2%,手工法則大于11%。

?3.3參考值：

?成年男性：（4~5.5）xlOWL

?成年女性：（3.5~5.0）X1012/L

?新生兒：（6.0~7.0）X1012/L

?3.4生理性變化

?①新生兒由于出生前生理性缺氧，故紅細胞明顯增高，較成人約增加35%,出生后逐漸下

降，2個月嬰兒約減少30%。

?②精神因素：興奮、恐懼等。

?③劇烈運動。

?④氣壓：高原性地帶，因缺氧紅細胞代償性增生。

?⑤妊娠：孕婦血漿容量明顯增加使血液稀釋，導致紅細胞減少。

?3.5病理性減少

?①紅細胞丟失過多

?②紅細胞壽命縮短（各種溶血）

?③生成減少（造血原料不足）

?④生成減少（骨髓造血功能減退）

?3.6紅細胞增多

?①原發(fā)性增多：真性紅細胞增多癥

?②繼發(fā)性增多：缺氧（先天性心血管疾病、慢阻肺）

?③相對性增多：血液的濃縮（嘔吐、腹瀉、大面積燒傷、消化道腫瘤晚期）

?3.7操作方法

?3.7.1牛鮑計數(shù)板每個大方格面積l.Omm?,容積為O.lmrrP（ul）

?3.7.2大方格邊長誤差不超過1%,蓋玻片深度誤差不超過2%

?3.7.3蓋玻片規(guī)格24mmx20mmx0.6mm

?3.7.4高倍鏡計數(shù)中央大方格內4角和正中5個中方格內的紅細胞。

?3.7.5兩次紅細胞計數(shù)相差不得超過5%,每個中方格相差不得超過20個。

?4、紅細胞形態(tài)檢查

?4.1正常形態(tài)：雙凹圓盤形、大小一致、平均直徑7.2um、淡粉紅色、1/3中央淡然區(qū)。

?4.2異常形態(tài)

?4.2.1大小異常

?①小紅細胞：直徑＜6um,見于缺鐵貧、珠蛋白生成障礙性貧血、遺傳性球細胞增多

癥。

?②大紅細胞：直徑＞10um,見于巨幼貧、溶血貧、惡性貧。

?③巨紅細胞：直徑＞15um,見于葉酸及bl2缺乏導致的巨幼貧。

?@大小不均：直徑相差一倍以上,見于嚴重增生性貧血。

?4.2.2色素異常

?①低色素性：淡然區(qū)擴大，成為環(huán)形紅細胞。見于缺鐵貧、珠障貧、鐵粒幼貧。

?②高色素性：淡然區(qū)消失，見于巨幼貧。

?③多色性：同一細胞不同顏色，正常人占1%左右。見于溶血貧、急性失血。

?④細胞著色不一：同一涂片不同細胞出現(xiàn)低色素、正常色素性兩種細胞，又稱雙形性

貧血，見于鐵粒幼貧。

?4.2.3形態(tài)異常

?①球形紅細胞：中央著色深，體積小。見于球形細胞增多癥。

?②橢圓形紅細胞：見于橢圓形細胞增多癥。正常人約占1%,不能超過15%。

?③靶形紅細胞：中央染色較深，見于各種低色素性貧血（珠障貧、HbC?。?/p>

?④口形紅細胞：中央有裂轉，見于口形紅細胞增多癥，正常人＜4%。

?⑤鐮形紅細胞：鐮刀狀、線條狀，含有異常血紅蛋白So見于鐮狀細胞貧血。

?⑥棘紅細胞：表面有針狀突起，見于小脂蛋白缺乏癥（高達70%~80%）.

?⑦裂紅細胞：為紅細胞碎片，見于彌漫性血管內凝血（DIC）。

?⑧緡錢狀紅細胞：紅細胞相互連接如緡錢狀，見于多發(fā)性骨髓瘤（球蛋白增多）。

?⑨有核紅細胞：除1周內嬰兒外，見于溶血貧、骨髓異常增生綜合征（MDS）、各種

白血病、骨髓纖維化。

?⑩淚滴形紅細胞：見于骨髓纖維化。

?4.2.4結構異常

?①嗜堿性點彩紅細胞：瑞氏染色后有形態(tài)不一的藍色顆粒（變性RNA）,見于鉛中毒。

?②豪焦小體：紫紅色圓形小體，臨床意義和卡波環(huán)類似。

?③卡波環(huán)：環(huán)形、8字形，常與豪焦小體一塊出現(xiàn)。見于骨髓增生旺盛（白血病、巨

幼貧、增生貧）、鉛中毒、脾切除。

?@寄生蟲：微絲坳、瘧原蟲等。

?5、血細胞比容（壓積）測定

?5.1臨床意義

?增高：血液濃縮（嘔吐、失水、燒傷）

?減低：各種貧血

?是臨床輸血、輸液療效觀察中國示。

?作為MCV、MCH、MCHC計算的基礎數(shù)據(jù)。

?5.2操作方法（溫氏法）

?離心后分為5層，臺上而下順序為血漿層、血小板層、白細胞與有核紅層、還原紅細胞層

（紫黑紅色）、帶氧紅細胞層（鮮紅色）o讀數(shù)讀還原紅細胞層x0.01。

?6、紅細胞平均指數(shù)

?貧血的紅細胞形態(tài)學分類（鐵粒幼貧、珠障貧都屬于第四種）

貧血分類MCVMCHMCHC貧血

再障貧、失血

正細胞貧血正常正常正常

貧、溶血貧

造血物質缺乏

大細胞貧血增高增高正?；蚶貌涣家?/p>

起的巨幼貧

慢性感染、慢

單純小細胞貧血減低減低正常

性肝腎疾病

缺鐵貧、失血

小細胞低色素貧血減低減低減低貧、鐵利用不

良貧血

?7、紅細胞體積分布寬度（RDW）

?貧血的MCV、RDW分類

MCVRDW貧血類型常見病因和疾病

單純雜合子珠蛋白生成障礙性貧

減少正常小細胞均一性

血、某些繼發(fā)性貧血

小細胞不均一缺鐵貧、珠蛋白生成障礙性貧

減少增大B

性貧血血、HbH病

正常體積均一再障貧、白血病、慢性肝腎疾病、

正常正常

性急性失血

混合型營養(yǎng)性缺乏性貧血、部分早

正常體積不均

正常增大期鐵缺乏、血紅蛋白病性貧血、骨

一性

髓纖維化、鐵粒幼貧

骨髓增生異常綜合征、部分再障

增大正常大細胞均一性

貧、肝腎疾病貧血

大細胞不均一

增大增大巨幼貧、肝病貧血

性

?RDW對缺鐵貧診斷靈敏度達95%,特異性不高，可作為篩查指標。

?8、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)（Ret）

?8.1質量控制

?豪焦小體、有核紅、巨大血4■會使結果假陽性增高。

?8.2臨床意義

?①反應骨髓造血功能的重要指標。增多見于溶血貧、放療化療后。減少見于再障貧。

?②正常情況下in型占20%~30%,IV型占70%~80%,若骨髓增生明顯，可出現(xiàn)I、II

型。

?③觀察貧血療效：給予鐵劑或維生素bl2、葉酸治療3~5天后,ret開始上升，7~10天

高峰。

?④骨髓移植后檢測：移植后第21d,Ret大于15xlO*9/L,表示無并發(fā)癥；小于

15xlO*9/L,同時伴有中性粒和血4地增高，則可能移植失敗。

?8.3WHO推薦新亞甲藍染液，染液：血液=1:1為宜。

?8.4ICSH推薦用Mille＜窺盤,其精度cv約為10%。

?9、點彩紅細胞計數(shù)

?9.1染色

?堿性亞甲藍染色顆粒呈深藍色

?瑞氏染色顆粒呈藍黑色

?9.2臨床意義

?增高：各類中毒、各類增生性貧血（除再障貧之外的貧血）?！疽驗辄c彩紅是幼稚細胞，

肯定不能是增生性的】

?10、紅細胞沉降率測定（血沉：ESR）

?10.1分期

?①緡錢狀紅細胞生成期：約lOmin

?②快速沉降期：等速下降，約40min

?③細胞堆積期（緩慢沉降期）：約lOmin

?10.2方法學評價

?手工法：魏氏法為ICSH推薦法

?血沉儀法：時間短、重復性好、不受溫度影響。

?10.3質量控制

?ru血漿中各種蛋白比例：大分子蛋白（纖維蛋白原、急性反應蛋白、免疫球蛋白、膽固

醇、甘油三酯等）使血沉加快。小分子蛋白（清（白）蛋白、軟磷脂）使血沉減慢。

?F2J紅細胞數(shù)量和形狀：紅細胞數(shù)量少血沉加快數(shù)量太少減慢；紅細胞直徑越大，血沉

越快。

?F3J血沉管傾斜3度，沉降率增加30%。

?F4J溫度高血沉快，溫度低血沉慢。

?10.4臨床意義

?生理性增快：女性高于男性、妊娠血沉快、老年人血沉快。

?病理性增快：各種炎癥（出現(xiàn)大分子蛋白，活動期血沉加快，病情好轉血沉減慢，非活動

期血沉正常）、組織損傷及壞死（手術、心梗等）、惡性腫瘤、高I求蛋白血癥（動脈粥樣

硬化等）。

?血沉減慢：DIC消耗性彳氐凝血期、真性紅細胞增多癥。

?白細胞檢查

?1、概要

?1.1粒細胞

粒細胞起源于造血干細胞，增殖發(fā)育約需

?1.1.110do

?1.1.2成熟粒細胞進入血液中約存6~10h,然后進入組織或體腔內。

?1.13粒細胞在組織中可行使防御功能1~2d,正常情況下，每小時進行更新的粒細胞約有

10%。

?1.1.4根據(jù)粒細胞群發(fā)育階段，人為地分為分裂池、成熟池、貯備池、循環(huán)池和邊緣池等

（順序不能顛倒）。

?①分裂池（骨髓）：具有分裂能力。

?②成熟池（骨髓）：晚幼粒和桿狀核粒細胞，失去分裂能力。

?③貯備池（骨髓）：桿狀核和分葉核粒細胞，成熟粒細胞貯存于骨髓，在貯售池中停

留3~5d,數(shù)量為外周血5~20倍。

?④循環(huán)池（外周血）：成熟粒細胞一半隨血液循環(huán)，白細胞計數(shù)就是計數(shù)的循環(huán)池。

?⑤邊緣池（外周血）：進入外周血的成熟粒細胞另一半進入邊緣池，粘附于靜脈血管

壁。循環(huán)池和邊緣池保持動態(tài)平衡。

?1.1.5中性粒細胞具有趨化、邊形、粘附作用以及吞噬、殺菌作用。

?1.2單核細胞

?1.2.1單核細胞大部分粘附于血管壁，少數(shù)隨血液循環(huán)，在血中停留3~6d后即進入組織或

體腔內，轉變?yōu)橥淌杉毎?，壽命可達2~3個月。

?172單核-巨噬細胞具有吞噬病原體功能（病毒細菌）、吞噬和清理功能（衰老細胞、凝

血因子、抗原抗體復合物）、吞噬抗原傳遞免疫信息功能，還參與殺菌、免疫和抗腫瘤作

用。

?13淋巴細胞

?13.1淋巴細胞起源于造血干細胞，分為B淋巴細胞和T淋巴細胞。

?L3.2B淋巴細胞占淋巴細胞總數(shù)20%~30%,經(jīng)過抗原刺激分化為漿細胞，產(chǎn)生特異性抗

體，參與體液免疫。

?1.3.3T淋巴細胞在胸腺中成熟，占淋巴細胞總數(shù)60%?70%,壽命很長，數(shù)月至數(shù)年。被

抗原致敏后產(chǎn)生免疫活性物質，參與細胞免疫。

?13.4此外還有少數(shù)NK細胞、N細胞、D細胞。

?2、白細胞計數(shù)

?2.1方法學評價

?血液分析儀法某些人為因素（抗凝不佳、病理情況如有核紅、巨大血小板、血小板聚集等）

可干擾白細胞計數(shù)

?人工法屬于參考方法

?2.2質量控制

?①與紅細胞比較：正常情況下紅細胞:白細胞:（500-1000）

?②與血涂片白細胞分布密度一致。

血涂片上WBCWBC(X10*9/

數(shù)/HPL)

2?44?7

4-67-9

6~1010-12

10-1213?18

?2.3參考值

?成人:(4-10)xlO*9/L

?新生兒：(15~20)xl0*9/L

?3、白細胞分類計數(shù)

?3.1方法學評價

?顯微鏡分類法是白細胞分類計數(shù)參考方法。

?血液分析儀分類法是白細胞分類和篩查首選方法，但不能完全替代顯微鏡。

?3.2質量控制

?3.2.1影響分類計數(shù)準確性的因素：

?@細胞分布不溝：尾部中性粒多、淋巴少；單核均勻分布；幼稚細胞在尾部和邊緣；

淋巴和嗜堿性粒細胞在頭部和體部。"城垛"5c移動可減少差異。

?②細胞辯識能力差異：桿狀核和分葉核診斷標準；單核細胞與大淋巴細胞鑒別差異；

染色較差的圖片嗜堿粒和中性粒難以區(qū)分。

?3.2.2影響分類計數(shù)精確性因素：

?白細胞總數(shù)與分類計數(shù)數(shù)目的關系

白細胞總數(shù)(X1應分類計數(shù)數(shù)

0*9/L)目

<450-100

4-10100

10-20200

20-30300

>30400

?3.3參考范圍

?中性粒細胞占白細胞總數(shù)50%~75%

?淋巴細胞占白細胞總數(shù)20%~40%

?3.4臨床意義

?3.4.1中性粒細胞

?生理性增多：

?①年齡變化：新生兒白細胞較高，3個月降至成人水平。嬰兒期以淋巴細咆數(shù)為主

(可達70%),2~3歲后淋巴細胞逐漸減低，中性粒細胞逐漸增高，4~5歲兩者基本

相等。

?②日間變化：白細胞早晨較低下午較高。一日內最高值和最低值可相差1倍。

?③運動、情緒、疼痛等。

?④妊娠超過5個月白細胞可達15x10*9/1以上。

?⑤其他：抽煙等。

?病理性增多：

?①反應性增多：急性感染和炎癥、組織損傷和壞死、中毒和惡性腫瘤。

?②異常增生性增多：見于粒細胞白血病和骨髓增生性疾?。ㄕ婕t增多癥、骨髓纖維

化等）

?中性粒細胞減低：

?①當中性粒細胞絕對值低于1.5xlO*9/L時,稱為粒細胞減低癥。當中性過細胞絕

對值低于C.5xlO*9/L時，稱為粒細胞缺乏癥。

?②見于某些感染（傷寒、流感等。）

?③血液?。涸僬县殹⑸贁?shù)急性白血?。?/p>

?④慢性理化損傷（X輻射等）

?⑤自身免疫性病（系統(tǒng)性紅斑狼瘡等）

?⑥脾功能亢進（門脈性肝硬化等）

?中性粒細胞核象改變

?正常情況下，外周血中性粒細胞以3葉核居多，桿狀核與分葉核比值為1:13

?核左移：外周血中桿狀核粒細胞增多或（和）出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細胞

時（＞5%輕度、＞10%中度、＞25%重度）稱為核左移。

?再生性左移：指核左移伴有白細胞總數(shù)增高者，表示機體反應性強，骨髓造血

功能旺盛,見于感染（化膿性）、中毒、溶血、失血等。

?退行性左移：指核左移而白細胞總數(shù)不增高甚至減低者，見于再生障礙性貧血、

粒細胞減低癥、嚴重感染等。

?核右移：中性粒細胞核分葉5葉以上者超過3%則為核右移，常伴白細胞總數(shù)減低。

為造血物質缺乏骨髓造血功能減退導致。見于巨幼貧、惡性貧血等。

?3.4.2淋巴細胞

?增多：見于病言性感染病（風疹、腮腺炎等）、慢性感染（結核）、淋巴性白血病、移

植、再障貧、粒細胞缺乏癥。

?減低：臨床見于放化療。

?3.4.3單核細胞

?生理性增多：兒童外周血單核細胞較成人稍多，平均為9%。出生2周嬰兒可達15%

或更多。

?病理性增多：感染（急性感染恢復期）

?3.4.4嗜酸性粒細胞（占白細胞總數(shù)1%~5%）

?生理變化

?①日間變化：白天低,夜間高；上午波動大,下午恒定，與糖皮質激素分泌有關。

?②勞動、寒冷、饑餓等降＜氐。

?病理性增多（外周血＞0.5xl0*9/L）:

?①寄生蟲病

?②變態(tài)反應性疾病

?③皮膚病

?④血液病：慢性粒細胞白血病等

?⑤某些惡恒中瘤：肺癌等

?⑥某些傳染病

?⑦其他、高嗜酸性粒細胞綜合征

?病理性減少

?①傷寒

?其他應用：

?①觀察急性傳染病、手術、燒傷的預后：腎上腺皮質有促進機體抗感染的能力,當

急性感染如傷寒時，腎上腺皮質激素分泌增高，嗜酸性粒細胞減低，疾病恢復期時

嗜酸性粒細胞又增多。

?②測定腎二腺皮質功能

?正常情況下，注射ACTH（促..）或腎上腺素后，嗜酸性粒細胞比注射前應低

50%以上。

?4、白細胞形態(tài)檢查

?4.1顆粒

?中性粒細胞：量多、細小、均勻、淺紫紅色

?嗜酸性粒細胞：粗大、均勻、鮮橘紅色

?嗜堿性粒細胞：最少、不均、藍黑色、常覆在核上

?淋巴細胞：小淋巴無顆粒、大淋巴顆粒量少、粗大、不均、淺紫紅色

?單核細胞：最多、細小、灰塵樣彌漫分布胞質中、紫紅色

?4.2中性粒細胞

?4.2.1毒性變彳匕：

?①大小不均

?②中毒顆粒：比正常中性粒細胞粗大、大小不等、分布不均勻、染色較深,呈黑色或

紫黑色。

?③Dohle小體：是中性粒細胞胞質因中毒性變而保留的嗜堿性區(qū)域，呈圓形、梨形、

云霧狀，界限大清，灰藍色。

?@退行性變：胞體腫大、結構模糊、邊緣不清晰、核固縮、核腫脹、核溶解

?⑤空泡

?臨床意義：與核左移類似。

?4.2.2巨多分葉核口性粒細胞：核分葉常在5葉以上，臨床意義見于巨幼貧，與核右移類似。

?4.2.3棒狀小體（Auer）:細胞質中出現(xiàn)呈紫紅色細桿狀物質一條或多條，見于急性白血病，

尤其是顆粒增多型早幼粒細胞白血病。（急性非淋巴白血病癥狀）

?4.2.4Pelger-Huet畸形：腎形、啞鈴形

?4.2.5Chediak-Higashi畸形：紫藍色

?4.2.6Alser-Reilly畸形

?4.2.7May-Hegglin畸形

?4.3淋巴細胞

?4.3.1異型淋巴細胞（胞體都不規(guī)則、染色深藍，正常淋巴是偏藍）

?分型

?I型（空泡型）：包漿有空泡、泡沫狀

?II型（不規(guī)則型）：胞體大、外觀不規(guī)則、可有多個偽足

?III型（幼稚型）：有核仁

?臨床意義

?診斷傳染性單核細胞增多癥（＞10%）

?4.3.2衛(wèi)星核淋巴細胞：胞質中主核旁出現(xiàn)小核，見于放射線損傷。

?4.4漿細胞

?形態(tài)：核偏位、車輪狀，包漿灰藍色、泡沫狀空泡。

?臨床意義：外周血出現(xiàn)漿細胞，見于傳染性單核細胞增多癥、流行性出血熱、弓形體病、

梅毒、結核病等。

?血液分析儀及其臨床應用

?L電阻抗法血細胞計數(shù)原理（庫爾特原理）：

?將等滲電解質溶液稀釋的細胞懸液置入不導電的容器中，將小孔管（傳感器）插進細胞懸液中，

小孔管內充滿電解質溶液，并有一個內電極，小孔管的外側細胞懸液中有一個外電機。當接通

電源后，位于小孔管兩側的電極產(chǎn)生穩(wěn)定電流，稀釋細胞懸液從小孔管夕M則通過小孔管壁上寶

石小孔（直徑＜100um,厚度約75um）向小孔管內流動，是小孔感應區(qū)內電阻增高，弓I起瞬

間電壓變化形成脈沖信號，脈沖振幅越高細胞體積越大，脈沖數(shù)量越多細胞數(shù)量越多，由此得

出血液中血細胞數(shù)量和體積值。

?2、白細胞分類計數(shù)原理

?2.1三分群：根據(jù)電阻抗原理，將體積為35~450fl的白細胞分為256個通道。

?35~90fl小細胞區(qū)：淋F,細胞等

?90~160fl中間型細胞區(qū)：單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、原始細胞、幼稚細胞

等

?>160fl大細胞區(qū)：中性粒細胞等

?2.2五分類計數(shù)原理（VCS）

?2.2.1利用電阻抗法原理測量細胞體積（V）

?2.2.2利用電導（C）技術測量細胞內部結構：

?利用高頻電磁探針測量細胞內部結構，根據(jù)細胞核和細胞質比例、細胞內顆粒大小和空

度來識別體積相同，但性質不同的兩類細胞群體，如小淋巴細胞和嗜堿性粒細胞。

?2.2.3利用光散射（S）技術測量細胞形態(tài)和核結構：

?利用激光照射進入計數(shù)區(qū)的每個細胞，根據(jù)散射光角度（10。~70。）的不同提哄每個細

胞形態(tài)核結構信息來鑒別中性粒細胞、堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞。

?3、白細胞直方圖

?3.1正常白細胞直方圖，在35~450fl范圍內將白細胞分為3群，左側峰又高又陡為淋巴細胞

峰，最右側峰又低又寬為中性粒細胞峰，左石兩峰間的谷區(qū)較平坦為單核細胞峰。

?3.2白細胞直方圖變化的部分原因

?淋巴細胞峰左側異常：有核紅細胞、血小板聚集、巨大血小板、未溶解紅細胞、瘧原蟲、

冷凝集蛋白、脂類顆粒、異形淋巴細胞

?淋巴細胞峰右移，與單個核細胞峰左側相連并抬高：急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞

白血病、異型淋巴細胞

?單個核細胞峰抬高增寬：原始或幼稚細胞、漿細胞、嗜酸性粒細胞增多、嗜堿性粒細胞增

多、單核細胞增多

?單個核細胞峰與中性粒細胞峰之間異常：未成熟的中性粒細胞、異常細胞亞群、嗜酸性粒

細胞增多

?中性粒細胞峰右移、抬高、增寬：中性粒細胞絕對值增多

?直方圖多區(qū)異常：以上多種原因引起

?4、紅細胞直方圖

?4.1正常纖細胞百方圖

?在36?360FL范圍內分布兩個細胞群體，從50~125FL區(qū)域有一個兩側對稱、較狹窄的

曲線為正常大小的紅細胞，從125~200FL區(qū)域有另一個低而寬的曲線，為大紅細胞、網(wǎng)

織紅細胞、當紅細胞體積大小發(fā)生變化時，峰可左移或右移，或出現(xiàn)雙峰。

?4.2紅細胞直方圖在貧血中的應用

?①小細胞性貧血

?（1）RDW正常：紅細胞主峰左移，分布在55~100FL,波峰在75FL處，基底較窄，

為小細胞低色素均一性圖形，見于輕型地中海貧血。

?(2)RDW輕度增高：紅細胞主峰左移，分布在55~100FL,波峰在65fifth,為小細

胞低色素和細胞不均一性圖形，見于缺鐵性貧血。

?(3)RDW明顯增高：紅細胞顯示雙峰，小細胞峰明顯左移，波峰在50FL處，大細

胞峰頂在90FL處，基底較寬，為小細胞低色素不均一性圖形，見于鐵粒幼細胞性貧血、

缺鐵性貧血治療有效時。

?②大細胞性貧血

?(1)RDW正常：紅細胞主峰右移，分布在75~130FL,波峰在100FL處，為大細

胞性圖形，見于溶血性貧血，白血病前期，再生障礙性貧血，巨幼細胞性貧血，

?(2)RDW輕度增高：紅細胞峰右移，基底增寬,分布在75~150FL,波峰在105FL

處，為大細胞大均一性圖形，見于巨幼細胞性貧血。

?(3)RDW明顯增高：紅細胞峰右移，出現(xiàn)雙峰，以100FL處峰為主,為大細胞不均

一性圖形，見于巨幼細胞性貧血治療初期。

?③正細胞貧血

?(1)RDW正常：紅細胞分布在55~110fl,波峰在88fl處,為正常紅細胞圖形，見

于慢性病貧血、急性失血、骨髓纖維化、骨髓發(fā)育不良。

?(2)RDW輕度增高：紅細胞分布在44~120FL,波峰在80FL處，為紅細胞不均一

性圖形，見于血紅蛋白異常、骨髓纖維化。

?(3)RDW明顯增高：紅細胞分布在40~150FL,波峰在90FL處，為紅細胞不均一

性圖形，見于旦期或混合性營養(yǎng)不良。

?5、血小板直方圖

?5.1在2~30FL范圍內分布，呈左偏態(tài)分布，集中分布于2~15FL內。當有大血小板或小纖細

胞、聚集血〃液時，直方圖顯示異常

?6、血小板分布寬度(PDW)

?PDW增大：鑒于急性白血病化療后，巨幼細胞性貧血，慢性粒細胞白血病，脾切除后，巨大

血4瀛綜合征，血栓性疾病，原發(fā)性血〃誠增多癥，再生障礙性貧血；

?PDW減低：見于反應性血小板增多癥。

?7、低熒光強度網(wǎng)織紅細胞百分率(LFR)和高熒光強度網(wǎng)織紅細胞百分率(HFR)[I型和II型屬

于HFRJII型JV型屬于LFR]

?骨髓移植：網(wǎng)織紅細胞計數(shù)是監(jiān)測骨髓造血恢復的重要參數(shù)，通常移植成功后網(wǎng)織紅細胞比白

細胞提前3~4天增高，HFR增高提示有較多未成熟細胞從骨髓進入外周血，故HFR變化比網(wǎng)織

紅細胞計數(shù)變化具有更重要意義。

?貧血：溶血性貧血時Ret、LFR、HFR明顯增高；腎性貧血時HFR上升、LFR下降Ret正常。

?放化療：長期化療導致網(wǎng)織紅細胞亞群發(fā)生變化HFR、MFR減低早于LFR骨髓恢復的HFR、

MFR又迅速上升。

?8、網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)(RMI)

?RMI增高：見于溶血性貧血、特發(fā)性血〃滁減少性紫癲（ITP）、慢性淋巴細胞白血病（CLL）、

急性白血病、真性紅細增多癥、再生障礙性貧血、多發(fā)性骨髓瘤。

?RMI減低：提示骨髓衰竭和造血無效，見于巨幼細胞性貧血。

?血型與輸血

?紅細胞ABO血型系統(tǒng)

?1、概述

?1.1.ABO抗原的遺傳位點在第9號染色體的長臂3區(qū)4帶，顯性基因A、B,隱形基因O。

6種基因型：00、AA、AO、BB、BO、AB;4種表現(xiàn)型：A、B、0、AB。

?1.2、5~6周胎兒紇細胞已可測出ABH抗原。新生兒A、B抗原位點較成人少，一般在生

后18個月時才能充分表現(xiàn)出抗原性，但抗原性也僅為成人的20%。此外abh抗原頻率亦

隨種族而不同。所謂h抗原是形成AB抗原的結構基礎。

?13、ABH血型特異物質存在于唾液（含量最豐富）、尿、淚液、胃液、膽汁、羊水、血清、

精液、汗液、乳汁等體液中，但不存在于腦積液。這些可溶性抗原又被稱為血型物質。

?1.4、血型物質意義

?①測定唾液血型物質可輔助鑒定血型。

?②中和AB0血型系統(tǒng)中的"天然抗體”有助于檢查免疫性抗體，鑒別抗體的性質。

?③檢查羊水可頊測胎兒AB0血型等。

?2、AB0系統(tǒng)抗體（新生兒抗體不全，反定型沒用。）

?2.1類型

?天然抗體（完全抗體、鹽水抗體）：在沒有可察覺的抗原刺激下而產(chǎn)生的抗體，

?以IgM為主。

?免疫性抗體

?IgM

?igG（主要）

?IgA

?2.2抗A和抗B可以是任意抗體，但主要是IgM,而。型血清中以IgG為主。

?2.3天然抗體和免疫抗體的區(qū)別：

?①天然抗體能被血型物質中和，而免疫性抗體則不能。

?②天然抗體在鹽水中能與相應紅細胞發(fā)生肉眼可見凝集，而免疫性抗體則不能。

?③天然抗體不能通過胎盤，而免疫性抗體則頻過胎盤。

?3、AB0血型系統(tǒng)的亞型

?A亞型：最多見，主要有A1和A2,占全部血型的99.9%，其他A亞型（A3、Ax、Am）

為少數(shù)。

?B亞型（B3、Bm、Bx）:比A亞型少見，臨床意義不大。

?3.1Al、A2亞型鑒定方法

?作ABO血型鑒定時應加入0型血清，以防止亞型誤定型。

?A1亞型的紅細^上具有A1和A抗原，其血清中含有抗B抗體;

?A2亞型紅細胞上只有A抗原，其血清中含有抗B抗體、抗A1抗體。

抗-A（8型人血清）

血型抗原

抗-A抗-A1

A1A、A1++

A2A+-

?3.2Al、A2亞型鑒定的意義

?防止誤定亞型

?4、ABO血型鑒定

?4.1鹽水凝集法

?4.1.1分類

?正向定型：用已知抗體的標準血清檢查紅細胞上未知的抗原。（抗體找抗原）

?反向定型：用已知血型的標準紅細胞檢查血清中未知的抗體。（抗原找抗體）

?4.1.2方法

?試管法

?玻片法

?4.1.3方法學評價

?①玻片法：操作簡單，適用于大量標本檢查，但反應時間長。

?②試管法：適用于急診檢查。

?4.1.4玻片法凝集結果判斷

一片或幾片凝

++++

集

數(shù)個大顆粒狀+++

小凝集顆粒與

++

1/2

細沙狀，每個

凝集團中有5~+

8個以上紅細胞

數(shù)個紅細胞凝±

集

極少數(shù)凝集，

混合凝集外觀

大多數(shù)分布

無凝集一

?4.2凝膠微柱法

?在凝膠微柱介質中發(fā)生凝集反應，血型抗體為單克隆抗體。

?5、質量控制

?5.1抗A、抗B和抗AB標準血清條件：

?①均采自健康人。

?②特異性：只能與相應的紅細胞抗原發(fā)生凝集，無^特異性凝集。

?③效價：我國蘇準抗a和抗b血清效價均在1:128以上。

?④親和力：我國標準要求抗a對al、a2及a2b發(fā)生反應開始出現(xiàn)凝集的時間分別為

15秒、30秒和45秒；抗B對B型紅細胞開始出現(xiàn)凝集的時間為15秒。凝集強度為

3min時，凝塊不小于1mm^

?⑤冷凝集素效吩：在1：4以下。

?⑥無菌。

?⑦滅活補體。

?6、交叉配血法

?6.1

主側次側

供血者RBC血清

受血者血清RBC

?6.2方法分類

?6.2.1鹽水配血法

?①簡單快速

?②只能檢出不匹配的完全抗體（IgM）,不能檢出不完全抗體。

?6.2.2抗球蛋白法配血法（Coombs試驗）

?方法學評價

?①是最可靠的確定不完全抗體的方法。

?②是最早用于檢查不完全抗體的方法。

?分類

?直接施求蛋白法：可檢查受檢者紅細胞是否已被不完全抗體致敏。

?間接施求蛋白法：可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。操作復

雜，筋IJ于急診和大批量。

?6.23聚凝胺法配血法

?可檢出IgM和IgG兩種性質抗體。

?原理：①聚凝膠分子溶解后帶正電荷，中和RBC表面負電荷。②低離子強度溶液

能減低RBCZeta電位，增強抗原抗體間引力。

?6.3質量控制

?①血液標本：受血者標本要新鮮。

?②選用方法：用試管法做交叉配血。

?③溶血現(xiàn)象：出現(xiàn)溶血，配血不合。

?④試驗溫度：4~22℃。

?7、ABO血型系統(tǒng)主要I缶床意義

?1.輸血

?2.新生兒溶血病

?3.器官移植

?紅細胞Rh血型系統(tǒng)

?（一）遺傳與命名

?遺傳

?Fisher-Race命名法（CDE）,認為Rh基因位于第1號染色體的短臂上。

?8種基因組合（CDe.cDE、cDe...）

?36種遺傳型

?命名

?Rh抗原命名為C、D、E、c、d、e

?d抗原未被發(fā)現(xiàn)過

?有D抗原為Rh陽性，無D抗原為Rh陰性

?Rh陰性人中最常見基因型為cde/cde

?（二）Rh的抗原與抗體

?1、Rh系統(tǒng)抗原

?（1）Rh抗原：與臨床關系最密切5種為D（抗原性最強）、E、C、c、e0

?（2）D*u（D）:弱D抗原

?（3）-D-:-D-/-D-遺傳基因型只有D抗原

?2、Rh系統(tǒng)抗體

?主要為igG

?（三）Rh系統(tǒng)血型鑒定

?1、低離子強度鹽水試驗

?2、酶介質法：木瓜酶或菠蘿蛋白酶破壞紅細胞表面唾液酸，對IgG作用大于IgM。

?（四）交叉配血法

?由于此系統(tǒng)抗體為不完全抗體（IgG）,故應選用酶介質法、抗球蛋白法或聚凝胺法等。

?（五）質量控制

?1、嚴格設立對照

?2、控制反應條件

?3、紅細胞必須洗滌干凈

?（六）臨床意義

?Rh陽性孕婦第二胎新生兒溶血

?人類白細胞抗原檢查

?（一）HLA抗原和抗體

?人類白細胞上有3類抗原：

?紅細胞血型抗原

?白細胞特有抗原

?與其他組織共有但也是最強的人類白細胞抗原（HLA）

?1、HLA:基因在第6號染色體短臂上

?4個與移植有關的基因區(qū)：

?HLA-A:編碼的抗原稱I類抗原

?HLA-B:編碼的抗原稱I類抗原

?HLA-C:編碼的抗原稱I類抗原

?HLA-D:又分為3個亞區(qū)，編碼的抗原稱II類抗原

?HLA-DR

?HLA-DQ

?HLA-DP

?HLA抗體：大部分是IgG,少數(shù)是IgM。

?（二）HLA分型方法

?L淋巴細胞毒試驗：常用

?2、混合淋巴細胞培養(yǎng)試驗：臨床主要用于器官移植

?3、分子生物學技術

?PCR為基礎

?基因測序為基礎

?（三）HLA檢測臨床意義

?1、器官移植：DR配型能提高存活率

?2、輸血

?3、親子鑒定

?4、疾病診斷：強直性脊柱炎

?血液保存液

?（一）血液保存液的主要成分與作用

?1、血液保存液的和