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PAGE生物工程下游技術(shù)課程論文枸杞多糖的研究及其進(jìn)展PAGEPAGE1枸杞多糖的研究及其進(jìn)展摘要:枸杞多糖是枸杞的一種重要活性成分,具有多種藥理作用和生物活性功能,是目前的一個研究熱點(diǎn)。對枸杞中多糖的提取、精制、結(jié)構(gòu)研究以及生理活性等多方面進(jìn)行綜述,并展望了枸杞多糖的發(fā)展前景和趨勢。關(guān)鍵詞:枸杞多糖;提純;生理活性;進(jìn)展Abstract:Lyciumbarbarumpolysaccharideisakindofmainfunctionalactivitycomponentsofthelyciumbarbarum.Itpossessesmanykindsofpharmacologicalandphysiologicalactivitiesandturnsintooneofresearchfocuses.ThepapersummarizesthemethodofextractionandseparationoftheLBP,thequalita-tive,quantitative,structureandpurityanalysis.Inaddition,itpresentedthephysiologicalactivitiesre-searchesinthisfield.Finally,theprospectionofthelyciumbarbarumpolysaccharideswasvisualized.Keywords:lyciumbarbarumpolysaccharides;extractionandpurification;analysisandidentification;physiologicalactivities;development現(xiàn)代醫(yī)學(xué)臨床研究認(rèn)為,枸杞的重要提取物之一就是枸杞多糖(Lyciumbarbarumpolysaccharides),枸杞的營養(yǎng)價值就在于其中含有多糖,枸杞子是茄科植物枸杞的果實是我國的一種傳統(tǒng)中藥經(jīng)研究表明枸杞多糖是枸杞子調(diào)節(jié)免疫延衰老的主要活性成份,可改善老年人易疲勞食欲不振和視力模糊等癥狀,并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用,而其藥理作用與其生物活性成分枸杞多糖密切相關(guān)。將其作為功能因子來開發(fā)保健食品具有廣闊的發(fā)展前景。1枸杞多糖的組成和理化性質(zhì)1.1枸杞多糖(LBP)的化學(xué)成分枸杞多糖(LBP)是由阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖及半乳糖醛組成的酸性雜多糖的糖鏈與蛋白質(zhì)的肽鏈以共價鍵的形式結(jié)合的含肽多糖,分子量在1×105μ[1]。研究者已采用DEAE2纖維素、DEAE2葡聚糖凝膠和其他各種不同類型的凝膠柱層析法,從枸杞粗多糖中分級純化出蛋白質(zhì)多糖G、LBP26、LBPI、LBPII、LBPIV、LBGP、LBNP、LBPC2、LBPC410個不同分子量范圍的均一級分的多糖[2-12]。1.2枸杞多糖(LBP)的理化性質(zhì)冷凍干燥得到的枸杞多糖為白色略帶棕色纖維狀疏松固體,按LBP-Ⅰ、LBP-Ⅱ、LBP-Ⅲ、LBP-Ⅳ的順序,其水溶性依次遞減,不溶于乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑。硫酸-苯酚、硫酸-蒽酮、硫酸-咔唑反應(yīng)、考馬斯亮藍(lán)染色反應(yīng)呈陽性,斐林試驗碘-碘化鉀反應(yīng)呈陰性[13]。2枸杞多糖的功能作用傳統(tǒng)的中醫(yī)理論認(rèn)為:其味甘,性平,具有補(bǔ)肝腎、益精血、明目之功能。枸杞中含有枸杞多糖、多種氨基酸、微量元素、維生素、?;撬帷⑸飰A、揮發(fā)油等化學(xué)成分。現(xiàn)代科學(xué)研究證明:枸杞具有調(diào)節(jié)免疫功能、降血糖、降血脂、抗衰老、抗腫瘤等作用,而其藥理作用與其生物活性成分枸杞多糖(LBP)密切相關(guān)。2.1抗衰老作用李響[14]等研究得到:枸杞多糖提高D-半乳糖所致衰老模型小鼠皮膚中SOD活力作用較維生素E更為顯著。SOD作為體內(nèi)天然的抗氧化酶之一,有清除自由基的作用,其活力的提高有益于機(jī)體抗氧化能力[15-16]。枸杞多糖降低D-半乳糖所致衰老模型小鼠皮膚中MDA含量作用也較維生素E顯著,其機(jī)制可能為枸杞多糖通過提高細(xì)胞清除H2O2和O2-能力,保護(hù)細(xì)胞免受自由基損傷,且可使成纖維細(xì)胞活性增強(qiáng),膠原蛋白合成增加而延緩衰老進(jìn)程。枸杞多糖可直接清除體內(nèi)羥自由基,并能抑制自發(fā)或由羥自由基引發(fā)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng),從而減少羰基化合物的形成,通過降低蛋白質(zhì)羰基化而發(fā)揮抗衰老作用[17];也可以抑制黃嘌呤脫氫酶向黃嘌呤氧化酶轉(zhuǎn)變,從而減少自由基產(chǎn)生;其還有很強(qiáng)的抗氧化作用,能保護(hù)細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶類活性,從而阻止多價不飽和脂肪酸的過氧化反應(yīng),抑制LPO生成,維持生物膜正常脂質(zhì)結(jié)構(gòu)和生理功能而發(fā)揮抗衰老作用。測定枸杞多糖含量的方法有:重量法、硫酸-苯酚分光光度法、生化分析法、比旋度及示差折射法等。重量測定法原理是先用80%的乙醇提取以除去單糖、低聚糖、生物堿等干擾性成分,然后用水提取其中所含的多糖類成分。硫酸-苯酚分光光度法原理是多糖類成分在硫酸作用下先水解成單糖,并迅速脫水生成糖醛衍生物,然后和苯酚縮合成有色化合物,在適當(dāng)波長處測定其含量。實驗研究一般采用分光光度法。韓晉、陳旭紅等人分別把硫酸-苯酚分光光度法與生化分析法、重量法進(jìn)行了比較,結(jié)果得出:分光光度法與生化分析法統(tǒng)計學(xué)處理無明顯差異,用分光光度法測定枸杞多糖含量,其顯色穩(wěn)定,靈敏度高,重現(xiàn)性好,但較繁瑣;生化分析法具有靈敏快速,樣品用量少、精密等優(yōu)點(diǎn),適合醫(yī)院藥房快檢[22];重量法和硫酸-苯酚分光光度法的測定值相差很少,同時重量法方法簡便,所用試劑少,靈敏度高,且可省去脫脂步驟。因此,在實際生產(chǎn)操作中宜采用重量法[23]。4展望LBP是一種有效的免疫增強(qiáng)劑,在細(xì)胞免疫和體液免疫調(diào)節(jié)中具有重要作用,對腫瘤免疫監(jiān)視系統(tǒng)的主要細(xì)胞免疫功能包括T、CTL、NK和Mφ等細(xì)胞均有明顯作用,還能促進(jìn)IL-2、IL-23、IL-6和TNF的產(chǎn)生,促進(jìn)IL-2R的表達(dá)。LBP不僅能增強(qiáng)荷瘤小鼠的免疫功能,而且還能對抗化療、放療、免疫和造血抑制的副反應(yīng)。在抗腫瘤方面,LBP單用也有一定效果,如果與化療或小劑量CP合用更能增強(qiáng)抗瘤效果。從學(xué)術(shù)上講,兩種免疫增強(qiáng)劑菌酶合用(如LBP與CP菌苗合用)具有協(xié)同作用;從應(yīng)用上講,兩種免疫劑合用更能避免化療和放療的副作用,增強(qiáng)抗癌效果。LBP不僅是一種調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑(BRM),而且還可能通過NIM網(wǎng)絡(luò)發(fā)揮抗癌作用,值得重視和研究。NIM網(wǎng)絡(luò)中各環(huán)節(jié)的各種分子的細(xì)節(jié)有待深入研究補(bǔ)充,NIM網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)思是具有廣范現(xiàn)實意義的,是符合生命科學(xué)的,也是與中醫(yī)傳統(tǒng)的整體思想體系不謀而合的,這對探討艾滋病的治療也具有較好的前景[24]。參考文獻(xiàn):[1]植飛,鄭衛(wèi).平枸杞多糖水提工藝的優(yōu)選[J].中藥材,2004,27(12):948-950.[2]王建華,汪建民,李林.枸杞多糖LBP2a的分離、純化與結(jié)構(gòu)特征[J].食品科學(xué),2002,23(6):44-48.[3]董進(jìn)文,胡慶和,高天順,等.枸杞多糖的藥理學(xué)研究進(jìn)展[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,1998,4(5):54-56.[4]潘泰安,毛忠英,張建成,等.枸杞多糖生產(chǎn)工藝及產(chǎn)品的開發(fā)研究[J].中國食品添加劑,2002(4):21-24.[5]袁振林.枸杞多糖的提取及含量和分子量分布的測定[J].廣東化工,2003(3):43-45.[6]王靜珍,熊建榮.枸杞多糖對小鼠胸腺和脾臟保護(hù)作用的研究[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2001,23(11):660-661.[7]王建華,張民,張聲華.枸杞多糖組分3對羥自由基所致?lián)p傷的作用[J].營養(yǎng)學(xué)報,2001,23(3):279-281.[8]甘璐,張聲華.枸杞多糖的抗腫瘤活性和對免疫功能的影響[J].營養(yǎng)學(xué)報,2003,25(2):200-202.[9]段昌令,喬善義,王乃利,等.枸杞子活性多糖的研究[J].藥學(xué)學(xué)報,2001,36(3):196-199.[10]方建國,丁水平,田庚元.枸杞多糖藥理作用與臨床應(yīng)用[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2004,23(7):484-485.[11]何進(jìn),張聲華.枸杞多糖的分離純化及組成研究[J].中國藥學(xué)雜志,1996,31(12):716-720.[12]汪積慧,李鴻梅.枸杞多糖免疫調(diào)節(jié)作用的研究[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2002,23(11):1204.[13]孫智達(dá),張聲華.枸杞多糖的提取、分離及理化特性研究[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,1996,15(6):603-607.[14]李響,梁杰.枸杞多糖與維生素E延緩小鼠皮膚衰老的實驗研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志.2009,18(13):1465-1466.[15]LinAD,MannikarottuA,KoganBA,etal.Effectofbilateralinvivoischemia/reperfusionontheactivitiesofsuperoxidedismutaseandcatalase:responsetoastandardizedgrapesuspension[J].MolCellBiochem,2007,296(1-2):11-16[16]LiXM,ShiYH,WangF,etal.Invitrofreeradicalscavengingactivitiesandeffectofsyntheticoligosaccharidesonantioxidantenzymesandlipidperoxidationinagedmice[J].JPharmBiomedAnal,2007,43(1):364-370[17]師伯省,李靈霞.枸杞多糖抗衰老作用的研究中國新醫(yī)學(xué)論壇[J].中國新醫(yī)學(xué)論壇,2008,8(3):19-20.[18]薛立文,李以暖.枸杞子的營養(yǎng)和保健功能[J].廣東微量元素科學(xué).2000,6(7):1-4.[19]熊俐,黃治國,羅慧波,等.枸杞多糖提取工藝優(yōu)化研究[J].四川食品與發(fā)酵,2008,44(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