2019水質(zhì)丁基黃原酸的測定液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法目 次前 言 ii1 適用范圍 12 規(guī)范性引用文件 13 方法原理 14 試劑和材料 15 儀器和設(shè)備 26 樣品 27 分析步驟 38 結(jié)果計算與表示 59 精密度和準(zhǔn)確度 710 質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 7廢物處理 7附錄A（資料性附錄）方法的精密度和準(zhǔn)確度 8iPAGEPAGE1PAGEPAGE2水質(zhì) 丁基黃原酸的測定 液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法1 適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定水中丁基黃原酸的液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法。的目標(biāo)物為丁基黃原酸，不包括其他黃原酸類物質(zhì)。當(dāng)進樣體積為10.0μl時，本標(biāo)準(zhǔn)測定的丁基黃原酸的方法檢出限為0.2為0.8μg/L。2 規(guī)范性引用文件標(biāo)準(zhǔn)。HJ/T91 地表水和污水監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ/T164 地下水環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范3 方法原理樣品過濾后直接進樣，經(jīng)液相色譜柱分離，用質(zhì)譜儀在多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）條件下檢測丁基黃原酸，根據(jù)保留時間和特征離子定性，內(nèi)標(biāo)法定量。4 試劑和材料除非另有說明，分析時均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純試劑，實驗用水為不含目標(biāo)物的純水。4.1 乙腈（CH3CN）：液相色譜純。4.2 氨水（NH3·H2O）：優(yōu)級純。4.3 丁基黃原酸鹽：丁基黃原酸鉀（C5H9OS2K）或丁基黃原酸鈉（C5H9OS2Na），純度≥95%。4.4 甲酸（HCOOH）：優(yōu)級純。4.5 氫氧化鈉（NaOH）。4.6 氫氧化鈉溶液：ρ（NaOH）=0.4g/ml。稱取4g氫氧化鈉（4.5）溶于水中，稀釋至10ml。4.7 氨水溶液1：1+1。氨水溶液2。取一定量氨水（4.2）溶于水中，調(diào)節(jié)pH≈9.5，8h內(nèi)使用。甲酸溶液：1+1。4.10 丁基黃原酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（C4H9OCSSH）=100mg/L。稱取丁基黃原酸鹽（0.0330g丁基黃原酸鉀或0.0302g丁基黃原酸鈉）（4.3），加少量水溶解，轉(zhuǎn)移至250ml棕色容量瓶（5.4）中，加水近標(biāo)線，再滴加3滴氫氧化鈉溶液（4.6）搖勻，使pH為9~10，再加水定容。將溶液轉(zhuǎn)移至棕色玻璃試劑瓶中，貯備液在4℃以下冷藏避光保存，可穩(wěn)定保存20d。也可直接購買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。4.11 丁基黃原酸標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ（C4H9OCSSH）=1.00mg/L。吸取1.00ml棕色容量瓶內(nèi)，用氨水溶液2（4.8）定容。臨用現(xiàn)配。4.12 內(nèi)標(biāo)貯備液：ρ(C8H6Cl2O3-13C6)=100mg/L。直接購買有證2,4-二氯苯氧乙酸-13C6標(biāo)準(zhǔn)溶液。內(nèi)標(biāo)貯備液于4℃以下冷藏避光保存，可保存一年?；騾⒄罩圃焐痰漠a(chǎn)品說明保存。4.13 內(nèi)標(biāo)使用液：ρ=1.0mg/L。將內(nèi)標(biāo)貯備液（4.12）用水稀釋至1.0mg/L?，F(xiàn)用現(xiàn)配。4.14 濾膜：孔徑0.22μm，親水性聚丙烯、玻璃纖維、親水性聚四氟乙烯或其他等效材質(zhì)。4.15 氮氣：純度≥99.9%。5 儀器和設(shè)備5.1 5.2 色譜柱：C18柱或其他等效色譜柱，柱長50mm，內(nèi)徑2.1mm，填料粒徑1.7μm。注：由于流動相為pH為9.5，因此應(yīng)選用適用于流動相pH≥10的色譜柱。5.3 棕色樣品瓶：2.0ml。5.4 棕色容量瓶：250ml。5.5 采樣瓶：405.6 微量注射器：10μl、50μl、100μl和1ml。5.7 一般實驗室常用儀器和設(shè)備。6 樣品6.1 樣品采集和保存按照HJ/T91和HJ/T164的相關(guān)規(guī)定采集樣品。調(diào)節(jié)樣品pH為9~10，再加樣品至滿瓶，混勻。樣品于4℃以下冷藏避光保存，48h內(nèi)完成分析。6.2 試樣的制備樣品經(jīng)濾膜（4.14）過濾，取1.0ml置于棕色樣品瓶（5.3）中，加入10.0μl內(nèi)標(biāo)使用液注：樣品恢復(fù)至室溫，測定pH，如果樣品pH有變化，重新用氨水1（4.7）或甲酸（4.9）調(diào)節(jié)pH為9～10。6.3 空白試樣的制備用實驗用水代替樣品，按照與試樣的制備（6.2）相同的步驟制備實驗室空白試樣。7 分析步驟7.1 測量條件7.1.1 液相色譜儀參考條件流動相：流動相A為乙腈（4.1），流動相B為氨水溶液2（4.8），梯度洗脫程序見表1；柱溫：40℃；進樣體積：10.0μl；流速：0.2ml/min。表1 液相色譜流動相梯度洗脫程序時間（min）流動相A（%）流動相B（%）020801.520802.590103.590104.020806.020807.1.2 質(zhì)譜儀參考條件離子化電壓：3000V；離子源加熱氣體溫度：120℃；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），具體條件見表2。表2 目標(biāo)化合物的多反應(yīng)監(jiān)測條件目標(biāo)化合物母離子（m/z）子離子（m/z）駐留時間（ms）錐孔電壓（V）碰撞電壓（V）丁基黃原酸148.972.9*20-22-1170.9**20-22-172,4-二氯苯氧乙酸-13C6227.0169.0*20-15-10注：帶*的為定量離子，帶**的為定性離子。7.1.3 調(diào)諧7.2 校準(zhǔn)7.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立取一定量丁基黃原酸標(biāo)準(zhǔn)使用液（4.11）于氨水溶液2（4.8）中，制備5個濃度點的標(biāo)準(zhǔn)系列，丁基黃原酸的質(zhì)量濃度分別為1.00μg/L、5.00μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100μg/L，每毫升標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中加入10.0μl內(nèi)標(biāo)使用液（4.13），使內(nèi)標(biāo)的質(zhì)量濃度為10.0μg/L，貯存在棕色樣品瓶（5.3）中。均相對響應(yīng)因子RRF。

（1）式中：RRFi——標(biāo)準(zhǔn)系列中第i點丁基黃原酸的相對響應(yīng)因子，無量綱；Ai——標(biāo)準(zhǔn)系列中第iAis——標(biāo)準(zhǔn)系列中第iρis——標(biāo)準(zhǔn)系列中內(nèi)標(biāo)的濃度，g/L；ρi——標(biāo)準(zhǔn)系列中第i點丁基黃原酸的質(zhì)量濃度，g/L。n RRFi1n式中：RRF——目標(biāo)物的平均相對響應(yīng)因子，無量綱；n——標(biāo)準(zhǔn)系列點數(shù)。7.2.2 標(biāo)準(zhǔn)樣品譜圖內(nèi)標(biāo)物和丁基黃原酸的總離子流圖見圖1。

（2）圖1 內(nèi)標(biāo)物和丁基黃原酸的總離子流圖7.3 試樣測定按照與標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立（7.2.1）相同的步驟進行試樣（6.2）的測定。注：若樣品中丁基黃原酸濃度超出校準(zhǔn)曲線最高點，用氨水溶液2(4.8)稀釋后測定。7.4 空白試驗按照與試樣測定（7.3）相同的步驟進行空白試樣（6.3）的測定。8 結(jié)果計算與表示8.1 定性分析以樣品的保留時間和定性離子/定量離子的相對豐度定性。/定量離子相對豐度（Kstd）進行比較，所得偏差在表3規(guī)定的最大允許偏差范圍內(nèi)，則可判定樣品中存在丁基黃原酸。Ksam和Kstd分別按照公式（3）和公式（4）計算。A

2×10% （）式中：Ksam——樣品中丁基黃原酸定性離子/定量離子的相對豐度，%；A2——樣品中丁基黃原酸定性離子的峰面積（或峰高）；A1——樣品中丁基黃原酸定量離子的峰面積（或峰高）。AKstd=

d210% （4）式中：Kstd——標(biāo)準(zhǔn)溶液中丁基黃原酸定性離子/定量離子的相對豐度，%；Astd2——標(biāo)準(zhǔn)溶液中丁基黃原酸定性離子的峰面積（或峰高）；Astd1——標(biāo)準(zhǔn)溶液中丁基黃原酸定量離子的峰面積（或峰高）。表3 相對離子豐度的最大允許偏差KstdKsam相對于Kstd的最大允許偏差Kstd＞50%20%20%＜Kstd≤50%25%10%＜Kstd≤20%30%Kstd≤10%50%8.2 定量分析根據(jù)定量離子的峰面積（或峰高），內(nèi)標(biāo)法定量。8.3 結(jié)果計算8.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線法當(dāng)丁基黃原酸采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進行定量時，樣品中丁基黃原酸的質(zhì)量濃度ρx計算：D

（5）式中：ρx——樣品中丁基黃原酸的質(zhì)量濃度，μg/L；ρ1——由標(biāo)準(zhǔn)曲線所得試樣中丁基黃原酸的質(zhì)量濃度，μg/L；D——稀釋倍數(shù)。8.3.2 平均相對響應(yīng)因子法當(dāng)丁基黃原酸采用平均相對響應(yīng)因子法進行定量時，樣品中丁基黃原酸的質(zhì)量濃度ρx按公式（6）計算。RRF

（6）式中：ρx——樣品中丁基黃原酸的質(zhì)量濃度，μg/L；ρis——樣品中內(nèi)標(biāo)物的濃度，μg/L；RRF——由公式（2）所得目標(biāo)物的平均相對響應(yīng)因子，無量綱。8.4 結(jié)果表示當(dāng)測定結(jié)果小于100μg/L時，保留小數(shù)點后1位，當(dāng)測定結(jié)果大于等于100μg/L時，保留3位有效數(shù)字。9 精密度和準(zhǔn)確度9.1 精密度6家實驗室分別對丁基黃原酸的加標(biāo)濃度為1.0μg/L、10.0μg/L和50.0μg/L的地表水，加標(biāo)濃度為20.0μg/L和500μg/L的尾礦浸提廢水和污水處理廠進水進行了6次重復(fù)測定，實驗室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為1.5%~11%，實驗室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為0.5%~7.3%，重復(fù)性限范圍0.3μg/L～32μg/L，再現(xiàn)性限范圍0.3μg/L～32μg/L。參見附錄A。9.2 準(zhǔn)確度6家實驗室分別對丁基黃原酸的加標(biāo)濃度為1.0μg/L、10.0μg/L和50.0μg/L的地表水，加標(biāo)濃度為20.0μg/L和500μg/L的尾礦浸提廢水和污水處理廠進水進行了6次重復(fù)測定，加標(biāo)回收率范圍為77.2%~113%。參見附錄A。10 質(zhì)量保證和質(zhì)量控制10.1 空白試驗每批樣品（≤20個/批）至少做一個空白試驗，測定結(jié)果不能超過方法的檢出限。10.2 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r≥0.995，或相對響應(yīng)因子（RRF）的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)在±20%之間；每批樣品（≤20個/批）測定一個曲線中間校核點，其測定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線相應(yīng)點濃度的相對誤差應(yīng)在±20%之間。10.3 平行樣之間。10.4 基體加標(biāo)70%～120%之間。11 廢物處理實驗中產(chǎn)生的廢液應(yīng)集中收集，并做好相應(yīng)標(biāo)識，委托有資質(zhì)的單位進行處理。附錄A（資料性附錄）方法的精密度和準(zhǔn)確度六家實驗室分別對不同濃度的樣品進行了測定。精密度和準(zhǔn)確度結(jié)果見表A.1和表A.2。表A.1 方法的精密度樣品類型實際樣品加標(biāo)濃度（μg/L）測定結(jié)果平均值（μg/L）實驗室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）實驗室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）重復(fù)性限r(nóng)（μg/L）再現(xiàn)性限R（μg/L）地表水ND1.00.910~112.30.30.3ND10.09.53.5~5.81.91.41.4ND50.049.01.6~5.31.06.46.4尾礦浸提廢水2.820.019.53.4~8.16.13.74.72.810097.52.5~6.11.512122.85004981.5~2.90.53232污水處理廠進水ND20.018.25.2~8.07.33.85.4ND10097.33.5~6.80.91515ND5004982.0~2.60.93131表A.2 方法的準(zhǔn)確度樣品類型實際樣品濃度加標(biāo)濃度回收率范圍加標(biāo)回收率最終值（%）（μ