造血教學課件

造血

hematopoiesis造血一.血細胞的起源造血(一)胚胎期造血器官中胚葉造血期肝臟造血期骨髓造血期造血出生前的造血部位

卵黃囊骨髓

肝臟

脾淋巴結

12345678910月造血(二)出生后的造血器官髓外造血骨髓造血的變化造血二.血細胞分化和成熟分化的定義血細胞的分化細胞的增殖分裂細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律造血造血干細胞stemcell全能干細胞多能干細胞集落形成單位colonyformingunit脾集落形成單位CFU-S細胞集落形成單位CFU-C造血祖細胞hematopieticprogenitorcell原始細胞幼稚細胞造血血細胞分化過程全能干細胞

多能干細胞階段

祖細胞階段

階段

1.BFU-E

髓系

2.CFU-GM全能干細胞

3.CFU-EO

4.CFU-Meg

CFU-TL

淋巴系

CFU-BL造血

造血干細胞骨髓干細胞淋巴干細胞原紅原粒原單原巨原淋早幼紅早幼粒幼單幼巨幼淋中幼紅中幼粒顆粒巨

晚幼紅晚幼粒單核細胞淋巴細胞網織紅細胞桿狀核產板巨紅細胞分葉核血小板返回造血血細胞分裂增殖造血分裂象返回造血血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律（原始-幼稚-成熟）細胞體積大小（早幼粒大于原粒，巨核細胞由小到大）細胞核大小核形圓凹陷分葉核漿比大小核染色質結構細致、疏松粗糙、緊密核仁有無胞漿少多（淋巴除外）胞漿顏色藍淡藍、紅胞漿顆粒無有造血粒細胞發(fā)育

原粒早幼粒中幼粒

晚幼粒桿狀核分葉核血液組織造血三.造血的調控造血微環(huán)境的調控1.造血微環(huán)境2.調控造血細胞生長因子1.紅細胞生成素erythropoietin,Epo2.集落刺激因子colonystimulatingfactor,CSF3.巨核細胞集落刺激因子白細胞介素的作用造血造血細胞生長因子和白介素的調空____________________________________SCEMegNEoBAMBLTLIL-1+(+)(+)(+)(+)-(+)++IL-2-------+++IL-3++++++++--IL-4-(+)(+)(+)(+)++-++IL-5----++--+++-IL-6全髓增殖因子IL-11全髓增殖因子GM-CSF++++++-+--G-CSF（+）（+）（+）++--+--M-CSF++--EPO-++-------TPO巨核系________________________________________________________造血骨髓檢查Bone–marrowexamining

造血一.骨髓的基本結構肉眼觀察紅髓黃髓造血二.骨髓檢查的意義診斷疾病協(xié)助診斷疾病提供診斷線索造血三.檢查方法骨髓的涂片檢查標本處理涂片觀察計算各系各階段細胞數(shù)造血骨髓增生程度增生極度活躍:有核細胞數(shù)>100/HP增生明顯活躍:有核細胞數(shù)>50/HP增生活躍:有核細胞數(shù)10~30/HP增生減低:有核細胞數(shù)5~10/HP增生極度減低:有核細胞數(shù)1/HP造血造血四.正常骨髓象的特征粒/紅比例為2~4:1骨髓增生活躍各系各階段有核細胞的比例大致在正常范圍內各系各階段細胞形態(tài)上無明顯異常無特殊病理細胞及血液寄生蟲造血組織細胞造血纖維母細胞造血巨噬細胞造血脂肪細胞造血網狀細胞造血成骨細胞造血破骨細胞造血骨髓涂片中所見寄生蟲造血五.骨髓涂片的報告造血七.骨髓活檢的方法

和臨床應用造血八.骨髓象和血象分析

的重要性造血

細胞化學染色造血過氧化物酶染色(POX)粒細胞及分化較好的單核細胞胞漿內的POX能分解H2O2，產生新生態(tài)氧使聯(lián)苯胺氧化，與亞硝基鐵青化鈉結合成蘭色顆粒，再進一步氧化成棕黑色的顆粒，定位于酶活性的胞漿內。造血過氧化物酶造血正常情況下：粒系：原粒——早幼?！杏琢！墒炝＜毎鄶?shù)（-）（+）陽性程度逐漸增強嗜酸（+）；嗜堿（-）單核系：原單——幼單——成熟單核細胞（-）（弱+）陽性顆粒細少而分散其他細胞:（-）有時吞噬細胞可呈陽性反應造血疾病：急粒（AGL）——陽性（顆粒較粗大，呈局灶分布）分化好的原粒呈（+），急早幼粒（APL）呈強陽性反應（++~+++）急單（AML）——弱陽性（顆粒細小、稀少、散在分布），原單（+），分化差的原始單核細胞也可陰性急淋（ALL）——陰性。各階段淋巴細胞POX均呈（-）反應，ALL骨髓中殘留的原粒細胞POX可為（+），但比例小于3%。造血應用：對急淋和急非淋做出判斷，陽性率大于5%診斷為髓系（尤其是急粒），小于3%不能排除淋巴系。區(qū)別小型原始粒細胞和原淋鑒別APL和急單鑒別急單（陽性~弱陽性）和異常組織細胞（陰性）各種疾病成熟中性粒細胞漿中POX酶活性改變

增加：再障、細菌感染、急淋、慢淋減低：急粒、急單、慢粒、MDS、放射病及退化性中性粒細胞

*注意：單個細胞POX陽性、陰性無鑒別髓系的意義造血蘇丹黑染色SB是一種脂溶性染料，可溶解于細胞質中的含脂的結構中，使胞質的脂類物質呈棕黑色或深黑色顆粒。造血臨床意義

SB染色法不常用，臨床意義同POX，敏感性好于POX，但穩(wěn)定性和特異性不如POX，因為有顆粒的細胞均含有脂類，除了紅系都可著色。急淋陽性率可以大于5%，僅是SB陽性不能區(qū)別急淋和急非淋。

造血糖原染色過碘酸是一種氧化劑，能使細胞內含有乙二醇的糖類氧化產生雙醛基，醛基與schiff試劑中的品紅結合，形成紫紅色化合物，定位于含有多糖成分的部位。造血正常情況下1.粒系：原?！缬琢！墒炝＜毎?）（+）隨細胞成熟，陽性程度逐漸增強嗜酸（-）；嗜堿（+）2.單核系：原單——幼單——成熟單核（-）（+）（+~++）

3.紅系：幼紅——成熟紅細胞（-）1~2%（+）

4.淋巴系：TL——小部分（+）BL——多數(shù)呈（+）

5.巨核細胞和血小板：（+）呈塊狀造血

疾?。?/p>

白細胞系統(tǒng)

*有助于急性白血病類型的鑒別急淋——50%出現(xiàn)陽性急?！栃约眴巍栃月瘦^高急粒單——有急粒和急單的特點

*毛細胞性白血病——強（+）*漿細胞性白血病及多發(fā)性骨髓瘤——（-），偶見（+）*慢淋——（+）造血紅細胞系統(tǒng)

*紅系病態(tài)造血：幼紅細胞可呈（+）反應，百分比增加，陽性程度增加，有時紅細胞也呈陽性，而其他類型急性和慢性白血病紅系細胞大多呈陰性。

*各類貧血的鑒別：缺鐵貧、地貧、MDS——幼紅可呈（+）AA、溶貧、巨幼貧——（-）

急單造血其他：

鑒別*不典型巨核細胞——強陽性淋巴瘤RS細胞——陰性

*戈謝細胞——強陽性尼曼皮克細胞——弱陽性~陰性

*白血病細胞腺癌骨髓轉移的癌細胞——強陽性紅色細顆粒、粗顆?；驂K狀造血鐵染色

鐵顆粒與酸性亞鐵氰化鉀發(fā)生普魯氏藍反應，產生蘭色亞鐵氰化鐵沉淀，定位于含鐵部位。造血細胞內鐵：中、晚幼紅細胞胞漿中有藍綠色顆粒鐵粒幼細胞：胞質內有藍綠色顆粒的幼紅細胞環(huán)鐵粒幼紅細胞：胞質內有藍綠色顆粒在6個以上，并圍繞于核周排列成環(huán)形者，超過2/3區(qū)域鐵粒紅細胞：含有藍綠色顆粒的紅細胞正常情況下25%~50%細胞外鐵：網狀細胞鐵，正常骨髓以含鐵血黃素形式儲存的鐵，主要存在骨髓小粒的巨噬細胞的胞質內或外。正常情況下+~++造血細胞外鐵反應強度的判斷標準：顯微鏡檢查肉眼觀察————————————————著色程度形態(tài)大小分布情況

————————————————陽性顯色不明顯淡染小稀疏（+~++）（綠~藍）（顆粒~小珠）（星狀排列）強陽性顯色明顯深染大密集（+++~++++）（藍~黑）（小珠~成堆）（片狀分布）

————————————————

造血疾?。喝辫F貧：外鐵明顯下降，甚至消失；內鐵下降。經鐵劑治療后，外鐵增加AA：內、外鐵明顯增加鐵粒幼細胞貧血：內、外鐵增加，且出現(xiàn)環(huán)鐵粒幼紅細胞大于等于15%，有時還可見鐵粒紅細胞。MDS：外鐵增加，鐵粒幼細胞百分比增加，出現(xiàn)環(huán)鐵粒幼細胞感染、肝硬化、慢性腎炎、尿毒癥、血色病及多次輸血后：外鐵增加。造血堿性磷酸酶染色

成熟中性粒細胞內的AKP在PH9.4~9.6緩沖液中能水解基質液中的α-磷酸柰酚，產生α-奈酚，其與重氮鹽偶聯(lián)，形成不溶性灰黑色偶氮染料沉淀，定位于酶活性處。造血堿性磷酸酶造血陽性程度：

-——胞漿中無紫黑色顆粒+——胞漿中有一層棕黑色不透明或局限地方有紫黑色顆粒++——胞漿中顆粒占胞漿1/2或遍布整個胞漿，但較疏松+++——胞漿中顆粒占3/4，顆粒染色濃++++——僅見核影，其余均是黑色造血AKP積分的計算積分：-——0分舉例：細胞數(shù)積分+——1分55*0——0++——2分55*1——5+++——3分1010*2——20++++——4分2020*3——606060*4——240

——————————計算陽性細胞的陽性率和總積分100個細胞AKP積分總分為325參考范圍：0~100分造血生理變化：

AKP活性和年齡有關，新生兒、嬰幼兒高于成年人，老年人略低，女性大于男性，應激狀態(tài)下增加。病理變化：*感染時增加

*血液病

造血鑒別：

*細菌感染——NAP積分增加病毒性感染——無明顯變化（感染癥狀相似）

*慢?！e分明顯下降可至0分

*中性粒細胞類白血病——積分可大于200

*急非淋——積分下降或正常下限急淋——明顯增加（慢淋增加）

*PNH、MDS——積分下降AA——明顯增加

*真性紅細胞增多癥——積分明顯增加繼發(fā)性紅細胞增多癥——正?；蚪档驮煅嵝粤姿崦溉旧?/p>

血細胞中ACP在酸性條件下，將基質液中磷酸奈酚AS-BI水解后，釋放出奈酚AS-BI，后者與重氮鹽偶聯(lián)，形成不溶性紅色沉淀，定位于胞漿中?？咕剖岱磻涸诨|中加入L-酒石酸耐酒石酸——（+）不耐酒石酸——（-）造血酸性磷酸酶造血酸性磷酸酶酒石酸抑制造血正常情況下：單核巨噬系陽性率最高，組織細胞陽性；淋巴細胞內T細胞活性高，B細胞低應用：*診斷多毛細胞白血病*輔助鑒別

TL——ACP（+）；BL——（-）戈謝病——（+）；尼曼皮克病——（-）*惡性單核、吞噬細胞系：

從（+）到（+-）到（-）造血氯乙酸AS-D奈酚酯酶染色血細胞（粒細胞）中ASDCE將基質液中氯乙酸奈酚水解，產生奈酚AS-D，后者與中氮鹽（堅牢紫醬GBC）偶聯(lián)，形成不溶性紅色沉淀，定位于胞質中酯酶所在的部位。造血ASDCE正常情況下：

粒系原?！?）或（+）；早幼粒~成熟粒細胞；嗜酸——（-）或弱（+）；嗜堿——（+）；少數(shù)肥大細胞可（+）其他細胞單核（-）個別弱（+）反應；淋、漿、紅（-）造血ASDCE疾病情況下：有助于急性白血病的分類：急粒——陽性，原粒多呈陽性，急性早幼粒為強陽性急單——陰性，原單、幼、單多呈陰性急淋——陰性，原淋、幼陰性急粒-單——部分白血病細胞呈陽性預后：在粒細胞白血病中如果ASDCE持續(xù)陽性增加，提示預后不良造血醋酸AS-D奈酚酯酶和氟化鈉抑制試驗血細胞中ASDAE將基質液中的醋酸AS-D奈酚水解，產生AS-D奈酚，后者與重氮鹽（堅牢藍BB）偶聯(lián)，形成不溶性蘭色沉淀，定位于胞質內。

氟化鈉抑制：在基質液中加入氟化鈉造血結果判斷：

油鏡計數(shù)100個細胞，分別計算出陽性率和陽性積分以及抑制率抑制前陽性率-抑制后陽性率或陽性積分或陽性積分抑制率%=————————————%抑制前陽性率或陽性積分造血ASDAE正常情況下：粒系——原粒（-）或（+）；早幼粒~成熟粒細胞陽性，一般+~++，不被NaF抑制單核系——原單（-）或（+），幼單~單核陽性，一般++~+++，被抑制彌散分布胞漿各處淋巴系——弱陽性，不被抑制陽性呈單個孤立，符點狀，定位在核周紅系——早期幼紅可陽性，隨細胞成熟陽性下降，不被抑制巨核、血小板——陽性造血疾病情況下——————————————————————————急粒急早幼粒急粒單急淋ASDAE原?？沙拾籽≡缬琢＜毎籽〖毎芎陀琢埽?）反應（+）較原粒細胞強呈（+）細胞呈陽性或弱陽性NaF抑制不被抑制不被抑制屬單核不被抑制被抑制屬粒系不被抑制—————————————————————————造血α-丁酸奈酚酯酶染色α-NBE血細胞中α-NBE在堿性條件下，基質液中的α-丁酸奈酚水解，產生α-奈酚，后者與堅牢醬紫GBC偶聯(lián)，形成不溶性紅色沉淀，定位于胞質內。造血α-NBE正常情況下：*粒系——各期（-）*單核系——強（+）；原單（+）或（-），幼單~成熟單核（+），可被NaF抑制*淋巴系——TC呈致密的局限性點符狀陽性反應，不管TC正?；虍惓＞鶠殛栃苑磻狟C陰性，非T非B也可出現(xiàn)散在顆粒狀陽性反應。

*巨核和漿細胞——陰性或弱陽性

*血小板——可陽性

*組織細胞——可陽性，不被抑制造血α-NBE疾病情況下：急性白血病鑒別

急?！ｊ幮约眴巍讍蝵成熟單核陽性急粒單——部分陽性，部分陰性鑒別

急單——陽性，被NaF抑制；組織細胞白血病——陽性，但不被抑制造血

雙酯酶染色

造血缺鐵性貧血

Irondeficiencyanemia,IDA

造血血涂片檢查：成熟紅細胞體積減低，中央淡染區(qū)擴大，典型的呈環(huán)形，小細胞低色素。

造血IDA血象：造血骨髓涂片檢查和鐵染色：

骨髓涂片：增生活躍或明顯活躍，尤其紅系增生明顯活躍（30%以上），以中、晚、幼紅為主，各階段紅細胞體積較小，胞漿量少，可見核漿發(fā)育不平衡（老核幼漿），幼紅細胞雖多，但比較小型，且缺乏細胞質，看上去象收縮了一樣，可能是缺鐵貧。粒系、巨核系正常。

鐵染色：缺鐵貧外鐵減少或消失，內鐵下降

鐵粒幼

內鐵增加，外鐵存在造血造血1：中幼紅細胞

2：晚幼紅細胞

造血增生性貧血的骨髓象

骨髓有核細胞增生明顯活躍，

以紅細胞系增生為主，粒紅比值減少，甚至倒置，以中、晚幼紅細胞增生為主，原紅、早幼紅細胞也相應增加。幼紅細胞形態(tài)正常，胞體也可偏大，但無巨幼紅細胞樣改變。嗜多色性紅細胞增多。

粒細胞系相對減少，形態(tài)正常。

巨核細胞正?；蛟龆?。造血白血病的分類

一、按白血病細胞分化程度分類1．

急性白血病

2．

慢性白血病

二、按白血病細胞形態(tài)分類

三、臨床