遺傳病的診斷

遺傳病的診斷

DiagnosisofGeneticDisease

遺傳病的診斷

前言遺傳病的常規(guī)診斷產(chǎn)前診斷基因診斷

第一節(jié)遺傳病的常規(guī)診斷

一、遺傳疾病診斷的主要內(nèi)容病史采集癥狀與體征家系分析細(xì)胞遺傳學(xué)檢查生化檢查基因診斷染色體檢查的指征①有明顯的智力發(fā)育不全、生長遲緩或伴有其他先天畸形者;②夫婦之一有染色體異常，如平衡結(jié)構(gòu)重排、嵌合體等;③家族中已有染色體或先天畸形的個體;④多發(fā)性流產(chǎn)婦女及其丈夫;⑤原發(fā)性閉經(jīng)和女性不育癥;⑥無精子癥男子和男性不育癥;⑦兩性內(nèi)外生殖畸形者;⑧疑為先天愚型的患兒及其父母;⑨原因不明的智力低下伴有大耳、大睪丸和(或)多動癥者;⑩30歲以上的高齡孕婦。Multi-colorFISH/

SpectralKaryotypingFISHforSRYNormalMaleXXSRY+Red=XRYGreen=centromereofX第二節(jié)產(chǎn)前診斷遺傳學(xué)檢查

細(xì)胞培養(yǎng)、染色體檢查、分子診斷等；生化檢查

特殊蛋白質(zhì)、酶、代謝底物、中間產(chǎn)物和終產(chǎn)物等；物理診斷

B超、X線、胎兒鏡、電子監(jiān)護(hù)等。需產(chǎn)前診斷的對象：夫婦之一有染色體畸變，特別是平衡易位攜帶者，或者夫婦染色體正常，但出生過染色體異常的患兒的夫婦；35歲以上的高齡孕婦；夫婦之一有開放性神經(jīng)管畸形，或出生過這種畸形患兒的夫婦；夫婦之一有先天性代謝缺陷，或出生過這種患兒的夫婦；X連鎖遺傳病基因攜帶者孕婦；原因不明的習(xí)慣性流產(chǎn)的孕婦；羊水過多的孕婦；夫婦之一有致畸因素接觸史的孕婦；具有遺傳病家族史，又系近親婚配的孕婦。

雖然具備了上述條件，但如果出現(xiàn)先兆流產(chǎn)、妊娠時間過長、有出血傾向者，則不宜做產(chǎn)前診斷，另外應(yīng)拒絕僅要求僅做胎兒性別的檢查。取胎兒細(xì)胞方法有：羊膜穿刺法（15-17w）絨毛取樣法（10-11w）臍帶穿刺（>18w）胎兒鏡檢查B超孕婦外周血胎兒細(xì)胞富集PGD第三節(jié)基因診斷一、分子診斷學(xué)的發(fā)展從第一代遺傳標(biāo)志（RFLP）第二代遺傳標(biāo)志（STR）第三代遺傳標(biāo)志（SNP）二、分子診斷的策略和常用技術(shù)基因診斷的策略基因突變的檢測mRNA檢測基因連鎖檢測基因診斷的基本技術(shù)核酸雜交聚合酶鏈反應(yīng)DNA測序基因芯片技術(shù)其它常用的技術(shù)

PCR-RFLPPCR利用一對或數(shù)對特異性引物，將目標(biāo)DNA擴(kuò)增；酶切利用某些限制性內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，如PCR產(chǎn)物中含有相應(yīng)的酶切位點(diǎn)序列，DNA鏈則被切開；電泳利用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠分離酶切后的PCR產(chǎn)物，根據(jù)電泳圖譜判斷結(jié)果。PCR-ASO：使用只有幾十個核苷酸的探針，檢測被檢DNA中的同源序列。由于探針比較短，當(dāng)被檢DNA序列與探針不完全互補(bǔ)，甚至只要有一個堿基的差異，雜交分子就不能穩(wěn)定形成，因此該方法的靈敏度非常高，特異性也非常好。PCR-ASOPCR-SSCP

當(dāng)雙鏈DNA變性為兩條單鏈后，各自會在中性條件下形成各自特定的空間構(gòu)象，因而在電泳時將在不同的位置上出現(xiàn)各自電泳條帶。如果DNA序列發(fā)生變化，甚至只有一個堿基變化，空間構(gòu)象也有可能發(fā)生變化，電泳條帶也隨之變化。PCR-SSCP三、分子診斷技術(shù)的應(yīng)用基因診斷在遺傳病中的應(yīng)用例如：鐮狀細(xì)胞貧血的基因診斷酶解正常人DNA和患者DNA，用標(biāo)記的

珠蛋白基因?yàn)樘结樧鱏outhern雜交

鐮狀細(xì)胞貧血的基因診斷限制性內(nèi)切酶MstⅡ切割的序列是CCTNAGG（其中N是任何一種核苷酸），切割正常DNA產(chǎn)生1.1kb

珠蛋白的DNA片段；若切割患者DNA時，由于A

T破壞了MstⅡ的位點(diǎn)，便形成1.3kb

珠蛋白的DNA片段。基因診斷在腫瘤中的作用肺癌乳腺癌結(jié)腸癌四、疾病分子診斷的展望

未來的分子診斷主要發(fā)展方向胚胎著床前診斷—在囊胚8個細(xì)胞期，通過對其中一個細(xì)胞的染色體核型分折和原位雜交，從而將人類的遺傳缺陷控制在最早期階段。母體