液相色譜-質譜聯(lián)用用于臨床治療藥物監(jiān)測技術要求

液相色譜-質譜聯(lián)用用于臨床治療藥物監(jiān)測通用技術要求析前準備、方法學建立和驗證、質量管理和結果報告下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本GB/T32267-2015分析CLSIC62-ALiquidChromatography-MassSpectrometryMethods;CNAS-GL037臨床化學定量檢驗程序性能CNAS-CL02-A001《醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則的應3.1液相色譜串聯(lián)質譜liquidchromatographytandemmassspectrometry一種聯(lián)合液相色譜和質譜分析的檢測技術，結合了色譜對物質的高分離能力和質譜對物質結構和質量的分析能力，具有高選擇性、高特異性以及高靈敏度加入到待測樣品中作為測定待測組分含量的參照標準的已知質量或含量純物質。[GB/T32267-3.3基質效應matrixeff基質效應是指被測量以外的某種樣品特性對被測量的值的影響。[WS/T33.4線性范圍linearrange2使實驗系統(tǒng)的最終分析結果為可接受的線性的濃度范圍，此時非線性誤差應低于允許誤差。在同一實驗室，由同一操作人員使用相同的設備，按相同的測試方法在相同的測試條件下，對同一被測量在短時間內相繼獨立進行多次測3.6中間精密度intermediate在一組測量條件下的測量精密度，這些條件包括相同的測量程序、相同地點并且對相同或相似所選用的測量方法的總誤差必須在臨床可接受的范圍內。由臨床醫(yī)學專家和臨床化學專家共同3.8質荷比masscharger離子的質量與它所帶電荷數的比值。[GB/T3226一組完整的試驗樣品，包括一定數量的校正標樣和質控樣品。多個分析批可在一天完成，或一3.10系統(tǒng)適用性測試systemsu3.11治療藥物監(jiān)測therapeuticdrugmonitoring,治療藥物監(jiān)測通過測定患者體內的藥物暴露、藥理標志物或藥效指標，利用定量藥理模型，以4.1實驗室基本要求d)應清潔無塵，無易燃、易爆和強腐蝕性氣體或試劑，排風良好；e)樣本處理應至少在二級生物安全實驗室3f)廢棄物、廢水、廢氣的處理和排放符合國家有關規(guī)定。注：4.1a)~c)中的條件與制造商標稱的條件不一致時，以產品規(guī)定的條件4.2人員要求實驗室技術人員應具備藥學、醫(yī)學檢驗、分析化學、生物化學等相關教育背景和工作經歷，經4.3LC-MS/MS設備的基本要求應綜合考慮針對不同治療藥物監(jiān)測的需求，選擇合b)質量穩(wěn)定性：全質量范圍<0.1Da/2g)線性范圍應≥3個數量級，線性回歸系數r應＞0.990。5.1樣本采集、運輸和存儲c)應考慮樣本采集容器等的影響，如采血管中添加劑種類對5.1.3樣本儲存：樣本不能及時測定時，應依4b)推薦使用非放射性穩(wěn)定同位素標記5.3試劑和耗材a)應至少選擇色譜級試劑，并按產品說明書要求保存c)應考慮耗材如樣本采集管、加樣槍頭、離心管、多孔板等析出的雜質對分析前應通過文獻檢索評估目標分析物現有檢測方法的局限性以性。根據目標分析物的理化性質和分子結構選擇合適的樣本類型并建立a)根據目標分析物的性質選擇儀器檢測極性和離子化方式，即正或負離子模式，ESI模式或APCI模式；b)根據儀器靈敏度制備一定濃度的純品分析物，以制d)優(yōu)化所選母離子的子離子，確定母離子/子離子對；e)優(yōu)化質譜儀各項參數，包括離子源參數以及質譜掃描參數，以獲得最佳的b)流動相及添加劑的種類及比例取決于目標分析物的a)使用添加已知濃度目標分析物的標準等文件中沒有關于總誤差的規(guī)定，則按變異a)使用有證標準物質、正確度驗證室間質評樣本b)根據測量區(qū)間選用至少2個濃度水平的標準物質樣本；a)通過稱重法配制標準溶液，在空白基質中加入不同體積的標準溶液，建議其體積宜少于總b)制備樣本終濃度與精密度測試用質控品保持一致；a)選擇適宜的臨床樣本，不少b)公認的參考方法，如CNAS認可的參考實驗室使用的參考方法。c)宜在相同時段內完成對同一樣本b)計算每份樣本兩種方法檢測結果的均值，并計算偏差。95%以上樣本比對結果應符合偏差≤1/2a)應該在指定的濃度范圍內評價儀器對分析物的響應b)通過加入已知量的分析物到空白基質中，制備各濃度的標準曲線樣本，其基質應該與目標6d)建議最低定量限（LLOQ）至少低于治療參考濃度范圍下限的1/4，定量上限宜大于實驗室警戒濃度或中毒濃度；考察不同天內至少3個獨立批本且至少6個濃度水平應符合上述標準。a)應使用與臨床樣品類型相同的空白基質，對高于定量上限濃度的樣本進b)宜稀釋至定量下限的3倍以內濃度，回收率應在標示值的10c)每個稀釋因子至少5個平行樣品，不精密度CV應≤1/3允許總誤差（TEa）或≤15%。a)在待測藥物出峰的位置應無干擾物質響應。當干擾組分的響應低于分析物定量下限響應的b)還應評價其他潛在的干擾物對待測藥物的影響，如合并用藥及其代謝物、高濃度血紅蛋白、a)應使用至少6批來自不同供體的空白基質來考察基質效c)通過計算基質存在下的峰面積(由空白基質提取后加入分析物和內標測得),與不含基質的相應峰面積(分析物和內標的純溶液)比值,計算分析物和內標的基質因子。進一步通過分析物的基質因子除以內標的基質因子,計算經內標歸一化的基質因子。不同基質計算的內標歸一理中、前處理后等所有過程，不同環(huán)境條件下的穩(wěn)定性，以確定樣本、質控品或標準曲線等的保存7應采用低和高濃度質控樣品進行穩(wěn)定性考察，得濃度與標示濃度相比較，每一濃度的均值與標示濃度的偏差應在±1/2TEad)凍融穩(wěn)定性：應在多次冷凍和解凍e)待測物前處理液在室溫或進樣器中的穩(wěn)定性：應考察前處理過程中及處理任何嚴重影響檢測程序分析性能的情況發(fā)生后，應在檢測程序重新啟用前對受影響的性能進行部分驗證。影響檢測程序分析性能的情況包括但不限于：改變儀器、樣本基質改變、抗凝劑改變、儀器主要部件故障、儀器搬遷、設施和環(huán)境的嚴重用于長期方法精密度的監(jiān)測、反映檢測結果的波動，質控數據結合各方面信息的回顧將有助實b)設置質控品濃度水平時宜考慮醫(yī)學決定值，如治療8b)應在每個分析批檢測前檢測質控品，宜在分析批結依據所選質控規(guī)則，對質控結果進行判讀，質控在控時方可發(fā)布臨床樣本a)應繪制質控圖并通過適當的質控規(guī)則進行b)質控失控后應調查原因并記錄采取的所有措施。c)失控處理應至少考量峰形、干擾峰、基線噪音、保留時間漂移、攜帶污染、信號強度改變、a)通過參加EQA評價實驗室檢測能力，對能力驗b)無適用的室間質評項目時，建議與外部實驗室進行比對?？稍诿總€分析批次運行前、預防性維護后、真空損失或系統(tǒng)平衡異?；謴秃筮M行系統(tǒng)適用性測b)在每分析批檢測開始時至少檢測一個單空白樣本。9結果報告b)不滿足上述標準時，該分析批不可出具檢測報告，需重新實驗并告知臨床。在待測藥物出峰的位置應無干擾物質響應。如有，當干擾組分的不同基質計算的內標歸一化的基質因子的變異系數包括儲備液和工作液穩(wěn)定性，凍融穩(wěn)定性，短