生物制藥工藝實踐練習題庫及解析

生物制藥工藝實踐練習題庫及解析姓名_________________________地址_______________________________學號______________________密封線1.請首先在試卷的標封處填寫您的姓名，身份證號和地址名稱。2.請仔細閱讀各種題目，在規(guī)定的位置填寫您的答案。一、選擇題1.生物制藥工藝中，以下哪種方法用于細胞培養(yǎng)？

a.真空發(fā)酵

b.微波發(fā)酵

c.液體深層發(fā)酵

d.固體發(fā)酵

2.以下哪項不是細胞分離純化的方法？

a.離心

b.過濾

c.吸附

d.水解

3.生物制藥工藝中，以下哪種酶用于蛋白質(zhì)的裂解？

a.胰蛋白酶

b.磷酸酶

c.核酸酶

d.脂肪酶

4.以下哪項不是純化過程中的雜質(zhì)？

a.蛋白質(zhì)

b.脂質(zhì)

c.核酸

d.鐵離子

5.生物制藥工藝中，以下哪種方法用于病毒滅活？

a.紫外線照射

b.高溫處理

c.磷酸鹽緩沖液

d.碘伏

6.以下哪項不是細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分？

a.葡萄糖

b.氨基酸

c.磷酸鹽

d.碘化鉀

7.生物制藥工藝中，以下哪種方法用于檢測微生物污染？

a.顯微鏡觀察

b.高壓蒸汽滅菌

c.抗生素檢測

d.培養(yǎng)基培養(yǎng)

8.以下哪項不是發(fā)酵過程的關鍵參數(shù)？

a.溫度

b.pH值

c.溶氧量

d.離子強度

答案及解題思路：

1.答案：c.液體深層發(fā)酵

解題思路：細胞培養(yǎng)通常在液體環(huán)境中進行，液體深層發(fā)酵是常用的細胞培養(yǎng)方法，提供細胞生長所需的營養(yǎng)和氧氣。

2.答案：d.水解

解題思路：水解通常指的是化學反應中的一種過程，不是細胞分離純化的方法。其他選項離心、過濾和吸附都是常用的細胞分離純化技術。

3.答案：a.胰蛋白酶

解題思路：胰蛋白酶是一種常用的蛋白水解酶，用于蛋白質(zhì)的裂解，以獲得特定大小的多肽或氨基酸。

4.答案：d.鐵離子

解題思路：在純化過程中，蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸是常見的雜質(zhì)，而鐵離子通常不是雜質(zhì)，它更多是作為催化劑或穩(wěn)定劑使用。

5.答案：b.高溫處理

解題思路：高溫處理是一種有效的病毒滅活方法，能夠破壞病毒的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，使其失去活性。

6.答案：d.碘化鉀

解題思路：碘化鉀不是細胞培養(yǎng)的常規(guī)成分，細胞培養(yǎng)培養(yǎng)基通常包含葡萄糖、氨基酸和磷酸鹽等。

7.答案：d.培養(yǎng)基培養(yǎng)

解題思路：檢測微生物污染的方法包括顯微鏡觀察、高壓蒸汽滅菌和抗生素檢測，而培養(yǎng)基培養(yǎng)是其中最直接和常用的方法。

8.答案：d.離子強度

解題思路：溫度、pH值和溶氧量是發(fā)酵過程中的關鍵參數(shù)，它們直接影響到微生物的生長和代謝。離子強度雖然重要，但不是發(fā)酵過程的關鍵參數(shù)。二、填空題1.生物制藥工藝中，細胞培養(yǎng)分為原代細胞培養(yǎng)和傳代細胞培養(yǎng)兩個階段。

2.細胞分離純化過程中，常用的離心方法有低速離心和高速離心。

3.蛋白質(zhì)裂解常用的酶有胰蛋白酶、膠原蛋白酶和溶菌酶。

4.純化過程中的雜質(zhì)包括內(nèi)源雜質(zhì)、宿主細胞碎片、未結(jié)合的配體和其他蛋白。

5.病毒滅活的方法有物理法、化學法、生物法和結(jié)合法。

6.細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分包括基礎營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子、血清和抗生素。

7.微生物污染的檢測方法有平板計數(shù)法、顯微鏡觀察法、分子生物學檢測法和自動化檢測系統(tǒng)。

8.發(fā)酵過程的關鍵參數(shù)有溫度、pH值、溶解氧和攪拌速度。

答案及解題思路：

1.答案：原代細胞培養(yǎng)傳代細胞培養(yǎng)

解題思路：在生物制藥工藝中，細胞培養(yǎng)過程分為兩個主要階段，即原代細胞培養(yǎng)和傳代細胞培養(yǎng)。原代細胞培養(yǎng)是從組織中分離得到的細胞進行首次培養(yǎng)，而傳代細胞培養(yǎng)則是將原代細胞進行增殖培養(yǎng)。

2.答案：低速離心高速離心

解題思路：離心是細胞分離純化過程中的常用方法，根據(jù)離心速度的不同，可分為低速離心和高速離心。低速離心用于分離細胞和較大的顆粒，而高速離心用于分離更小的顆粒和細胞。

3.答案：胰蛋白酶膠原蛋白酶溶菌酶

解題思路：蛋白質(zhì)裂解是生物制藥工藝中的重要步驟，常用的酶包括胰蛋白酶、膠原蛋白酶和溶菌酶。這些酶能夠特異性地斷裂蛋白質(zhì)的肽鍵，從而實現(xiàn)蛋白質(zhì)的裂解。

4.答案：內(nèi)源雜質(zhì)宿主細胞碎片未結(jié)合的配體其他蛋白

解題思路：在蛋白質(zhì)純化過程中，雜質(zhì)是不可避免的。常見的雜質(zhì)包括內(nèi)源雜質(zhì)、宿主細胞碎片、未結(jié)合的配體和其他蛋白。

5.答案：物理法化學法生物法結(jié)合法

解題思路：病毒滅活是生物制藥工藝中的關鍵步驟，常用的方法包括物理法、化學法、生物法和結(jié)合法。這些方法能夠有效滅活病毒，保證藥物的安全性。

6.答案：基礎營養(yǎng)物質(zhì)生長因子血清抗生素

解題思路：細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分主要包括基礎營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子、血清和抗生素。這些成分能夠為細胞提供必要的生長環(huán)境，保證細胞正常生長。

7.答案：平板計數(shù)法顯微鏡觀察法分子生物學檢測法自動化檢測系統(tǒng)

解題思路：微生物污染的檢測方法主要包括平板計數(shù)法、顯微鏡觀察法、分子生物學檢測法和自動化檢測系統(tǒng)。這些方法能夠幫助檢測和控制微生物污染。

8.答案：溫度pH值溶解氧攪拌速度

解題思路：發(fā)酵過程是生物制藥工藝中的重要環(huán)節(jié)，關鍵參數(shù)包括溫度、pH值、溶解氧和攪拌速度。這些參數(shù)對發(fā)酵過程有重要影響，需要嚴格控制。三、判斷題1.生物制藥工藝中，細胞培養(yǎng)只包括細胞增殖階段。（×）

解題思路：細胞培養(yǎng)過程包括細胞增殖階段，但不僅限于增殖階段，還包括細胞的生長、分裂等過程。

2.細胞分離純化過程中，離心方法包括過濾和吸附。（×）

解題思路：離心方法主要包括離心分離，而過濾和吸附是純化過程中的其他技術手段。

3.蛋白質(zhì)裂解常用的酶有胰蛋白酶、磷酸酶和核酸酶。（×）

解題思路：蛋白質(zhì)裂解通常使用胰蛋白酶，而磷酸酶和核酸酶不常用于蛋白質(zhì)裂解。

4.純化過程中的雜質(zhì)包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和鐵離子。（√）

解題思路：在生物制藥純化過程中，確實可能遇到上述各種雜質(zhì)。

5.病毒滅活的方法有紫外線照射、高溫處理、磷酸鹽緩沖液和碘伏。（×）

解題思路：雖然紫外線照射、高溫處理和碘伏可以用于病毒滅活，但磷酸鹽緩沖液并不具備滅活病毒的功能。

6.細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分包括葡萄糖、氨基酸、磷酸鹽和碘化鉀。（√）

解題思路：細胞培養(yǎng)培養(yǎng)基中確實需要含有葡萄糖、氨基酸、磷酸鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。

7.微生物污染的檢測方法有顯微鏡觀察、高壓蒸汽滅菌、抗生素檢測和培養(yǎng)基培養(yǎng)。（√）

解題思路：這些方法都是常用的微生物污染檢測方法。

8.發(fā)酵過程的關鍵參數(shù)有溫度、pH值、溶氧量和離子強度。（√）

解題思路：發(fā)酵過程中的關鍵參數(shù)包括溫度、pH值、溶氧量和離子強度，它們直接影響發(fā)酵效果。四、簡答題1.簡述細胞培養(yǎng)的基本步驟。

解答：

1.細胞來源的獲?。簭慕M織或器官中提取細胞。

2.細胞的預處理：包括細胞的消化、洗滌和計數(shù)。

3.培養(yǎng)基的準備：配置適宜的培養(yǎng)基，包括基礎培養(yǎng)基和添加的血清、生長因子等。

4.細胞接種：將細胞接種到培養(yǎng)容器中。

5.培養(yǎng)條件控制：包括溫度、pH、氧氣和二氧化碳濃度等。

6.細胞觀察與傳代：定期觀察細胞生長情況，并進行必要的傳代。

2.簡述細胞分離純化的方法。

解答：

1.液液界面法：利用細胞在不同密度介質(zhì)中的浮力差異進行分離。

2.密度梯度離心法：通過不同密度梯度介質(zhì)，使細胞按密度分離。

3.篩選法：利用細胞表面或內(nèi)部標記物進行分離。

4.流式細胞術：利用激光照射細胞，通過分析散射光和熒光信號進行細胞分離。

3.簡述蛋白質(zhì)裂解的目的和常用酶。

解答：

蛋白質(zhì)裂解的目的是為了獲得單個蛋白質(zhì)或多肽，以便于后續(xù)的純化和分析。

常用酶包括：

1.鏈霉蛋白酶：用于裂解細胞膜和細胞器中的蛋白質(zhì)。

2.胰蛋白酶：用于裂解富含堿性氨基酸的蛋白質(zhì)。

3.胃蛋白酶：用于裂解富含酸性氨基酸的蛋白質(zhì)。

4.簡述純化過程中的雜質(zhì)及處理方法。

解答：

純化過程中的雜質(zhì)包括：

1.蛋白質(zhì)：通過SDSPAGE、凝膠過濾等方法去除。

2.DNA/RNA：通過DNA酶、RNA酶或親和層析等方法去除。

3.糖類和脂類：通過離子交換層析、親和層析等方法去除。

5.簡述病毒滅活的方法及適用范圍。

解答：

病毒滅活方法包括：

1.熱滅活：通過高溫處理病毒，使其失活。

2.化學滅活：使用化學試劑如甲醛、乙醇等滅活病毒。

3.輻照滅活：使用紫外線、γ射線等輻射滅活病毒。

適用范圍：適用于疫苗、生物制品等的滅活。

6.簡述細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分及作用。

解答：

細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分包括：

1.營養(yǎng)成分：氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等。

2.血清或血漿：提供生長因子、激素等。

3.糖類：提供能量。

4.pH調(diào)節(jié)劑：維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定。

5.氧氣和二氧化碳：維持細胞正常代謝。

7.簡述微生物污染的檢測方法及注意事項。

解答：

微生物污染的檢測方法包括：

1.顯微鏡觀察：觀察細胞或培養(yǎng)物中的微生物。

2.培養(yǎng)檢測：將樣本接種到培養(yǎng)基中，觀察生長情況。

3.分子生物學檢測：如PCR、基因測序等。

注意事項：

1.樣本采集和處理的無菌操作。

2.使用合適的培養(yǎng)基和檢測方法。

3.定期進行微生物檢測。

8.簡述發(fā)酵過程的關鍵參數(shù)及其對發(fā)酵的影響。

解答：

發(fā)酵過程的關鍵參數(shù)包括：

1.溫度：影響微生物的生長和代謝。

2.pH：影響微生物的生長和酶活性。

3.氧氣濃度：影響需氧微生物的生長。

4.攪拌速度：影響氧氣傳遞和混合均勻性。

5.營養(yǎng)成分：影響微生物的生長和代謝。

這些參數(shù)的變化會直接影響發(fā)酵效率和產(chǎn)品質(zhì)量。五、論述題1.論述生物制藥工藝中細胞培養(yǎng)的重要性。

解答：

細胞培養(yǎng)是生物制藥工藝的基礎環(huán)節(jié)，其重要性體現(xiàn)在：

a)保證細胞生長穩(wěn)定，為生產(chǎn)高質(zhì)量生物制品提供基礎。

b)篩選和優(yōu)化生產(chǎn)菌株，提高生物制品產(chǎn)量和活性。

c)為下游純化工藝提供純凈的細胞物料，降低生產(chǎn)成本。

2.論述生物制藥工藝中細胞分離純化的難點及解決方法。

解答：

細胞分離純化存在以下難點：

a)細胞與細胞、細胞與雜質(zhì)間的粘附和相互作用。

b)分離純化過程中的細胞損傷和活力下降。

解決方法：

a)采用適宜的分離介質(zhì)和操作條件，減少細胞損傷。

b)選擇高效的分離純化方法，如親和層析、膜過濾等。

3.論述生物制藥工藝中蛋白質(zhì)裂解技術的應用及注意事項。

解答：

蛋白質(zhì)裂解技術在生物制藥工藝中的應用包括：

a)獲取目標蛋白。

b)去除蛋白中的非目標組分。

注意事項：

a)裂解條件的選擇要適當，避免蛋白結(jié)構(gòu)改變。

b)選擇高效的裂解劑，減少裂解時間。

4.論述生物制藥工藝中純化過程中的雜質(zhì)來源及處理方法。

解答：

純化過程中的雜質(zhì)來源：

a)生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的內(nèi)源雜質(zhì)。

b)外部環(huán)境引入的污染物。

處理方法：

a)采用合適的純化方法，如離子交換、親和層析等。

b)對生產(chǎn)環(huán)境進行嚴格控制，減少污染。

5.論述生物制藥工藝中病毒滅活技術的選擇及應用。

解答：

病毒滅活技術的選擇及應用：

a)選擇高效、低毒、廣譜的滅活方法，如輻射、化學滅活等。

b)嚴格操作，保證滅活效果。

6.論述生物制藥工藝中細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分及調(diào)整方法。

解答：

細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分：

a)營養(yǎng)物質(zhì)：葡萄糖、氨基酸、維生素等。

b)生長因子：生長激素、細胞因子等。

調(diào)整方法：

a)根據(jù)細胞生長需求，調(diào)整營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子比例。

b)監(jiān)測細胞生長狀況，及時調(diào)