TNAIA 0345-2024 雞蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亞砜的測(cè)定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ICS67.050CCSA032T/NAIA團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/NAIA0345—2024雞蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亞砜的測(cè)定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法DeterminationofdiclazurilandtoltrazurilponazurilToltrazurilsulfoxideineggsHPLC-MS/MS2024-12-03發(fā)布 2024-12-15實(shí)施寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì) 發(fā)布II前 言GB/T1.1-20201編寫(xiě)。本文件由寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì)提出并歸口。（監(jiān)管重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（枸杞及葡萄酒質(zhì)量安全中心、寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì)。本文件主要起草人：馬雪梅、湯麗華、朱燕燕、王鵬、孫少憶、呂曉東、王芳煥、王紫昕、王澤嵐、龔慧、謝芳、李強(qiáng)、張小飛。PAGEPAGE1雞蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亞砜的測(cè)定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法范圍-譜檢測(cè)方法。本文件適用于雞蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亞砜的測(cè)定和確證。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法SN/T2318-2009高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。原理試樣經(jīng)乙酸乙酯提取，反相色譜柱分離，以保留時(shí)間定性，供高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定和確證，內(nèi)標(biāo)法定量。試劑和材料本方法所用的試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。試劑乙酸乙酯：色譜純。乙腈：色譜純。甲醇：色譜純。50%50mL100mL，混合均勻。氯化鈉：優(yōu)級(jí)純標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品：地克珠利（Diclazuril，CAS101831-37-2）、妥曲珠利（Toltrazuril，CAS號(hào)69004-03-1）、妥曲珠利砜（PonazurilCAS69004-04-2）、妥曲珠利亞砜（ToltrazurilSulfoxide，CAS69004-15-5）、妥曲珠利-D3（Toltrazuril-D3，CAS1353867-75-0）。T/NAIA0345—2024T/NAIA0345—2024PAGEPAGE2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（100.0μg/mL）：分別準(zhǔn)確移取地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亞10mg（100.0μg/mL冷凍避光貯存。1.0mL10mL10.0μg/mL妥曲珠利-D3儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確移取妥曲珠利-D3標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量，用甲醇溶解并定容,配制成10.0μg/mL的妥曲珠利-D3內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液，于冷凍避光貯存。妥曲珠利-D3工作液：準(zhǔn)確移取妥曲珠利-D31mL，用甲醇溶解并定容,配制成1.0μg/mL的妥曲珠利-D3內(nèi)標(biāo)工作液，于冷凍避光貯存。儀器和設(shè)備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配備電噴霧離子源。0.1mg0.01g。渦旋混合器。10000r/min。氮吹儀。分析步驟試樣的制備0.5kg雞蛋，去殼，勻漿，均分成兩份，分別裝入潔凈容器中，密封，并標(biāo)明標(biāo)記，于-18℃以下冷凍避光保存。試樣的提取5g（0.01g）樣品準(zhǔn)確加入適量妥曲珠利-D310mL2g5min后，49000rpm/min5min,5mLN2流下緩慢吹1mL50%0.22μm濾膜，供超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。儀器參考條件液相色譜參考條件色譜柱:C18，2.1mm×100mm1.8μm或性能相當(dāng)。柱溫：40℃。流動(dòng)相：A：水，B1。流速：0.3mL/min。進(jìn)樣量：10μL。表1 流動(dòng)相及梯度洗脫條件時(shí)間/min流速/（mL/min）流動(dòng)相A/%流動(dòng)相B/%0.000.360404.000.320805.000.301006.000.301006.100.360408.000.36040質(zhì)譜參考條件離子源：電噴霧離子源（ESI）。掃描方式：負(fù)離子掃描。檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）。。7L/min。霧化器壓力：30psi定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞能量等參數(shù)參見(jiàn)附錄A?；|(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線7.1同體積混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入相同體積的妥曲珠利-D31.0mL1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0ng/mL線。定性測(cè)定許偏差之內(nèi)（3），則可判定樣品中存在對(duì)應(yīng)的被測(cè)物。表2 定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差離子豐度比%＞50＞20~50＞10~20≤10允許相對(duì)偏差%±20±25±30±50定量測(cè)定7.2.17.2.2B內(nèi)標(biāo)法定量?？瞻自囼?yàn)除不加試樣外，均按上述步驟進(jìn)行。平行試驗(yàn)按以上步驟對(duì)同一試樣進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)測(cè)定。分析結(jié)果的表述試樣中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亞砜的含量按式（1）進(jìn)行計(jì)算：X cV f

式中：

m 1000

（1）X──試樣中各種化合物含量，單位為微克每千克（μg/kg）；c──由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的試樣溶液濃度，單位為納克每毫升V──試樣的最后定容體積，單位為毫升（mL）；m──試樣質(zhì)量，單位為克f──試樣的稀釋倍數(shù)。注：測(cè)定結(jié)果用平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。精密度在重復(fù)性測(cè)定條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%，在3.0μg/kg~40μg/kg范圍內(nèi)，加標(biāo)回收率范圍60~120%。其他當(dāng)稱樣量為5.0g,定容體積為1.0mL時(shí)，地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亞砜的定量限為3.0μg/kg，檢出限為1.0μg/kg。附錄A(資料性)地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亞砜的質(zhì)譜參數(shù)被測(cè)物名稱母離子(m/z)子離子(m/z)碎裂電壓/V碰撞電壓/被測(cè)物名稱母離子(m/z)子離子(m/z)碎裂電壓/V碰撞電壓/V地克珠利40733613520405334*13520妥曲珠利4244241200425425*1200妥曲珠利-D34284281200427427*1200妥曲珠利砜457457*13004564561300妥曲珠利亞砜44038313016371*13018注：對(duì)于不同質(zhì)譜儀器，儀器參數(shù)可