藥物分析57課件

藥物分析第八章維生素類藥物分析達(dá)·伽馬（VascodaGama，1460年-1524年12月24日），出生于葡萄牙錫尼什，葡萄牙航海家、探險(xiǎn)家，早期殖民主義者。他是從歐洲繞好望角到印度航海路線的開(kāi)拓者，其開(kāi)辟的航路促進(jìn)了歐、亞商業(yè)關(guān)系的發(fā)展。1497年，達(dá)伽馬的160船員中100名因壞血病死亡1593年，英國(guó)海軍一年中高達(dá)1萬(wàn)多人患?jí)难?8世紀(jì)，英國(guó)醫(yī)生倫達(dá)發(fā)現(xiàn)檸檬可治療壞血病1924年，英國(guó)科學(xué)家齊佛從檸檬汁中提取到維生素C1932年匹茨堡大學(xué)兩名學(xué)者從檸檬汁中分離并證明維生素C1933年瑞士科學(xué)家用葡萄糖為原料合成出維生素C目錄CONTENTS維生素A維生素E維生素B1維生素C1324維生素C（Vitamin

C）又稱L-抗壞血酸，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上和糖類十分相似，有兩個(gè)手性碳原子，4種光學(xué)異構(gòu)體，其中以L-構(gòu)型右旋體的生物活性最強(qiáng)?！吨袊?guó)藥典》（2015年版）收載維生素C、維生素C片劑、維生素C泡騰片、維生素C泡騰顆粒、維生素C注射劑、維生素C顆粒劑。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）化學(xué)結(jié)構(gòu)維生素C分子中具有二烯醇結(jié)構(gòu)和內(nèi)酯環(huán)。

維生素C（L-抗壞血酸）

（二）主要理化性質(zhì)

1.外觀性狀：為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，味酸；久置色漸變微黃。

溶解性：本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。

2.旋光性結(jié)構(gòu)中有兩個(gè)手性碳原子（C4、C5），具有旋光性，其中L-(+)-維生素C活性最強(qiáng)。3.酸性維生素C分子結(jié)構(gòu)中C3上的羥基受共軛效應(yīng)的影響，酸性較強(qiáng)（pK1=4.17）；C2上的羥基酸性極弱（pK2=11.57），故維生素C一般表現(xiàn)為一元酸，可與碳酸氫鈉作用生成鈉鹽。4.還原性分子結(jié)構(gòu)中的連二烯醇基具有極強(qiáng)的還原性，易被氧化劑氧化為去氫維生素C，加氫又可還原為維生素C。在堿性溶液或強(qiáng)酸性溶液中，去氫維生素C可進(jìn)一步水解生成二酮古洛糖酸而失去活性，此反應(yīng)為不可逆反應(yīng)。5.水解性維生素C和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不致發(fā)生水解，因雙鍵使內(nèi)酯環(huán)變得較穩(wěn)定；但在強(qiáng)堿中，內(nèi)酯環(huán)可水解，生成酮酸鹽。6.糖類的性質(zhì)維生素C的化學(xué)結(jié)構(gòu)與糖類似，具有糖的性質(zhì)和反應(yīng)。7.紫外吸收特性由于維生素C分子結(jié)構(gòu)中具有共軛雙鍵，其稀鹽酸溶液在243nm波長(zhǎng)處有最大吸收，為560，可用于鑒別和含量測(cè)定。二、鑒別（一）與硝酸銀及2,6靛酚的反應(yīng)（原料藥）1.測(cè)定方法取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成2等份，在一份中加硝酸銀試液0.5ml，即生成銀的黑色沉淀；在另一份中，加二氯靛酚鈉試液1～2滴，試液的顏色即消失。2.解析維生素C分子中有二烯醇的結(jié)構(gòu)，具有極強(qiáng)的還原性。加硝酸銀試液0.5ml，即生成銀的黑色沉淀加二氯靛酚鈉試液1～2滴，試液的顏色即消失（二）薄層色譜法鑒別（片劑、注射劑）測(cè)定方法：取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于維生素C10mg），加水10ml，振搖使維生素C溶解，濾過(guò)，取濾液作為供試品溶液；另取維生素C對(duì)照品，加水溶解并稀釋制成1ml中約含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5∶4∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，晾干，立即（1h內(nèi)）置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。（三）與其他氧化劑反應(yīng)（注射劑）測(cè)定方法：取本品，用水稀釋制成1ml中含維生素C10mg的溶液，取4ml，加0.1mol/L的鹽酸溶液4ml，混勻，加0.05%亞甲藍(lán)乙醇溶液4滴，置40℃水浴中加熱，3min內(nèi)溶液應(yīng)由深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)色或完全褪色。解析：維生素C還可以被亞甲藍(lán)、高錳酸鉀、堿性酒石酸銅試液、磷鉬酸等氧化劑氧化為去氫抗壞血酸，同時(shí)可以使其試劑褪色，產(chǎn)生沉淀或呈現(xiàn)顏色。三、檢查《中國(guó)藥典》（2015年版）規(guī)定維生素C要檢查重金屬、細(xì)菌內(nèi)毒素、熾灼殘?jiān)?、溶液的澄清度與顏色、草酸、鐵和銅等。（一）溶液的澄清度與顏色測(cè)定方法：取本品3.0g，加水15ml，振搖使溶解，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯色，將溶液經(jīng)4號(hào)垂熔玻璃漏斗濾過(guò)，取濾液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法（通則0401），在420nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，不得過(guò)0.03。解析：維生素C及其制劑在貯存期間易變色，且顏色隨貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸加深。這是因?yàn)榫S生素C的水溶液不穩(wěn)定，在高于或低于pH5～6時(shí)，易受空氣、光線和溫度的影響，分子中的內(nèi)酯環(huán)經(jīng)水解、脫羧、脫水生成糠醛聚合呈色?，F(xiàn)行版《中國(guó)藥典》采用紫外-可見(jiàn)分光光度法，通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)控制有色雜質(zhì)的限量。

（二）草酸

測(cè)定方法：取本品0.25g，加水4.5ml，振搖使維生素C溶解，加氫氧化鈉試液0.5ml、稀醋酸1ml與氯化鈣試液0.5ml，搖勻，放置1h，作為供試品溶液；另精密稱取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，加稀醋酸1ml與氯化鈣試液0.5ml，搖勻，放置1h，作為對(duì)照溶液。供試品溶液產(chǎn)生的渾濁不得濃于對(duì)照溶液（0.3%）。解析：草酸是維生素C的代謝產(chǎn)物之一，過(guò)多的草酸可能在人體內(nèi)造成結(jié)石，通過(guò)比濁法控制維生素C中草酸的限量，可增加藥物的安全性。

（三）鐵、銅測(cè)定方法：原子吸收分光光度法。解析：由于微量的鐵鹽和銅鹽會(huì)加速維生素C的氧化、分解。四、含量測(cè)定（一）碘量法（原料藥、片劑、注射劑）1.測(cè)定方法取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過(guò)的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色并在30s內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6。含C6H8O6不得少于99.0%。2.解析操作中加入稀醋酸使滴定在酸性溶液中進(jìn)行，在酸性介質(zhì)中維生素C受空氣中的氧氧化速度減慢，但供試品溶于稀酸后仍需立即滴定。使用新煮沸過(guò)的冷水溶解供試品可減少水中溶解的氧對(duì)測(cè)定的干擾。片劑中所加入的輔料對(duì)測(cè)定有干擾，應(yīng)先溶解后再濾過(guò)，取續(xù)濾液進(jìn)行測(cè)定。注射劑在處方中加入抗氧劑焦亞硫酸鈉，而焦亞硫酸鈉易水解生成亞硫酸氫鈉，消耗一定量的碘滴定液，對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響，故在滴定前加入2ml丙酮排除干擾。3.含量計(jì)算（1）原料藥：式中，V為消耗碘滴定液的體積（ml）；F為碘滴定液的濃度校正因子；T為滴定度（mg/ml）；m為供試品的取樣量（g）。（2）片劑：式中，V為消耗碘滴定液的體積（ml）；F為碘滴定液的濃度校正因子；T為滴定度（mg/ml）；W（3）注射劑：式中，