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文檔簡介

制劑一廠QC閆占寬微生物基本特點(diǎn)與鑒別科技為本·創(chuàng)造健康生活微生物特點(diǎn)、影響生長繁殖因素產(chǎn)品召回中的微生物分析微生物鑒別策略與技術(shù)科技為本·創(chuàng)造健康生活微生物特性、影響生長繁殖因素種類多、分布廣個(gè)體小,胃口大繁殖快、轉(zhuǎn)化快適應(yīng)強(qiáng)、易變異古菌:通常生活在地球上極端的環(huán)境或者生命出現(xiàn)初期的自然環(huán)境中,如超高溫、高酸堿度、高鹽及無氧環(huán)境,大多數(shù)營自養(yǎng)和異樣生活。代表著生命的極限,確定了生物圈的范圍。馬迪根.微生物生物學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,2001MDD的困擾科技為本·創(chuàng)造健康生活一根頭發(fā)的微生物培養(yǎng)結(jié)果手掌的微生物培養(yǎng)結(jié)果:手掌的微生物培養(yǎng)結(jié)果洗手后消毒后更衣順序人體微生物分布種類科技為本·創(chuàng)造健康生活1014活的微生物,是人的一部分。其中皮膚有1012,口腔有1010,腸道1014.皮膚:表皮葡萄球菌、頭狀葡萄球菌、科室葡萄球菌、棒狀桿菌屬、丙

酸桿菌、痤瘡桿菌、微球菌屬。口腔:唾液鏈球菌,血液鏈球菌。毛發(fā):毛癬菌屬、表皮癬菌屬、小孢子菌屬。腸道:腸桿菌包括腸桿菌屬,埃希菌菌屬,乳酸桿菌,雙歧桿菌,糞桿菌

屬,梭菌人體微生物分布種類表皮葡萄球菌頭狀葡萄球菌科氏葡萄球菌棒狀桿菌屬丙酸桿菌痤瘡桿菌微球菌屬唾液鏈球菌血液鏈球菌毛癬菌屬表皮癬菌屬小孢子菌屬腸桿菌屬埃希菌菌屬乳酸桿菌雙歧桿菌糞桿菌屬梭菌口腔皮膚毛發(fā)腸道科技為本·創(chuàng)造健康生活微生物在空氣中的分布空氣本身缺乏微生物生活所必需的營養(yǎng)物,日光對(duì)微生物也具有很強(qiáng)的殺菌作用,空氣一般是干燥的,因此空氣不是微生物生活的良好環(huán)境。(芽孢)空氣中的微生物主要來源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵,這類微生物大人和動(dòng)物,通過呼吸道排出的,其中也包含有病原微生物,懸浮在大氣中??諝庵写嬖谳^多的、存活時(shí)間較長的是各種真菌、放線菌的孢子及細(xì)菌芽胞。如果潔凈區(qū)環(huán)境空氣中檢測出來的絕大部分是G+球菌,和普通空氣中的分布是不同的,顯然是人員散發(fā)出來的??萍紴楸尽?chuàng)造健康生活微生物特性、影響生長繁殖因素種類多、分布廣個(gè)體小,胃口大繁殖快、轉(zhuǎn)化快適應(yīng)強(qiáng)、易變異影響微生物生長繁殖的因素固體粉末的水分活度一般0.5左右科技為本·創(chuàng)造健康生活1、原輔料檢測時(shí)間長,導(dǎo)致的采購、生產(chǎn)壓力;2、成品延長放行周期,增加了庫存成本和市場銷售壓力。3、許多非無菌藥品的微生物污染可能性很低,因此測試的價(jià)值不大。為什么想要減少微生物限度測試?需氧菌3~5天,霉菌酵母菌培養(yǎng)5~7天藥品GMP指南:質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室與物料管理;Ch.p20159202非無菌產(chǎn)品微生物限度檢査指導(dǎo)原則科技為本·創(chuàng)造健康生活固體原輔料水分活度:水分活度是對(duì)游離水的測定,不包括對(duì)結(jié)合水。同其他產(chǎn)品特性一樣,如低或高pH、無營養(yǎng)物質(zhì)、含表面活性劑、抗菌劑,能防止微生物生長耐受性較強(qiáng)的微生物,如能形成芽孢的梭菌、桿菌、沙門氏菌及絲狀真菌,雖然它們并不在低水分活度的產(chǎn)品中增殖,但會(huì)存活在產(chǎn)品中降低水分活度對(duì)微生物生長的作用:

較長的停滯期、較慢的生長速度、較少的穩(wěn)定期的微生物數(shù)量,減少微生物毒素的產(chǎn)生在某個(gè)微生物專有的水分活度以下,該微生物不會(huì)生長

水分活度下降后,微生物的耐熱性會(huì)提高什么是水分活度?USP38<1112>科技為本·創(chuàng)造健康生活USP<1112>細(xì)菌水分活度(Aw)霉菌酵母菌水分活度(Aw)銅綠假單胞菌0.97黑根霉0.93蠟狀芽孢桿菌0.95毛霉菌屬0.92肉毒桿菌A0.95膠紅酵母0.92大腸桿菌 0.95釀酒酵母菌0.90產(chǎn)氣莢膜桿菌0.95擬青霉0.84綠色乳桿菌0.95產(chǎn)黃青霉0.83沙門菌0.95煙曲霉菌0.82產(chǎn)氣腸桿菌0.94青霉菌屬 0.81枯草芽孢桿菌0.90黃曲霉菌0.78微球菌屬0.93黑曲霉菌(嗜高溫)0.77金黃色葡萄球菌0.86嗜滲酵母0.62嗜鹽桿菌0.75嗜干酵母0.61固體原輔料科技為本·創(chuàng)造健康生活產(chǎn)品水分活度最可能的污 建議的測試鼻腔吸入劑0.99革蘭氏陰性菌TAMC,TCYMC,金黃色葡萄球菌,銅綠假單胞洗發(fā)香波0.99革蘭氏陰性菌TAMC,TCYMC,金黃色葡萄球菌,銅綠假單胞菌抗酸劑0.99革蘭氏陰性菌TAMC,TCYMC,大腸埃希菌,沙門氏菌 局部乳劑0.97革蘭氏陰性菌TAMC,TCYMC,金黃色葡萄球菌,銅綠假單胞菌口服液0.90革蘭氏陽性菌及真菌TAMC,TCYMC口服混懸劑0.87真菌TAMC,TCYMC局部膏劑0.55無減少測試唇用軟膏0.36無減少測試陰道/直腸栓劑0.30無減少測試片劑0.36無減少測試充液膠囊0.30無減少測試USP<1112>科技為本·創(chuàng)造健康生活溫度

在醫(yī)學(xué)微生物研究方面,主要研究接近人體溫度范圍的微生物,因?yàn)橹挥羞@一溫度下能夠生長的微生物才最可能感染人體。所以培養(yǎng)溫度一般在20~37℃的范圍內(nèi)。(這樣的溫度能培養(yǎng)出環(huán)境中的所有微生物?)

嗜寒性的G-細(xì)菌(可以生長在10℃的水中)存在于水中,并且是內(nèi)毒素的來源,所以也是研究對(duì)象。影響微生物生長繁殖的因素人體環(huán)境EM

培養(yǎng)策略Cited:OliverGordon.ComparisonofDifferentIncubationConditionsforMicrobiologicalEnvironmentalMonitoring科技為本·創(chuàng)造健康生活什么是一個(gè)CFU在活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí),由單個(gè)菌體或聚集成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長繁殖所形成的集落,稱為菌落形成單位,以其表達(dá)活菌的數(shù)量鏈球菌酵母醫(yī)藥方面相關(guān)微生物1、可多可少2、102科技為本·創(chuàng)造健康生活隨著微生物增加,擁擠現(xiàn)象會(huì)降低估計(jì)值(爭奪營養(yǎng)、空間)隨著微生物減少,隨機(jī)誤差影響越來越大,導(dǎo)致不準(zhǔn)確的估計(jì)平皿計(jì)數(shù)上限平皿計(jì)數(shù)下限(無法計(jì)數(shù))科技為本·創(chuàng)造健康生活細(xì)菌結(jié)構(gòu)(染色)G+細(xì)菌

細(xì)胞壁厚,主要成分是肽聚糖,占細(xì)胞干重的50%~80%.革蘭氏染色呈紫色G-細(xì)菌

細(xì)胞壁薄,主要成分是LPS,有致熱作用,是細(xì)菌內(nèi)毒素有效成分。

革蘭氏染色呈紅色天然內(nèi)毒素vsLPS科技為本·創(chuàng)造健康生活細(xì)菌生長周期無菌檢查14天,痤瘡桿菌生物指示劑培養(yǎng)時(shí)間Cited:HELENBATHGATE.TheIncubationPeriodinSterilityTestingPDAJPharmSciandTech1993,47254-257科技為本·創(chuàng)造健康生活典型的酵母是橢圓形,細(xì)胞壁主要是結(jié)構(gòu)性多糖,葡聚糖占細(xì)胞壁干重50%~60%,甘露糖占15%~23%。葡聚糖主要以β-1,6-葡聚糖、β-1,3-葡聚糖(內(nèi)毒素檢驗(yàn)假陽性)、β-1,3-β-1,6-葡聚糖和殼多糖的混合物。(葡聚糖反應(yīng)激活步驟少,延滯期短,速率低)菌落形態(tài):大,疏松,絨毛狀,絮狀,蜘蛛網(wǎng)狀,初期無色,后期產(chǎn)生孢子有顏色霉菌菌落什么會(huì)向潔凈區(qū)引入霉菌

EM結(jié)果沒有霉菌,并不代表環(huán)境中真的沒有??赡苁怯捎贓M程序中缺少真菌特異性的監(jiān)測。對(duì)真菌的警戒限缺乏真正的了解,最終導(dǎo)致污染。

1、絲狀真菌更容易漂浮在空氣中而不是附著在表面上,這是它們主要的傳播途徑。2、室內(nèi)或廠房設(shè)備里面被絲狀真菌污染,通常認(rèn)為是曲霉屬。潔凈區(qū),高枝孢菌和青霉菌常見,曲霉菌較少。3、回收種類方面、回收數(shù)量方面,SDA最好。實(shí)際環(huán)境監(jiān)測,某些霉菌不能在SDA上生長,并不是說SDA不支持他們生長,可能是在潔凈區(qū)處于亞致死狀態(tài),實(shí)驗(yàn)室復(fù)增后,就能夠生長。一些在醫(yī)藥方面有價(jià)值的微生物微生物名稱特征藥用價(jià)值放線菌G+,絲狀桿菌抗生素生產(chǎn)嗜熱脂肪芽孢桿菌G+,桿菌、需氧,產(chǎn)芽孢濕熱滅菌驗(yàn)證枯草芽孢桿菌G+,桿菌,需氧,產(chǎn)芽孢濕熱滅菌驗(yàn)證、環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證短小芽孢桿菌G+,桿菌,需氧,產(chǎn)芽孢射線滅菌驗(yàn)證缺陷短波單胞菌G-,微需氧、桿菌0.22um濾芯截留實(shí)驗(yàn)生孢梭菌G+,桿菌,厭氧,產(chǎn)芽孢確認(rèn)厭氧的生長條件大腸桿菌G-,腸桿菌,兼性厭氧生產(chǎn)內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品,防腐效力極限測試Cited:JulieSchwedock,BrevundimonasdiminutaisnotalwayssodiminutiveGrowthconditionsaffectsize.(PMF)/PDATR12007USP<1231>0.1umFBIO>12Cited:LUISJIMENEZ:MicrobialDiversityinPharmaceuticalProductRecallsandEnvironmentsPDA20071998~2006FDA產(chǎn)品召回情況產(chǎn)品召回1998~2006非無菌產(chǎn)品(134批)G-細(xì)菌

60%G+細(xì)菌

4%霉菌酵母菌

23%無菌產(chǎn)品(193批)缺乏無菌保障

78%霉菌酵母菌

7%G-細(xì)菌

6%G+細(xì)菌

1%洋蔥伯克霍爾德菌(FDA建議),假單胞菌屬、皮氏羅爾斯頓氏菌占48%科技為本·創(chuàng)造健康生活R2A培養(yǎng)基比營養(yǎng)瓊脂檢出多(菌落特點(diǎn),小、透明、反光)有很多菌,在R2A也不能形成肉眼可見的菌落,熒光方法可以。還有很多菌,熒光法也不可以,但16sDNA可以(VBNC微生物)Milliflex?Quantum–DetectionofMicrobialContaminantsinWaterSamplesR2A培養(yǎng)基平皿計(jì)數(shù)如何操作?科技為本·創(chuàng)造健康生活

無菌產(chǎn)品78%缺乏保證,6%G-細(xì)菌,1%G+細(xì)菌。洋蔥伯克霍爾德菌占比2.2%。霉菌酵母菌占比7%,主要是青霉菌屬和曲霉菌屬。主要是人員操作,環(huán)境缺乏控制,或者設(shè)計(jì)缺陷有關(guān)。環(huán)境結(jié)果很少出現(xiàn)霉菌,霉菌召回比卻很高從1998到2006沒有因?yàn)閱为?dú)的G+細(xì)菌(人員皮膚如葡萄球菌、棒狀桿菌、丙酸桿菌)污染造成的召回。只有1%召回是含有G+菌。無菌制劑科技為本·創(chuàng)造健康生活鑒別神器存在嗎?鑒別不出來怎么辦?科技為本·創(chuàng)造健康生活USP38<1113>Ch.p9204微生物鑒定需達(dá)到的水平視情況而定,包括種/屬鑒定和菌株分型。大多數(shù)非無菌藥品生產(chǎn)過程和部分無菌生產(chǎn)環(huán)境的中,只需要做菌落形態(tài)學(xué)、細(xì)胞形態(tài)學(xué)(桿狀、球狀、細(xì)胞群、孢子形成模式等)、革蘭氏染色或其它染色法、某些能夠給出鑒定結(jié)論的關(guān)鍵生化反應(yīng)(如氧化酶、過氧化氫酶和凝固酶反應(yīng)),即可滿足需要;非無菌產(chǎn)品的控制菌檢查一般應(yīng)達(dá)到種屬的水平;

無菌試驗(yàn)結(jié)果陽性和培養(yǎng)基灌裝失敗時(shí),對(duì)檢出的微生物鑒定至少達(dá)到種屬水平,必要時(shí)需達(dá)到菌株水平??萍紴楸尽?chuàng)造健康生活GMP實(shí)施指南-無菌藥品環(huán)境監(jiān)測14.6:對(duì)關(guān)鍵區(qū)、周圍潔凈區(qū)以及人員的監(jiān)控,應(yīng)包括將微生物鑒定到屬(或必要時(shí)鑒定到種)的常規(guī)試驗(yàn)無菌檢查15.3:如果將微生物鑒別結(jié)果作為判定無菌檢查試驗(yàn)無效的惟一依據(jù),則必須使用比微生物學(xué)/生物化學(xué)方法更為靈敏的技術(shù),如確定RNA/DNA同源性的分子分型方法??萍紴楸尽?chuàng)造健康生活FDA:無菌生產(chǎn)工藝指南2004IX無菌保障9、培養(yǎng)基模擬灌裝結(jié)果解釋Anycontaminatedunitshouldbeconsideredobjectionableandinvestigated.ThemicroorganismsshouldbeidentifiedtospecieslevelX實(shí)驗(yàn)室控制關(guān)鍵潔凈區(qū)及人員中的微生物鑒別到種/屬M(fèi)onitoringcriticalandimmediatelysurroundingcleanareasaswellaspersonnelshouldincluderoutineidentificationofmicroorganismstothespecies(or,whereappropriate,genus)level.科技為本·創(chuàng)造健康生活現(xiàn)行的是:《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊》第二版,共五卷第一卷、古生菌、藍(lán)細(xì)菌、光合細(xì)菌和最早分支的屬古生菌2001年出版第二卷、變形桿菌第三卷、低G+C含量的革蘭氏陽性細(xì)菌2009年出版第四卷、高G+C含量的革蘭氏陽性細(xì)菌2010年出版第五卷、放線菌2012.05出版,中國放線菌學(xué)家在這方面做出杰出貢獻(xiàn)參考:李文均,職曉陽,

唐蜀昆:我國放線菌系統(tǒng)學(xué)研究歷史、現(xiàn)狀及未來發(fā)展趨勢科技為本·創(chuàng)造健康生活本版本與之前版本的重要區(qū)別是,其內(nèi)容是依據(jù)16SRNA

的核苷酸序列分析,按照系統(tǒng)發(fā)育為框架編寫的,而不是按照表型結(jié)構(gòu)編寫的。系統(tǒng)發(fā)育樹或樹狀圖顯示了微生物之間的遺傳關(guān)系。這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用導(dǎo)致了一些已知微生物的分類和命名修改。例如,ATCC16404即真菌黑曲霉被重名為巴西曲霉(CMCC98003未改)。一般而言,微生物親緣關(guān)系小于或等于97%被認(rèn)定為不同的屬,那些親緣關(guān)系小于或等于99%被認(rèn)定為不同的種?;蚝捅硇偷牟町愋韵鄬?duì)比較少見。具有相同或非常相似基因的微生物具有不同的表型、具有相似表型的卻具有不同的基因,不能被歸為同種或同屬。當(dāng)微生物特征、試驗(yàn)歷史記錄和分離來源被考慮進(jìn)來時(shí),可以避免單獨(dú)使用基因數(shù)據(jù)做出毫無意義的結(jié)論。資源是有限的科技為本·創(chuàng)造健康生活在我的日常監(jiān)控中,什么時(shí)候需要鑒別到種屬?發(fā)生了微生物偏差

培養(yǎng)基模擬灌裝(分裝)試驗(yàn)出現(xiàn)的陽性樣品中的微生物;

無菌檢查中,檢品或者陰性對(duì)照呈陽性的微生物;無菌生產(chǎn)工藝中,過濾前藥液微生物污染水平檢查出現(xiàn)的微生物(出現(xiàn)就鑒別,可以更佳的評(píng)估風(fēng)險(xiǎn));(100ml檢驗(yàn)量依據(jù))

最終滅菌工藝中,滅菌前藥液微生物污染水平檢查超標(biāo)或耐熱性檢查呈陽性的微生物;(F0>8和F0>12檢驗(yàn)項(xiàng)目區(qū)別)

微生物限度檢查中,結(jié)果超標(biāo)時(shí)的微生物;控制菌檢查中,當(dāng)出現(xiàn)疑似菌落,不能確定是否為所檢控制菌的時(shí)候(標(biāo)準(zhǔn)102)

環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)超過標(biāo)準(zhǔn)、水監(jiān)測超過標(biāo)準(zhǔn)、原輔料監(jiān)測超過標(biāo)準(zhǔn)Cited:HARRYYANG.ARisk-basedApproachtoSettingSterileFiltrationBioburdenLimits科技為本·創(chuàng)造健康生活在我的日常監(jiān)控中,什么時(shí)候需要鑒別到種屬?需要了解微生物種類分布的情況

無菌灌裝工藝中,A級(jí)區(qū)和B級(jí)區(qū)日常環(huán)境監(jiān)測發(fā)現(xiàn)的微生物;

與關(guān)鍵區(qū)相鄰的C\D級(jí)別選擇鑒別,用于研究外部和關(guān)鍵區(qū)的微生物之間的關(guān)系

工藝用水系統(tǒng)中出現(xiàn)的微生物,主要包括:純化水儲(chǔ)罐和分配系統(tǒng),注射用水制備系統(tǒng)、儲(chǔ)罐和分配系統(tǒng)。(選擇性鑒別)需要進(jìn)行確認(rèn)的情況

外購的標(biāo)準(zhǔn)菌株,為防止運(yùn)輸和其他原因造成的錯(cuò)誤,傳種的同時(shí)進(jìn)行鑒別確認(rèn)外購的生物指示劑,鑒別以確定種類沒有誤差

為什么不全部鑒別?致病菌策略是什么?(被提缺陷?)科技為本·創(chuàng)造健康生活試驗(yàn)結(jié)果革蘭氏染色鑒別結(jié)果菌落描述:直徑約3mm圓形,黃色,表面有光澤,不透明,質(zhì)地均勻,隆起,邊緣整齊。革蘭氏染色G+球菌API鑒別選用APIstaph生化圖譜620610鑒別結(jié)果:克氏庫克菌克氏庫克菌(MicrococcusKristinae)主要分布在自然環(huán)境及哺乳動(dòng)物皮膚,是一種極罕見的機(jī)會(huì)致病菌。科技為本·創(chuàng)造健康生活科技為本·創(chuàng)造健康生活

待鑒定的微生物可以采用劃線純化,必要時(shí)可再次劃線純化,直至獲得單菌落。同一培養(yǎng)皿上有兩個(gè)或兩個(gè)以上外觀相同的菌落時(shí),可僅純化一個(gè)菌落進(jìn)行鑒別。

在硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中生長的微生物必須同時(shí)劃線兩塊平板,一塊用于厭氧培養(yǎng)(厭氧培養(yǎng)基),一塊用于需氧培養(yǎng)。參考:李家琪,唐明清:清除硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基內(nèi)絮狀沉淀物方法的實(shí)驗(yàn)科技為本·創(chuàng)造健康生活微生物類別單細(xì)胞微生物菌絲狀微生物細(xì)菌酵母菌放線菌霉菌主要特征細(xì)胞形態(tài)特征小而均勻、個(gè)別有芽孢大而分化細(xì)而均勻粗而分化相互關(guān)系單個(gè)分散或按一定方式排列單個(gè)分散或假絲狀絲狀交織絲狀交織菌落含水情況很濕或較濕較濕干燥或較干燥干燥外觀特征小而突起或大而平坦大而突起小而緊密大而疏松或大而致密參考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落與培養(yǎng)基結(jié)合度不結(jié)合不結(jié)合牢固結(jié)合較牢固結(jié)合菌落的顏色多樣單調(diào)十分多樣十分多樣菌落正反面顏色差別相同相同一般不同一般不同細(xì)胞生長速度一般很快較快慢一般較快氣味一般有臭味多帶酒香常有泥腥味霉味用語標(biāo)準(zhǔn)化科技為本·創(chuàng)造健康生活涂片:在潔凈載玻片上滴加純化水1-2滴,將分離所得菌用接種環(huán)挑取1環(huán)均勻涂在純化水中。

干燥固定:酒精燈高處微微加熱。

染色:在整個(gè)涂面上滴加結(jié)晶紫染色液(或其它染色液),染色1分鐘

水洗:傾去染液,用純化水細(xì)流沖洗至流下的水中無染料顏色為止干燥:空氣中自然干燥。鏡檢:觀察結(jié)果。簡單染色科技為本·創(chuàng)造健康生活革蘭氏染色

選用培養(yǎng)18~24小時(shí)的微生物進(jìn)行革蘭氏染色;涂片:在潔凈載玻片上滴加純化水1-2滴,將分離所得菌用接種環(huán)挑取1環(huán)均勻涂在純化水中。干燥固定:酒精燈高處微微加熱。(死亡)初染:在做好的涂面上滴加結(jié)晶紫染液,染1分鐘,傾去染液,流水沖洗至無紫色。媒染:先用路哥氏碘液沖去殘水,而后用其覆蓋涂面1分鐘,后水洗脫色:除去殘水后,滴加95%酒精進(jìn)行脫色約30秒,后立即用流水沖洗復(fù)染:滴加沙黃染色液,染1分鐘,水洗后用吸水紙吸干。

鏡檢:觀察染色結(jié)果。呈紫色者為革蘭氏陽性菌,紅色者為陰性菌。

科技為本·創(chuàng)造健康生活生化篩選1、氧化酶試驗(yàn),區(qū)分革蘭氏陰性菌,非發(fā)酵的棒狀細(xì)菌(氧化酶陽性)和腸道菌(氧化酶陰性);2、過氧化氫酶試驗(yàn),區(qū)分葡萄球菌(過氧化氫酶陽性)和鏈球菌(過氧化氫酶陰性);3、凝固酶試驗(yàn),區(qū)分凝固酶陰性葡萄球菌(可推測為非致病性)和凝固酶陽性葡萄球菌(很可能為致病性)4、3%氫氧化鉀實(shí)驗(yàn),區(qū)分革蘭陰性細(xì)菌和易脫色的革蘭陽性細(xì)菌。

由于革蘭陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁肽聚糖層數(shù)少,在稀堿溶液內(nèi)易于破裂,釋放出未斷裂的DNA螺旋,使KOH菌懸液呈現(xiàn)粘性,攪拌后拉出絲來,而革蘭陽性菌在稀堿溶液中仍保持不變??萍紴楸尽?chuàng)造健康生活表型微生物鑒定表型鑒定依據(jù)基因物質(zhì)的表達(dá)來區(qū)分不同微生物間的差異,通常需要大量相關(guān)的純化細(xì)胞、單

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