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文檔簡(jiǎn)介
3.3基因工程的應(yīng)用
胰島素是治療糖尿病的特效藥物。傳統(tǒng)生產(chǎn)胰島素的方法是從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取。曾經(jīng)生產(chǎn)供一位糖尿病病人使用一年的胰島素需要上千頭牛,生產(chǎn)的成本非常高。1978年,科學(xué)家將編碼人胰島素的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中,使大腸桿菌表達(dá)重組人胰島素。我國(guó)擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的基因工物——重組人胰島素已經(jīng)研制成功并得到廣泛應(yīng)用??瓜x棉、轉(zhuǎn)基因大豆、重組人干擾素等。思考:除了生產(chǎn)胰島素,基因工程還有哪些應(yīng)用呢?一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用二、基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用三、基因工程在食品工業(yè)方面的應(yīng)用基因工程的應(yīng)用1、發(fā)展現(xiàn)狀:(1)植物:①1996-2017年,全世界轉(zhuǎn)基因作物種植面積增加了100多倍。轉(zhuǎn)基因作物的種植使化學(xué)農(nóng)藥的施用量減少了8.2%,作物產(chǎn)量增加了6.6×108t,增加經(jīng)濟(jì)效益1.3萬億。②美國(guó)是世界上轉(zhuǎn)基因作物種植面積最大的國(guó)家③世界轉(zhuǎn)基因作物種植面積最大的是大豆,其次是玉米、棉花;④我國(guó)轉(zhuǎn)基因作物的種植面積位居世界第八位,商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因作物有棉花和番木瓜;(2)動(dòng)物:①幾乎每年都有令人矚目的研究成果報(bào)道,有些成果正在進(jìn)入實(shí)用化和商業(yè)化開發(fā)的階段;②2015年11月,第一種用于食用的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物——轉(zhuǎn)基因大西洋鮭(俗稱“三文魚”)在美國(guó)獲得批準(zhǔn)上市。轉(zhuǎn)基因大西洋鮭的優(yōu)點(diǎn):(1)縮短了生長(zhǎng)周期(2)都是雌性而且不育,避免了野生鮭魚雜交的風(fēng)險(xiǎn)。轉(zhuǎn)基因鮭魚(后排)和正常鮭魚(前排)基因工程在農(nóng)牧業(yè)中的應(yīng)用發(fā)展迅速。已被廣泛用于改良動(dòng)植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面。轉(zhuǎn)基因抗蟲植物農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用轉(zhuǎn)基因抗病植物轉(zhuǎn)基因抗除草劑植物改良植物的品質(zhì)提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)抗逆性2、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用:(1)轉(zhuǎn)基因抗蟲植物:①方法:④優(yōu)點(diǎn):Bt毒蛋白基因;蛋白酶抑制劑基因;淀粉酶抑制劑基因;植物凝集素基因等。
②主要?dú)⑾x基因:③成果:從某些生物中分離出抗蟲基因?qū)胱魑铮怪哂锌瓜x性狀。轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花、玉米、水稻、大豆、馬鈴薯等。減少因化學(xué)農(nóng)藥的使用而造成的環(huán)境污染和對(duì)人類健康的損害、降低生產(chǎn)成本、提高產(chǎn)量。(2)轉(zhuǎn)基因抗病植物:病毒外殼蛋白基因(CP基因)病毒的復(fù)制酶基因抗病毒基因幾丁質(zhì)酶基因抗毒素合成基因抗真菌基因①方法:③成果:轉(zhuǎn)基因抗病毒甜椒、番木瓜和煙草等。②抗病基因:科學(xué)家將來源于某些病毒、真菌等的抗病基因?qū)胫参镏校嘤鲛D(zhuǎn)基因抗病植物。(3)轉(zhuǎn)基因抗除草劑植物:①背景:雜草常常危害農(nóng)業(yè)生產(chǎn),而大多數(shù)除草劑不僅能殺死田間雜草,還會(huì)損傷作物,導(dǎo)致作物減產(chǎn)。②方法:將降解或抵抗某種除草劑的基因?qū)胱魑?,可以培育出抗除草劑的作物品種。③成果:轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米、大豆、油菜和甜菜等。思考:
我國(guó)西北地區(qū)的主要?dú)夂蛱攸c(diǎn)是年降雨量小,從而影響糧食的產(chǎn)量,如果從基因工程的角度考慮,如何避免糧食減產(chǎn)?可以用基因工程技術(shù)培育抗旱作物(篩選獲取抗旱基因)(4)改良植物的品質(zhì):目的:提高植物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、觀賞價(jià)值等。轉(zhuǎn)基因矮牽牛富含賴氨酸的轉(zhuǎn)基因玉米①改良植物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值:例如,將某種必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胫参镏?,可以提高這種氨基酸的含量??茖W(xué)家培育的某種轉(zhuǎn)基因玉米中賴氨酸含量比對(duì)照提高30%。②改良植物的觀賞價(jià)值:我國(guó)科學(xué)家成功地將與植物花青素代謝相關(guān)的基因?qū)氚珷颗V?,使它呈現(xiàn)出自然界沒有的顏色變異,大大提高了它的觀賞價(jià)值。(5)提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率:①原理:由于外源生長(zhǎng)激素基因的表達(dá)可以使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生長(zhǎng)得更快。將外源生長(zhǎng)激素基因?qū)雱?dòng)物體內(nèi),以提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率。②實(shí)例:轉(zhuǎn)基因鯉魚(6)改善畜產(chǎn)品的品質(zhì):有些人由于乳糖酶分泌少,不能完全消化牛奶中的乳糖,食用牛奶后會(huì)出現(xiàn)腹瀉等不適癥狀,這稱為乳糖不耐受。我國(guó)約有1/3的成年人乳糖不耐受??茖W(xué)家將腸乳糖酶基因?qū)肽膛;蚪M,使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中,
乳糖的含量大大降低,而其他營(yíng)養(yǎng)成分不受影響。①基因:腸乳糖酶基因②成果:思考討論:轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物的培育1、轉(zhuǎn)基因植物常用的受體細(xì)胞:2、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的受體細(xì)胞:3、轉(zhuǎn)基因植物主要的操作技術(shù):4、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物主要的操作技術(shù):體細(xì)胞受精卵基因工程、植物組織培養(yǎng)基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用二、基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用三、基因工程在食品工業(yè)方面的應(yīng)用基因工程的應(yīng)用我國(guó)生產(chǎn)的重組人干擾素、血小板生成素、促紅細(xì)胞生成素和粒細(xì)胞集落刺激因子等基因工程藥物均已投放市場(chǎng)??梢杂脕眍A(yù)防和治療人類腫瘤、心血管疾病、傳染病、糖尿病和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等;1、對(duì)微生物或動(dòng)植物的細(xì)胞進(jìn)行基因改造生產(chǎn)藥物(1)藥物舉例:細(xì)胞因子、抗體、疫苗和激素等。(2)應(yīng)用:(3)實(shí)例:資料卡:干擾素干擾素是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白,是治療病毒感染的“萬能靈藥”!對(duì)癌癥也有一定療效。科學(xué)家用基因工程方法從大腸桿菌及酵母菌細(xì)胞內(nèi)獲得了干擾素,從1kg細(xì)菌培養(yǎng)液中可20~40mg干擾素。干擾素生產(chǎn)過程:干擾素基因質(zhì)粒重組質(zhì)粒大腸桿菌大量可生產(chǎn)干擾素的大腸桿菌構(gòu)建導(dǎo)入培養(yǎng)資料卡:干擾素1、干擾素的化學(xué)本質(zhì)是什么?糖蛋白2、干擾素的作用機(jī)理是怎樣的?干擾病毒復(fù)制3、干擾素用于哪些疾病的治療?和某些白血病等。病毒感染性疾病、乳腺癌、淋巴癌、多發(fā)骨髓瘤4、傳統(tǒng)生產(chǎn)干擾素的方法是什么?從人血液中的白細(xì)胞內(nèi)提取5、目前大量生產(chǎn)干擾素的方法是什么?用基因工程方法從大腸桿菌及酵母菌細(xì)胞內(nèi)獲得抗生素
干擾素①抗生素:抗細(xì)菌藥物②干擾素:抗病毒藥物≠2、讓轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物批量生產(chǎn)藥物(1)實(shí)例:乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器注意:?jiǎn)?dòng)子具有物種和組織的特異性,如乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子只在乳腺細(xì)胞被特異性激活,使乳腺細(xì)胞的目的基因得以表達(dá)藥用蛋白基因乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件基因表達(dá)載體受精卵泌乳期分泌乳汁轉(zhuǎn)基因動(dòng)物藥物蛋白顯微注射法發(fā)育(2)培育過程:目前已經(jīng)在牛、山羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中,獲得了抗凝血酶、血清白蛋白、生長(zhǎng)激素和α-抗胰蛋白酶等重要醫(yī)藥產(chǎn)品(3)應(yīng)用:要求:乳腺生物反應(yīng)器必須是雌性,且泌乳期胚胎移植前應(yīng)做DNA分析,鑒定性別,保留雌性思考討論:關(guān)于乳腺生物反應(yīng)器優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)
適合于表達(dá)高等動(dòng)物體內(nèi)的復(fù)雜蛋白制備乳腺反應(yīng)器的方法成熟乳腺是天然的高效合成蛋白質(zhì)的器官乳汁中重組蛋白的提取和純化相對(duì)容易動(dòng)物泌乳期有間隔有些蛋白不能在乳腺里表達(dá)某些蛋白在乳腺中的修飾可能與天然狀態(tài)不同優(yōu)點(diǎn):產(chǎn)量高;成本低;產(chǎn)品質(zhì)量好,易提取。補(bǔ)充:膀胱生物反應(yīng)器①可以從動(dòng)物一出生就收集產(chǎn)物,不論動(dòng)物的性別和是否處于生殖期。②從尿液中提取蛋白質(zhì)比從乳汁中提取更簡(jiǎn)便、高效。思考討論:1、乳腺生物反應(yīng)器指的是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺嗎?讓藥用蛋白基因只在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)。不局限于性別與生長(zhǎng)期(乳腺生物反應(yīng)器必須是雌性,且泌乳期才會(huì)分泌)。將目的基因與膀胱上皮細(xì)胞中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子重組。不是,乳腺生物反應(yīng)器指的就是這個(gè)轉(zhuǎn)基因生物。2、為什么將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起?3、藥用蛋白基因存在于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的哪些細(xì)胞中?4、膀胱生物反應(yīng)器哪些方面優(yōu)于乳腺生物反應(yīng)器?5、研制膀胱生物反應(yīng)器時(shí),應(yīng)如何處理目的基因?幾乎所有細(xì)胞。思考:
根據(jù)前面學(xué)過的基因工程的操作程序,說出通過基因工程方法用酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過程是怎樣的?(提示:乙肝病毒抗原蛋白基因)①用PCR擴(kuò)增乙肝病毒抗原蛋白基因;②將乙肝病毒抗原蛋白基因插入質(zhì)粒,構(gòu)建基因表達(dá)載體;③將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌(該過程也是將酵母菌制備成感受態(tài)細(xì)胞,但是并不是用Ca2+處理,而是用醋酸鋰處理);④檢測(cè)并鑒定,篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌,進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),分離并提純產(chǎn)物,獲得乙肝病毒抗原蛋白。(1)人體器官移植的難題:人體移植器官短缺是一個(gè)世界性難題。(2)解決途徑:尋求可替代的移植器官,如利用基因工程對(duì)豬的器官進(jìn)行改造,來解決人類器官移植的來源問題。a.豬的內(nèi)臟構(gòu)造、大小、血管分布與人極為相似;b.豬體內(nèi)隱藏的、可導(dǎo)致人類疾病的病毒遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于靈長(zhǎng)類動(dòng)物。最大難題:免疫排斥3、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為器官移植的供體,建立移植器官工廠(3)改造方法:a.在器官供體的基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子,以抑制抗原決定基因的表達(dá);b.設(shè)法除去抗原決定基因,然后再結(jié)合克隆技術(shù),培育出不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。(4)優(yōu)點(diǎn):解決人體移植器官短缺問題;避免免疫排斥反應(yīng)。比較項(xiàng)目乳腺(房)生物反應(yīng)器基因工程菌生產(chǎn)藥物基因結(jié)構(gòu)基因產(chǎn)物受體細(xì)胞導(dǎo)入方式生產(chǎn)條件產(chǎn)物提取哺乳動(dòng)物基因的結(jié)構(gòu)與人類結(jié)構(gòu)基本相同細(xì)菌或酵母菌等生物的基因結(jié)構(gòu)與人類基因結(jié)構(gòu)有較大差異與天然蛋白質(zhì)完全相同細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)缺少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器,合成的蛋白質(zhì)可能不具有生物活性哺乳動(dòng)物的受精卵微生物細(xì)胞顯微注射法Ca2+處理法(感受態(tài)細(xì)胞法)不需要嚴(yán)格的滅菌,溫度等外界條件對(duì)其影響不大需嚴(yán)格滅菌,嚴(yán)格控制工程菌所需的溫度、pH、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度等外界條件從動(dòng)物乳汁中提取,相對(duì)簡(jiǎn)單(一般經(jīng)過工業(yè)發(fā)酵后)從微生物細(xì)胞(或發(fā)酵液)中提取,相對(duì)復(fù)雜一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用二、基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用三、基因工程在食品工業(yè)方面的應(yīng)用基因工程的應(yīng)用1、基因工程菌利用基因工程菌,除了可以生產(chǎn)藥物,還能生產(chǎn)食品工業(yè)用酶、氨基酸和維生素等用基因工程的方法,使外源基因得到高效表達(dá)的菌類。①概念:②應(yīng)用:2、實(shí)際應(yīng)用:產(chǎn)物應(yīng)用制備方法阿斯巴甜凝乳酶淀粉酶、脂酶主要由天冬氨酸和苯丙氨酸形成,這兩種氨基酸就可以通過基因工程實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)科學(xué)家將編碼牛凝乳酶的基因?qū)氪竽c桿菌、黑曲霉或酵母菌的基因組中,再通過工業(yè)發(fā)酵批量生產(chǎn)凝乳酶通過構(gòu)建基因工程菌、然后用發(fā)酵技術(shù)大量生產(chǎn)普遍使用的甜味劑用于奶酪生產(chǎn),凝聚固化奶中的蛋白質(zhì)。轉(zhuǎn)化糖漿(淀粉酶)、烘烤食物(脂酶)基因工程獲得的工業(yè)用酶優(yōu)點(diǎn):①純度更高②生產(chǎn)成本顯著降低③生產(chǎn)效率提高其他應(yīng)用:環(huán)保領(lǐng)域的應(yīng)用利用經(jīng)過基因改造的微生物生產(chǎn)清潔能源培育可以降解多種污染物的“超級(jí)細(xì)菌”治理環(huán)境污染背誦知識(shí)提綱練習(xí)與應(yīng)用一、概念檢測(cè)1、將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長(zhǎng)激素的基因后,重新導(dǎo)入大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi),再通過發(fā)酵工程就能大量生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素。下列相關(guān)敘述正確的是
(
)A.轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)激素基因需要解旋酶和DNA連接酶B.發(fā)酵產(chǎn)生的生長(zhǎng)激素屬于大腸桿菌的初生代謝物C.大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長(zhǎng)激素的變異可以遺傳D.大腸桿菌質(zhì)粒標(biāo)記基因中腺嘌呤和尿嘧啶的含量相等C2.基因工程應(yīng)用廣泛,成果豐碩。下列不屬于基因工程應(yīng)用的是()A.培育青霉菌并從中提取青霉素B.利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物C.制造一種能降解石油的“超級(jí)細(xì)菌"D.制造一種能產(chǎn)生干擾素的基因工程菌A二、拓展應(yīng)用除草劑的有效成分草甘膦能夠?qū)R坏匾种艵PSP合酶的活性,從而使植物體內(nèi)多種代謝途徑受到影響而導(dǎo)致植物死亡。草甘膦沒有選擇性,它在除掉雜草的同時(shí)也會(huì)使作物受損。解決這個(gè)問題的方法之一就是培育抗草甘膦的作物。(1)下面是探究“轉(zhuǎn)入外源EPSP合酶基因能否使矮牽??共莞熟ⅰ钡牧鞒?,請(qǐng)補(bǔ)充完整。①用_____________________________等處理含有目的基因的DNA片段和T質(zhì)粒,構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒;②將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中;③利用含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染_________細(xì)胞,再通過培育得到轉(zhuǎn)基因植株;④用草甘膦同時(shí)噴酒轉(zhuǎn)基因植株和對(duì)照組植株。結(jié)果:對(duì)照組植株死亡,轉(zhuǎn)基因植株存活,但也受到了影響。結(jié)論:__________________________________
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