體外培養(yǎng)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)條件營(yíng)養(yǎng)條件是細(xì)胞體外生長(zhǎng)的基本條件在培養(yǎng)液中除了細(xì)胞生命活動(dòng)所需的各種營(yíng)養(yǎng)

營(yíng)養(yǎng)條件是細(xì)胞體外生長(zhǎng)的基本條件。在培養(yǎng)液中，除了細(xì)胞生命活動(dòng)所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之外，還必須提供調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)與功能活動(dòng)的激素、生長(zhǎng)因子以及生長(zhǎng)基質(zhì)成分等。LOGO體外培養(yǎng)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)條件蛋白質(zhì)合成的原料8種必需氨基酸、12種非必需氨基酸谷氨酰胺（每種細(xì)胞都需要）

谷氨酰胺在細(xì)胞代謝過(guò)程中有重要作用，是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸。各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺本身是一種非必需氨基酸。

注意：-20℃保存谷氨酰胺，4℃2周就會(huì)失效1、氨基酸碳水化合物是細(xì)胞生長(zhǎng)的主要能量來(lái)源，不論是有氧氧化還是無(wú)氧酵解，六碳糖都是主要能源。六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，一般以葡萄糖作為必含的能源物質(zhì)。2、碳水化合物Na+、Mg2+、Ca2+、Cl-、SO42-、PO43-、HCO3-等無(wú)機(jī)離子作用：1、維持細(xì)胞滲透壓平衡，調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能2.是合成維生素、激素和酶的原料，如許多酶都以Mg2+作為輔助因子。3、無(wú)機(jī)鹽細(xì)胞生長(zhǎng)必不可少大多做為輔酶、輔基分為脂溶性和水溶性兩種脂溶：A、D、E、K水溶：B族和C血清能提供維生素，但是還需再添加一些其他維生素4、維生素傳遞各種信息調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝保持細(xì)胞狀態(tài)促進(jìn)細(xì)胞增殖來(lái)源：血清培養(yǎng)基中基本都會(huì)添加5%--20%的小牛血清LOGO5、促生長(zhǎng)因子和激素微量元素：鐵、鋅、硒、銅、錳、釩現(xiàn)有的文獻(xiàn)并沒(méi)有明確規(guī)定要加入，或許加入的非限定物血清中含有。促細(xì)胞貼附物質(zhì)：對(duì)懸浮型細(xì)胞無(wú)效并非必需但有促進(jìn)作用一些其他物質(zhì)：丙酮酸鈉2-巰基乙醇巰基乙醇（2-Me）：含巰基，能將含S化合物還原成谷胱甘肽LOGO6、其他成分2-Me①誘導(dǎo)細(xì)胞增殖②使血清中含S的化合物還原為谷胱甘肽，避免過(guò)氧化物損害細(xì)胞③促進(jìn)分裂源的反應(yīng)和DNA的合成。谷胱甘肽

抗氧化劑和自由基清除劑，還能調(diào)節(jié)其他氧化劑；

谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸三者結(jié)合而成；

解毒：能和芥子氣、鉛、汞、砷等重金屬鹽絡(luò)合，達(dá)到整合解毒

生理溫度范圍溫度能夠影響體內(nèi)細(xì)胞代謝活動(dòng)。在生理溫度范圍內(nèi)，溫度越高，酶活性越高,細(xì)胞代謝越快。大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞在25～35℃范圍內(nèi)都仍然能夠生存和生長(zhǎng)。若將培養(yǎng)細(xì)胞放在4℃下，數(shù)小時(shí)后再放回37℃,細(xì)胞仍然能夠繼續(xù)生長(zhǎng)。LOGO體外培養(yǎng)細(xì)胞的環(huán)境條件1、溫度對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞最常用的溫度是37℃。培養(yǎng)的細(xì)胞總的來(lái)說(shuō)對(duì)較低溫度的耐受能力比較高溫度(一般不超過(guò)39℃)的強(qiáng)。高于生理溫度閾值時(shí)，溫度越高，對(duì)細(xì)胞損傷越大。培養(yǎng)的細(xì)胞處在39～40℃下1h，即會(huì)受到一定的損傷，但仍然可以恢復(fù)；在41～42℃下lh，細(xì)胞便會(huì)受到嚴(yán)重?fù)p傷，絕大多數(shù)細(xì)胞將死亡；當(dāng)培養(yǎng)溫度高達(dá)43℃時(shí)，1h內(nèi)將使得全部細(xì)胞死亡。高溫對(duì)細(xì)胞造成的損傷程度與暴露的時(shí)間長(zhǎng)短也有關(guān)。高溫的影響高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的酶高溫能破壞細(xì)胞膜上的脂類高溫影響細(xì)胞分裂低溫的影響培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)低溫的耐受力較之對(duì)高溫的耐受力要強(qiáng)。在生理溫度范圍內(nèi)，溫度越低，酶活性越低。當(dāng)溫度降至細(xì)胞所能忍受的最低限度時(shí)，細(xì)胞的生命活動(dòng)即會(huì)受到抑制。對(duì)于絕大多數(shù)開(kāi)放式培養(yǎng)系統(tǒng)來(lái)講，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣相環(huán)境都是采用5%CO2與95%空氣的混合氣體。個(gè)別類細(xì)胞生長(zhǎng)需要有別于此的氣相條件。2、氣相環(huán)境對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響3、培養(yǎng)用水對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響機(jī)體內(nèi)的水分為自由水和結(jié)合水能促進(jìn)細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)也是生化反應(yīng)所需介質(zhì)去離子水蒸餾水雙蒸水三蒸水大多數(shù)的有機(jī)體細(xì)胞能在pH6.0～8.0的環(huán)境中生存。最適宜的pH值范圍是7.2～7.4。植物細(xì)胞通常適宜pH5.6～6.0。4.培養(yǎng)液的酸堿度對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響能夠?qū)w外培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生影響的輻射線包括可見(jiàn)光、紫外線、X射線、β射線與γ射線等類型。等類型。5、輻射線對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響可見(jiàn)光：多數(shù)結(jié)果表明光線能夠促使培養(yǎng)的細(xì)胞發(fā)生退化不同波長(zhǎng)的光線對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用有所不同。不同細(xì)胞對(duì)于光線照射的反應(yīng)不一。紫外線紫外線能夠影響細(xì)胞的生命活動(dòng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)造成破壞不同波長(zhǎng)的紫外線對(duì)細(xì)胞造成的傷害程度不同，波長(zhǎng)越短的紫外線損傷越嚴(yán)重。不同細(xì)胞對(duì)紫外線的敏感性是不同的。紫外線對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響主要在于能破壞細(xì)胞的遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。③X射線、β射線與γ射線不同類型的細(xì)胞對(duì)這幾種放射線的反應(yīng)是不同的，反應(yīng)也因射線劑量與細(xì)胞生長(zhǎng)條件而有所不同。低劑量時(shí)將緩慢降低細(xì)胞的增生率，高劑量將對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生致死效應(yīng)。X射線、β射線與γ射線對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞造成的影響相似。主要是通過(guò)引起染色體發(fā)生畸變而致細(xì)胞分裂活動(dòng)發(fā)生異?；蚴艿揭种?。超過(guò)一定劑量，引起細(xì)胞死亡。射線對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的影響在體外培養(yǎng)工作中也有益的應(yīng)用。超聲波對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞一般會(huì)產(chǎn)生破壞作用，強(qiáng)度稍大時(shí)，會(huì)造成細(xì)胞破裂。超