食品添加劑葉綠素銅

1GB1886.361—2022食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑葉綠素銅本標(biāo)準(zhǔn)適用于以蠶沙或草類（如高羊茅、紫花苜蓿、蕁麻等）、螺旋藻等植物為原料提取葉綠素，或者直接以葉綠素為原料，再經(jīng)銅代反應(yīng)制得的食品添加劑葉綠素銅。使用溶劑為丙酮、二氯甲烷、甲醇、乙2分子式和相對(duì)分子質(zhì)量2.2相對(duì)分子質(zhì)量葉綠酸銅a:932.75（按2018年國際相對(duì)原子質(zhì)量）葉綠酸銅b:946.73（按2018年國際相對(duì)原子質(zhì)量）3技術(shù)要求感官要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。項(xiàng)目要求檢驗(yàn)方法色澤青綠色至深綠色取適量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光線下觀察其色澤和狀態(tài)狀態(tài)蠟狀或膠狀固體3.2理化指標(biāo)理化指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2理化指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法葉綠素含量，∞/%≥0附錄A中A.380附錄A中A.42GB1886.361—2022項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法游離銅(Cu),∞/%≤附錄A中A.5溶劑殘留a二氯甲烷/(mg/kg)≤甲醇、異丙醇、正己烷、正庚烷總和/(mg/kg)≤附錄A中A.6鉛30砷300鎘0注：商品化的葉綠素銅應(yīng)以符合本標(biāo)準(zhǔn)的葉綠素銅為原料，可添加食用植物油、糊精、食用淀粉等食品輔料和／或符合食品添加劑質(zhì)量規(guī)格要求的乳化劑、酸度調(diào)節(jié)劑等，其含量符合聲稱值，形態(tài)可以是粉末、蠟狀或液體。a根據(jù)產(chǎn)品實(shí)際使用的溶劑，測定相應(yīng)溶劑殘留（使用石油醚測定正庚烷）。3GB1886.361—2022附錄A檢驗(yàn)方法A.1一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水在未注明其他要求時(shí)，均指分析純?cè)噭┖虶B/T6682規(guī)定的三級(jí)水。試驗(yàn)中所用標(biāo)準(zhǔn)溶液、雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑和制品在未注明其他要求時(shí)，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備。試驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。A.2鑒別試驗(yàn)A.2.1最大吸收峰及吸光度比值范圍取A.3.3.1葉綠素含量測定中的試樣溶液，在405nm±3nm和635nm±5nm的兩個(gè)波長范圍內(nèi)A.2.2銅離子試驗(yàn)鹽酸溶液A.2.2.1.3二乙基二硫代氨基甲酸鈉溶液：1g/L。取1g試樣，置于已在800℃±25℃下灼燒至恒重的坩堝中，緩緩加熱直至試樣完全炭化。將炭化硫酸潤濕殘?jiān)?，繼續(xù)加熱至硫酸蒸汽逸盡，并在800℃±25℃的高溫爐中灼燒殘?jiān)梁阒亍Ｔ跉堅(jiān)屑尤?0mL鹽酸溶液，在水浴上加熱溶解，過濾后補(bǔ)充水至10mL。取5mL上述溶液，加入0.5mL二乙基二硫代氨基甲酸鈉溶液，產(chǎn)生紅褐色沉淀。A.3葉綠素含量的測定磷酸氫二鈉溶液(0稱取磷酸氫二鈉(加水溶解稀釋定容至A.3.1.3磷酸二氫鉀溶液(0.15mol/L)：稱取20.4g磷酸二氫鉀(KH2PO4),加水溶解，稀釋定容至1000mL。按體積比混合。液液氫氧化鈉-甲醇溶液(４分液漏斗。稱取試樣，精確至置于錐形瓶中，加~無水乙醚溶解。加入Ａ液在℃±２℃恒溫水浴中加熱回流取下再加入Ｂ液搖勻，繼續(xù)在℃±２℃恒溫水浴中加熱回流整個(gè)過程間斷振搖，保證反應(yīng)完全。反應(yīng)后取下錐形瓶后冷卻，加入少量水，搖勻，移入分液漏斗中，再用適量水分次洗滌錐形瓶，洗液一并移入分液漏斗中，充分振搖后至少靜置。分液漏斗中的液體分層后，將下層液體過濾，注意界面層留在分液漏斗中，不要過濾下來，以免堵塞濾紙。過濾完畢，用水沖洗上層乙醚層和界面，直至洗出的水層無色，洗液并入下層濾液，棄掉上層乙醚層和界面。濾紙用水洗滌數(shù)次至近乎無色，洗液并入下層濾液。全部濾液保留。將濾液移入另一分液漏斗中，用無水乙醚振搖洗滌后，靜置將下層液體移入容量瓶中用水稀釋定容，棄掉上層乙醚層。取上述溶液，用磷酸鹽緩沖液稀釋定容至搖勻。取試樣溶液置于比色皿中，以磷酸鹽緩沖液做空白對(duì)照，用分光光度計(jì)在±波長范圍內(nèi)的最大吸收波長處測定吸光度。葉綠素含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)狑１按式計(jì)算。式中：犃—試樣溶液的吸光度值；—體積換算系數(shù)；—比色皿中濃度為溶劑含葉綠素）的溶液消光值；—濃度換算系數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果以平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于算術(shù)平均值的。的測定5GB1886.361—2022A.4.2儀器和設(shè)備A.4.3試樣處理精確至0.0002g,置于微波消解罐中，加入5mL硝酸，按照微波消解的操作步驟消解試樣，消解條件參考B.1。冷卻后取出消解罐，于120℃~趕酸至1mL左右。消解罐放冷后，將消化液轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，用少量二級(jí)水洗滌消解罐2次~3次，合并洗滌液于容量瓶中，用二級(jí)水定容至刻度，混勻備用。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。稱取0.1g試樣，精確至0.0002g,于坩堝中小火加熱，炭化至無煙，轉(zhuǎn)移至550℃馬弗爐中，灰化冷卻后取出。對(duì)于灰化不徹底的試樣，加數(shù)滴硝酸，小火加熱，小心蒸干，再轉(zhuǎn)入550℃馬弗至試樣呈白灰狀，冷卻后取出。用適量硝酸溶液(1+1)溶解并用水定容至10mL,混勻備用。同時(shí)做空白試驗(yàn)。A.4.4分析步驟除試樣處理外，其余步驟按GB5009.13規(guī)定的方法測定。的測定A.5.1試劑和材料 A.5.2儀器和設(shè)備A.5.3試樣處理稱取0.1g試樣，精確至0.0002g,置于錐形瓶中，塞，振搖1min,移入125mL分液漏斗中，靜置30min。將分液漏斗中的下層液體用雙層濾紙過濾，如濾液有顏色，再次用雙層濾紙過濾，直至濾液無色，濾液即為試樣液。A.5.4分析步驟除試樣處理外，其余步驟按GB5009.13規(guī)定的方法測定。6GB1886.361—2022A.6.1.4N-甲基吡咯烷酮。A.6.2儀器和設(shè)備氣相色譜儀：配備氫火焰離子化檢測器(FID)和頂空進(jìn)樣器。A.6.3參考色譜條件色譜柱：石英毛細(xì)管柱(φ涂層為二甲基聚硅氧烷，厚度為5μm,或能的色譜柱。載氣流速柱溫保持升溫至保持進(jìn)樣口溫度檢測器溫度進(jìn)樣量A.6.4參考頂空進(jìn)樣條件試樣加熱溫度試樣加熱時(shí)間注射器溫度傳質(zhì)溫度A.6.5分析步驟移取水至一個(gè)進(jìn)樣瓶中稱重進(jìn)樣瓶精確至移取A.6.5.2空白溶液的制備空瓶，封蓋，60℃加熱10min并劇烈振搖，混勻。A.6.5.3標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備分別量取5.0mL水和1.0mL內(nèi)標(biāo)溶液，移入頂空瓶中，稱取10mg待測組分標(biāo)準(zhǔn)品（對(duì)每個(gè)溶劑分別分析用N-甲基吡咯烷酮溶解稀釋定容至100mL,移取20μL注入頂空瓶，封蓋，60℃加熱10min并劇烈振搖，混勻。A.6.5.4試樣溶液的制備N-甲基吡咯烷酮，將其注入頂空瓶，封蓋，60℃加熱10min并劇烈振搖，混勻。在A.6.3和A.6.4參考操作條件下，分別對(duì)空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液頂空處理后進(jìn)行色譜分析。試樣溶液中溶劑殘留的參考?xì)庀嗌V圖見圖C.1。7GB1886.361—2022A.6.6結(jié)果計(jì)算校準(zhǔn)因子fi校準(zhǔn)因子fi按式(A.2)計(jì)算。式中：mi—標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測組分的質(zhì)量，單位為毫克(mg);50—質(zhì)量換算系數(shù)；ms—標(biāo)準(zhǔn)溶液中內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量，單位為毫克(mg);Af—標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖中待測組分峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值；A—空白溶液色譜圖中待測組分峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值。A.6.6.2待測組分含量按式(計(jì)算。式中：Ai—試樣溶液色譜圖中待測組分峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值；—內(nèi)標(biāo)溶液中內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量，單位為毫克(mg);fi—校準(zhǔn)因子；1000—質(zhì)量換算系數(shù)；m—試樣的質(zhì)量，單位為克(g);50—體積換算系數(shù)。由式(A.3)計(jì)算得到二氯甲烷的含量為∞2,甲醇、異丙醇、正己烷、正庚烷的含量分別為∞3、∞4、試驗(yàn)結(jié)果以平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于算術(shù)平均值的10.0%。8GB1886.361—2022附