2025年粵教版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年粵教版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、基因工程產(chǎn)物可能存在著一些安全性問題，但不必?fù)?dān)心的是（）A.四倍體轉(zhuǎn)基因鯉魚與正常鯉魚的雜交，導(dǎo)致自然種群被淘汰B.載體的標(biāo)記基因（如抗生素抗性基因）可能指導(dǎo)合成有利于抗性進(jìn)化的產(chǎn)物C.目的基因（如殺蟲基因）本身編碼的產(chǎn)物可能會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒性D.目的基因通過花粉的散布轉(zhuǎn)移到其他植物體內(nèi)，從而可能打破生態(tài)平衡2、下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細(xì)胞中獲得的致敏B淋巴細(xì)胞B.①可用滅活的病毒誘導(dǎo)甲與骨髓瘤細(xì)胞融合C.乙為融合細(xì)胞，同時(shí)具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性D.②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞3、平板劃線法和稀釋涂布平板法是常用的兩種接種方法。下列相關(guān)敘述中錯(cuò)誤的是（）A.平板劃線法要求要連續(xù)多次劃線，且除了第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的終點(diǎn)B.除了第一次劃線需要將接種環(huán)灼燒滅菌外，以后的劃線可以不用滅菌C.如果菌液本來濃度不高，則可以適當(dāng)降低稀釋倍數(shù)D.充分稀釋和連續(xù)劃線的目的都是為了使形成的菌落是由單一的細(xì)菌細(xì)胞繁殖而成4、美籍華人張明覺首次實(shí)現(xiàn)哺乳動(dòng)物體外受精：從兔子的子宮回收獲能的精子在體外同卵子結(jié)合，然后根據(jù)同步化的原理，將早期胚胎移植到另一只假孕雌兔的子宮中，經(jīng)過“借體懷胎”繁殖出世界上第一只通過體外受精培育成功的仔兔。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.為防止受體對(duì)移植的胚胎發(fā)生免疫排斥，供體和受體要進(jìn)行同期發(fā)情處理B.體外培養(yǎng)受精卵時(shí)需要給予一定量的CO2，以維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定C.囊胚期透明帶會(huì)破裂，胚胎從中伸展出來的過程叫孵化D.在囊胚階段，胚胎的內(nèi)部開始出現(xiàn)含有液體的腔5、使用現(xiàn)代生物科技手段達(dá)到所需目的的物質(zhì)或過程，與生物體內(nèi)有差異的是（）A.植物組織培養(yǎng)過程中形成的愈傷組織B.PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)使用的DNA聚合酶C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞正常分裂的代數(shù)是有限的D.構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需要啟動(dòng)子來驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、轉(zhuǎn)MT-like基因的衣藻對(duì)Pb、Cd等重金屬離子的抗性明顯增強(qiáng)，對(duì)Cb2+富集效應(yīng)顯著。某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)擴(kuò)增MT-like基因，并進(jìn)一步通過基因工程手段構(gòu)建凈化重金屬廢水的工程菌。下列有關(guān)PCR操作的敘述，正確的是（）A.PCR擴(kuò)增需要加入Taq酶和DNA連接酶B.需設(shè)計(jì)一對(duì)與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物C.設(shè)計(jì)引物時(shí)要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對(duì)D.長度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火溫度7、生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類；研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲；乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說法正確的是（）

A.倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B.倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長因子乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選8、下圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。下列說法正確的是（）

A.若能在細(xì)菌B中檢測到人的生長激素基因，則說明該基因工程項(xiàng)目獲得成功B.將完成導(dǎo)入過程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長的就是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌C.將人的生長激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程共形成了4個(gè)磷酸二酯鍵D.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B之前，可以用Ca2+處理細(xì)菌B9、下列關(guān)于微生物發(fā)酵的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.制備培養(yǎng)基過程中，需要在滅菌后進(jìn)行pH的調(diào)節(jié)B.制作果酒時(shí)適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌生長C.現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后即可進(jìn)行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵D.醋酸菌能將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜?，故夏天開瓶后的紅酒容易變酸10、下列關(guān)于限制酶和DNA連接酶的理解，錯(cuò)誤的是（）A.限制酶能在特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的氫鍵，將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來C.在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶D.限制酶廣泛存在于動(dòng)植物體內(nèi)，微生物內(nèi)很少分布11、下列有關(guān)生物技術(shù)安全性和倫理問題的觀點(diǎn)，合理的是（）A.對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)，我們應(yīng)該趨利避害，理性看待B.我國禁止生殖性克隆和治療性克隆C.我國不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)其擴(kuò)散D.對(duì)基因檢測應(yīng)該保護(hù)個(gè)人遺傳信息的隱私權(quán)12、玉米秸稈轉(zhuǎn)化為綠色能源酒精是解決能源危機(jī)的措施之一，具體的工藝流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.用酸或堿預(yù)處理有利于酶與底物充分接觸，提高催化效率B.步驟③中，酵母菌在發(fā)酵初期更多分布在發(fā)酵液的上層C.隨培養(yǎng)次數(shù)的增加，分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定D.發(fā)酵過程中酒精濃度升高會(huì)抑制酵母菌代謝活動(dòng)，同時(shí)使發(fā)酵液pH降低，發(fā)酵停止13、治療性克隆的做法是先從需要救治的患者身上提取細(xì)胞，然后將該細(xì)胞的遺傳物質(zhì)植入一個(gè)去除了細(xì)胞核的卵細(xì)胞中，該卵細(xì)胞開始自行分裂，直至形成一個(gè)早期胚胎，從早期胚胎中提取胚胎干細(xì)胞后將其培養(yǎng)成人們所需要的各種人體器官。下列有關(guān)說法正確的是（）A.可采用開放式培養(yǎng)的方式，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞B.該早期胚胎發(fā)育始于受精卵，胚胎是由囊胚內(nèi)部的細(xì)胞團(tuán)不斷增殖分化而來C.治療性克隆中運(yùn)用胚胎移植技術(shù)，一般不選擇原腸胚進(jìn)行胚胎移植D.我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何克隆性實(shí)驗(yàn)14、2019年，中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細(xì)胞通過克隆技術(shù)培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運(yùn)用該基因編輯技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人的研究評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、獲取目的基因的方法______、______、______16、假設(shè)PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在30次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個(gè)這樣的_______個(gè)DNA片段，一共需要加入______________個(gè)引物。17、動(dòng)物基因工程：______。18、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以將_____________水解成_________________和________________。19、加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇___________，導(dǎo)致DNA分子不能形成__________。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共18分)20、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性。（選擇性必修3P52）()A.正確B.錯(cuò)誤21、基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動(dòng)植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面。（選擇性必修3P87）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共6分)22、Hela細(xì)胞系是人工培養(yǎng)具有無限增殖能力的水生瘤細(xì)胞系；在世界各地的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室中為研究者提供了相同的研究對(duì)象?；卮鹣铝袉栴}：

（1）Hela細(xì)胞源自一位美國婦女的宮頸癌細(xì)胞，目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)步研究Hela細(xì)胞，需進(jìn)行___________(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng)。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小組為研究葡萄糖饑餓對(duì)Hela細(xì)胞生長的抑制情況，其他營養(yǎng)條件適宜，用不同葡萄糖濃度的培養(yǎng)基，培養(yǎng)Hela細(xì)胞24h，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示：。葡萄糖濃度（mmol:L-1）Hela細(xì)胞生長抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

該實(shí)驗(yàn)_____________(填“需要”或“不需要”)另設(shè)對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長抑制率的關(guān)系是____________________。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可_________________癌細(xì)胞的增殖，為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。Hela細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，例如，它幫助科學(xué)家首次實(shí)現(xiàn)了人源細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合。細(xì)胞融合技術(shù)的意義是__________________________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)23、某種物質(zhì)S（一種含有C；H、N的有機(jī)物）難以降解；會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y。

回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用__________________方法進(jìn)行滅菌，對(duì)培養(yǎng)皿、燒瓶及吸管等玻璃器皿一般用________法滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是_______________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于__________培養(yǎng)基。

（2）制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都溶化后、分裝前，要進(jìn)行的是_____和滅菌，為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在_______________附近進(jìn)行。接種后的培養(yǎng)皿_______于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

（3）上述實(shí)驗(yàn)中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即_____________________________________。

（4）實(shí)驗(yàn)中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布0．1mL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋________________倍。

（5）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是________________________________________（答出1點(diǎn)即可）。

（6）為檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格，可采取的措施是__________________________________________。24、草甘膦是一種非選擇性除草劑；殺死雜草的同時(shí)也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝。我國科學(xué)家從草甘膦施用土壤中的微生物體內(nèi)獲取草甘膦抗性基因GR79，并將其導(dǎo)入植物體細(xì)胞中獲得抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因植物?；卮鹣铝袉栴}：

(1)啟動(dòng)子的功能是_____。GR79基因發(fā)揮抗草甘膦作用的途徑可能是_____。從土壤中分離得到的某微生物體內(nèi)獲取含有GR79基因的質(zhì)粒，并將其保存在某細(xì)菌群體中。各個(gè)受體菌分別含有該微生物的不同的基因，這樣的細(xì)菌群體稱為_____。

(2)據(jù)圖推測，擴(kuò)增該基因時(shí)，需向引物1和引物2的_____端加上限制酶_____的識(shí)別序列。雙子葉植物幼苗細(xì)胞受損后會(huì)產(chǎn)生用于激活農(nóng)桿菌表達(dá)某些基因并吸引農(nóng)桿菌移向受損植物幼苗細(xì)胞的信號(hào)分子。根據(jù)所學(xué)知識(shí)，這些信號(hào)分子可能是_____。

(3)經(jīng)檢測，科研人員發(fā)現(xiàn)部分獲得GR79基因的植物幼苗不具有抗草甘膦的能力，原因可能是_____。待植株長出新葉后噴灑適量含_____的水溶液，選取存活植株移栽到溫室，以獲得具有除草劑抗性的植株。25、下圖為“乙肝基因工程疫苗”生產(chǎn)過程圖解；質(zhì)粒上箭頭所指部位為相應(yīng)的限制酶的切割位點(diǎn)。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解培養(yǎng)基中的X-gal，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。請(qǐng)回答下列問題：

回答下列問題。

(1)過程①選用限制酶的最佳方案是________。A．只有BamHIB．BamHI和EcoRIC．EcoRV和BamHID．EcoRV和EcoRI(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是_____________。

(3)過程②需要先將大腸桿菌用___________處理，目的是____________________。

(4)為了篩選含目的基因表達(dá)載體的大腸桿菌，可在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中額外加入__________，培養(yǎng)一段時(shí)間后挑選出____________（填“藍(lán)色”或“白色”）的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)；從而獲得大量目的菌。

(5)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，常用___________技術(shù)檢測目的基因是否翻譯出乙肝病毒外殼。26、水蛭是我國的傳統(tǒng)中藥材；主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。擬通過蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)，提高其抗凝血活性。回答下列問題：

（1）蛋白質(zhì)工程流程如圖所示，物質(zhì)a是_______，物質(zhì)b是_______。在生產(chǎn)過程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是_______________________。（2）蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸；基因工程中獲取目的基因的常用方法有___________；__________和利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。PCR技術(shù)遵循的基本原理是____________________。

（3）將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，分析水解產(chǎn)物中的肽含量及其抗凝血活性，結(jié)果如圖所示。推測兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的______（填“種類”或“含量”）有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是______________________________。（4）若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血活性差異，簡要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路________________________________________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

三倍體轉(zhuǎn)基因鯉魚在減數(shù)分裂形成配子時(shí)；同源染色體聯(lián)會(huì)發(fā)生紊亂，不能形成正常后代，不必?fù)?dān)心與正常鯉魚的雜交，所以不會(huì)導(dǎo)致自然種群被淘汰；

運(yùn)載體的標(biāo)記基因（如質(zhì)粒上抗生素抗性基因）以及目的基因（如殺蟲基因）本身編碼的產(chǎn)物；均可轉(zhuǎn)錄；翻譯指導(dǎo)抗性產(chǎn)物形成或形成毒性蛋白；

轉(zhuǎn)基因生物釋放到環(huán)境中（如抗蟲和抗病類轉(zhuǎn)基因植物）；除對(duì)害蟲和病菌致毒外，對(duì)環(huán)境中的許多有益生物也將產(chǎn)生直接或間接的不利影響，甚至?xí)?dǎo)致一些有益生物死亡。

【詳解】

A；四倍體轉(zhuǎn)基因鯉魚與正常鯉魚（二倍體）雜交；后代個(gè)體的體細(xì)胞中含三個(gè)染色體組，在減數(shù)分裂過程中聯(lián)會(huì)發(fā)生紊亂，不能產(chǎn)生正常生殖細(xì)胞，因此不能產(chǎn)生后代，不會(huì)導(dǎo)致自然種群被淘汰，A正確；

B；標(biāo)記基因（如抗生素抗性基因）可能指導(dǎo)合成具有抗性的蛋白質(zhì)產(chǎn)物；B錯(cuò)誤；

C；目的基因如殺蟲基因指導(dǎo)合成的產(chǎn)物具有殺蟲效果；除對(duì)害蟲和病菌致毒外，對(duì)環(huán)境中的許多有益生物也將產(chǎn)生直接或間接的不利影響，甚至?xí)?dǎo)致一些有益生物死亡，C錯(cuò)誤；

D；目的基因可能有抗性基因和毒性基因；有可能存在一定的安全性問題，目的基因通過花粉散布到其他植物體內(nèi)，也有可能改變其特性導(dǎo)致生態(tài)環(huán)境的平衡遭到破壞，D錯(cuò)誤。

故選A。2、C【分析】【分析】

1；單克隆抗體的制備過程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

2；題圖分析：①表示細(xì)胞融合過程；②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞。

【詳解】

A；將抗原注射到小鼠體內(nèi)是為了激發(fā)小鼠的特異性免疫；甲是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的致敏B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；①是骨髓瘤細(xì)胞與免疫的B淋巴細(xì)胞融合的過程；該過程可用滅活的病毒誘導(dǎo)處理，B正確；

C；融合細(xì)胞不一定同時(shí)具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性；也可能是瘤瘤細(xì)胞或B細(xì)胞，還需要進(jìn)一步進(jìn)行篩選，C錯(cuò)誤；

D；②是經(jīng)篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；D正確。

故選C。3、B【分析】微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；平板劃線法要求要連續(xù)多次劃線；且除了第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的終點(diǎn)，逐步稀釋成單個(gè)菌，A正確；

B；接種環(huán)每次使用前都要進(jìn)行灼燒滅菌；B錯(cuò)誤；

C；如果菌液本來濃度不高；則可以適當(dāng)降低稀釋倍數(shù)，C正確；

D；充分稀釋和連續(xù)劃線的目的都是為了使形成的菌落是由單一的細(xì)菌細(xì)胞繁殖而成；D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】4、A【分析】【分析】

同期發(fā)情處理目的是使供體與受體出現(xiàn)相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具需要進(jìn)行滅菌處理，以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害；②營養(yǎng)：使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需加入血清等一些天然成分；③溫度、pH、滲透壓：哺乳動(dòng)物多是36.5℃左右，適宜pH為7.2-7.4；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】

A；受體子宮不會(huì)對(duì)移植的胚胎發(fā)生免疫排斥；供體和受體要進(jìn)行同期發(fā)情處理目的是使供體與受體出現(xiàn)相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境，A錯(cuò)誤；

B、在體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，除了給予一定量的O2以維持細(xì)胞呼吸外，還需要提供CO2氣體；維持培養(yǎng)液的pH的穩(wěn)定，B正確；

C；囊胚進(jìn)一步發(fā)育擴(kuò)大；會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，這個(gè)過程叫做孵化，C正確；

D；隨著胚胎的進(jìn)一步發(fā)育；胚胎內(nèi)部出現(xiàn)了含有液體的腔即囊胚腔，這時(shí)的胚胎叫做囊胚，D正確。

故選A。5、B【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)錄過程需要啟動(dòng)子來驅(qū)動(dòng)。

2；PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

3；正常動(dòng)物細(xì)胞的分裂能力是有限的；傳代次數(shù)也是有限的。

【詳解】

A；植物組織培養(yǎng)過程中通過脫分化形成愈傷組織的過程進(jìn)行有絲分裂；細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)不變，與生物體無差異，A錯(cuò)誤；

B；PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)使用的DNA聚合酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶；而體內(nèi)DNA復(fù)制所用的酶不能耐高溫，這與題意相符，B正確；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞正常分裂的代數(shù)是有限的；體內(nèi)細(xì)胞分裂的代數(shù)也是有限的，與題意不符，C錯(cuò)誤；

D；構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需要啟動(dòng)子來驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄；體內(nèi)轉(zhuǎn)錄過程也需要啟動(dòng)子來驅(qū)動(dòng)，與題意不符，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)6、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。

【詳解】

A；DNA連接酶催化DNA片段連接；Taq酶催化脫氧核苷酸連接，故PCR擴(kuò)增不需要DNA連接酶，A錯(cuò)誤；

B；PCR技術(shù)的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)和DNA半保留復(fù)制；其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物，因此需設(shè)計(jì)一對(duì)與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物，B正確；

C；為避免引物自連；設(shè)計(jì)引物時(shí)要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對(duì)，C正確；

D；因G-C堿基對(duì)之間的氫鍵多于A-T堿基對(duì)之間的氫鍵；GC堿基對(duì)含量高的雙鏈的穩(wěn)定性更高，故GC堿基對(duì)含量高的引物需要更高的退火溫度，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】7、A:D【分析】【分析】

培養(yǎng)基的概念及營養(yǎng)構(gòu)成。

（1）概念：人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

（2）營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水；碳源、氮源、無機(jī)鹽；此外還要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無氧的條件。

【詳解】

A；平板上不含任何生長因子；若倒成平板后直接培養(yǎng)，出現(xiàn)菌落說明已被雜菌感染，因?yàn)樵撌葻峋荒茉谌狈ιL因子的培養(yǎng)基中生長，A正確；

B；制備平板時(shí)；先滅菌再倒平板，B錯(cuò)誤；

C；圖中菌落生活在乙丙區(qū)域之間；說明同時(shí)需要乙和丙，C錯(cuò)誤；

D；不同菌種所需生長因子不同；可利用生長圖形法篩選菌種，D正確。

故選AD。8、C:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測到細(xì)菌B合成人的生長激素才能說明獲得成功；A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)題意；細(xì)菌B不含有質(zhì)粒A及其上的基因，即沒有抗氨芐青霉素基因；質(zhì)粒含抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發(fā)生重組時(shí)抗四環(huán)素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長的是導(dǎo)入了普通質(zhì)?；蛘咧亟M質(zhì)粒的細(xì)菌，B錯(cuò)誤；

C；將人的生長激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程連接兩個(gè)切口；該過程共形成4個(gè)磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因?qū)爰?xì)菌時(shí)，需要用Ca2+處理細(xì)菌；使其處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】9、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的無氧呼吸產(chǎn)生酒精；醋酸菌在糖源；氧氣充足時(shí)；直接將葡萄糖氧化為醋酸；在糖源不足、氧氣充足時(shí)，可利用酒精，即乙醇作為呼吸底物，先將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜幔ù姿幔?/p>

【詳解】

A；制備培養(yǎng)基過程中；pH的調(diào)節(jié)應(yīng)在滅菌前進(jìn)行，A錯(cuò)誤；

B；制作果酒時(shí)適當(dāng)加大接種量；酵母菌菌體的基數(shù)增大，可使其快速形成優(yōu)勢菌群，抑制雜菌生長，提高發(fā)酵速率，B正確；

C；現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后；為滿足發(fā)酵過程的需要，還要對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，之后才可進(jìn)行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵，C錯(cuò)誤；

D；醋酸菌能夠氧化酒精產(chǎn)生醋酸；造成葡萄酒的敗壞。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天開瓶后的紅酒容易變酸，D正確。

故選AC。10、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。

DNA連接酶是鏈接兩個(gè)DNA的片段；形成磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；能在特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵，A正確；

B；DNA連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的磷酸二酯鍵；將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來，B錯(cuò)誤；

C；DNA聚合酶將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端；形成磷酸二酯鍵，DNA連接酶是鏈接兩個(gè)DNA的片段，形成磷酸二酯鍵。在基因工程操作中，不可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶，C錯(cuò)誤；

D；限制酶主要來源于微生物；D錯(cuò)誤。

故選BCD。11、A:C:D【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。

3；生殖性克隆：指將克隆技術(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個(gè)體。

4；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆。

【詳解】

A；對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)；我們應(yīng)該趨利避害，理性看待，A正確；

B；中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆，B錯(cuò)誤；

C；中國在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器；并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散，C正確；

D；對(duì)基因檢測應(yīng)該保護(hù)個(gè)人遺傳信息的隱私權(quán)；D正確。

故選ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精是利用微生物進(jìn)行生物發(fā)酵的過程；所利用的微生物為酵母菌，通過酒精發(fā)酵將葡萄糖轉(zhuǎn)化為酒精，玉米秸稈中含有的糖類主要是纖維素，因此需要先將纖維素水解成葡萄糖，再進(jìn)行發(fā)酵。

【詳解】

A；由于纖維素組成成分復(fù)雜、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；生物降解時(shí)難以迅速進(jìn)行，常用酸或堿進(jìn)行預(yù)處理，初步打斷纖維素內(nèi)部的化學(xué)鍵，降低聚合度，利于酶與底物充分接觸，提高催化效率，A正確；

B；在有氧的條件下酵母菌進(jìn)行出芽生殖；上層培養(yǎng)液與空氣接觸部位氧氣較多，短時(shí)間內(nèi)酵母菌更多分布在發(fā)酵液的上層，B正確；

C；在選擇培養(yǎng)基中經(jīng)多次培養(yǎng)；分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定，C正確；

D、發(fā)酵液pH下降是因?yàn)楫a(chǎn)生了CO2；D錯(cuò)誤。

故選ABC。13、C【分析】【分析】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚；神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；不反對(duì)治療性克隆。

【詳解】

A；開放式組織培養(yǎng)一般是指使組織培養(yǎng)脫離嚴(yán)格無菌的操作環(huán)境；在自然、開放的有菌環(huán)境中進(jìn)行操作。，動(dòng)物細(xì)胞一般不能采用這種方式，A錯(cuò)誤；

B；胚胎是由整個(gè)受精卵發(fā)育而來的；囊胚內(nèi)部的細(xì)胞不能發(fā)育為完整的胚胎，B錯(cuò)誤；

C；胚胎移植技術(shù)；一般采用桑椹胚或囊胚進(jìn)行移植，C正確；

D；我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何形式的生殖性克??；但是不反對(duì)治療性克隆，D錯(cuò)誤。

故選C。14、B:D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細(xì)胞通過克隆技術(shù)（屬于無性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯(cuò)誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)藥物；C正確；

D；不能利用該技術(shù)進(jìn)行克隆人的研究；D錯(cuò)誤。

故選BD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共5題，共10分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫人工合成PCR技術(shù)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－217、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動(dòng)物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA斷裂絮狀沉淀四、判斷題(共2題，共18分)20、B【分析】【詳解】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到了限制，故錯(cuò)誤。21、A【分析】【詳解】

目前，基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動(dòng)植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面，例如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物；將植物花青素代謝相關(guān)的基因?qū)霠颗；ㄖ校蛊涑尸F(xiàn)自然界沒有的顏色，提高了觀賞價(jià)值；將外源生長素基因?qū)膈庺~體內(nèi)，轉(zhuǎn)基因鯉魚生長速率加快等，所以正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共6分)22、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；培養(yǎng)條件：

（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無毒--定期更換培養(yǎng)液；防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。

（2）營養(yǎng)：

成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）

（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜；多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】

（1）目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)一步研究Hela細(xì)胞；需進(jìn)行傳代培養(yǎng)；由于是在多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液適宜的pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶（最適pH是強(qiáng)酸性）已失去活性，所以在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸液。

（2）分析表格數(shù)據(jù)；該實(shí)驗(yàn)需要另設(shè)對(duì)照組，觀察在正常條件下細(xì)胞生長情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長抑制率的關(guān)系是葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長抑制率越高。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可抑制癌細(xì)胞的增殖；為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成的單核細(xì)胞叫做雜交細(xì)胞，細(xì)胞融合技術(shù)的意義是突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，重點(diǎn)考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和條件，相關(guān)知識(shí)點(diǎn)只需考生識(shí)記即可正確作答，屬于考綱識(shí)記層次的考查。對(duì)于此類試題，考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中，應(yīng)該注意構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)?！窘馕觥總鞔诙鄶?shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長抑制率越高抑制突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能六、綜合題(共4題，共16分)23、略

【分析】【分析】

由圖分析可知；甲培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，乙培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，結(jié)合它們的成分推測可知，Y是凝固劑。

（1）

對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法；對(duì)培養(yǎng)皿；燒瓶及吸管等玻璃器皿滅菌的方法是干熱滅菌；由分析可知；Y是凝固劑，實(shí)驗(yàn)室中常用的凝固劑為瓊脂；甲、乙培養(yǎng)基均屬于選擇培養(yǎng)基，可對(duì)對(duì)應(yīng)的菌種進(jìn)行選擇。

（2）

微生物的培養(yǎng)培養(yǎng)需要適宜的條件；制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都溶化后；分裝前，要進(jìn)行的是調(diào)pH和滅菌；為避免雜菌污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；接種后的培養(yǎng)皿倒置放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)過快而不利于微生物生長。

（3）

培養(yǎng)基中的成分一般都有的成分是水；碳源、氮源和無機(jī)鹽。

（4）

實(shí)驗(yàn)中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，假設(shè)稀釋倍數(shù)為X，則200÷0.1×X=2×107個(gè)，故至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋104倍。

（5）

在步驟⑤的篩選過程中；發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是：S的濃度超過某一值時(shí)，導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞由于滲透作用失水過多，會(huì)抑制菌株的生長。

（6）

為檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格；可單獨(dú)設(shè)置一個(gè)滅菌后不接種樣液的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)形成對(duì)照。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記微生物實(shí)驗(yàn)中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題和解決問題的能力?！窘馕觥浚?）高壓蒸汽滅菌干熱滅菌瓊脂選擇。

（2）調(diào)pH酒精燈火焰倒置。

（3）水；碳源、氮源和無機(jī)鹽。

（4）104

（5）S的濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長。

（6）單獨(dú)設(shè)置一個(gè)滅菌后不接種菌液的培養(yǎng)皿（含培養(yǎng)基）進(jìn)行培養(yǎng)24、略

【分析】【分析】

分析題意可知；草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時(shí)也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝。

（1）

啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)；驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行；草甘膦與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，會(huì)與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶，影響細(xì)胞正常代謝，由此推測，GR79基因表達(dá)的產(chǎn)物能阻止草甘膦與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶，從而發(fā)揮抗草甘膦作用；基因文庫能夠儲(chǔ)存一種生物的全部或者部分基因。

（2）

由題圖可知；擴(kuò)增目的基因時(shí)，應(yīng)在引物的5′端添加相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列；由題圖中質(zhì)粒結(jié)構(gòu)可知，限制酶BamHⅠ的識(shí)別序列位于標(biāo)記基因中，不能選用，且為防止目的基因自身環(huán)化和反向插入，應(yīng)選擇兩種不同的限制酶，即PstⅠ和XhoⅠ，將它們的識(shí)別序列分別加在引物1和引物2的5′端；雙子葉植物受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量酚類化合物吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞，由此可知信號(hào)分子為酚類化合物。

（3）

獲得GR79基因的植物幼苗通過基因表達(dá)可以表現(xiàn)出抗草甘膦的性狀，若不具有抗草甘膦的能力，則意味著草甘膦抗性基因（GR79基因）轉(zhuǎn)錄或翻譯異常，即草甘膦抗性基因（GR79基因）表達(dá)異常；待植株長出新葉后，需在個(gè)體水平鑒定該植株是否具有抗草甘膦的性狀，故應(yīng)噴灑適量含草甘膦的水溶液，從而篩選出具有除草劑抗性的植株。【解析】(1)RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)；驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行GR79基因表達(dá)的產(chǎn)物阻止草甘膦與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶基因文庫。

(2)5′PstⅠ和XhoⅠ酚類化合物。

(3)草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)錄或翻譯異常（或草甘膦抗性基因表達(dá)異常）草甘膦25、略

【分析】【分析】

基因工程基本操作程序：

1.目的基因的獲?。悍椒ㄓ蠵CR；化學(xué)方法人工合成、DNA合成儀合成；

2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建：基因表達(dá)載體的組成有目的基因；啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)；

3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：導(dǎo)入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；花粉管通道法、基因槍法；導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法；導(dǎo)入微生物的方法：感受態(tài)細(xì)胞法；

4.目的基因的檢測與鑒定：分子水平檢測：DNA分子雜交檢測目的基因是否插入到轉(zhuǎn)基因生