DBS32 011-2016 食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒配方乳粉中α-乳白蛋白的測(cè)定 凝膠色譜法　　

DBS江蘇省衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布I1食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)嬰幼兒配方乳粉中α-乳白蛋白的測(cè)定凝膠色譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用凝膠色譜法測(cè)定嬰幼兒配方乳粉中α-乳白蛋白2.1α-乳白蛋白(α-Lac2.2β-乳球蛋白(β-Lactoglobulin）是指乳以鹽酸胍為變性劑，以2-巰基乙醇為還原劑，斷開(kāi)蛋白質(zhì)中的硫-硫（S-S）4.2.1磷酸二氫鈉(NaH2PO4)。4.2.2磷酸氫二鈉(Na2HPO4)。4.2.3乙二胺四乙酸(EDTA，C10H16N2O84.2.6鹽酸胍(CH6ClN3)。4.3試劑配制4.3.1緩沖溶液有必要，用氫氧化鈉（4.2.4）或鹽酸（4.2.5）將pH調(diào)節(jié)到7.5±0.1。將溶液轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶，用4.3.2流動(dòng)相稱取573g鹽酸胍，置于1000mL廣口錐形瓶中，添加100mL緩沖溶液（4.3.1），再用水將該溶液稀釋到約900mL，同時(shí)不停攪拌，用氫氧化鈉溶液（4.2.4將pH調(diào)節(jié)到7.5±0.1。將溶液轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，并用水定容至刻度。過(guò)0.45μm濾4.3.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制準(zhǔn)確稱取25mg（精確到0.1mg）α-乳白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和25mg（精確到0.1mg）β-乳球蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，置分別移取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.05mL、0.1mL、0.5mL、1mL、2mL至10m至刻度，配成濃度為0.0125、0.025、0.125、注2：標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入β-乳球蛋白是為確保β-乳球蛋白和α-乳5.1高效液相色譜儀（配泵頭清洗裝置、紫外檢測(cè)器或二極管矩陣根據(jù)樣品的蛋白質(zhì)含量，稱取含有10mg蛋白質(zhì)的乳粉樣品（精確到0.1mg），置于10mL刻度試管中，加入8mL流動(dòng)相，使樣品完全溶解，如需超聲應(yīng)保持樣品溫度不高于30℃,G3000SWXL（7.8mm×300mm）或相當(dāng)者；使用時(shí)將236.2.4檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器或二極管矩陣檢測(cè)器，檢測(cè)CV100m1000XCV100m1000X——試樣中α-乳白蛋白（以牛α-乳白蛋白計(jì)）的含量C——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的試樣測(cè)定液中α-乳白m——試樣質(zhì)量，g。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值4DBS32/011—2016(資料性附錄)-at意意律圖A.1α-乳白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的液相色譜圖(RT:36.圖A.2樣品中α