2025年仁愛科普版選擇性必修三生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年仁愛科普版選擇性必修三生物下冊階段測試試卷305考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、菜籽粕含有35%～45%蛋白質(zhì)；是畜禽飼料的重要原料，但其中的單寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子限制了菜籽粕的應(yīng)用。研究者將不同菌種接種到菜籽粕與麩皮制成的固體培養(yǎng)基中發(fā)酵48h，測定菜籽粕中單寧的含量，結(jié)果如下圖。

下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.菜籽粕與麩皮為微生物提供碳源和氮源B.接種后需對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C.黑曲霉菌對單寧的去除效果最為理想D.對照組為不接種微生物的固體培養(yǎng)基2、用XhoI和SalI兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段；酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是（）

A.如圖中兩種酶識別的核苷酸序列不同B.如圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNAC.泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物D.圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA3、下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性及倫理問題的觀點(diǎn)，正確的是（）A.可隨意選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，從而培育出大量的轉(zhuǎn)基因植物B.克隆人可以解決不孕不育患者的痛苦，應(yīng)該在臨床上進(jìn)行推廣實(shí)驗(yàn)C.反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是因?yàn)樵嚬軏雰杭夹g(shù)屬于無性繁殖方式D.生物武器具有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止生產(chǎn)和使用4、下列關(guān)于限制酶的說法不正確的是（）A.一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，體現(xiàn)了酶的專一性B.限制酶在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子C.限制酶可以斷開兩條DNA鏈之間的氫鍵D.在基因工程的操作中，一般選用同一限制酶切割目的基因與運(yùn)載體，以獲得相同的黏性末端5、下圖為科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡要過程。下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強(qiáng)的肌肉母細(xì)胞B.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，有利于減輕環(huán)境污染C.培養(yǎng)液中的支架提供了更多的細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長D.生物反應(yīng)器內(nèi)應(yīng)控制好適宜的溫度，并充入純氧保證細(xì)胞呼吸6、下圖為真核生物核基因結(jié)構(gòu)模式圖，下列敘述正確的是（）

A.啟動子編碼起始密碼子B.cDNA文庫和基因組文庫的基因中均含有內(nèi)含子C.在轉(zhuǎn)錄完成后，RNA聚合酶從c~d區(qū)段脫落下來D.細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)，只復(fù)制編碼區(qū)，不復(fù)制非編碼區(qū)7、圖為科研人員培育克隆猴“中中”的流程圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.“中中”不受卵子b的基因控制B.圖中利用了干細(xì)胞技術(shù)C.d為胚胎發(fā)育提供遺傳物質(zhì)和其他適宜條件D.“中中”的染色體數(shù)目與a細(xì)胞相同評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)8、我國科學(xué)家提出的異種克隆大熊貓實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.科學(xué)家通過對母兔注射孕激素，進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞B.異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)，為保證無毒無菌環(huán)境，往往需要在培養(yǎng)液中加入維生素C.囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成，后者將來可發(fā)育成胎兒的各種組織D.兔子宮提供的生理環(huán)境與大熊貓差異大，異種重構(gòu)囊胚可能不能正常發(fā)育出大熊貓幼仔9、基因工程利用某目的基因（圖甲）和Pl噬菌體載體（圖乙）構(gòu)建重組DNA；限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正確的是（）

A.構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體B.構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產(chǎn)生一種重組DNA10、下圖為科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡要過程；下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強(qiáng)的肌肉母細(xì)胞B.生物反應(yīng)器內(nèi)應(yīng)控制好適宜的溫度，并沖入純氧保證細(xì)胞呼吸C.培養(yǎng)液中的支架提供了更多的細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長D.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，減少環(huán)境污染11、2022年6月10日；世界首例體細(xì)胞克隆北極狼在北京呱呱墜地。克隆北極狼的供體細(xì)胞來自哈爾濱極地公園引進(jìn)的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細(xì)胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。克隆過程如圖所示，下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.體細(xì)胞核移植技術(shù)比胚胎干細(xì)胞核移植技術(shù)更易成功B.用電刺激、Ca2+載體等方法激活重構(gòu)胚，促進(jìn)其分裂發(fā)育C.圖中細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組D.體細(xì)胞核移植技術(shù)有望用于增加瀕危動物的種群數(shù)量12、如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是（）

A.某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板，該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果常會比實(shí)際活菌數(shù)目少B.3號試管中的樣品溶液稀釋倍數(shù)為104倍C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個(gè)D.該實(shí)驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，用以判斷選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用13、關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性，下列說法正確的是（）A.對待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定，即堅(jiān)決禁止生物武器B.對轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害或過敏的蛋白質(zhì)C.我國不反對治療性克隆，允許有限制地進(jìn)行克隆人實(shí)驗(yàn)D.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物14、2020年7月20日，國際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗(yàn)的成果。該試驗(yàn)是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團(tuán)隊(duì)開展的研究，試驗(yàn)中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗(yàn)結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護(hù)”，將新冠病毒“拒之門外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價(jià)試驗(yàn)的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗15、CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯是一種對靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)；其原理是由一個(gè)向?qū)NA(sgRNA)分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。受此機(jī)制啟發(fā)，科學(xué)家們通過設(shè)計(jì)sgRNA中堿基的識別序列，即可人為選擇DNA上的任一目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行切割（如圖所示）。CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對象出錯(cuò)而造成脫靶。下列相關(guān)錯(cuò)誤的是（）

A.Cas9蛋白通過破壞目標(biāo)DNA的氫鍵實(shí)現(xiàn)對DNA的切割，與解旋酶的作用類似B.若脫靶率與sgRNA序列的長度有關(guān)，則sgRNA的序列越短脫靶率越高C.利用此技術(shù)對目標(biāo)基因部分DNA片段進(jìn)行切除可能導(dǎo)致染色體變異D.sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補(bǔ)配對原則與目標(biāo)基因的雙鏈區(qū)域不同16、淀粉經(jīng)淀粉酶水解后得到的產(chǎn)物是重要的工業(yè)原料；但工業(yè)化生產(chǎn)常需在高溫條件下進(jìn)行，而現(xiàn)有的淀粉酶耐熱性不強(qiáng)，科研人員發(fā)現(xiàn)將淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替換為天冬氨酸能產(chǎn)生耐熱性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計(jì)并人工合成了AmyS2基因，將其導(dǎo)入芽孢桿菌內(nèi)，具體過程如下圖所示。最終結(jié)果表明，與導(dǎo)入質(zhì)粒B相比，導(dǎo)入質(zhì)粒C的芽孢桿菌培養(yǎng)液中更易獲得并提純AmyS2．下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過基因工程實(shí)現(xiàn)的B.構(gòu)建質(zhì)粒C時(shí)需用限制酶Eco52I和BamHI同時(shí)切割質(zhì)粒B和信號肽基因C.信號肽基因表達(dá)的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體D.可用PCR技術(shù)檢測芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)17、禁止生物武器公約。

（1）1972年4月10日，蘇聯(lián)、美國、英國分別在其首都簽署了《禁止試制、生產(chǎn)和儲存并銷毀細(xì)菌（生物）和毒劑武器公約》（簡稱_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我國也加入了這一公約。

（2）我國在任何情況下_____、_____、_____生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。18、纖維素酶是一種__________，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即__________、___________和_______________，前兩種酶使纖維素分解成___________，第三種酶將纖維二糖分解成_____________。正是在這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被__________成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)，同樣，也可以為人類所利用。19、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。20、動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。21、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來除去病毒（因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn)：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲藏和運(yùn)輸。

人工種子的結(jié)構(gòu)包括：______、_____和______。評卷人得分四、判斷題(共4題，共32分)22、轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡（______）A.正確B.錯(cuò)誤23、制備單克隆抗體時(shí)，2次篩選的目的不同。()____A.正確B.錯(cuò)誤24、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。（選擇性必修3P111）()A.正確B.錯(cuò)誤25、如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因源于自然界，則不會存在安全性問題。()A.正確B.錯(cuò)誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共3分)26、有研究表明CDKN2B基因與小鼠的壽命有關(guān)；科學(xué)家將該基因?qū)胄∈篌w內(nèi)，統(tǒng)計(jì)其壽命是否高于正常小鼠。圖1表示CDKN2B基因與相關(guān)限制酶酶切位點(diǎn)，該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA堿基序列與A鏈的堿基序列相同（T；U視為相同的堿基），圖2為質(zhì)粒簡圖，請回答下列有關(guān)問題：

（1）科學(xué)家首先采用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。PCR過程中每一循環(huán)有兩次升溫一次降溫，其中降溫的目的是_______________________________________________________。

（2）科學(xué)家在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程時(shí)，目的基因應(yīng)插在___________和___________之間才能正常表達(dá)。單獨(dú)使用限制酶HindⅢ分別切割目的基因和載體后產(chǎn)生黏性末端。攜帶CDKN2B基因的重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)約一半的細(xì)胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白，原因是___________。為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生，應(yīng)對以上方法進(jìn)行改進(jìn)，改進(jìn)措施為___________。

（3）若想讓一個(gè)轉(zhuǎn)入了目的基因的受精卵發(fā)育成多個(gè)個(gè)體，可以采用___________技術(shù)，操作時(shí)應(yīng)注意做到_______________________________________________________。評卷人得分六、綜合題(共3題，共24分)27、硒作為生物體內(nèi)的微量元素；具有抗氧化；增強(qiáng)抵抗力等功能，是生物體內(nèi)不可或缺的。研究人員以從實(shí)驗(yàn)室冷藏的饅頭上提取的酵母作為出發(fā)菌株，利用紫外線進(jìn)行物理誘變以篩選富硒能力強(qiáng)的菌株。回答下列問題：

(1)酵母菌細(xì)胞呼吸的類型屬于___________型。研究人員挑選饅頭酵母接種到30mL選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，培養(yǎng)基中需要添加的物質(zhì)主要有____________。將錐形瓶在180r/min的恒溫?fù)u床上培養(yǎng)，搖床培養(yǎng)有助于加速培養(yǎng)液中酵母菌的繁殖，原因是___________（答出一點(diǎn)即可）；搖床培養(yǎng)后可添加，以進(jìn)行梯度稀釋獲得酵母菌懸液。

(2)將制成的酵母菌懸液用紫外線誘變后，實(shí)驗(yàn)人員采用梯度稀釋法對誘變菌種稀釋105倍，再分別將0.1mL稀釋液涂布在3個(gè)牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上，三個(gè)平板上統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為251，265和276，則原酵母菌懸液中每10mL含有的酵母菌個(gè)數(shù)為____________。為了計(jì)算紫外線誘變的致死率，應(yīng)設(shè)計(jì)對照實(shí)驗(yàn)，對照實(shí)驗(yàn)的處理方式為___________。

(3)富硒酵母是制作果酒的優(yōu)良菌株，在制作果酒的過程中密封不嚴(yán)會導(dǎo)致果酒變酸，其原因是___________；工業(yè)發(fā)酵時(shí)，培養(yǎng)富硒酵母的培養(yǎng)基中還需要添加一定量的抗生素，以___________。28、人胰島素由A；B兩條肽鏈構(gòu)成。研究人員用大腸桿菌作生產(chǎn)菌；利用基因工程TTA號凍技術(shù)分別生產(chǎn)兩條肽鏈，并在體外將兩條肽鏈加工成胰島素。請回答下列問題：

（1）由A、B兩條肽鏈可推導(dǎo)出A、B基因的堿基序列，依據(jù)是______。因?yàn)锳、B基因中的脫氧核苷酸數(shù)較少，因此常用______的方法獲取目的基因。

（2）在基因表達(dá)載體中，標(biāo)記基因的作用是______?；蚬こ讨胁荒軐、B基因直接導(dǎo)入大腸桿菌的原因是______。

（3）檢測A、B基因是否導(dǎo)入受體菌時(shí)，常用______作探針。若A、B基因表達(dá)的肽鏈?zhǔn)壑邪被釘?shù)目增多，肽鏈后延，則需對A、B基因進(jìn)行改造，這個(gè)改造是______。

（4）引導(dǎo)肽是由引導(dǎo)肽基因控制合成的段多肽序列，若在A、B肽鏈的前端加上引導(dǎo)肽序列后，可將A、B肽鏈引導(dǎo)到大腸桿菌的細(xì)胞膜外，便于A、B肽鏈提取。為實(shí)現(xiàn)上述目的，在基因?qū)用娴牟僮魇莀_____29、新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合；侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的黏附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點(diǎn)之一。圖2為篩選；制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題。

(1)圖1中人體內(nèi)抗原呈遞細(xì)胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細(xì)胞表面，被____細(xì)胞表面的受體識別后激活該細(xì)胞。

(2)B細(xì)胞識別入侵的病毒后，在細(xì)胞因子作用下，經(jīng)過細(xì)胞的___，形成__細(xì)胞。

(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查，檢測病毒的__；采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查，檢測__。

(4)據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射___免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞；再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得。

___細(xì)胞。因?yàn)橥环N抗原可能激活__細(xì)胞，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞株。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

制備培養(yǎng)基的基本過程為：計(jì)算；稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。對培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌。圖中不同菌種接種到菜籽粕與麩皮制成的固體培養(yǎng)基中發(fā)酵48h后；發(fā)酵菜籽粕中單寧含量都發(fā)生了不同程度的減少，說明微生物發(fā)酵可去除單寧。

【詳解】

A；菜籽粕含有35%～45%蛋白質(zhì)；麩皮富含纖維素，菜籽粕與麩皮可為微生物提供碳源和氮源，A正確；

B；對培養(yǎng)基滅菌應(yīng)在接種前；接種后再滅菌，菌種將被全部殺死，B錯(cuò)誤；

C；據(jù)圖可知；與對照組相比，黑曲霉菌發(fā)酵菜籽粕中單寧含量最低，說明黑曲霉菌對單寧的去除效果最為理想，C正確；

D；對照組為不接種微生物的固體培養(yǎng)基；目的是作為對照，說明微生物去除單寧的作用，D正確。

故選B。2、D【分析】【詳解】

【分析】該題考查DNA的結(jié)構(gòu)；限制酶的特點(diǎn)和功能等。DNA一般是雙螺旋結(jié)構(gòu)；限制酶可以識別特定的脫氧核苷酸序列；并在每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割。

【詳解】限制酶識別特定的脫氧核苷酸序列，不同的限制酶能識別不同的核苷酸序列，由電泳圖可知XhoI和SalI兩種酶分別切割時(shí)，識別的序列不同，A正確；同種限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA連接酶進(jìn)行連接，可以構(gòu)成重組DNA，B正確；SalI將DNA片段切成4段，XhoI將DNA片段切成3段，根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為SalI，泳道②為XhoI；C正確；限制酶切割雙鏈DNA，酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA，D錯(cuò)誤，所以選D。

【點(diǎn)睛】注意圖1兩種限制酶的識別位點(diǎn)數(shù)量，SalI有3個(gè)識別位點(diǎn)，能將DNA片段切成4段，XhoI有2個(gè)識別位點(diǎn)，能將DNA片段切成3段。3、D【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對治療性克隆人。

3；生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因生物存在食物安全、生態(tài)安全等問題；不可隨意選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，從而培育出大量的轉(zhuǎn)基因植物，A錯(cuò)誤；

B；克隆人是不道德的；禁止生殖性克隆人，不應(yīng)該在臨床上進(jìn)行推廣實(shí)驗(yàn)，B錯(cuò)誤；

C；試管嬰兒可以設(shè)計(jì)嬰兒的性別；反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒，而試管嬰兒技術(shù)屬于有性繁殖方式，C錯(cuò)誤；

D；生物武器包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，具有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止生產(chǎn)和使用，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】4、C【分析】【分析】

關(guān)于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

ABC；一種限制酶只能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，可見，限制酶在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子，體現(xiàn)了酶的特異性，A、B正確，C錯(cuò)誤；

D；在基因工程的操作中；一般選用同一限制酶切割目的基因與運(yùn)載體，以獲得相同的黏性末端，D正確。

故選C。5、D【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

【詳解】

A；胰蛋白酶處理動物組織；可以使組織分散成單個(gè)細(xì)胞，利于動物細(xì)胞培養(yǎng)，A正確；

B；理論上來說；僅來自1只動物的干細(xì)胞，可制成的肉品數(shù)量比宰殺1頭牛多很多倍，有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，同時(shí)也可減少對土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會減少，B正確；

C；動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中懸液中的細(xì)胞會很快貼附在瓶壁上；如果想得到大量的產(chǎn)物，可以增大細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長，C正確。

D、動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2（調(diào)節(jié)pH值）；D錯(cuò)誤。

故選D。6、C【分析】【分析】

真核細(xì)胞的基因由編碼區(qū)和非編碼區(qū)兩部分組成；其中編碼區(qū)包括能夠編碼蛋白質(zhì)的序列（外顯子）和一般不能夠編碼蛋白質(zhì)的序列（內(nèi)含子），在真核細(xì)胞基因表達(dá)時(shí)，首先由DNA轉(zhuǎn)錄出前驅(qū)mRNA，然后經(jīng)過裁接才能形成成熟的mRNA。

【詳解】

A；mRNA上起始密碼子的序列應(yīng)由基因的編碼區(qū)編碼；而啟動子位于編碼區(qū)上游的非編碼區(qū)，所以啟動子不編碼起始密碼子，A錯(cuò)誤；

B；cDNA文庫中不含有內(nèi)含子；B錯(cuò)誤；

C；c~d區(qū)為終止子區(qū)域；終止子可終止轉(zhuǎn)錄過程，因此在轉(zhuǎn)錄完成后，RNA聚合酶從c~d區(qū)段脫落下來，C正確；

D；DNA分子復(fù)制時(shí)形成的子代DNA與親代DNA相同；不具有選擇性，因此細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)，即復(fù)制編碼區(qū)，也復(fù)制非編碼區(qū)，D錯(cuò)誤。

故選C。7、D【分析】【分析】

核移植是指將供體細(xì)胞核移入除去核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動物個(gè)體。

【詳解】

A、“中中”也會受到卵子b細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)的影響；A錯(cuò)誤；

B；據(jù)圖可知；圖中利用了體細(xì)胞核移植技術(shù)，沒有用到干細(xì)胞技術(shù)，B錯(cuò)誤；

C；d為受體動物；能為胚胎發(fā)育提供發(fā)育環(huán)境，但不提供遺傳物質(zhì)，C錯(cuò)誤；

D；a是成纖維細(xì)胞；“中中”的細(xì)胞核中的染色體來自于a細(xì)胞，故“中中”的染色體數(shù)目與a細(xì)胞相同，D正確。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)8、A:B【分析】【分析】

分析圖解：異種克隆大熊貓的培育首先通過核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞；然后經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)獲得異種重構(gòu)囊胚，再利用胚胎移植技術(shù)將重構(gòu)囊胚移植如代孕兔體內(nèi)。

【詳解】

A；科學(xué)家通過對母兔注射促性腺激素；進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)；往往需要在培養(yǎng)液中加入抗生素，從而保證無毒無菌環(huán)境，B錯(cuò)誤；

C；囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成；其中滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育為胎盤和胎膜，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胚胎的各種組織，C正確；

D；目前；異種重構(gòu)囊胚在代孕兔的子宮內(nèi)能正常著床，但是不能正常發(fā)育生產(chǎn)出大熊貓幼仔，很可能是代孕兔提供的營養(yǎng)物質(zhì)不能讓異種重構(gòu)囊胚正常發(fā)育，D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】9、A:B:C【分析】【分析】

一種限制酶只能識別一種核苷酸序列且在特定的位點(diǎn)對DNA分子進(jìn)行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端兩種，具有相同黏性末端的DNA片段之間可以在DNA連接酶的作用下連接到一起。

【詳解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，A正確；

B；由于Sau3AI的切割位點(diǎn)在EcoRI的左側(cè)；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，B正確；

C；P1噬菌體載體為環(huán)狀DNA；其上只含有一個(gè)EcoRI的切點(diǎn)，因此用EcoRI切割后，該環(huán)狀DNA分子變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，因此切割后含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，C正確；

D；從圖甲看出；用EcoRI切割目的基因后兩端各有一切口，與圖乙中EcoRI切口對接時(shí)，可有兩種可能，即可產(chǎn)生兩種重組DNA，D錯(cuò)誤。

故選ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中懸液中的細(xì)胞會很快貼附在瓶壁上。動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2?！叭嗽炫Ｈ狻钡呐囵B(yǎng)不僅產(chǎn)量高；并可以減少成本和降低環(huán)境污染。

【詳解】

A；胰蛋白酶處理動物組織；可以使組織分散成單個(gè)細(xì)胞，利于動物細(xì)胞培養(yǎng)，A正確。

B、動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2；B錯(cuò)誤。

C；動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中懸液中的細(xì)胞會很快貼附在瓶壁上。所以細(xì)胞貼附瓶壁的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑；無毒，易于貼附，如果想得到大量的產(chǎn)物，可以增大細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長，C正確。

D；人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)；同時(shí)也可減少對土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會減少，D正確。

故選ACD。11、B:D【分析】【分析】

克隆是指生物體通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖；以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個(gè)體。通常是利用生物技術(shù)由無性生殖產(chǎn)生與原個(gè)體有完全相同基因的個(gè)體或種群。

【詳解】

A；體細(xì)胞的分化程度比胚胎干細(xì)胞的分化程度高；與體細(xì)胞核移植技術(shù)相比，胚胎干細(xì)胞核移植技術(shù)更易成功，A錯(cuò)誤；

B；在體細(xì)胞核移植過程中；用物理方法或化學(xué)方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白質(zhì)合成酶抑制劑等）激活受體細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，B正確；

C；基因重組發(fā)生在有性生殖的生物進(jìn)行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過程中(狹義上的基因重組)以及基因工程技術(shù)中（包含在廣義的基因重組內(nèi)）；而細(xì)胞分裂、分化的過程一般不會發(fā)生基因重組，C錯(cuò)誤；

D；體細(xì)胞核移植技術(shù)是無性繁殖；有望用于增加瀕危動物的種群數(shù)量，D正確。

故選BD。12、A:B:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中5支試管為梯度稀釋；最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)在30~300的平板，取其平均值，進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)公式為（C÷V）×M。（C為平均菌落數(shù)，V為涂布液體積，M為稀釋倍數(shù)）。

【詳解】

A；設(shè)置重復(fù)組；增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性，故某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板。稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長成一個(gè)菌落，使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會比實(shí)際活菌數(shù)目要低，A正確；

B、據(jù)圖可知，將10g土樣加入到90mL無菌水中定容至100mL后，此時(shí)土樣稀釋倍數(shù)為10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號試管中的樣品，故3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍；B正確；

C、5號試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109個(gè)；C錯(cuò)誤；

D；要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用；需設(shè)置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基上的菌落種類數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落類型，則說明起到了選擇作用，D正確。

故選ABD。13、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括食物安全、生物安全和環(huán)境安全。

3；“治療性克隆”將使人胚胎干細(xì)胞（簡稱ES細(xì)胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞），用于治療。

【詳解】

A；對待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，堅(jiān)決禁止生物武器，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因要注意基因安全；對外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)，B正確；

C；中國對于克隆人的態(tài)度是不反對治療性克?。唤惯M(jìn)行克隆人的實(shí)驗(yàn)，C錯(cuò)誤；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題；包括食品安全、生物安全和生態(tài)安全，要馬上停止試驗(yàn)，并銷毀重組生物，D正確。

故選ABD。14、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱為亞單位疫苗；是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進(jìn)行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價(jià)試驗(yàn)的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。15、A:C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：①限制酶；能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；②DNA連接酶，連接兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；③運(yùn)載體，質(zhì)粒是最常用的運(yùn)載體，除此之外，還有λ噬菌體衍生物、動植物病毒。

2；基因治療：把正常的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細(xì)胞中；使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的。基因治療分為體外基因治療和體內(nèi)基因治療兩種類型。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息“由一個(gè)向?qū)NA（sgRNA）分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割”；再結(jié)合圖解可知能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點(diǎn)功能的分子是向?qū)NA（sgRNA）分子和Cas9蛋白，其類似于基因工程中限制酶，作用的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；

B；非基因編輯對象也可能含有與sgRNA配對的堿基序列；造成sgRNA選錯(cuò)對象與之錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶，sgRNA的序列長短影響成功率，序列越短，脫靶率越高，B正確；

C；染色體變異會引起基因的數(shù)目或排列順序改變；利用此技術(shù)對目標(biāo)基因部分DNA片段進(jìn)行切除屬于基因內(nèi)部堿基對的改變，不改變基因的數(shù)目和排列順序，故不屬于染色體變異，C錯(cuò)誤；

D；sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補(bǔ)配對原則遵循的是DNA與RNA之間的配對關(guān)系；而目標(biāo)基因的雙鏈區(qū)域遵循的是DNA之間的配對方式，故兩者不同，D正確。

故選AC。16、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的篩選與獲取；構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。

分泌蛋白的合成：首先；在游離的核糖體中以氨基酸為原料開始多肽鏈的合成。當(dāng)合成了一段肽鏈后，這段肽鏈會與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成過程，并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，再經(jīng)過加工；折疊，形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡，包裹著蛋白質(zhì)離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，到達(dá)高爾基體，與高爾基體融合，高爾基體對蛋白質(zhì)做進(jìn)一步的加工，然后形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜，與細(xì)胞膜融合。

【詳解】

A；科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計(jì)并人工合成了AmyS2基因；因此獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過蛋白質(zhì)工程和基因工程實(shí)現(xiàn)的，A錯(cuò)誤；

B；BamHI會破壞AmyS2基因；B錯(cuò)誤；

C；在分泌蛋白的合成過程中；信號肽序列可幫助肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被切割，因此信號肽基因表達(dá)的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，但不能引導(dǎo)其進(jìn)入高爾基體，C錯(cuò)誤；

D；可用PCR技術(shù)檢測芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果經(jīng)過PCR擴(kuò)增，不出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物，說明沒有插入基因，反之，則成功插入，D正確。

故選ABC。三、填空題(共5題，共10分)17、略

【分析】【詳解】

為最大程度的保障人類權(quán)益；簽署了禁止生物武器公約：

（1）《禁止試制；生產(chǎn)和儲存并銷毀細(xì)菌（生物）和毒劑武器公約》；簡稱《禁止生物武器公約》。

（2）我國對于生物武器的態(tài)度是在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散?！窘馕觥竣?《禁止生物武器公約》②.不發(fā)展③.不生產(chǎn)④.不儲存18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】復(fù)合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖水解19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代傳代21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）四、判斷題(共4題，共32分)22、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡，特別是對生物多樣性的影響。大自然經(jīng)過億萬年的演化，各種生物相對處于一種和諧的生態(tài)平衡狀態(tài)。但是，如果我們用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把某種生物人為地變得更加“強(qiáng)悍”，那其他物種就會衰敗以至滅絕，故本題正確。23、A【分析】【詳解】

制備單克隆抗體時(shí)，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，故正確。24、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。故該說法正確。25、B【分析】【詳解】

來源于自然界的目的基因?qū)胫参矬w后，可能破壞原有的基因結(jié)構(gòu)，具有不確定性，外源基因也可能通過花粉傳播，使其他植物成為“超級植物"等，所以如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，也可能存在安全性問題。本說法錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共3分)26、略

【分析】【分析】

1；PCR擴(kuò)增的過程是：目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈；引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸，如此重復(fù)循環(huán)多次。

2；構(gòu)建基因表達(dá)載體過程時(shí)；目的基因應(yīng)插在啟動子和終止子之間才能正常表達(dá)。

【詳解】

（1）PCR過程中每次循環(huán)兩次升溫（變性和延伸）和一次降溫（復(fù)性）；其中降溫（復(fù)性）的目的是讓兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。

（2）基因表達(dá)載體包括標(biāo)記基因；目的基因；啟動子和終止子，科學(xué)家在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程時(shí)，目的基因應(yīng)插在啟動子和終止子之間才能正常表達(dá)。單獨(dú)使用限制酶HindⅢ切割目的基因和載體后，由于部分基因反向連接，導(dǎo)致攜帶CDKN2B基因的重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入細(xì)胞后，約一半的細(xì)胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白。為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生，可以同時(shí)用兩種酶進(jìn)行切割，由于SmaⅠ會破壞CDKN2B基因，不能選用該酶切割，HindⅢ會破壞質(zhì)粒的兩種標(biāo)記基因，不能選用該酶切，PstⅠ和EcoRⅠ能切下完整的CDKN2B基因，并不會破壞抗四環(huán)素基因基因，因此為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生，可以同時(shí)用PstⅠ、EcoRⅠ分別對目的基因和載體進(jìn)行酶切。

（3）來自同一個(gè)胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；因此要讓一個(gè)受精卵發(fā)育成多個(gè)個(gè)體，可采用胚胎分割技術(shù)，然后經(jīng)移植獲得多胎。分割時(shí)應(yīng)注意將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程和胚胎分隔技術(shù)相關(guān)知識，掌握基因工程和胚胎分割操作步驟是解決本題的關(guān)鍵?！窘馕觥孔寖煞N引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合啟動子終止子部分基因反向連接同時(shí)用PstⅠ、EcoRI分別對目的基因和載體進(jìn)行酶切胚胎分割將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割六、綜合題(共3題，共24分)27、略

【分析】【分析】

酵母菌是一種單細(xì)胞真菌；在有氧和無氧環(huán)境下都能生存，屬于兼性厭氧菌。

【詳解】

（1）酵母菌在有氧和無氧條件下都能生存；呼吸類型為兼性厭氧型；培養(yǎng)基的基本成分包括水；碳源、氮源和無機(jī)鹽等，因此研究所用的選擇培養(yǎng)基需要添加上述四種物質(zhì)；搖床能使酵母菌充分接觸營養(yǎng)物質(zhì)，有利于酵母菌對營養(yǎng)物質(zhì)的利用，同時(shí)能提供更多的氧氣，以促進(jìn)酵母菌的增殖，因此搖床培養(yǎng)能加速酵母菌的繁殖。

（2）首先計(jì)算三個(gè)平板的平均菌落數(shù)為（251+265+276）/3=264，實(shí)驗(yàn)人員采用梯度稀釋法將菌種稀釋了105倍，涂布平板時(shí)使用了0.1mL，此時(shí)是106倍，求沒10mL酵母菌懸液，所以最終是107倍，因此每10mL含有的酵母菌個(gè)數(shù)為264107，即2.64109；計(jì)算紫外線誘變的致死率設(shè)計(jì)對照試驗(yàn)；應(yīng)保證實(shí)驗(yàn)的唯一變量是紫外線的有無，因此對照試驗(yàn)的處理方式為將等量的未接受紫外線照射的菌液接種在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上。

（3）制作果酒需要嚴(yán)格密封，密封不嚴(yán)導(dǎo)致醋酸菌繁殖，從而使乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸，最終引起果酒變酸；抗生素的作用在于防止雜菌污染。【解析】(1)兼性厭氧水、氮源、碳源和無機(jī)鹽搖床培養(yǎng)能使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)充分和酵母菌接觸，有利于酵母菌對營養(yǎng)物質(zhì)的利用；為培養(yǎng)液提供更多的氧氣，有利于酵母菌的有氧呼吸，以促進(jìn)酵母菌的增殖

(2)2.64×109將等量的未接受紫外線照射的菌液接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上。

(3)密封不嚴(yán)，導(dǎo)致醋酸菌繁殖，將乙