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…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè),總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè),總=sectionpages11頁(yè)2025年外研版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍:全部知識(shí)點(diǎn);考試時(shí)間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級(jí):______考號(hào):______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題,共12分)1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是()A.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞B.不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞D.不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞2、果酒、果醋、泡菜都是通過(guò)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的產(chǎn)品。下列哪項(xiàng)不是果酒、果醋和泡菜發(fā)酵制作的共同點(diǎn)()A.利用微生物的代謝活動(dòng)將有機(jī)物質(zhì)轉(zhuǎn)化成產(chǎn)品B.使用的菌種都沒有細(xì)胞核和線粒體等具膜結(jié)構(gòu)C.發(fā)酵過(guò)程的主要反應(yīng)都在微生物的細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行D.通過(guò)人工接種菌種均可提高發(fā)酵產(chǎn)品的質(zhì)量3、兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出,若在細(xì)胞融合前染色體發(fā)生斷裂,形成的染色體片段可能不會(huì)被全部排出,而是整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理,通過(guò)下圖過(guò)程獲得了耐鹽小麥新品種。下列說(shuō)法不正確的是()
A.過(guò)程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞B.過(guò)程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C.過(guò)程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合D.耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段4、在腐乳發(fā)酵過(guò)程中下列有關(guān)毛霉的作用,正確的是()A.將多糖分解成葡萄糖B.將葡萄糖分解成丙酮酸C.將脂肪水解成甘油和脂肪酸D.將核酸分解成核苷酸5、PH基因兩側(cè)限制酶MspI酶切位點(diǎn)的分布存在兩種形式,如圖1,其中異常的PH基因可導(dǎo)致苯丙酮尿癥。圖2是某患者的家族系譜圖,為確定④號(hào)個(gè)體是否患苯丙酮尿癥,提取該家庭成員的相關(guān)DNA經(jīng)MspI酶切后電泳,分離得到DNA條帶分布情況如圖3,酶切有時(shí)會(huì)出現(xiàn)不完全的情況,分子量較小的條帶因電泳速度過(guò)快導(dǎo)致難以觀察。下列敘述正確的是()
A.①號(hào)個(gè)體23Kb的DNA條帶中含有異常PH基因B.②號(hào)個(gè)體19Kb的DNA條帶中含有正常PH基因C.④號(hào)個(gè)體攜帶異常PH基因的概率為1/2D.④號(hào)個(gè)體肯定不是苯丙酮尿癥患者6、下列有關(guān)以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的描述中,錯(cuò)誤的是()A.銨鹽和硝酸鹽等無(wú)機(jī)氮為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質(zhì)不是該微生物的能源物質(zhì)C.水、無(wú)機(jī)鹽也是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)D.瓊脂是該微生物的營(yíng)養(yǎng)要素之一評(píng)卷人得分二、多選題(共6題,共12分)7、關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性,下列說(shuō)法正確的是()A.對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定,即堅(jiān)決禁止生物武器B.中國(guó)對(duì)于克隆人的態(tài)度是不反對(duì)治療性克隆,但禁止生殖性克隆人C.對(duì)轉(zhuǎn)基因植物外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇,避免產(chǎn)生對(duì)人體有害的或過(guò)敏的蛋白質(zhì)D.轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題,不一定要馬上停止實(shí)驗(yàn)8、下列關(guān)于基因工程中的基本工具的說(shuō)法中,正確的是()A.基因工程中的工具酶有限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶B.DNA連接酶可將任意的DNA片段通過(guò)形成磷酸二酯鍵而連接起來(lái)C.質(zhì)粒上必須有標(biāo)記基因才可作為載體D.限制性內(nèi)切核酸酶一般不僅僅能切割外源DNA,也能切割自身的DNA分子9、老年癡呆癥患者的腦血管中有一種特殊的β-淀粉樣蛋白體,它的逐漸積累可能導(dǎo)致神經(jīng)元損傷和免疫功能下降,某些基因的突變會(huì)導(dǎo)致β-淀粉樣蛋白體的產(chǎn)生和積累。下列技術(shù)能用于老年癡呆癥治療的是()A.胚胎移植技術(shù)B.胚胎干細(xì)胞技術(shù)C.單克隆抗體技術(shù)D.核移植技術(shù)10、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的細(xì)菌,需要用科學(xué)的方法測(cè)定微生物數(shù)量。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.利用以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基,可從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌B.平板劃線法可以分離得到單菌落,也可用來(lái)測(cè)定樣品中的活菌數(shù)C.樣品的稀釋度直接影響平板上的菌落數(shù)目,因此稀釋度越大越好D.利用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù),可快速直觀地測(cè)定樣品中的活菌數(shù)11、如圖是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖,1~3代表相關(guān)過(guò)程,a~e代表相關(guān)細(xì)胞,其中c是兩兩融合的細(xì)胞。以下敘述錯(cuò)誤的是()
A.過(guò)程1是給小鼠注射特定抗原蛋白,可刺激小鼠產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)B.過(guò)程2的促融方法可采用電融合技術(shù),該技術(shù)能擊穿核膜促使核融合C.c細(xì)胞有三種,每種細(xì)胞染色體組數(shù)不相等,e細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞D.過(guò)程3是進(jìn)行抗體檢測(cè),并克隆產(chǎn)生陽(yáng)性細(xì)胞的過(guò)程12、某種物質(zhì)S(一種含有C;H、N的有機(jī)物)難以降解;會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染,只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要甲,乙兩種培養(yǎng)基,甲的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和S,乙的組分為無(wú)機(jī)鹽、水、S和Y下列分析正確的是()
A.Y物質(zhì)是瓊脂,甲和乙均需采用高壓蒸汽滅菌B.若搖瓶甲細(xì)菌細(xì)胞估算數(shù)為2×107個(gè)/mL,每個(gè)平板接種量為0.1mL,菌落平均數(shù)為200個(gè),則搖瓶?jī)?nèi)菌液至少稀釋104倍C.③過(guò)程所使用的接種環(huán),需采用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌D.⑤過(guò)程中若S的濃度超過(guò)某一濃度時(shí),菌株對(duì)S的降解量可能會(huì)下降評(píng)卷人得分三、填空題(共6題,共12分)13、一般包括______、______等技術(shù)14、在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?____________________________15、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質(zhì))、_________________(提供氮元素的物質(zhì))和__________________。16、重組DNA或重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選______的依據(jù)是______。17、其它載體:_______18、什么是生物武器?簡(jiǎn)述生物武器的危害。__________評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題,共16分)19、胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí),細(xì)胞逐漸分化。()A.正確B.錯(cuò)誤20、雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力,必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯(cuò)誤21、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織,滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤。(選擇性必修3P58)()A.正確B.錯(cuò)誤22、對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域,是因?yàn)槲⑸锞哂猩斫Y(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)繁殖快、對(duì)環(huán)境因素敏感和容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作等優(yōu)點(diǎn)。(選擇性必修3P101)()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共32分)23、某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X;Y和Z);每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。
若要制備雜交瘤細(xì)胞;需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。
回答下列問題:
(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)___________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是___________小鼠,理由是______________。
(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外,可能還有________,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是________________。
(3)雜交瘤細(xì)胞中有______個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是_________條。
(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是_____________________。24、佩戴口罩是預(yù)防病原體感染的有效措施之一。使用過(guò)的口罩;如果沒有妥善處理會(huì)對(duì)生態(tài)環(huán)境造成巨大威脅。某科研團(tuán)隊(duì)欲從不同環(huán)境的土壤中篩選出能高效降解一次性口罩(主要成分是聚丙烯纖維)的細(xì)菌。請(qǐng)回答下列問題:
(1)該科研團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)了一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn);請(qǐng)將以下實(shí)驗(yàn)步驟補(bǔ)充完整:
①采集來(lái)自不同環(huán)境的等量土壤,編號(hào)為A、B、C、D。將同型號(hào)等量的一次性口罩經(jīng)___________處理后埋入各組土壤中。
②在相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后;觀察各組中口罩的腐爛程度。
③從口罩腐爛程度_________的一組上采集細(xì)菌樣品。
(2)分離純化目的菌時(shí),培養(yǎng)基以______________作為唯一的碳源。這樣的培養(yǎng)基按功能劃分,屬于_________培養(yǎng)基,其含義是指______________。
(3)若需進(jìn)一步對(duì)土樣中的細(xì)菌計(jì)數(shù),上圖所示微生物接種的方法是_____________,在3個(gè)平板上分別滴加0.1mL稀釋液,經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上菌落數(shù)分別是65、66和67,則1g土壤中的活菌數(shù)約為__________個(gè)。該方法所得測(cè)量值一般比實(shí)際值偏低的原因是________________________。25、釀酒;釀醋、腐乳、泡菜、醬制品等是源于中國(guó)的傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù);為部分地區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展做出巨大貢獻(xiàn)。請(qǐng)依據(jù)相關(guān)生物學(xué)知識(shí)回到下列問題。
(1)泡菜腌制過(guò)程中,進(jìn)行發(fā)酵的主要微生物在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上屬于___________生物。不能采用加入抗生素的方法來(lái)抑制雜菌的原因是____________________________。
(2)腐乳外部有一層致密的“皮”,是前期發(fā)酵時(shí)______等生物在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲。
(3)測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是___________,在泡菜腌制過(guò)程中定期測(cè)定亞硝酸鹽含量的目的是____________________________。
(4)為了保證既無(wú)雜菌,又能使發(fā)酵菌發(fā)揮正常作用,泡菜所用鹽水應(yīng)__________再使用。
(5)某些制作泡菜的某些蔬菜也可用作DNA粗提取與鑒定,沸水浴條件下,提取出的DNA可與_________試劑反應(yīng)呈_______________色。26、干燥綜合征(SS)是臨床常見的一種自身免疫?。换颊哐逯写嬖诙喾N抗體,其中以SSB抗體特異性最強(qiáng)。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的過(guò)程?;卮鹣铝袉栴}:
(1)利用RNA通過(guò)①過(guò)程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA(多聚腺嘌呤核糖核苷酸)保護(hù)尾部不被降解。為了針對(duì)性獲得cDNA,應(yīng)如何設(shè)計(jì)逆轉(zhuǎn)錄第一步時(shí)的DNA引物______,設(shè)計(jì)引物的目的是______。
(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接,對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí),應(yīng)在相應(yīng)引物的_______(填“5'”或“3'”)端加上______酶切位點(diǎn)。
(3)③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí),需要用Ca2+處理大腸桿菌,目的是______,然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基(A)上培養(yǎng),待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基(B)上培養(yǎng),收集_______菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理;篩選得到SSB蛋白。
(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性,則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題,共32分)27、某細(xì)菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水,其中凝固劑是__________,碳源是__________,氮源是__________。已知只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),故該培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。按照化學(xué)成分分類,該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。從同化作用類型看,用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于__________。28、我國(guó)首只克隆貓“大蒜”的培育過(guò)程如下。請(qǐng)回答:
(1)圖中的去核卵母細(xì)胞所處的時(shí)期為_______________。
(2)從“大蒜”本體腿部取得表皮細(xì)胞,在構(gòu)建重組細(xì)胞前需進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要定期更換培養(yǎng)液的原因是____________________________。
(3)通過(guò)_______方法使兩細(xì)胞融合;并激活受體受體細(xì)胞(重構(gòu)胚)。
(4)將囊胚植入代孕貓?bào)w內(nèi)的過(guò)程叫做____________,植入前需對(duì)代孕貓進(jìn)行________處理。囊胚能在代孕貓?bào)w內(nèi)存活的生理學(xué)基礎(chǔ)是__________________。
(5)該技術(shù)還可以應(yīng)用在____________________(答出1點(diǎn))方面。29、草甘膦是一種廣譜除草劑;能抑制植物細(xì)胞內(nèi)一定比例的EPSPS酶的合成,使植物失綠死亡。為培育抗草甘膦轉(zhuǎn)基因棉花品種,研究人員開展了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問題:
(1)在適宜條件下,若用強(qiáng)啟動(dòng)子使棉花細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)EPSPS基因大量表達(dá),能否得到抗草甘膦棉花植株,請(qǐng)判斷并寫出理由:____________________________。
(2)獲取目的基因常用的方法包括_____________和_____________。將獲取的三個(gè)抗草甘膦基因G10插入質(zhì)粒,重組質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)(箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向)如圖所示,則添加的啟動(dòng)子位點(diǎn)是_____________(填圖中字母)。G10插入質(zhì)粒后,不能影響質(zhì)粒的_____________。
(3)將消毒后的棉花胚與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌在培養(yǎng)基上共培養(yǎng),目的是_____________。將共同培養(yǎng)后的棉花胚轉(zhuǎn)入含有營(yíng)養(yǎng)物以及_____________的培養(yǎng)基中誘導(dǎo)培養(yǎng)和篩選,從而得到目的植株。30、大米中鐵含量極低;科研人員通過(guò)基因工程;細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物技術(shù),培育出了鐵含量比普通水稻高60%的轉(zhuǎn)基因水稻,改良了大米的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過(guò)程示意圖,其中①~⑥為過(guò)程,EcoRI,HindⅢ,BamHI為限制酶。
(1)完成圖中①過(guò)程需選用___________限制酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA。
(2)②過(guò)程中用___________處理農(nóng)桿菌,使其成為感受態(tài)細(xì)胞。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是:在農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在____________片段,它具有可以整合到受體細(xì)胞___________上的特點(diǎn),使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并穩(wěn)定存在和表達(dá)。為了篩檢成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,1號(hào)培養(yǎng)基需要加入___________。
(3)圖中___________過(guò)程,屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù),該技術(shù)依據(jù)的基本原理(理論基礎(chǔ))是___________。參考答案一、選擇題(共6題,共12分)1、A【分析】單克隆抗體制備是利用經(jīng)免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞產(chǎn)生的。2、B【分析】【分析】
果酒;果醋、腐乳和泡菜發(fā)酵制作比較:
【詳解】
A;果酒發(fā)酵的主要微生物是酵母菌;果醋發(fā)酵的主要微生物是醋酸菌,泡菜發(fā)酵的主要微生物是乳酸菌,果酒、果醋和泡菜都是利用微生物的代謝活動(dòng)將有機(jī)物質(zhì)轉(zhuǎn)化成產(chǎn)品,A不符合題意;
B;酵母菌是真核生物;具有細(xì)胞核和線粒體等具膜結(jié)構(gòu),B符合題意;
C;果酒、果醋、泡菜的發(fā)酵制作過(guò)程的主要反應(yīng)都是在微生物的細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的;C不符合題意;
D;通過(guò)人工接種菌種;短時(shí)間內(nèi)使得相應(yīng)菌種成為優(yōu)勢(shì)種群,從而提高相應(yīng)發(fā)酵產(chǎn)品的質(zhì)量,D不符合題意。
故選B。3、C【分析】【分析】
1;圖中將不同種植物的體細(xì)胞在一定條件下融合成雜種細(xì)胞;并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體叫做植物體細(xì)胞雜交。植物體細(xì)胞雜交這一育種方法的最大優(yōu)點(diǎn)是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙。
2;植物體細(xì)胞雜交;其實(shí)質(zhì)為植物原生質(zhì)體的融合,在融合前需要使用酶解法(纖維素酶和果膠酶)去除植物的細(xì)胞壁,再用化學(xué)法(聚乙二醇)或物理法(振動(dòng)、離心、電刺激)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,需要注意的是誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合時(shí)不用生物方法(滅活的病毒);細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是融合細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁;獲得融合細(xì)胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株,故植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種。
【詳解】
A;①為去除細(xì)胞壁的過(guò)程;需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞,A正確;
B;若在細(xì)胞融合前染色體發(fā)生斷裂;形成的染色體片段可能不會(huì)被全部排出,而是整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上留存在雜種細(xì)胞中。所以過(guò)程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂,并進(jìn)一步整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上留存在雜種細(xì)胞中,B正確;
C;過(guò)程③為誘導(dǎo)融合;植物細(xì)胞誘導(dǎo)融合一般不用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,常采用化學(xué)法(聚乙二醇)或物理法(振動(dòng)、離心、電刺激)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,C錯(cuò)誤;
D;由題可知;中間偃麥草的染色體被紫外線照射后發(fā)生斷裂,其片段整合到了耐鹽小麥的染色體上留存在雜種細(xì)胞中,D正確。
故選C。4、C【分析】【分析】
腐乳制作的原理:(1)腐乳的發(fā)酵在多種微生物的協(xié)同作用下進(jìn)行;其中起主要作用的是毛霉,它是一種絲狀真菌,新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型;(2)毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。
【詳解】
毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。
故選C。
【點(diǎn)睛】5、A【分析】【分析】
分析圖2:雙親①和②表現(xiàn)正常;所生女兒③患病,說(shuō)明該病為常染色體上的隱性遺傳病。假設(shè)由基因A;a表示,①和②的基因型為Aa,③的基因型為aa。
【詳解】
AB、由圖2可知,雙親①和②表現(xiàn)正常,所生女兒③患病,說(shuō)明該病為常染色體上的隱性遺傳病,①、②號(hào)個(gè)體為Aa,③號(hào)個(gè)體為aa,分子量較小的條帶因電泳速度過(guò)快導(dǎo)致難以觀察,則圖1中兩個(gè)較近的MspI酶切位點(diǎn)間的DNA片段不能在電泳中被觀察到。酶切有時(shí)會(huì)出現(xiàn)不完全的情況,所以圖3中③個(gè)體19Kb的條帶中含有a,①號(hào)個(gè)體23Kb的DNA條帶中含有正常PH基因和異常PH基因,②號(hào)個(gè)體23Kb的DNA條帶中含有正常PH基因,19Kb的DNA條帶中含有異常PH基因;A正確,B錯(cuò)誤;
CD、由圖3可知,④號(hào)個(gè)體19Kb的片段來(lái)自②個(gè)體,含有a基因,其23Kb的片段來(lái)自①個(gè)體;可能含有A基因,也可能含有a基因,④號(hào)個(gè)體攜帶異常PH基因的概率為100%,表現(xiàn)型可能正常,也可能患病,CD錯(cuò)誤。
故選A。6、D【分析】【分析】
培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成:各種培養(yǎng)基一般都含有水;碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽;此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。
【詳解】
A;銨鹽和硝酸鹽等無(wú)機(jī)氮為該微生物提供必要的氮素;A正確;
B、以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物;二氧化碳不是該微生物的能源物質(zhì),B正確;
C;水、無(wú)機(jī)鹽也是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);C正確;
D;瓊脂是凝固劑;不是該微生物的營(yíng)養(yǎng)要素之一,D錯(cuò)誤。
故選D。
【點(diǎn)睛】二、多選題(共6題,共12分)7、A:B:C【分析】【分析】
1.生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員;牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來(lái);給人類的生存安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。
2.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括食物安全;生物安全和環(huán)境安全。
3.“治療性克隆”將使人胚胎干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞)造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎;體外培養(yǎng)到一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞,獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞;肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞),用于治療。
【詳解】
A;對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定;即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器,堅(jiān)決禁止生物武器,A正確;
B;中國(guó)對(duì)于克隆人的態(tài)度是禁止生殖性克隆人;但不反對(duì)治療性克隆,B正確;
C;對(duì)轉(zhuǎn)基因植物外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇;避免產(chǎn)生對(duì)人體有害的或過(guò)敏的蛋白質(zhì),C正確;
D;一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題;要馬上停止實(shí)驗(yàn),并銷毀重組生物,D錯(cuò)誤。
故選ABC。8、A:C【分析】【分析】
基因工程的工具:
(1)限制酶:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列;并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。
(2)DNA連接酶:連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。
(3)運(yùn)載體:常用的運(yùn)載體:質(zhì)粒;噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。
【詳解】
A;限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶是基因工程的工具酶;A正確;
B;DNA連接酶只能催化具有互補(bǔ)黏性末端或平末端的DNA片段之間形成磷酸二酯鍵;B錯(cuò)誤;
C;質(zhì)粒上必須有標(biāo)記基因才可作為載體;便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞,C正確;
D;限制性內(nèi)切核酸酶的作用是不切割自身DNA分子;只切割外源DNA,以保護(hù)自身DNA的安全,D錯(cuò)誤。
故選AC。
【點(diǎn)睛】9、B:C【分析】【分析】
根據(jù)題意;治療老年癡呆癥的思路有,通過(guò)生產(chǎn)抗體對(duì)抗患者體內(nèi)的β-淀粉樣蛋白體積累,通過(guò)增殖補(bǔ)充損傷死亡的神經(jīng)元改善患者的情況。
【詳解】
A;胚胎移植技術(shù)只可用于培養(yǎng)新的個(gè)體;對(duì)該疾病無(wú)應(yīng)用意義,A錯(cuò)誤;
B;胚胎干細(xì)胞技術(shù)可以培養(yǎng)誘導(dǎo)增殖新的神經(jīng)元;有可能用于治療該疾病,B正確;
C;單克隆抗體技術(shù)可以用于生產(chǎn)抗體對(duì)抗患者體內(nèi)的β-淀粉樣蛋白體;有助于治療該疾病,C正確;
D;核移植技術(shù)主要運(yùn)用于克隆動(dòng)物等;對(duì)該病沒有實(shí)際應(yīng)用意義,D錯(cuò)誤。
故選BC。10、B:C:D【分析】【分析】
選擇培養(yǎng)基是用來(lái)將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái)的培養(yǎng)基。設(shè)計(jì)選擇培養(yǎng)基時(shí);主要考慮某些微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或它們對(duì)某些化學(xué)物質(zhì)具有的抗性。
【詳解】
A;以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基;可從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌,A正確;
B;平板劃線法能將單個(gè)微生物分散到培養(yǎng)基上;從而分離得到單菌落,但是不可以用來(lái)測(cè)定樣品中的活菌數(shù),稀釋涂布平板法可以計(jì)數(shù),B錯(cuò)誤;
C;樣品的稀釋度太大;會(huì)導(dǎo)致微生物數(shù)量太少,一般要求稀釋后平板上的菌落數(shù)在30到300之間比較合適,C錯(cuò)誤;
D;利用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù);可快速直觀地測(cè)定樣品中的活菌數(shù)和死菌數(shù),D錯(cuò)誤。
故選BCD。11、B:C【分析】【分析】
單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞融合;細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞篩選;從題干信息圖可看出,過(guò)程1代表的是注射特異性抗原使小鼠免疫,從而獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞;過(guò)程2是將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過(guò)程;過(guò)程3是克隆培養(yǎng)篩選后的陽(yáng)性細(xì)胞,一共需要進(jìn)行兩次,最終獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,此后在培養(yǎng)基或小鼠腹腔中培養(yǎng)。
【詳解】
A;圖中過(guò)程1是通過(guò)注射抗原或抗原蛋白來(lái)獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞;A正確;
B;過(guò)程2是促進(jìn)細(xì)胞融合的過(guò)程;其中電融合技術(shù)是用低壓電流擊穿細(xì)胞膜促使細(xì)胞融合,B錯(cuò)誤;
C;c細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞;有三種,分別是骨髓瘤細(xì)胞-骨髓瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞,其中骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞都有兩個(gè)染色體組,融合后的細(xì)胞都含有4個(gè)染色體組,其中e細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞,C錯(cuò)誤;
D;過(guò)程3是專一抗體檢測(cè)及克隆培養(yǎng)篩選后獲得陽(yáng)性細(xì)胞;該過(guò)程需要多次進(jìn)行,D正確。
故選BC。12、A:B:D【分析】【分析】
由題圖信息分析可知;通過(guò)過(guò)程①獲得菌懸液,此過(guò)程中的淤泥不需要滅菌操作,過(guò)程②可以使分解S的細(xì)菌大量繁殖(選擇培養(yǎng)),過(guò)程③通過(guò)稀釋涂布獲得分解S物質(zhì)的單菌落,過(guò)程④再次對(duì)各種單菌落進(jìn)行篩選,經(jīng)過(guò)過(guò)程⑤多次篩選后獲得高效降解S的菌體。
【詳解】
A;甲和乙的培養(yǎng)基均需采用高壓蒸汽滅菌;乙與甲不同的是Y,乙的培養(yǎng)基上有菌落生長(zhǎng),說(shuō)明是固體培養(yǎng)基,因此Y是凝固劑瓊脂,A正確;
B、利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),要保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)為200個(gè),假設(shè)稀釋倍數(shù)為a,在每個(gè)平板上涂布100μL(0.1ml)稀釋后的菌液,則有200×a÷0.1=2×107,則稀釋倍數(shù)a=104;B正確;
C;③過(guò)程采用的是稀釋涂布平板法;其接種工具為涂布器,涂布器需采用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌,C錯(cuò)誤;
D;⑤過(guò)程中若S的濃度超過(guò)某一濃度時(shí);會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞由于滲透作用失水過(guò)多,會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng),使得菌株對(duì)S的降解量可能會(huì)下降,D正確。
故選ABD。三、填空題(共6題,共12分)13、略
【解析】①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體14、略
【解析】避免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種15、略
【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無(wú)機(jī)鹽16、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞標(biāo)記基因是否表達(dá)。17、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】噬菌體、動(dòng)植物病毒18、略
【分析】【詳解】
生物武器種類:包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等,以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布,經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi),造成大規(guī)模傷亡,也能損害植物,若用與戰(zhàn)爭(zhēng),則可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?!窘馕觥可镂淦鞣N類:包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等,以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布,經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi),造成大規(guī)模傷亡,也能損害植物。四、判斷題(共4題,共16分)19、A【分析】【分析】
早期胚胎發(fā)育從受精卵開始;當(dāng)卵裂分裂到16-32個(gè)細(xì)胞時(shí),卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞逐漸形成致密的細(xì)胞團(tuán),形似桑葚時(shí),這時(shí)的胚胎稱為桑葚胚,這一階段及之前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能,屬于全能細(xì)胞。胚胎進(jìn)一步發(fā)育,細(xì)胞開始出現(xiàn)分化,形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán);滋養(yǎng)層;隨著胚胎進(jìn)一步發(fā)育,胚胎內(nèi)部出現(xiàn)了含有液體的囊腔—囊胚腔,這個(gè)時(shí)期的胚胎叫做囊胚。胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí),細(xì)胞逐漸分化。
【詳解】
囊胚時(shí)期聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán),將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織,即發(fā)育成完整的胚胎,而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細(xì)胞,稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞,它們將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤,為胚胎的發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng),故“胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí),細(xì)胞逐漸分化表述”正確。20、A【分析】【詳解】
雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力,必須獲能后才具備受精能力,精子獲能的過(guò)程不是獲得能量的過(guò)程,是獲得受精能力的過(guò)程,可在獲能液或受精液中完成,故正確。21、A【分析】【詳解】
內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織;滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤。
正確。22、A【分析】【詳解】
微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn),便于研究,生長(zhǎng)周期短,具有生長(zhǎng)繁殖快的優(yōu)點(diǎn),遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單,具有容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點(diǎn),對(duì)環(huán)境因素敏感,因此對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域,這句話是正確的。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共32分)23、略
【分析】【詳解】
本題以雜交瘤細(xì)胞為背景;考查了動(dòng)物細(xì)胞融合;細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。
(1)在第四次免疫后;Y的血清抗體效價(jià)大于16000,所以最少需要經(jīng)過(guò)四次免疫.由圖可知,血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上時(shí),Y的效價(jià)最大,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。
(2)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在一起融合時(shí);可能發(fā)生B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,B細(xì)胞之間的融合,骨髓瘤細(xì)胞之間的融合和B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。由于細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%,故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。
(3)由于核膜也具有流動(dòng)性;故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)雜交的細(xì)胞核。B細(xì)胞有40條染色體,骨髓瘤細(xì)胞有60條染色體,融合后的雜交瘤細(xì)胞有100條染色體。
(4)未融合的B淋巴細(xì)胞是已分化的細(xì)胞;不能無(wú)限增殖,所以多次培養(yǎng)后不能存活。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程,意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn),并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力?!窘馕觥?YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%1100不能無(wú)限增殖24、略
【分析】【分析】
篩選目的菌株的原理:在尋找目的菌株時(shí);要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。實(shí)驗(yàn)室中微生物菌株的篩選,也應(yīng)用了同樣的原理,即人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(營(yíng)養(yǎng);溫度、pH等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。而在篩選菌株的時(shí)候,常用到選擇培養(yǎng)基。在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱作選擇培養(yǎng)基。
【詳解】
(1)①不同類型土壤中微生物的種類和數(shù)量不同;可采集來(lái)自不同環(huán)境(不同地區(qū))的等量土壤,編號(hào)為A;B、C、D。本實(shí)驗(yàn)要篩選能高效降解一次性口罩(主要成分是聚丙烯纖維)的細(xì)菌,可人為制造有利于該菌生長(zhǎng)的環(huán)境,因此將同型號(hào)的等量一次性口罩經(jīng)滅菌處理后埋入各組土壤中。
②一段時(shí)間后;觀察各組中口罩的腐爛程度。
③從口罩腐爛程度最大的一組上采集細(xì)菌樣品;該樣品即含有較強(qiáng)分解口罩能力的菌體。
(2)該目的菌是能高效降解一次性口罩(主要成分是聚丙烯纖維)的細(xì)菌;因此培養(yǎng)基以聚丙烯纖維作為唯一的碳源。這樣的培養(yǎng)基按功能劃分,屬于選擇培養(yǎng)基,在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱為選擇培養(yǎng)基。
(3)據(jù)圖可知,上述需要對(duì)土樣中的細(xì)菌計(jì)數(shù),先將菌液梯度稀釋,然后涂布在平板上,該接種的方法是稀釋涂布平板法。據(jù)圖可知,1g土樣加入到99mL無(wú)菌水,稀釋了100倍,隨后取1mL的菌液分別加入9mL的無(wú)菌水,稀釋10倍,因此最后被稀釋了106倍,根據(jù)公式每克樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×M=(65+66+67)÷3÷0.1×106=6.6×108個(gè)。稀釋涂布平板法常用菌落數(shù)表示菌液中細(xì)胞數(shù),當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,因此該方法所得測(cè)量值一般比實(shí)際值偏低?!窘馕觥?1)滅菌最大。
(2)聚丙烯纖維選擇在微生物學(xué)中;將允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱為選擇培養(yǎng)基。
(3)稀釋涂布平板法6.6×108當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落25、略
【分析】【分析】
1;腐乳的制作過(guò)程主要是:讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。
2;測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理:在鹽酸酸化條件下;亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)對(duì)比,可以大致估算出亞硝酸鹽的含量。
【詳解】
(1)泡菜腌制過(guò)程中;進(jìn)行發(fā)酵的主要微生物是乳酸菌,乳酸菌為原核生物。由于抗生素會(huì)抑制乳酸菌的生長(zhǎng)和繁殖,因此不能采用加入抗生素的方法來(lái)抑制雜菌。
(2)利用毛霉腌制腐乳時(shí);腐乳的外部有一層致密的皮,它是毛霉等生物在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲。
(3)測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是比色法;不同發(fā)酵時(shí)期亞硝酸鹽的含量不同,在泡菜腌制過(guò)程中定期測(cè)定亞硝酸鹽含量的目的是把握取食泡菜的最佳時(shí)機(jī)。
(4)為了保證既無(wú)雜菌;又能使發(fā)酵菌發(fā)揮正常作用,泡菜所用鹽水應(yīng)煮沸;冷卻再使用。
(5)沸水浴條件下;提取出的DNA可與二苯胺試劑反應(yīng)呈藍(lán)色。
【點(diǎn)睛】
本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用和DNA鑒定的原理,意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的識(shí)記能力?!窘馕觥吭丝股貢?huì)抑制乳酸菌的生長(zhǎng)和繁殖毛霉比色法把握取食泡菜的最佳時(shí)機(jī)煮沸、冷卻二苯胺藍(lán)26、略
【分析】【分析】
1;基因工程的四個(gè)步驟:目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。
2、在基因工程操作中,常用原核生物作為受體細(xì)胞,其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞;使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。
【詳解】
(1)利用RNA通過(guò)①過(guò)程(逆轉(zhuǎn)錄)獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶;已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA(多聚腺嘌呤核糖核苷酸)保護(hù)尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈;新鏈與模板鏈反向平行,由于新鏈只能由5'端向3'端延伸,所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA(多聚腺嘌呤核糖核苷酸)互補(bǔ)配對(duì),即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物;設(shè)計(jì)引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
(2)對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí);引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴(kuò)增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接,應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因,由圖可知,使用EcoRI酶會(huì)破環(huán)SSB基因,故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。
(3)由題圖分析可知:質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因,由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因,所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí),需要用Ca2+處理大腸桿菌;目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài),然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基(A)上培養(yǎng),待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基(B)上培養(yǎng),收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理,經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。
(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性,如果該蛋白有抗原性,會(huì)引起機(jī)體的免疫反應(yīng),產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體,利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體?!窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
(2)5’BamHⅠ和XhoI
(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的。
(4)提取其中的抗體,利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體六、綜合題(共4題,共32分)27、略
【分析】【分析】
1;微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽;此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。
2;配制培養(yǎng)基的凝固劑通常選用瓊脂;葡萄糖為有機(jī)碳源,尿素為氮源;由于在該固體培養(yǎng)基上,只有能合成脲酶的細(xì)菌才能生長(zhǎng),因此可以用來(lái)選擇出能夠合成脲酶的細(xì)菌,在功能上稱為選擇培養(yǎng)基;由于該固體培養(yǎng)基的組成成分是人為選擇配制,故又稱為合成培養(yǎng)基;該培養(yǎng)基中加入的是有機(jī)碳源葡萄糖,從同化作用類型上,使用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于異養(yǎng)型。
【詳解】
該培養(yǎng)基中;瓊脂為凝固劑,葡萄糖為碳源,尿素為氮源;由于只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),可以用來(lái)選擇出能夠合成脲酶的細(xì)菌,在功能上稱為選擇培養(yǎng)基;由于其化學(xué)成分明確,故又稱為合成培養(yǎng)基;由于該培養(yǎng)基中存在著有機(jī)碳源葡萄糖,故可推測(cè)從同化作用類型上看,用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于異養(yǎng)型。
【點(diǎn)睛】
本題圍繞細(xì)菌的培養(yǎng)主要考查考生對(duì)微生物的營(yíng)養(yǎng)和鑒定等知識(shí)和技能的理解和掌握情況,包括培養(yǎng)基的類型和配制;根據(jù)細(xì)菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)需求的特點(diǎn)判斷其合成代謝的類型;此類試題需要考生注意的細(xì)節(jié)較多,需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累,學(xué)會(huì)構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)?!窘馕觥竣?瓊脂②.葡萄糖③.尿素④.選擇⑤.合成⑥.異養(yǎng)型28、略
【分析】【分析】
1;胚胎的早期培養(yǎng):精子與卵子在體外受精后;應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。哺乳動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)液成分一般都比較復(fù)雜,除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分,以及血清等物質(zhì)。
2;動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交;是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程,融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理
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