2025年外研版三年級(jí)起點(diǎn)選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年外研版三年級(jí)起點(diǎn)選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、為培育抗旱性強(qiáng)、可溶性糖含量高的甘薯KTl，研究者設(shè)計(jì)如下流程。相關(guān)敘述不正確的是（）

A.該過程不需要考慮甘薯B的親緣關(guān)系遠(yuǎn)近B.過程①需要通過酶解法處理后進(jìn)行減數(shù)分裂C.過程②需要高爾基體參與再生出新的細(xì)胞壁D.過程③需要控制生長素和細(xì)胞分裂素的比例2、地錢具有重要的藥用價(jià)值，可用植物組織培養(yǎng)的方法進(jìn)行快速人工繁育。有關(guān)此過程的敘述不正確的是（）A.發(fā)生了細(xì)胞的脫分化、再分化B.形成的愈傷組織分化程度較高C.依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性D.若發(fā)生雜菌污染則難以獲得目的植株3、在某病原菌均勻分布的平板上鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培養(yǎng)，在紙片周圍會(huì)出現(xiàn)透明區(qū)域抑菌圈。可測(cè)定該病原菌對(duì)各種抗生素的敏感性。相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖中的接種方法可能為平板劃線法或稀釋涂布平板法B.未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異C.形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物較敏感D.不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響4、紫草富含一種紅色的次生代謝產(chǎn)物——紫草寧，具有抗菌、消炎的功效?？蒲腥藛T利用紫草新生的營養(yǎng)芽進(jìn)行培養(yǎng)獲得愈傷組織，再使用液體培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)，以獲得更多的紫草寧。下列敘述正確的是（）A.次生代謝產(chǎn)物一般認(rèn)為不是植物基本生命活動(dòng)所必需的，其在植物細(xì)胞中含量很少B.愈傷組織是由高度分化的一團(tuán)薄壁細(xì)胞組成，無特定形態(tài)C.為獲得愈傷組織，培養(yǎng)時(shí)需要加入PEGD.愈傷組織的誘導(dǎo)受植物激素配比的影響，不受營養(yǎng)物質(zhì)和光照等因素的影響5、為了解決雜交瘤細(xì)胞在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)來自B淋巴細(xì)胞的染色體丟失的問題，研究者除了用抗原刺激之外，還用EBV（一種病毒顆粒）感染動(dòng)物B淋巴細(xì)胞，并使之成為“染色體核型穩(wěn)定”的細(xì)胞株。上述細(xì)胞株能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對(duì)烏本苷（Oua）敏感。下圖為該實(shí)驗(yàn)操作示意圖。相關(guān)分析合理的是（）

A.B淋巴細(xì)胞可從多次間歇注射某種抗原的動(dòng)物脾臟中篩選獲得B.HAT培養(yǎng)基的作用主要是為了去除未融合的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞C.導(dǎo)致EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞死亡的原因完全相同D.雜交瘤細(xì)胞具有持續(xù)產(chǎn)生抗EBV抗體的能力6、人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，改造后的t-PA蛋白能顯著降低出血副作用。下圖表示構(gòu)建含t-PA改良基因重組質(zhì)粒的過程示意圖。相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）

A.構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用的限制酶是XmaⅠ和BglⅡB.需要DNA聚合酶將t-PA改良基因與質(zhì)粒連接C.新霉素抗性基因的作用是便于將導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來D.在加入新霉素的培養(yǎng)基中選擇呈白色的菌落選育工程菌株7、下列關(guān)于乳酸菌種的選育的敘述，不正確的是（）A.自然選育該菌種費(fèi)時(shí)且盲目性大B.該菌能發(fā)生染色體變異C.采用基因工程的方法可構(gòu)建工程菌D.誘變育種原理的基礎(chǔ)是基因突變?cè)u(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)8、人參是一種名貴藥材；具有良好的滋補(bǔ)作用?？诜?干擾素在慢性乙肝；丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程，①~④表示相關(guān)的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶，它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。下列選項(xiàng)正確的是（）

。限制酶。

識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。

EcoRI

BamHI

A.步驟①中，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列B.科研人員在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列，目的是方便后續(xù)的剪切和連接C.在過程③中T—DNA整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上D.過程④中，科研人員最終未能檢測(cè)出干擾素基因，其原因可能是干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞9、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是兩種常見的工具酶，它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)依次為G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA獲得目的基因，用BglⅡ切割質(zhì)粒，并連接得到重組質(zhì)粒。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時(shí)間等因素B.目的基因經(jīng)BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGC.分別用兩種限制酶切割，保證了目的基因定向插入質(zhì)粒D.經(jīng)兩種酶處理得到的重組質(zhì)粒不能再被這兩種酶所識(shí)別10、B基因存在于水稻基因組中；其僅在體細(xì)胞（2n）和精子中正常表達(dá)，但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)，培育轉(zhuǎn)基因植株。以下鑒定篩選轉(zhuǎn)基因植株的方式正確的是（）

A.將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DNA分子雜交B.以Luc基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針進(jìn)行DNA分子雜交C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交D.檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光11、某實(shí)驗(yàn)室做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)研究；有關(guān)敘述正確的是（）

A.與纖維母細(xì)胞相比，過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較高B.過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞中基因選擇性表達(dá)的結(jié)果C.過程③得到的Z細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)及多次篩選D.圖中的肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞及Y細(xì)胞具有相同的基因組成12、從胰島素依賴型糖尿病患者的骨髓中分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC），誘導(dǎo)分化成胰島樣細(xì)胞，再導(dǎo)入該患者體內(nèi)。放射性免疫分析結(jié)果表明誘導(dǎo)的胰島樣細(xì)胞團(tuán)可以正常分泌胰島素，患者的血糖恢復(fù)正常。下列說法正確的是（）A.培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)液通常需加入血清B.在體外連續(xù)培養(yǎng)時(shí)，利用胰蛋白酶將接觸抑制的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分開C.在功能上，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性D.治療成功后，康復(fù)者的血型有可能發(fā)生改變13、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過程中兩種引物分別為A和B，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似。下列敘述正確的是（）A.從理論上推測(cè)，第二輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段占3/4B.在第二輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段C.引物之間或引物自身發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)則不能擴(kuò)增目的基因D.耐熱的DNA聚合酶總將游離的脫氧核苷酸連接到3’端14、勤洗手是預(yù)防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果；研究人員檢測(cè)了用凝膠洗手前后手部細(xì)菌的含量。凝膠洗手前的檢測(cè)流程見下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是平板劃線法B.除圖中操作外，還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)C.培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落只可能來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌D.初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀15、利用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌生產(chǎn)人的胰島素原。下列相關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.人和大腸桿菌在合成胰島素原時(shí)，轉(zhuǎn)錄和翻譯的場(chǎng)所是相同的B.DNA連接酶能催化磷酸與脫氧核糖形成化學(xué)鍵C.通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)大腸桿菌中沒有胰島素原產(chǎn)生，則可判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌D.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原有較高的生物活性16、熒光原位雜交可用熒光標(biāo)記的特異DNA片段為探針；與染色體上對(duì)應(yīng)的DNA片段結(jié)合，從而將特定的基因在染色體上定位。下列說法正確的是（）

A.由圖1可知，DNA探針的本質(zhì)是熒光標(biāo)記的DNA片段，其基本單位是脫氧核苷酸B.由圖2可知，高溫可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈C.圖2中兩條姐妹染色單體中最多可有2條熒光標(biāo)記的DNA片段D.若C分別代表不同來源的一個(gè)染色體組，已知AA和BB中各有一對(duì)同源染色體可被熒光探針標(biāo)記。若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則F1有絲分裂中期的細(xì)胞中可觀察到6個(gè)熒光點(diǎn)評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)17、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？____________________________18、在篩選纖維素分解菌的過程中，人們發(fā)明了___________，這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。剛果紅(CongoRed，簡(jiǎn)稱__________)是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成____________，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅一纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的______________。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生________________來篩選纖維素分解菌。19、本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會(huì)使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測(cè)培養(yǎng)基______________來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。20、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地說，就是按照_____，把一種生物的_____提取出來，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遺傳性狀。21、植物誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括______等。化學(xué)法一般是用_____作為誘導(dǎo)劑。22、干細(xì)胞的應(yīng)用：有著_____能力及_____的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、_____和_____等密切相關(guān)。23、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題，共36分)24、通過體細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)獲得了多種克隆動(dòng)物，該技術(shù)的成功率已經(jīng)很高。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯(cuò)誤25、從牛卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接用于體細(xì)胞核移植。（選擇性必修3P53）()A.正確B.錯(cuò)誤26、雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯(cuò)誤27、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實(shí)際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共27分)28、為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶；研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個(gè)堿基對(duì)），利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見下圖。請(qǐng)回答下列問題：

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因前；需先獲得細(xì)菌的_________。

（2）為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接；需在引物的____端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是________________。

（3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)；反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定，下列選項(xiàng)中_______的設(shè)定與引物有關(guān)，________的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長度有關(guān)。（填序號(hào)）

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時(shí)間⑤退火時(shí)間⑥延伸時(shí)間。

（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：

圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含___個(gè)密碼子；如虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有__種。

（5）獲得工程菌表達(dá)的α-淀粉酶后；為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測(cè)定酶活性，結(jié)果如下：

。緩沖液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相對(duì)活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為______。29、如圖為釀制葡萄酒的兩個(gè)簡(jiǎn)易裝置；請(qǐng)分析回答：

（1）制作果酒與果醋的菌種在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別在于前者有_____，后者應(yīng)將溫度控制在_____℃

（2）甲裝置中，A液體是_____，NaHCO3溶液的作用是_____；若用乙裝置，在發(fā)酵過程中，必須進(jìn)行的操作是每隔12小時(shí)左右將瓶蓋_____一次。

（3）將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約1/3的空間，這是因?yàn)開__________

（4）果酒制作是否成功，需發(fā)酵后取樣鑒定，可用_____試劑檢驗(yàn)。

（5）醋酸菌可以利用果酒進(jìn)行發(fā)酵，請(qǐng)寫出相應(yīng)反應(yīng)式：_________________30、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病。科研人員對(duì)此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對(duì)___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時(shí)清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對(duì)。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測(cè)導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測(cè)肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)31、下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過程和克隆羊培育過程示意圖；據(jù)圖回答下列問題。

(1).圖甲和圖乙所示的過程中，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段是____________。該過程要在培養(yǎng)液中加入的特殊物質(zhì)是__________，②不同于植物細(xì)胞的方法是_____________。經(jīng)兩次篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_______________；

(2).單克隆抗體能定向攻擊癌細(xì)胞，主要是利用其_________________________。

(3).克隆羊的成功體現(xiàn)了__________，其生殖方式為____________，若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀全部像白面綿羊嗎?_____________。原因是______________________。

(4).圖乙過程的技術(shù)具有多種用途，但是不能___________。A．有選擇地繁殖某一性別的家畜B．繁殖家畜中的優(yōu)良個(gè)體C．用于保存物種D．改變動(dòng)物的核基因32、如圖為哺乳動(dòng)物的生殖和個(gè)體發(fā)育過程；請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞在______中完成受精作用。

（2）哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育的起點(diǎn)是________，其胚胎發(fā)育的整個(gè)過程在______完成。

（3）圖示I過程為_______，II過程為_______。

（4）圖中“?”處應(yīng)為_______，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)出現(xiàn)于_______時(shí)期。

（5）過程①需經(jīng)過多次細(xì)胞分裂才能完成；請(qǐng)?jiān)谙聢D中繪出該過程中每個(gè)細(xì)胞的體積；核DNA含量與時(shí)間的關(guān)系。

___33、若在重金屬鎘污染的土壤中種植水稻；鎘會(huì)經(jīng)水稻的根系吸收而使大米中的鎘含量超標(biāo)。研究人員利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)改變編碼水稻鎘載體蛋白的基因結(jié)構(gòu)，使該蛋白功能缺失，從而培育出了低．鎘吸收的水稻突變體。CRISPR/Cas9主要由人工設(shè)計(jì)的向?qū)NA（gRNA）和Cas9蛋白組成，gRNA與待編輯的目的基因部分序列互補(bǔ)，能引導(dǎo)Cas9蛋白與目的基因的特異性位點(diǎn)結(jié)合并進(jìn)行定點(diǎn)切割。回答下列問題。

（1）Cas9蛋白的作用與基因工程中使用的___________酶相似。Cas9蛋白與目的基因結(jié)合后，使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的_______________斷開，切除基因內(nèi)部的部分片段，再在_______________酶作用下重新連接所需的兩個(gè)片段；即得到被編輯的目的基因。

（2）編輯成功的目的基因可采用_______________技術(shù)擴(kuò)增，再組裝到相應(yīng)的載體上，該載體的結(jié)構(gòu)還應(yīng)包括________________和標(biāo)記基因。

（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入水稻愈傷組織細(xì)胞后，若想獲得完整的植株，還需借助_______技術(shù)。如果被編輯的目的基因已經(jīng)插入水稻的染色體DNA上，但植株對(duì)鎘的吸收并未減少，根據(jù)中心法則分析，可能的原因是__________________________________________。34、近年來；高氨氮廢水的處理不當(dāng)以及持續(xù)排放，導(dǎo)致了水體污染的日益嚴(yán)重。生物脫氮法是較好的氨氮廢水處理方法。某科研團(tuán)隊(duì)從湖底污泥中分離；篩選出能降解氨氮的菌株，并研究其降解氨氮的最佳培養(yǎng)時(shí)間，實(shí)驗(yàn)步驟如下：

步驟一：將1g水底污泥加入9mL無菌水中制成懸液，接種至100mL液體培養(yǎng)基中，于30℃的溫度條件下在搖床中培養(yǎng)7天。期間，每天向培養(yǎng)基中加入1mL濃度為5%的(NH4)2SO4溶液。

步驟二：將培養(yǎng)后的菌液用____法均勻接種到分離培養(yǎng)基中；倒置于30℃的恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)至長出菌落。

步驟三：將篩選分離后的各菌株分別接種到氨氮含量為120mg/L的液體篩選培養(yǎng)基(模擬高濃度氨氮水樣)中；在30℃的溫度條件下?lián)u瓶培養(yǎng)24小時(shí)后，取培養(yǎng)液進(jìn)行離心10分鐘，取其上清液進(jìn)行測(cè)量，從而計(jì)算出各個(gè)降解菌的氨氮降解率，篩選出降解氨氮能力最強(qiáng)的菌株。請(qǐng)分析回答下列問題：

(1).(NH4)2SO4能夠?yàn)榫N生長提供_____，培養(yǎng)期間每天向培養(yǎng)基中加入1mL濃度為5%的(NH4)2SO4溶液的目的是_________。

(2).步驟二中A處對(duì)應(yīng)的方法為_____。若平板中菌落過于密集，應(yīng)進(jìn)—步_____；直到獲得單菌落。

(3).步驟三中應(yīng)測(cè)量上清液中的_____；計(jì)算各降解菌的氨氮降解率。

(4).為研究降解氨氮的最佳培養(yǎng)時(shí)間，將篩選出的最優(yōu)菌種于30℃的溫度條件下在搖床中培養(yǎng)24小時(shí)，每隔2小時(shí)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行測(cè)定。下圖是某菌株的氨氮降解率曲線圖：

①實(shí)驗(yàn)中，溫度條件30℃屬于該實(shí)驗(yàn)的_____量。

②據(jù)圖可知，培養(yǎng)時(shí)間為_____h為降解氨氮的最佳培養(yǎng)時(shí)間，其判斷依據(jù)是______。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官；組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

題圖分析：圖中①表示去除細(xì)胞壁；獲得原生質(zhì)體；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合形成雜種細(xì)胞；③表示采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成雜種植株。

【詳解】

A；植物體細(xì)胞雜交克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙；所以該過程不需要考慮甘薯A、B的親緣關(guān)系遠(yuǎn)近，A正確；

B；過程①需要通過酶解法處理后去除細(xì)胞壁；不進(jìn)行減數(shù)分裂，B錯(cuò)誤；

C；雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁；高爾基體與植物細(xì)胞壁的形成有關(guān)，所以過程②需要高爾基體參與再生出新的細(xì)胞壁，C正確；

D；過程③包括脫分化和再分化過程；需要控制生長素和細(xì)胞分裂素的比例，該比例不同會(huì)使愈傷組織向不同的方向分化，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】2、B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

（1）過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）；

（2）原理：植物細(xì)胞的全能性；

（3）條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）；

（4）植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖；作物脫毒；人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；此過程中外植體脫分化形成愈傷組織；愈傷組織再分化胚狀體，A正確；

B；愈傷組織是沒有分化的細(xì)胞；B錯(cuò)誤；

C；已分化的植物細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能；即植物細(xì)胞具有全能性，利用此特性可將細(xì)胞培育成植株體，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)要求全程在無菌條件下進(jìn)行；若發(fā)生雜菌污染則難以獲得目的植株，D正確。

故選B。3、D【分析】【分析】

紙片擴(kuò)散法是藥敏試驗(yàn)一種常用的方法；它將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測(cè)試菌的瓊脂平板上，紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周圍區(qū)域擴(kuò)散，形成遞減的梯度濃度，在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的細(xì)菌生長被抑制，形成透明的抑菌圈。紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散，隨著擴(kuò)散距離的增加，抗菌藥物的濃度呈對(duì)數(shù)減少，從而在紙片的周圍形成濃度梯度。同時(shí)，紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的菌株不能生長，而抑菌范圍外的菌株則可以生長，從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈。不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑，因受藥物在瓊脂中擴(kuò)散速度的影響而可能不同，抑菌圈的大小可以反映測(cè)試菌對(duì)藥物的敏感程度。抑菌圈越大，說明該菌對(duì)此藥敏感性越大，反之越小，若無抑菌圈，則說明該菌對(duì)此藥具有耐藥性。透明圈直徑大小與藥物濃度；細(xì)菌濃度有直接關(guān)系。

【詳解】

A；平板中病原菌應(yīng)均勻分布；圖中的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；

B；未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌對(duì)抗生素不敏感；B錯(cuò)誤；

C；形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物敏感程度較低；C錯(cuò)誤；

D；不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑；因受藥物在瓊脂中擴(kuò)散速度的影響而可能不同，故不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成一定影響，D正確。

故選D。4、A【分析】【分析】

次生代謝物：

（1）概念：植物代謝產(chǎn)生的一些一般認(rèn)為不是植物基本生命活動(dòng)所必需的產(chǎn)物。

（2）本質(zhì)：一類小分子有機(jī)化合物（如酚類；赭類和含氮化合物等）。

（3）作用：在植物抗?。豢瓜x等方面發(fā)揮作用；也是很多藥物、香料和色素等的重要來源。

（4）缺點(diǎn)：①植物細(xì)胞的次生代謝物含量很低；從植物組織提取會(huì)大量破壞植物資源。②有些產(chǎn)物又不能或難以通過化學(xué)合成途徑得到。

【詳解】

A；植物的次生代謝產(chǎn)物一般不是植物基本生命活動(dòng)所必需的；其在植物細(xì)胞中含量很少，A正確；

B；愈傷組織是由高度分化的細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的一團(tuán)薄壁細(xì)胞組成；其分化程度很低，B錯(cuò)誤；

C；誘導(dǎo)外植體脫分化獲得愈傷組織不需要PEG（聚乙二醇）；需要植物激素，C錯(cuò)誤；

D；愈傷組織的誘導(dǎo)受植物激素配比的影響；也受營養(yǎng)物質(zhì)和光照等因素的影響，D錯(cuò)誤。

故選A。5、A【分析】【分析】

在制備單克隆抗體時(shí)；首先要給小鼠免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，然后將漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。在單克隆抗體的制備過程中，使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)。

【詳解】

A；B淋巴細(xì)胞在骨髓中發(fā)育成熟；可分布于淋巴結(jié)和脾臟等處，故B淋巴細(xì)胞可來源于抗原刺激后動(dòng)物的淋巴結(jié)和脾臟等處，A正確；

B；HAT培養(yǎng)基的作用主要是為讓細(xì)胞存活；烏本苷（Oua）起篩選作用，B錯(cuò)誤；

C；導(dǎo)致EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞由于不能增殖而死亡；骨髓瘤細(xì)胞由于對(duì)烏本苷（Oua）敏感而死亡，C錯(cuò)誤；

D；本實(shí)驗(yàn)中EBV的作用是使B細(xì)胞染色體核型更穩(wěn)定；而不是刺激B細(xì)胞分化成漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，所以該雜交瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗EBV的抗體，D錯(cuò)誤。

故選A。6、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等。載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入，③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；根據(jù)圖中目的基因兩端的黏性未端以及各種限制酶的的切制位點(diǎn)可知；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用限制酶Xmal和BglⅡ切割質(zhì)粒，才能與目的基因t-PA改良基因高效連接，A正確；

B；將t-PA改良基因與質(zhì)粒連接的酶是DNA連接酶；不是DNA聚合酶，B錯(cuò)誤；

C；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)；其中的新霉素抗性基因沒有被破壞，因此可以根據(jù)對(duì)新霉素的抗性將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，即該基因的作用是便于將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，C正確；

D；重組質(zhì)粒已經(jīng)破壞了mlacZ基因；其不會(huì)表達(dá)產(chǎn)物，即細(xì)胞呈白色。所以，在加入新霉素的培養(yǎng)基中選擇呈白色的菌落選育工程菌株，D正確。

故選B。7、B【分析】【分析】

自然選育的菌種來源于自然界；菌種保藏機(jī)構(gòu)或生產(chǎn)過程；從自然界中選育菌種的過程較為復(fù)雜，而從生產(chǎn)過程或菌種保藏機(jī)構(gòu)得到菌種的自然選育過程較為簡(jiǎn)單；此外也可通過誘變育種和基因工程育種獲得。

【詳解】

A；自然選育菌種要到相應(yīng)的環(huán)境從眾多的微生物中進(jìn)行篩選；所以費(fèi)時(shí)且盲目性大，A正確；

B；乳酸菌屬于原核生物；原核生物無染色體，B錯(cuò)誤；

C；基因工程是以基因重組為原理；能夠?qū)崿F(xiàn)定向改造基因的技術(shù)，可采用基因工程的方法可構(gòu)建工程菌，C正確；

D；菌種的選育可以采用誘變育種的方法；其原理是基因突變，D正確。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)8、A:B:D【分析】【分析】

分析圖解：圖中過程①表示利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因；過程②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，過程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌，過程④表示目的基因的檢測(cè)和鑒定。

【詳解】

A；步驟①中；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列，A正確；

B；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒；因此科研人員還在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后續(xù)的剪切和連接，B正確；

C；在過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌；而根瘤農(nóng)桿菌在侵染人參愈傷組織細(xì)胞時(shí)，T-DNA才整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，C錯(cuò)誤；

D；干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞或?qū)肴藚⒂鷤M織細(xì)胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄；這會(huì)導(dǎo)致通過該方法不能檢測(cè)出干擾素基因，D正確。

故選ABD。9、B:C【分析】【分析】

關(guān)于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；影響酶促反應(yīng)的因素有溫度、pH、酶濃度、底物濃度等；因此酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時(shí)間等因素，A正確；

B；根據(jù)題意可知；限制酶BamHⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)為G↓GATCC，因此目的基因經(jīng)BamHI切割后形成的黏性末端是是-GATC或CTAG-，B錯(cuò)誤；

C；由于這兩種酶切割形成的黏性末端相同；因此分別用這兩種限制酶切割，不能保證目的基因定向插入質(zhì)粒，C錯(cuò)誤；

D；經(jīng)兩種酶處理得到的重組質(zhì)粒的相應(yīng)部位的序列不能再被這兩種酶識(shí)別；D正確。

故選BC。

【點(diǎn)睛】10、B:C:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中①表示將目的基因?qū)朕r(nóng)桿菌；②表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株。

【詳解】

A；探針是指用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段；因此要以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針，而不是將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針，A錯(cuò)誤；

B；可用DNA分子雜交技術(shù)；即以Luc基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針進(jìn)行DNA分子雜交，B正確；

C；用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交；即以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交，C正確；

D；檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)；由圖可知B基因與Luc基因連接形成B-Luc融合基因，因此可通過Luc基因表達(dá)，檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光，D正確。

故選BCD。11、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析；①過程導(dǎo)入外源基因，類似于植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化，②表示細(xì)胞分裂和分化，③表示動(dòng)物細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，④是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

【詳解】

A；①過程是通過誘導(dǎo)基因作用使纖維母細(xì)胞（高度分化）脫分化為干細(xì)胞（具有分裂和分化能力）；與纖維母細(xì)胞相比，干細(xì)胞的全能性較高，A正確；

B；②過程是干細(xì)胞再分化為其他組織器官細(xì)胞；是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，B正確；

C；③過程是細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞過程；需要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)及多次篩選，C正確；

D；圖中的肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞均來自于甲鼠；具有相同的基因組成，Y細(xì)胞來自于乙鼠，其基因組成不同，D錯(cuò)誤。

故選ABC。12、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理利用的是細(xì)胞的增殖；培養(yǎng)過程需要無毒無菌的環(huán)境；充足的營養(yǎng)、適宜的溫度和pH以及適宜的氣體環(huán)境。

【詳解】

A；細(xì)胞體外培養(yǎng)所需的營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；需要加入血清，以補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，A正確；

B；在體外連續(xù)培養(yǎng)時(shí)；常采用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶將細(xì)胞分開，B正確；

C；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以分化成胰島樣組織細(xì)胞；但沒有發(fā)育成一個(gè)完整的個(gè)體人，不能說明其具有發(fā)育的全能性，C錯(cuò)誤；

D；由于導(dǎo)入的是胰島樣細(xì)胞；與血型無關(guān)，治療成功后康復(fù)者的血型不可能發(fā)生改變，D錯(cuò)誤。

故選AB。13、A:C:D【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴(kuò)增。

【詳解】

A；基因擴(kuò)增中引物通常是一小段DNA或RNA片段；每一次循環(huán)后DNA分子數(shù)量增加一倍，從理論上推測(cè)，第二輪后只有一個(gè)DNA片段只有引物B，含引物A的比例為3/4，A正確；

B；引物A和引物B均不在該片段的端點(diǎn)；因此第一輪循環(huán)后，得到的兩DNA片段中兩條脫氧核苷酸鏈都不等長，通過繪圖可推知，第二輪中也不會(huì)出現(xiàn)等長的引物，所以在第二輪循環(huán)產(chǎn)物中不會(huì)出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，B錯(cuò)誤；

C；引物A和引物B必須與目的基因配對(duì)；如果引物之間或引物自身發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，則不能擴(kuò)增目的基因，C正確；

D；由于復(fù)制過程子鏈的合成方向是從子鏈的5’端向3’端延伸；所以耐熱的DNA聚合酶總將游離的脫氧核苷酸連接到3’端，D正確。

故選ACD。14、A:C:D【分析】微生物常見的接種方法（稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)）：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；平板劃線無法得知稀釋倍數(shù)；不能用于活菌計(jì)數(shù)，故統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；

B；除圖中操作外；還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，以驗(yàn)證培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B正確；

C；由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)；平板上顯示的只是一個(gè)菌落，故培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個(gè)、甚至幾個(gè)活菌，C錯(cuò)誤；

D；由于菌落肉眼可見；故初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，可用肉眼觀察菌體的形態(tài)特征，D錯(cuò)誤。

故選ACD。15、A:C:D【分析】【分析】

大腸桿菌是原核生物；原核細(xì)胞與真核細(xì)胞相比，最大的區(qū)別是原核細(xì)胞沒有被核膜包被的成形的細(xì)胞核（沒有核膜；核仁和染色體）；原核細(xì)胞只有核糖體一種細(xì)胞器；原核細(xì)胞中，轉(zhuǎn)錄和翻譯在相同時(shí)空中進(jìn)行，而真核生物的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程在不同時(shí)間和空間進(jìn)行。

【詳解】

A；人體胰島細(xì)胞是真核細(xì)胞；在合成胰島素原時(shí)，轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞核中進(jìn)行，翻譯在細(xì)胞質(zhì)的核糖體上進(jìn)行，原核細(xì)胞沒有細(xì)胞核，A錯(cuò)誤；

B；DNA連接酶能在兩個(gè)相同黏性末端配對(duì)后的磷酸與脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵（磷酸二酯鍵）；B正確；

C；通過檢測(cè)；大腸桿菌中沒有胰島素原產(chǎn)生，不能判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌，也可能是導(dǎo)入后沒有表達(dá)，C錯(cuò)誤；

D；大腸桿菌是原核生物；沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)胰島素原進(jìn)行加工，因此人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原沒有生物活性，D錯(cuò)誤。

故選ACD。16、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作為探針；原理是DNA分子雜交。

2；DNA分子是一個(gè)獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu)；是由兩條平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成，外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對(duì)（A-T；C-G）通過氫鍵連接。

3；目的基因的檢測(cè)與鑒定：

分子水平上的檢測(cè)：

①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

個(gè)體水平上的鑒定：

抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；由圖1可知；DNA探針是用熒光分子標(biāo)記的DNA分子，DNA的基本組成單位是脫氧核苷酸，因此熒光標(biāo)記的DNA探針的基本單位是脫氧核糖核苷酸，A正確；

B；由圖2可知；高溫（煮沸）可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈，B正確；

C；圖中兩條姐妹染色單體中含有2個(gè)DNA分子共有4條鏈；所以最多可有4條熒光標(biāo)記的DNA片段，C錯(cuò)誤；

D、由于AA和BB中各有一對(duì)同源染色體可被熒光探針標(biāo)記，若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則其F1（AABC）含有3個(gè)熒光點(diǎn)；經(jīng)間期復(fù)制加倍，有絲分裂中期的細(xì)胞中可觀察到6個(gè)熒光點(diǎn)，D正確。

故選ABD。三、填空題(共7題，共14分)17、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】剛果紅染色法CR紅色復(fù)合物透明圈透明圈19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因重組基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)人們意愿某種基因修飾改造另一種生物細(xì)胞里定向21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】離心、振動(dòng)、電刺激聚乙二醇22、略

【分析】略【解析】自我更新分化潛能再生修復(fù)23、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒?huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共4題，共36分)24、B【分析】【詳解】

目前；用體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物的成功率還很低。

故錯(cuò)誤。25、B【分析】【詳解】

從牛卵巢中采集到卵母細(xì)胞后；接著對(duì)其進(jìn)行的操作是先在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，再通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，獲得去核的卵母細(xì)胞，再經(jīng)核移植獲得重組的受體細(xì)胞。

故該表述錯(cuò)誤。26、A【分析】【詳解】

雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。27、B【分析】【詳解】

基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實(shí)；說明并未開始實(shí)際應(yīng)用。

故錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共27分)28、略

【分析】【分析】據(jù)圖分析；圖示為利用基因工程大量制備α-淀粉酶的過程，目的基因是α-淀粉酶基因，與體構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后將目的基因?qū)氪竽c桿菌，接著對(duì)目的基因進(jìn)行檢測(cè)與鑒定，最后利用工程菌培養(yǎng)獲得大量的α-淀粉酶產(chǎn)品。

【詳解】（1）α-淀粉酶基因來自于海洋細(xì)菌；因此為了利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因，必須先獲得細(xì)菌的基因組DNA。

（2）目的基因與運(yùn)載體結(jié)合前需要用限制酶對(duì)兩者進(jìn)行切割；延伸是在引物的3’端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位點(diǎn)，且為了使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)。

（3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)；退火溫度的設(shè)定與引物有關(guān)，延伸時(shí)間的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長度有關(guān)。

（4）根據(jù)題意分析；虛線框內(nèi)mRNA片段內(nèi)含有24個(gè)堿基，每3個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)密碼子，因此包含24÷3=8個(gè)密碼子；構(gòu)成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有4×4-3=13種。

（5）根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析可知，在pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下；α-淀粉酶相對(duì)活性為99.5%，活性最高。

【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是基因工程的四個(gè)基本步驟以及PCR技術(shù)的過程、條件，回憶相關(guān)知識(shí)點(diǎn)和注意事項(xiàng)，結(jié)合提示分析答題?！窘馕觥炕蚪MDNA5’使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連②⑥813pH為8．5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl29、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖示為釀制葡萄酒的兩個(gè)簡(jiǎn)易裝置，甲裝置中，A為葡萄汁，能為酵母菌提供碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和生長因子；NaHCO3溶液能夠吸收酵母菌酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2；乙裝置需要定期擰松瓶蓋排氣。

（1）

制作果酒的菌種是酵母菌；屬于真核生物；制作果醋的菌種是醋酸菌，屬于原核生物，它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別在于前者有以核膜為界限的細(xì)胞核，即有核膜包被的細(xì)胞核。醋酸菌發(fā)酵的適宜溫度為30℃～35℃，因此制作果酒后制果醋，應(yīng)將溫度控制在30℃～35℃。

（2）

甲裝置中，A液體是葡萄汁，能為酵母菌提供碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和生長因子；NaHCO3溶液的作用是吸收酵母菌酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2；若用乙裝置；在發(fā)酵過程中，必須進(jìn)行的操作是每隔12小時(shí)左右將瓶蓋擰松一次，排除二氧化碳。

（3）

酵母菌屬于兼性厭氧菌；其在有氧條件下可以大量繁殖，故將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約1/3的空間，這樣既為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，又可防止發(fā)酵旺盛時(shí)汁液溢出。

（4）

酒精可用重鉻酸鉀來檢驗(yàn)；在酸性條件下，該試劑與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。

（5）

醋酸菌可以利用果酒進(jìn)行發(fā)酵，相應(yīng)反應(yīng)式為：

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作，要求考生識(shí)記參與果酒和果醋制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒和果醋制作的原理及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，難度適中?！窘馕觥浚?）核膜包被的細(xì)胞核30-35

（2）葡萄汁吸收酵母菌酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2擰松。

（3）為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發(fā)酵旺盛時(shí)汁液溢出。

（4）重鉻酸鉀。

（5）30、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對(duì)的增添和缺失，因?yàn)檫@兩者改變會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測(cè)其基因突變是由于堿基對(duì)替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測(cè)該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對(duì)使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時(shí)保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對(duì)照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多，說明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗(yàn)可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對(duì)突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時(shí)，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異。【解析】(1)替換減少。

(2)識(shí)別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異六、綜合題(共4題，共24分)31、略

【分析】【分析】

分析甲圖：圖甲為單克隆抗體制備過程；圖中①表示給小鼠注射特定的抗原蛋白，②表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，③表示篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，④表示雜交瘤細(xì)胞的體內(nèi)培養(yǎng)。

分析乙圖：圖乙表示克隆羊培育過程，圖中a表示細(xì)胞核移植，b表示胚胎移植技術(shù)?！拘?】

圖甲是單克隆抗體制備過程；圖乙是克隆羊培育過程，都必須用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染；植物體細(xì)胞雜交可以采用物理（離心；振動(dòng)、電刺激）和化學(xué)（聚乙二醇）的方法，動(dòng)物細(xì)胞融合過程中，除了利用這兩種方法以外，還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)。兩次篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能無限增殖又可分泌特異性抗體。【小問2】

單克隆抗體能定向攻擊癌細(xì)胞；主要是利用其特異性。【小問3】

克隆羊的成功體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性；其生殖方式為無性繁殖，若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀不是全部像白面綿羊，因?yàn)槁鸭?xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的線粒體遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀?！拘?】

動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用：①加速家畜遺傳改良進(jìn)程；促進(jìn)良畜群繁育；②保護(hù)瀕危物種，增大存活數(shù)量；③生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白；④作為異種移植的供體；⑤用于組織器官的移植等，但是不能改變動(dòng)物的核基因，只有通過可遺傳變異改變動(dòng)物的核基因。故選D。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查單克隆抗體的制備、核移植等知識(shí)，要求考生識(shí)記單克隆抗體制備的具體過程；識(shí)記核移植的具體過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確作答?！窘馕觥俊拘☆}1】①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)②.抗生素③.滅活的病毒④.既能無限增殖又可分泌特異性抗體。

【小題2】特異性。

【小題3】①.動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性②.無性繁殖③.不是④.卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀。

【小題4】D32、略

【分析】【分析】

1；胚胎發(fā)育的過程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。

①卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加。

②桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎（之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞）。

③囊胚：細(xì)胞開始分化；其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔（注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化）。

④原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層；下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。（細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度）

2；受精卵發(fā)育為桑椹胚的過程稱為卵裂；卵裂就是有絲分裂。在卵裂過程中，細(xì)胞的總體積基本不變，單個(gè)細(xì)胞的體積不斷減小；單個(gè)細(xì)胞的DNA含量不變，卵裂球的有機(jī)物總量減少。

【詳解】

（1）哺乳動(dòng)物睪丸產(chǎn)生的精子進(jìn)入陰道后；精子緩慢通過子宮，在輸卵管內(nèi)與卵細(xì)胞相遇，精子與卵細(xì)胞結(jié)合，形成受精卵。

（2）哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞結(jié)合形成的受精卵是哺乳動(dòng)物新個(gè)體發(fā)育的起點(diǎn)；受精卵在輸卵管中形成，不斷進(jìn)行細(xì)胞分裂，逐漸發(fā)育成胚泡，胚泡緩慢移動(dòng)到子宮，最終植入子宮內(nèi)膜，故其胚胎發(fā)育的整個(gè)過程在輸卵管和子宮中完成。

（3）圖示過程表示個(gè)體發(fā)育過程；發(fā)育分兩個(gè)階段：第一個(gè)階段是從受精卵發(fā)育到成熟的胎兒的過程；第二個(gè)階段是由嬰兒出生發(fā)育到個(gè)體成熟的過程。Ⅰ過程表示由受精卵發(fā)育成胎兒的胚胎發(fā)育，Ⅱ過程為胎兒發(fā)育為成體的胚后發(fā)育。

（4）胚胎發(fā)育的過程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體；故圖中“？”處