2025年冀教新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年冀教新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下列有關(guān)基因工程中限制酶的描述，錯(cuò)誤的是（）A.每一種限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列B.限制酶的活性受溫度影響C.限制酶能識(shí)別和切割RNAD.限制酶可從原核生物中提取2、下列關(guān)于生物工程的說法，不正確的是（）A.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的原理是相同的B.從理論上講，基因工程和細(xì)胞工程都可以定向改造生物性狀C.基因工程的工具酶有限制酶、DNA連接酶等，細(xì)胞工程的工具酶有纖維素酶、胰蛋白酶等D.蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造一種新蛋白質(zhì)的技術(shù)3、下列生物技術(shù)操作對(duì)生物遺傳物質(zhì)的改造，不會(huì)遺傳給子代的是（）A.用經(jīng)過修飾的腺病毒做載體將治療遺傳性囊性纖維病的正?；蜣D(zhuǎn)入患者組織中B.將治療乙型肝炎的重組人干擾系a-1b基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得基因工程菌C.將魚的抗凍蛋白基因?qū)敕?，獲得耐寒的番茄植株D.將外源生長(zhǎng)素基因?qū)膈庺~受精卵，培育出快速生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)基因鯉魚4、勤洗手是預(yù)防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為測(cè)試該凝膠的清洗效果，研究人員檢測(cè)了用凝膠洗手前后手部細(xì)菌的含量。凝膠洗手前的檢測(cè)流程見下圖。下列敘述正確的是（）

A.統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是平板劃線法B.除圖中操作外，還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)C.培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落只可能來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌D.初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，必須用顯微鏡觀察菌體的形狀5、導(dǎo)致新冠肺炎的病原體是“2019—nCoV”病毒，該病毒為RNA病毒，其序列中具有RNA聚合酶基因，無逆轉(zhuǎn)錄酶基因，快速準(zhǔn)確的檢測(cè)對(duì)疫情防控起著至關(guān)重要的作用。病毒的檢測(cè)方法有:①用“新冠病毒核酸檢測(cè)試劑盒”，檢測(cè)病毒的遺傳物質(zhì)RNA；②特異性抗原蛋白檢測(cè)，即檢測(cè)病毒表面的一種糖蛋白；③特異性抗體檢測(cè)，即檢測(cè)感染者體內(nèi)通過免疫反應(yīng)所產(chǎn)生的某種抗體。下列有關(guān)說法不正確的是（）A.方法①②③都需要從患者體內(nèi)采集病毒樣本B.方法②③都需要用到抗原一抗體雜交的方法C.某人有可能①②為陽(yáng)性③為陰性，也可能③為陽(yáng)性①②為陰性D.由于RNA比DNA穩(wěn)定性差，往往將病毒樣本的RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，擴(kuò)增之后進(jìn)行分段測(cè)序，在該過程中需要用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)6、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的正確觀點(diǎn)是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，設(shè)計(jì)試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題C.當(dāng)今社會(huì)的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)，但不反對(duì)治療性克隆D.大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交7、轉(zhuǎn)MT-like基因的衣藻對(duì)Pb、Cd等重金屬離子的抗性明顯增強(qiáng)，對(duì)Cb2+富集效應(yīng)顯著。某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)擴(kuò)增MT-like基因，并進(jìn)一步通過基因工程手段構(gòu)建凈化重金屬?gòu)U水的工程菌。下列有關(guān)PCR操作的敘述，正確的是（）A.PCR擴(kuò)增需要加入Taq酶和DNA連接酶B.需設(shè)計(jì)一對(duì)與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物C.設(shè)計(jì)引物時(shí)要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對(duì)D.長(zhǎng)度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火溫度8、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的觀點(diǎn)，正確的是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，設(shè)計(jì)試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題C.運(yùn)用試管嬰兒技術(shù)解決不孕問題D.大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交9、如圖為腎臟上皮細(xì)胞培養(yǎng)過程示意圖；下列敘述正確的是（）

A.甲→乙過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.丙過程指細(xì)胞在添加血清的合成培養(yǎng)基中原代培養(yǎng)C.丙和丁過程均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象D.丁過程是傳代培養(yǎng)的細(xì)胞，細(xì)胞都能進(jìn)行無限增殖10、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用的說法中，正確的是（）A.植物體體內(nèi)具完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)的活細(xì)胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體B.不同培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例應(yīng)不同C.單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)D.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可實(shí)現(xiàn)某些重要細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)11、生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說法正確的是（）

A.倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B.倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙和丙D.生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選12、轉(zhuǎn)基因作物的推廣種植，大幅度提高了糧食產(chǎn)量，取得了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益碩果累累的轉(zhuǎn)基因成果在帶給人們喜悅的同時(shí)，也促使人們關(guān)注轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題。下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因作物的安全性的敘述，正確的是（）A.轉(zhuǎn)入抗性基因的植物可能成為“入侵物種”，影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性B.抗性基因可能會(huì)隨花粉傳播到田間近緣野生植物體內(nèi)，造成基因污染C.若目的基因來自自然界，則培育出的轉(zhuǎn)基因植物不會(huì)有安全性問題D.大面積種植抗蟲棉，有可能會(huì)導(dǎo)致棉鈴蟲群體中相關(guān)抗性基因頻率增大評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)13、基因的“剪刀”是_____，它的化學(xué)本質(zhì)是_____，它只能識(shí)別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構(gòu)成；基因的運(yùn)載體是將_____送入_____的運(yùn)輸工具。目前常用的運(yùn)載體有_____、________和_____。質(zhì)粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環(huán)狀_____。14、來源：主要是從______中分離純化出來的。15、動(dòng)物基因工程：______。16、通過____________的方式，來控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。17、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。18、植物體細(xì)胞雜交的意義：_____。19、第四步：_____20、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共14分)21、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實(shí)際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。()A.正確B.錯(cuò)誤22、“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共36分)23、學(xué)校開展以“利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作食品”為主題的相關(guān)活動(dòng)。小余同學(xué)興致勃勃地回家；發(fā)現(xiàn)冰箱中可用的原材料有草莓；豆腐、白蘿卜、牛奶等。請(qǐng)回答下列問題：

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次發(fā)酵保存下來的發(fā)酵物中的______進(jìn)行發(fā)酵；制作食品的技術(shù)。

（2）小余同學(xué)將草莓洗凈、切塊，裝入瓶中。加入原漿醋（經(jīng)糧食直接釀制，不經(jīng)勾兌）少許、白糖兩勺，置于保溫箱中，每隔一段時(shí)間擰開瓶蓋換氣，兩周后得到草莓醋。小余同學(xué)加入原漿醋的目的是接種更多的______，加入糖并經(jīng)常開蓋換氣的目的是保證______都充足。保溫箱溫度應(yīng)保持在______℃。

（3）小余同學(xué)還打算制作一些腐乳和蘿卜泡菜給住宿生作早餐。從豆腐到腐乳，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是_______，屬于______（填“真核”或“原核”）生物。豆腐中的成分也會(huì)發(fā)生一定的變化，其中蛋白質(zhì)被分解成______，脂肪被分解成______；用白蘿卜制作泡菜的過程中，能達(dá)到縮短腌制時(shí)間的操作有______（填下面的序號(hào)）。

①將白蘿卜切成小塊②用沸水短時(shí)間處理白蘿卜塊。

③添加陳泡菜汁④向容器中通入無菌空氣。

（4）小余同學(xué)欲從泡菜汁中分離制作酸奶的乳酸菌，首先對(duì)陳泡菜汁進(jìn)行過濾，然后取濾液用無菌水進(jìn)行充分______，再用涂布器接種到特定的______培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選。24、碰碰香葉片中的揮發(fā)油具有廣泛的食用；藥用等價(jià)值。為驗(yàn)證碰碰香揮發(fā)油對(duì)細(xì)菌的抑菌活性，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：

步驟一：配置LB培養(yǎng)基（胰蛋白胨10g；酵母浸膏5g；氯化鈉10g、瓊脂粉l5g、蒸餾水960mL），滅菌后倒平板，靜置備用；

步驟二：制備大小相同的濾紙片；滅菌后烘干；

步驟三：將濾紙片分別浸于l0mL碰碰香揮發(fā)油提取液中處理；晾干后備用；

步驟四：用移液槍取20μL的大腸桿菌懸液加入LB培養(yǎng)基表面；用涂布器將其均勻涂布；

步驟五：取步驟三浸泡處理過的3個(gè)濾紙片；置于LB培養(yǎng)基表面，并保持相互間隔一定距離，37℃倒置培養(yǎng)，每天觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

請(qǐng)回答下列問題：

(1)可利用水蒸氣蒸餾法從碰碰香葉片中提取揮發(fā)油．該方法的原理是_____________________。

(2)LB培養(yǎng)基中，可以為微生物提供氮源的是_________________，從物理性質(zhì)分析，該培養(yǎng)基屬于_________________培養(yǎng)基，對(duì)該培養(yǎng)基滅菌應(yīng)采用_________________________法。

(3)步驟五需增設(shè)對(duì)照組，對(duì)照組的處理應(yīng)把濾紙片置于_____________________中浸泡。

(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：經(jīng)碰碰香揮發(fā)油浸泡過的3個(gè)濾紙片周圍都出現(xiàn)了抑菌圈（透明圈），其中一個(gè)抑菌圈如圖所示，請(qǐng)分析其形成原因：________________________________。

25、赤霉素與其受體GID結(jié)合后；可以促進(jìn)植物莖稈伸長(zhǎng)。藍(lán)光能夠激活藍(lán)光受體CRY，抑制赤霉素的作用，為探究該機(jī)理，研究者分別構(gòu)建了含有His-CRY和GST-GID融合基因的表達(dá)載體，表達(dá)出相應(yīng)的融合蛋白。His和GST均為短肽，它們與其他蛋白形成的融合蛋白能與His或GST抗體結(jié)合，且不影響其他蛋白的結(jié)構(gòu)和功能。

(1)構(gòu)建含上述融合基因的表達(dá)載體。

①結(jié)合圖1分析，欲使His短肽連在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，則應(yīng)在____________(填“F引物”或“R引物”)的___________(“5’”或“3’”)端加上His短肽的編碼序列，理由是________________。

②為使融合基因能與載體相連接，還需在F引物和R引物上添加相應(yīng)的酶切位點(diǎn)序列，該序列應(yīng)該位于His短肽編碼序列的_____________(填“5’”或“3’”)端。

③用同樣的方法擴(kuò)增GST-GID融合基因；并構(gòu)建相關(guān)表達(dá)載體。

(2)將兩個(gè)表達(dá)載體同時(shí)導(dǎo)人擬南芥細(xì)胞，一段時(shí)間后裂解細(xì)胞，將含有His抗體的磁珠加人裂解液中，充分孵育后收集磁珠，將磁珠上的蛋白(磁珠蛋白)分離下來，進(jìn)行抗原-抗體雜交，結(jié)果如圖2。

①對(duì)細(xì)胞裂解液蛋白進(jìn)行抗原-抗體雜交的目的是_______________。對(duì)磁珠蛋白進(jìn)行His抗體檢測(cè)的目的是_________。

②圖示結(jié)果說明，藍(lán)光的作用機(jī)理是__________。26、微生物因具有體積小；易培養(yǎng)，繁殖快，且自身遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，經(jīng)人工處理或自然突變可獲得新性狀等特點(diǎn)，在發(fā)酵工程中應(yīng)用廣泛?；卮鹣铝袉栴}：

(1)大腸桿菌是發(fā)酵工程中應(yīng)用較為廣泛的菌種之一。培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至____性，再利用_________________法滅菌后進(jìn)行接種。

(2)在發(fā)酵工程中，常常需要對(duì)菌種數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。相對(duì)真菌來說，細(xì)菌的體積較小，因此對(duì)細(xì)菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)時(shí)，適合使用_________________（填“細(xì)菌計(jì)數(shù)板”或“血細(xì)胞計(jì)數(shù)板”）進(jìn)行計(jì)數(shù)，且統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際活菌數(shù)目_________________（填“多”或“少”）。

(3)人工處理或自然突變往往會(huì)使菌種成為營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株；現(xiàn)欲設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，請(qǐng)簡(jiǎn)單描述實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

實(shí)驗(yàn)思路：_____________________________；

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：_____________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共2題，共4分)27、利用木聚糖酶進(jìn)行紙漿漂白時(shí)；可以大幅度減少氯化物的用量，減輕造紙工業(yè)對(duì)環(huán)境的污染。紙漿漂白需要在高溫堿性條件下進(jìn)行，因此需要耐熱耐堿的木聚糖酶。根據(jù)生產(chǎn)需要，科學(xué)家將木聚糖酶的第110位的絲氨酸和第154位的天冬氨酸都突變?yōu)榘腚装彼?，從而在該蛋白的?10位和第154位形成一個(gè)二硫鍵，并在羧基末端將第162位的谷氨酰胺突變?yōu)榻M氨酸或酪氨酸，使木聚糖酶在5℃時(shí)的半衰期從不到1min延長(zhǎng)到63min，減少了紙漿漂白時(shí)木聚糖酶的用量，提高了生產(chǎn)效率。請(qǐng)回答下列問題：

(1)科學(xué)家對(duì)木聚糖酶的改造過程是怎樣的？______

(2)有研究表明在木聚糖酶中特定部位引入精氨酸可以增加木聚糖酶的離子鍵數(shù)目，從而增加酶在堿性環(huán)境中的穩(wěn)定性。根據(jù)這一研究結(jié)果，請(qǐng)利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)設(shè)計(jì)改造木聚糖酶，提高其在堿性條件下的穩(wěn)定性。______

(3)利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，針對(duì)目前水體污染，提出治理的構(gòu)想和初步方案。______28、魚鱗病是一種遺傳所致的皮膚疾病；臨床表現(xiàn)為皮膚干燥；伴有魚鱗狀脫屑。

(1)下圖為某魚鱗病家族系譜圖。據(jù)圖分析該遺傳病的遺傳方式最可能是_______，判斷依據(jù)是________。

(2)Ⅲ-14為該家族發(fā)現(xiàn)的一位魚鱗病女性患者，通過對(duì)患者細(xì)胞學(xué)鑒定，發(fā)現(xiàn)該患者核型為45，XO，推測(cè)該女性患者魚鱗病致病基因來自于_______________。

(3)魚鱗病的病因是由于患者體內(nèi)缺乏類固醇硫酸酯酶（STS）所致，已知編碼STS的基因含有10個(gè)外顯子，根據(jù)STS基因的編碼區(qū)外顯子1及外顯子10序列設(shè)計(jì)引物，對(duì)該家系中相關(guān)成員的基因進(jìn)行PCR檢測(cè)，結(jié)果如下圖所示（a~e分別是III-14、II-6、II-7、正常女性和正常男性；M是標(biāo)準(zhǔn)DNA片段）。同時(shí)在患者細(xì)胞中不能檢測(cè)到STS蛋白，由此推測(cè)患者基因發(fā)生了堿基對(duì)的_________（填“增添”；“缺失”或“替換”）。

(4)魚鱗病目前還沒有較好的治療方法，最常用的方法是加強(qiáng)皮膚保濕和護(hù)理。通過遺傳咨詢和_________可對(duì)該病進(jìn)行預(yù)防和監(jiān)測(cè)，進(jìn)而降低該病的發(fā)病率。請(qǐng)結(jié)合本研究，提出可能根治魚鱗病的思路_________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、C【分析】【分析】

限制酶：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；故每一種限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，A正確；

B；酶的作用條件溫和；酶的活性易受溫度、pH等條件的影響，故限制酶的活性受溫度的影響，B正確；

C；限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，不能識(shí)別和切割RNA，C錯(cuò)誤；

D；限制酶主要從原核生物中提??；D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】2、A【分析】【分析】

1；植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)?？筛鶕?jù)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。

2；基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。

3；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。

【詳解】

A；植物體細(xì)胞雜交的原理時(shí)細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞全能性；動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，不完全相同，A錯(cuò)誤；

B；基因工程和細(xì)胞工程都可以定向改造生物的遺傳性狀；B正確；

C；基因工程的工具酶有限制酶、DNA連接酶等；細(xì)胞工程的工具酶有纖維素酶、胰蛋白酶等，C正確；

D；蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求，D正確。

故選A。3、A【分析】【分析】

1；基因治療是指把正常基因?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細(xì)胞中；使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的。例：將腺苷酸脫氨酶（ADA）基因?qū)牖颊叩牧馨图?xì)胞，治療復(fù)合型免疫缺陷癥。

2；對(duì)于有性生殖的生物；外源基因需要導(dǎo)入細(xì)胞核內(nèi)才能隨著細(xì)胞增殖傳遞給子代細(xì)胞。

【詳解】

A；因?yàn)閷⒅委熯z傳性囊性纖維病的正?；蜣D(zhuǎn)入患者的體細(xì)胞中使其正常表達(dá)；因此不會(huì)通過遺傳傳遞給子代，A正確；

B、將治療乙型肝炎的重組人干擾素a-1b基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌；篩選獲得基因工程菌，重組質(zhì)粒能隨細(xì)菌分裂而遺傳給后代，B錯(cuò)誤；

C；將魚的抗凍蛋白基因?qū)敕眩慌嘤龅哪秃姆阎仓昙?xì)胞中都含魚的抗凍蛋白基因，因而能遺傳給后代，C錯(cuò)誤；

D；將外源生長(zhǎng)素基因?qū)膈庺~受精卵；培育出轉(zhuǎn)基因鯉魚細(xì)胞中都含外源生長(zhǎng)素基因，因而能遺傳給后代，D錯(cuò)誤。

故選A。4、B【分析】【分析】

微生物常見的接種方法（稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)）：平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；平板劃線無法得知稀釋倍數(shù)；不能用于活菌計(jì)數(shù)，故統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；

B；除圖中操作外；還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，以驗(yàn)證培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B正確；

C；當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)；平板上顯示的只是一個(gè)菌落，故培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個(gè)或幾個(gè)活菌，C錯(cuò)誤；

D；由于菌落肉眼可見；故初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，可用肉眼觀察菌體的形態(tài)、大小、顏色等特征，D錯(cuò)誤。

故選B。5、A【分析】【分析】

病毒是一種個(gè)體微小；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，只含一種核酸(DNA或RNA)，必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型生物。病毒是一種非細(xì)跑生命形態(tài)，它由一個(gè)核酸長(zhǎng)鏈和蛋白質(zhì)外殼構(gòu)成，病毒沒有自己的代謝機(jī)構(gòu)，沒有酶系統(tǒng)。因此病毒離開了宿主細(xì)胞，就成了沒有任何生命活動(dòng)；也不能獨(dú)立自我繁殖的化學(xué)物質(zhì)。它的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯的能力都是在宿主細(xì)胞中進(jìn)行，當(dāng)它進(jìn)入宿主細(xì)胞后，它就可以利用細(xì)胞中的物質(zhì)和能量完成生命活動(dòng)，按照它自己的核酸所包含的遺傳信息產(chǎn)生和它一樣的新一代病毒。

【詳解】

A；2019-nCoV病毒為RNA病毒；具有RNA聚合酶基因，無逆轉(zhuǎn)錄基因，其RNA首先侵入機(jī)體，然后經(jīng)過復(fù)制過程并指導(dǎo)相關(guān)蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而完成病毒自身的增殖過程，同時(shí)機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，抗體的產(chǎn)生的快慢可能會(huì)因人而異，據(jù)此推測(cè)：RNA檢測(cè)和抗原蛋白檢測(cè)需要從患者體內(nèi)采集病毒樣本，而檢測(cè)抗體不需要采集病毒樣本，A錯(cuò)誤；

B；方法②③都是檢測(cè)蛋白質(zhì)；都需要用到抗原―抗體雜交的方法，B正確；

C；某人有可能①②為陽(yáng)性③為陰性；即感染了新冠病毒但還未產(chǎn)生抗體，也可能③為陽(yáng)性①②為陰性，即抗體陽(yáng)性，可能感染該病毒但痊愈或注射疫苗產(chǎn)生了抗體，C正確；

D；由于RNA相比DNA穩(wěn)定性差；往往將病毒樣本的RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，該過程中需要用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共7題，共14分)6、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

我國(guó)反對(duì)以克隆人為目的任何實(shí)驗(yàn)和舉動(dòng)；主要是基于以下四方面的倫理考慮：

1；克隆人是對(duì)人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)；

2；克隆人違反生物進(jìn)化的自然發(fā)展規(guī)律；

3；克隆人將擾亂社會(huì)家庭的正常倫理定位；

4；克隆人的安全性在倫理上也難以確認(rèn)。

【詳解】

A；設(shè)計(jì)試管嬰兒性別會(huì)引起性別比例失調(diào)；違背倫理道德，我國(guó)不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，A錯(cuò)誤；

B；基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題；B正確；

C；當(dāng)今社會(huì)的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)；但不反對(duì)治療性克隆，C正確；

D；大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯(cuò)誤。

故選BC。7、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。

【詳解】

A；DNA連接酶催化DNA片段連接；Taq酶催化脫氧核苷酸連接，故PCR擴(kuò)增不需要DNA連接酶，A錯(cuò)誤；

B；PCR技術(shù)的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)和DNA半保留復(fù)制；其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物，因此需設(shè)計(jì)一對(duì)與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物，B正確；

C；為避免引物自連；設(shè)計(jì)引物時(shí)要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對(duì)，C正確；

D；因G-C堿基對(duì)之間的氫鍵多于A-T堿基對(duì)之間的氫鍵；GC堿基對(duì)含量高的雙鏈的穩(wěn)定性更高，故GC堿基對(duì)含量高的引物需要更高的退火溫度，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】8、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)；過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變)、生物安全(對(duì)生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。

【詳解】

A；設(shè)計(jì)試管嬰兒；會(huì)引起性別失調(diào)，違背倫理道德，我國(guó)不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，A錯(cuò)誤；

B；應(yīng)基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題；B正確；

C；運(yùn)用試管嬰兒技術(shù)可以解決不孕問題；C正確；

D；大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯(cuò)誤。

故選BC。9、A:B:C【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2；圖示為腎臟上皮細(xì)胞培養(yǎng)過程示意圖；圖中甲表示剪碎腎臟組織塊，乙表示制成細(xì)胞懸液，丙表示原代培養(yǎng)，丁表示傳代培養(yǎng)。

【詳解】

A；甲剪碎腎臟組織塊→乙制成細(xì)胞懸液過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理；分散成單個(gè)細(xì)胞，A正確；

B；丙過程指細(xì)胞在添加血清的合成培養(yǎng)基中原代培養(yǎng)；B正確；

C；丙原代培養(yǎng)過程和丁傳代培養(yǎng)過程均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象；C正確；

D；丁過程是傳代培養(yǎng)過程；該過程少部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生了變化，進(jìn)而無限繁殖，D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程，掌握原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的區(qū)別；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，難度不大。10、A:B:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)：1；過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化產(chǎn)生胚狀體，最好發(fā)育成植株（新植體）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要。

2；原理：植物細(xì)胞的全能性。

3；應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快速繁殖優(yōu)良品種、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種和突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的植物細(xì)胞必須具有完整的細(xì)胞核；以保證有全套的遺傳信息，因此植物體體內(nèi)具完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)的活細(xì)胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體，A正確；

B；脫分化過程和再分化過程所需的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例應(yīng)不同；如生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成；生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值低時(shí)，有利于芽的形成；生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí)，有利于根的形成，B正確；

C；單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育都要經(jīng)歷細(xì)胞到植株的過程；因此都需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C正確；

D；利用某些細(xì)胞能產(chǎn)生特定的產(chǎn)物；通過組織培養(yǎng)使細(xì)胞數(shù)量增加，進(jìn)而增加產(chǎn)量，實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)，D正確。

故選ABCD。

【點(diǎn)睛】11、A:C:D【分析】【分析】

本題考查微生物的培養(yǎng)及鑒定。據(jù)圖分析；菌落主要分布于添加了乙和丙的區(qū)域的交界處，說明該嗜熱菌所需的生長(zhǎng)因子是乙和丙。

【詳解】

A；倒平板后不接種任何菌種直接進(jìn)行培養(yǎng)觀察有無菌落的出現(xiàn)；可以判斷培養(yǎng)基有無污染，A正確；

B；在制作培養(yǎng)基的過程中；需要先進(jìn)行滅菌再倒平板，B錯(cuò)誤；

C；分析題圖可知；嗜熱菌在添加了乙、丙生長(zhǎng)因子的區(qū)域生長(zhǎng)，故該菌需要的生長(zhǎng)因子是乙和丙，C正確；

D；不同的菌種所需的生長(zhǎng)因子不同；利用生長(zhǎng)圖形法可用于某些菌種的篩選，某菌種只會(huì)在提供其需要的生長(zhǎng)因子區(qū)域生長(zhǎng)，D正確。

故選：ACD。12、A:B:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因生物具有某些特殊性質(zhì)；他們?cè)谀车貐^(qū)的競(jìng)爭(zhēng)能力較強(qiáng)，可能成為“外來入侵物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的存在，從而影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因作物的基因可以通過花粉傳播到田間近緣野生植物體內(nèi)；該近緣物種在通過授粉會(huì)造成基因進(jìn)一步擴(kuò)散和污染，B正確；

C；即使目的基因來自自然界；培自出的轉(zhuǎn)基因植物仍然可能會(huì)有潛在的安全性向題，C錯(cuò)誤；

D；大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉；有可能會(huì)導(dǎo)致棉鈴蟲群體中相關(guān)抗性基因頻率增加，D正確。

故選ABD。三、填空題(共8題，共16分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質(zhì)核苷酸序列特定的切點(diǎn)DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細(xì)胞質(zhì)粒噬菌體動(dòng)植物病毒細(xì)菌酵母菌細(xì)胞核自主復(fù)制DNA分子14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的檢測(cè)和鑒定20、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒?huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共14分)21、B【分析】【詳解】

基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實(shí)；說明并未開始實(shí)際應(yīng)用。

故錯(cuò)誤。22、A【分析】【分析】

“設(shè)計(jì)試管嬰兒”在植入前需要對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；而“試管嬰兒”是解決不孕不育等問題，不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。

【詳解】

“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要通過多種技術(shù)手段對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；以便選擇合適的設(shè)計(jì)出來的試管嬰兒。

故正確五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共36分)23、略

【分析】【分析】

醋酸菌是好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，這些小分子物質(zhì)有利于人體的消化和吸收。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次發(fā)酵保存下來的發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵；制作食品的技術(shù)；一般不需要嚴(yán)格滅菌。

（2）原漿醋中含有發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的醋酸菌；加入原漿醋的目的是接種更多的醋酸菌，加入糖并經(jīng)常開蓋換氣的目的是保證糖源；氧氣都充足，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌適宜的發(fā)酵溫度為30~35℃，故保溫箱溫度應(yīng)保持在30~35℃。

（3）腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉；毛霉屬于真核生物，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，這些小分子物質(zhì)有利于人體的消化和吸收。①將白蘿卜切成小塊可以擴(kuò)大白蘿卜與腌料的接觸面積，縮短腌制時(shí)間，①正確；②用沸水短時(shí)處理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品質(zhì)，也可縮短腌制時(shí)間，②正確；③泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過程中，加入一些已經(jīng)腌制過泡菜汁可縮短腌制時(shí)間，③正確；④泡菜制作所需菌種為乳酸菌，制作過程中應(yīng)保持無氧環(huán)境，向容器中通入無菌空氣不利于腌制，④錯(cuò)誤；綜上分析，①②③操作能達(dá)到縮短腌制時(shí)間。

（4）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌；首先對(duì)經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進(jìn)行過濾，然后取濾液用無菌水進(jìn)行稀釋，再用涂布分離的方法在特定的熱選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選乳酸菌。

【點(diǎn)睛】

本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用，意在考查考生對(duì)發(fā)酵原理、發(fā)酵過程的識(shí)記和應(yīng)用能力?！窘馕觥课⑸锎姿峋窃?、氧氣30~35毛霉真核小分子肽和氨基酸甘油和脂肪酸①②③稀釋選擇24、略

【分析】【分析】

根據(jù)物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基分成固體培養(yǎng)基；半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。

(1)

水蒸氣蒸餾法的原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來；形成油水混合物，冷卻后又會(huì)重新分出油層和水層。

(2)

胰蛋白胨和酵母浸膏都可以為微生物提供氮源；培養(yǎng)基中加入了瓊脂；因此是固體培養(yǎng)基；對(duì)培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)采取高壓蒸汽滅菌法。

(3)

為了避免微生物的干擾；根據(jù)單一變量原則，對(duì)照組應(yīng)該設(shè)置為把濾紙片置于等量無菌水中浸泡。

(4)

該實(shí)驗(yàn)為驗(yàn)證類實(shí)驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)結(jié)果是已知的，實(shí)驗(yàn)組的3個(gè)濾紙片上含有抑菌作用的揮發(fā)油，其紙片外圍大腸桿菌不能繁殖，因而出現(xiàn)抑菌圈（透明圈），而對(duì)照組的不會(huì)出現(xiàn)。

【點(diǎn)睛】

本題考察獲取目的菌種的相關(guān)知識(shí)，需要考生熟練掌握培養(yǎng)基的制備、培養(yǎng)基的類型以及實(shí)驗(yàn)的原理等內(nèi)容?！窘馕觥?1)利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來；形成油水混合物，冷卻后又會(huì)重新分出油層和水層。

(2)胰蛋白胨和酵母浸膏固體高壓蒸汽滅菌。

(3)等量無菌水。

(4)實(shí)驗(yàn)組的3個(gè)濾紙片上含有抑菌作用的揮發(fā)油，其紙片外圍大腸桿菌不能繁殖，因而出現(xiàn)抑菌圈（透明圈）25、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟包括目的基因的獲?。换虮磉_(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定?；蚬こ讨辽傩枰N工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。

【詳解】

（1）①由圖1可知，欲使His短肽連在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，即獲得“3’—His短肽—CRY基因—5’”的基因表達(dá)載體；由圖可知CRY基因的3’端對(duì)應(yīng)的為F引物，即要將His短肽加在CRY的氨基端，應(yīng)在CRY基因模板鏈的3’端上加His短肽編碼序列，對(duì)應(yīng)的是F引物；而且加上的His序列不與CRY轉(zhuǎn)錄模板配對(duì)，所以只能加在F引物5’端，才能保證引物與模板配對(duì)后可以正常延伸。

②為使融合基因能與載體相連接；酶切位點(diǎn)序列應(yīng)該位于F引物的3’端，His短肽編碼序列的5’端。

（2）①為確定His-CRY和GST-GID這兩個(gè)融合基因在擬南芥細(xì)胞中已正常表達(dá)；應(yīng)對(duì)細(xì)胞裂解液蛋白進(jìn)行抗原-抗體雜交，并且為了確定磁珠上的His抗體可以結(jié)合His短肽，對(duì)磁珠蛋白進(jìn)行His抗體檢測(cè)。

②由題意可知，藍(lán)光可以激活藍(lán)光受體CRY，抑制赤霉素的作用，分析圖2，對(duì)細(xì)胞裂解液蛋白進(jìn)行抗原-抗體雜交，無論黑暗或藍(lán)光條件下，均具有條帶，但含有His抗體的磁珠蛋白組，黑暗條件下沒有檢測(cè)到GST條帶，但藍(lán)光組出現(xiàn)了GST條帶，說明藍(lán)光激活CRY后，CRY與赤霉素受體GID結(jié)合，使赤霉素?zé)o法發(fā)揮作用，從而抑制赤霉素的作用。【解析】(1)F引物5’要將His短肽加在CRY的氨基端；則應(yīng)在CRY基因模板鏈的3’端上加His短肽編碼序列，對(duì)應(yīng)的是F引物；而且加上的His序列不與CRY轉(zhuǎn)錄模板配對(duì)，所以只能加在F引物5’端，才能保證引物與模板配對(duì)后可以正常延伸5’

(2)確定His-CRY和GST-GID這兩個(gè)融合基因在擬南芥細(xì)胞中已正常表達(dá)確定磁珠上的His抗體可以結(jié)合His短肽光激活CRY后，CRY與赤霉素受體GID結(jié)合，使赤霉素?zé)o法發(fā)揮作用，從而抑制赤霉素的作用26、略

【分析】【分析】

1；利用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù)；也是一種常用的、快速直觀的測(cè)定微生物數(shù)量的方法。該方法利用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)，然后再計(jì)算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和。細(xì)菌計(jì)數(shù)板和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)原理相同。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚，常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞、霉菌孢子等的計(jì)數(shù)。用細(xì)菌計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。

2；滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物；包括芽孢和孢子。濕熱滅菌：高壓蒸汽滅菌（壓力為100kPa、溫度為121℃、15~30min）；干熱滅菌：160~170℃熱空氣維持2~3h。耐高溫的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等；灼燒滅菌：接種工具。接種過程中，試管口、瓶口等容易被污染的部位。

【詳解】

（1）大腸桿菌是細(xì)菌；培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，對(duì)培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。

（2）細(xì)菌計(jì)數(shù)板和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)原理相同。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚；常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞；霉菌孢子等的計(jì)數(shù)。用細(xì)菌計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，所以統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際活菌數(shù)目多。

（3）本實(shí)驗(yàn)為了證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后；可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，可將野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察大腸桿菌是否生長(zhǎng)，如果在培養(yǎng)基上無大腸桿菌生長(zhǎng)，說明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，獲得了組氨酸缺陷型突變菌株。具體實(shí)驗(yàn)思路及結(jié)果如下：

實(shí)驗(yàn)思路：使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上；標(biāo)記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標(biāo)記為丙組；將甲；乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察并統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒有出現(xiàn)菌落或出現(xiàn)菌落、但菌落數(shù)少于乙組；丙組培養(yǎng)基無菌落?！窘馕觥?1)中性或弱堿高壓蒸汽滅菌（或濕熱滅菌）

(2)細(xì)菌計(jì)數(shù)板多。

(3)使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標(biāo)記為丙組；將甲、乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察并統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒有出現(xiàn)菌落或出