2025屆高考生物二輪復(fù)習(xí)【第1部分】大概念整合6限時規(guī)范訓(xùn)練15基因工程(新教材)

限時規(guī)范訓(xùn)練(十五)基因工程(限時：45分鐘)一、選擇題1．(2023·廣東深圳二模)如圖表示改造哺乳動物遺傳特性的三種途徑，相關(guān)敘述錯誤的是()A．上述動物的獲得過程中均運用顯微注射法B．動物2含有目的基因的體細胞與其他體細胞的基因種類不同C．獲得動物3的重組細胞具有全能性D．獲得動物1的受體細胞通常是MⅡ期卵母細胞解析：D上述動物的獲得過程中均需要將外源基因?qū)胧荏w細胞，需要運用顯微注射法，A正確；動物2的其他體細胞有原本的受精卵發(fā)育而來，含有目的基因的體細胞與其他體細胞的基因種類不同，B正確；獲得動物3的重組細胞能夠發(fā)育出完整的動物3，表明它具有全能性，C正確；獲得動物1轉(zhuǎn)基因動物，需將目的基因?qū)胧芫?，因為受精卵的全能性高，D錯誤。2．(2023·湖北應(yīng)城二模)乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物質(zhì)，由乳酸脫氫酶催化產(chǎn)生，影響白酒品質(zhì)和風(fēng)格?？蒲腥藛T將釀酒酵母質(zhì)粒上的丙酮酸脫氫酶基因(PD)替換為植物乳桿菌中的乳酸脫氫酶基因(L-PG)，可獲得乳酸乙酯高產(chǎn)菌株，該過程如圖所示。下列說法不正確的是()A．可借助序列數(shù)據(jù)庫(GenBank)等查詢L-PG基因的序列和功能B．可以利用PCR技術(shù)篩選導(dǎo)入了L-PG基因的受體細胞C．酵母菌PD基因被替換為L-PG基因的過程中發(fā)生了基因重組D．標記基因AmpR可檢測是否成功構(gòu)建乳酸乙酯高產(chǎn)菌株解析：DGenBank是美國國家生物技術(shù)信息中心建立的DNA序列數(shù)據(jù)庫，從公共資源中獲取序列數(shù)據(jù)，可借助序列數(shù)據(jù)庫(GenBank)等查詢L-PG基因的序列和功能，A正確；PCR技術(shù)是一項體外擴增基因的技術(shù)，依據(jù)堿基互補配對原則，可以用于篩選含有L-PG基因的受體細胞，B正確；由圖可知，通過基因工程技術(shù)將釀酒酵母質(zhì)粒上的丙酮酸脫氫酶基因(PD)替換為植物乳桿菌中的乳酸脫氫酶基因(L-PG)，其原理是基因重組，C正確；標記基因AmpR不能檢測是否成功構(gòu)建乳酸乙酯高產(chǎn)菌株，D錯誤。3．(2023·山東泰安一中校考)白細胞介素-2(IL-2)參與移植排斥反應(yīng)，是免疫調(diào)節(jié)因子，對機體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用。科研人員將含IL-2基因的DNA片段和質(zhì)粒pPIC9K(部分結(jié)構(gòu)如圖所示)構(gòu)建成重組質(zhì)粒，并導(dǎo)入酵母菌GS115(組氨酸缺陷菌株)中，篩選到了能分泌IL-2的工程菌株。下列敘述錯誤的是()A．組氨酸合成基因可作為標記基因篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的酵母菌細胞B．構(gòu)建重組質(zhì)粒時可選用AvrⅡ和NotⅠ切割目的基因和pPIC9K質(zhì)粒C．重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌GS115前，需要先用Ca2＋處理酵母菌GS115細胞D．抑制IL-2基因的表達可在一定程度上減輕機體器官移植后的免疫排斥反應(yīng)解析：B酵母菌GS115是組氨酸缺陷菌株，不能合成組氨酸，可以用不含組氨酸的培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的酵母菌GS115，A正確；據(jù)圖可知，為保證目的基因(AvrⅡ會破壞目的基因)和啟動子(SacⅠ會破壞啟動子)的完整性，可用EcoRⅠ和NotⅠ分別切割含有IL-2基因的DNA片段和pPIC9K質(zhì)粒，B錯誤；導(dǎo)入重組質(zhì)粒前，需要先用Ca2＋處理酵母菌GS115細胞，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，C正確；IL-2參與移植排斥反應(yīng)，抑制IL-2基因的表達可在一定程度上減輕器官移植后機體的免疫排斥反應(yīng)，D正確。4．(2023·遼寧實驗中學(xué)?？?研究人員通過RNA沉默技術(shù)，特異性降低蘋果細胞內(nèi)多酚氧化酶基因的表達水平，使蘋果被切開后即使長時間暴露在空氣中也不會被氧化褐變。如圖是該過程原理的示意圖，下列有關(guān)敘述不正確的是()A．構(gòu)建基因表達載體需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶和RNA聚合酶B．可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因成功導(dǎo)入蘋果細胞C．目的基因與多酚氧化酶基因的表達序列互補，且同時在同一細胞內(nèi)表達D．“RNA沉默”的含義是mRNA不能翻譯產(chǎn)生多酚氧化酶解析：A構(gòu)建基因表達載體需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶，不需要RNA聚合酶，A錯誤；蘋果屬于雙子葉植物，可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因成功導(dǎo)入蘋果細胞，B正確；要使目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA和多酚氧化酶基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA互補配對，應(yīng)使目的基因的表達序列與多酚氧化酶基因的表達序列互補，且要同時在同一細胞內(nèi)表達，C正確；“RNA沉默”的含義是mRNA不能指導(dǎo)相關(guān)多肽鏈的合成，即不能翻譯產(chǎn)生多酚氧化酶，D正確。5．(2023·河北衡水三模)基因工程中需使用特定的限制酶切割基因載體，以便其與目的基因連接形成基因表達載體。研究人員將相同的基因載體分組并進行相應(yīng)酶切處理(如表所示)，其中限制酶H1和H2識別序列不同。各組基因載體經(jīng)酶切處理后，進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，實驗結(jié)果如圖所示。下列說法錯誤的是()分組相應(yīng)酶切處理甲限制酶H1乙限制酶H2丙限制酶H1＋H2A．該基因載體最有可能為環(huán)狀DNA分子B．限制酶H1與H2在該載體上都有識別和切割位點C．限制酶H1與H2在該載體上的酶切位點最短相距0.2kbD．限制酶作用于該載體時會直接導(dǎo)致氫鍵和磷酸二酯鍵的斷裂解析：D由圖可知，當(dāng)僅用一種限制酶切割載體時，僅產(chǎn)生一種長度的DNA片段，因此該載體最有可能為環(huán)狀DNA分子，A正確；當(dāng)用一種限制酶切割載體時，產(chǎn)生的DNA片段等長，而用兩種限制酶同時切割時，產(chǎn)生兩種長度的DNA片段，所以兩種限制酶在該載體上都有酶切位點，B正確；用兩種限制酶同時切割載體時，產(chǎn)生0.6kb和0.2kb兩種長度的DNA片段，所以兩種限制酶的酶切位點最短相距0.2kb，C正確；限制酶切割載體時直接破壞的是作用位點上兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵，D錯誤。6．(2023·北大附中?？?研究者對綠色熒光蛋白進行改造，將其第203位蘇氨酸替換為酪氨酸，使改造后的蛋白質(zhì)在特定光激發(fā)后發(fā)射橙色光，稱為橙色熒光蛋白。關(guān)于橙色熒光蛋白的構(gòu)建，以下說法正確的是()A．用蛋白酶直接處理綠色熒光蛋白獲得目標產(chǎn)物B．設(shè)計定點突變PCR獲得橙色熒光蛋白基因C．PCR擴增獲得的產(chǎn)物激發(fā)后可以發(fā)橙色熒光D．綠色熒光蛋白基因發(fā)生的突變類型為堿基缺失解析：B用蛋白酶直接處理綠色熒光蛋白得到的是各種氨基酸，而不是第203位蘇氨酸替換為酪氨酸的橙色熒光蛋白，A錯誤；要使綠色熒光蛋白第203位蘇氨酸替換為酪氨酸，可以通過對其基因進行定點突變PCR實現(xiàn)，這樣基因中控制蘇氨酸的堿基序列替換為合成酪氨酸的堿基序列，B正確；PCR擴增獲得的產(chǎn)物是目的基因片段，不能發(fā)橙色熒光，只有該基因片段控制合成的蛋白質(zhì)才會在特定光激發(fā)后發(fā)橙色熒光，C錯誤；綠色熒光蛋白基因發(fā)生的突變類型為堿基替換，D錯誤。7．(2023·安徽校聯(lián)考二模)在某些生化反應(yīng)中，積累的產(chǎn)物濃度達到一定程度時，產(chǎn)物會與酶結(jié)合，從而抑制酶促反應(yīng)的進行。如圖是蘇氨酸脫氫酶催化蘇氨酸形成異亮氨酸的過程。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A．蘇氨酸脫氫酶和蘇氨酸中可能都含有氨基和羧基B．圖示存在反饋調(diào)節(jié)，有助于維持異亮氨酸含量的相對穩(wěn)定C．增加蘇氨酸含量可以解除異亮氨酸對蘇氨酸脫氫酶的抑制D．可通過蛋白質(zhì)工程改造蘇氨酸脫氫酶的結(jié)構(gòu)來提高異亮氨酸的產(chǎn)量解析：C蘇氨酸脫氫酶的本質(zhì)為蛋白質(zhì)，由氨基酸組成，含有氨基和羧基，蘇氨酸為氨基酸，至少含有一個氨基和一個羧基，A正確；據(jù)圖可知，當(dāng)異亮氨酸濃度達到一定程度時，會與蘇氨酸脫氫酶結(jié)合，從而抑制酶促反應(yīng)的進行，使異亮氨酸濃度不至于太高，此過程為反饋調(diào)節(jié)，有助于維持異亮氨酸含量的相對穩(wěn)定，B正確；據(jù)圖可知，當(dāng)異亮氨酸濃度達到一定程度時，會與蘇氨酸脫氫酶結(jié)合，從而使得蘇氨酸不能與蘇氨酸脫氫酶結(jié)合，則蘇氨酸也不能轉(zhuǎn)化為異亮氨酸，即使蘇氨酸濃度增大，蘇氨酸也不能與蘇氨酸脫氫酶結(jié)合，所以增加蘇氨酸含量不能解除異亮氨酸對蘇氨酸脫氫酶的抑制，C錯誤；蛋白質(zhì)工程改造了蘇氨酸脫氫酶的空間結(jié)構(gòu)之后，可使異亮氨酸不能與蘇氨酸脫氫酶結(jié)合，即解除了反饋調(diào)節(jié)，故可通過蛋白質(zhì)工程改造蘇氨酸脫氫酶的結(jié)構(gòu)來提高異亮氨酸的產(chǎn)量，D正確。8．(2023·山東泰安二模)環(huán)境DNA(eDNA)是“在環(huán)境樣品中所有被發(fā)現(xiàn)的不同生物的基因組DNA的混合”，它涵蓋的范圍非常廣泛，無論是土壤、空氣、液體，甚至是排泄物，都可以從中找到可作為樣品的eDNA。對所得的樣品，可使用普通的聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)或直接霰彈槍法(shotgunstrategy)測序，能夠方便獲得多個DNA序列。下列有關(guān)說法不正確的是()A．可分析環(huán)境樣品中的eDNA分別是屬于哪些物種，這與傳統(tǒng)的動植物分類調(diào)查是一致的B．eDNA技術(shù)可尋找環(huán)境中是否有單一物種的DNA，用于研究和追蹤珍稀物種的分布C．使用PCR測序，能夠方便獲得DNA序列D．每個eDNA中都有一個游離的磷酸基團解析：D由于DNA分子具有特異性，所以可分析環(huán)境樣品中的eDNA分別是屬于哪些物種，這與傳統(tǒng)的動植物分類調(diào)查其實是一致的，A正確；環(huán)境DNA(eDNA)技術(shù)是一種新型生物資源調(diào)查手段，是指從環(huán)境中提取DNA片段，根據(jù)DNA分子的特異性，結(jié)合PCR和DNA測序等分子生物學(xué)技術(shù)來定性或定量檢測目標生物，從而確定其分布狀況等，B正確；PCR是一項體外擴增DNA的技術(shù)，其原理是DNA的復(fù)制，故擴增微量的樣品eDNA，可獲得大量的DNA序列，C正確；DNA分子是雙螺旋結(jié)構(gòu)，有兩條脫氧核苷酸鏈，若是鏈狀DNA分子，則每個eDNA中都有兩個游離的磷酸基團，若是環(huán)狀DNA分子，則沒有游離的磷酸基團，D錯誤。9．(2023·湖南長沙二模)研究人員將雪花蓮凝集素(GNA)基因和尾穗莧凝集素(ACA)基因連接成融合基因后再與pBI121質(zhì)粒載體結(jié)合并導(dǎo)入玉米細胞，最終獲得了抗蚜蟲玉米新品種，部分操作過程如圖所示。下列敘述正確的是()A．過程①和過程②分別需要使用DNA聚合酶和DNA連接酶B．可將含有重組載體的溶液滴加到玉米受粉后形成的花粉管通道內(nèi)，獲得抗蚜蟲玉米新品種C．在加入了卡那霉素的培養(yǎng)基上存活下來的玉米細胞均成功導(dǎo)入了重組載體D．若用PCR技術(shù)檢測出玉米細胞含有融合基因，則該玉米為抗蚜蟲玉米解析：B過程①為獲得融合基因，過程②為構(gòu)建基因表達載體，兩過程均需要使用DNA連接酶，A錯誤；將含有重組載體的溶液滴加到玉米受粉后形成的花粉管通道內(nèi)，重組載體可通過花粉管通道進入卵細胞、合子或早期胚胎細胞中，這是將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄖ?，B正確；在加入了卡那霉素的培養(yǎng)基上存活下來的玉米細胞，可能是成功導(dǎo)入重組載體的細胞，也可能是導(dǎo)入含有卡那霉素抗性基因的非重組載體的細胞，C錯誤；用PCR技術(shù)檢測出玉米細胞含有融合基因，不能說明該玉米為抗蚜蟲玉米，因為融合基因可能不能正常表達，D錯誤。10．基因定點突變的目的是通過定向地改變基因內(nèi)一個或少數(shù)幾個堿基來改變多肽鏈上一個或幾個氨基酸。該技術(shù)是蛋白質(zhì)工程的重要技術(shù)。如圖為利用PCR技術(shù)進行定點突變的流程，下列相關(guān)敘述不正確的是()注：引物1和引物3的突起處代表與模板不能互補的突變位點，而這兩條引物有部分堿基(包括突變位點)是可以互補的。A．由于基因決定蛋白質(zhì)，因此要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行設(shè)計改造，最終還必須通過改造或合成基因來完成B．酶①應(yīng)為耐高溫的DNA聚合酶，引物X和Y應(yīng)該為引物2和4C．可以將引物1、引物2、引物3和引物4置于同一個反應(yīng)系統(tǒng)中同時進行第一個階段的反應(yīng)，進而縮短實驗時間D．利用圖示流程技術(shù)可以將兩個不同的基因拼接到一起解析：C基因控制蛋白質(zhì)的合成，因此要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行設(shè)計改造，最終還必須通過改造或合成基因來完成，A正確；酶①要在高溫條件下延伸DNA，所以酶①為耐高溫的DNA聚合酶，由圖可知，要得到兩條鏈一樣長的DNA單鏈，應(yīng)選擇引物2和引物4，所以引物X和Y應(yīng)該為引物2和4，B正確；由圖可知，引物1和引物3存在互補配對片段，置于同一個反應(yīng)系統(tǒng)時它們會發(fā)生結(jié)合而失去作用，C錯誤；圖示的過程為重疊延伸PCR技術(shù)，利用重疊互補引物將兩個不同的基因拼接到一起，D正確。二、非選擇題11．(2023·云南昆明二模)科學(xué)家將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫押嘶蚪M中，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因克隆牛分泌的乳汁，乳汁中乳糖含量大大降低。這有利于解決我國約有1/3的成年人因?qū)θ樘遣荒褪苁秤门Ｄ毯蟪霈F(xiàn)腹瀉等不適癥狀的問題。分析回答下列問題：(1)利用PCR技術(shù)擴增腸乳糖酶基因時，PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性和________________三步，其中使反應(yīng)體系中的模板DNA解聚為單鏈的條件是________________，解聚為單鏈過程破壞了DNA雙鏈分子中的________________，復(fù)性的結(jié)果是_______________________。(2)科學(xué)家將腸乳糖酶基因與____________細胞中特異表達的基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起，以使乳汁中的乳糖含量降低。構(gòu)成啟動子的基本單位是_____________________________________________________________。(3)為了促進轉(zhuǎn)腸乳糖酶基因牛的繁育，將含腸乳糖酶基因的胚胎細胞的細胞核移入牛的________________。然后用物理或化學(xué)方法激活重構(gòu)胚，激活重構(gòu)胚的目的是________________________________________________________。解析：(1)PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性和延伸三步，其中使反應(yīng)體系中的模板DNA解聚為單鏈的條件是90℃以上高溫，解聚為單鏈過程破壞了DNA雙鏈分子中的氫鍵，復(fù)性的結(jié)果是兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。(2)科學(xué)家將腸乳糖酶基因與乳腺細胞中特異性表達的基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起，以使乳汁中的乳糖含量降低。構(gòu)成啟動子的是DNA，其基本單位是脫氧核苷酸。(3)將含腸乳糖酶基因的胚胎細胞的細胞核移入牛的去核卵母細胞，為了促進轉(zhuǎn)腸乳糖酶基因牛的繁育，然后用物理或化學(xué)方法激活重構(gòu)胚，激活重構(gòu)胚的目的是使其完成細胞分裂和發(fā)育進程。答案：(1)延伸90℃以上高溫氫鍵兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合(2)乳腺脫氧核苷酸(3)去核卵母細胞使其完成細胞分裂和發(fā)育進程12．(2023·江蘇鹽城二模)黨的二十大對保障糧食安全提出了更高要求，馬鈴薯是我國重要的糧食作物之一。致病疫霉導(dǎo)致的晚疫病及干旱、高低溫和鹽脅迫等是導(dǎo)致馬鈴薯減產(chǎn)的重要原因。研究人員為探究StNPR4和StproNPR4基因在馬鈴薯應(yīng)對致病疫霉和高鹽脅迫中的功能進行了相關(guān)實驗，基因表達載體構(gòu)建示意圖如圖?；虮磉_載體構(gòu)建示意圖(1)用SacⅡ等限制酶切割含目的基因的DNA片段，與經(jīng)相同酶切割后的pENTR-L16質(zhì)粒用________________酶連接，構(gòu)建重組pENTR-L16。(2)經(jīng)________________酶將含目的基因的片段切出并連接到載體pORE04上構(gòu)建重組pORE04。(3)將重組pORE04導(dǎo)入馬鈴薯細胞常用的方法是__________法，它利用了T-DNA的________特性，最終使目的基因整合到馬鈴薯細胞______________上。經(jīng)轉(zhuǎn)化后得到5個品系，命名為1、2、3、4和5。如圖A表示馬鈴薯基因相對表達量分析，B表示馬鈴薯接種致病疫霉后病原菌相對生物量分析，C表示150mmol·L－1的NaCl處理對馬鈴薯快繁生根率的影響，**表示組別間差異達到極顯著水平。①據(jù)圖A分析，只有轉(zhuǎn)基因品系________________的表達量顯著低于野生型(WT)和其余4個轉(zhuǎn)化品系，因此后續(xù)試驗不再檢測此品系。②據(jù)圖B和圖C分析，與野生型馬鈴薯比較，轉(zhuǎn)基因馬鈴薯品系的優(yōu)勢是具有__________，致病疫霉相對生物量低；生根率高，__________________。(4)為研究轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株的分子機理，研究人員利用TaqMan探針和反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)，對轉(zhuǎn)基因馬鈴薯StproNPR4和StNPR4基因的表達進行檢測：①StproNPR4基因的兩端堿基序列如下：采用PCR技術(shù)獲取和擴增StproNPR4基因，需要使用的引物2序列為5′－CTTGGATGAT－3′，則引物1的序列為________(標出5′和3′端，寫出前6個堿基即可)。②TaqMan探針的結(jié)構(gòu)如圖所示，由于探針有________________的片段，導(dǎo)致游離探針上的熒光素會與淬滅劑結(jié)合無法發(fā)出熒光。③經(jīng)檢測，轉(zhuǎn)基因馬鈴薯水楊酸(SA)信號通路相關(guān)蛋白基因表達量顯著上升，SA是一種植物抗病有關(guān)的調(diào)節(jié)物質(zhì)。研究人員推測L儀器檢測通過激活SA途徑提升抗病能力，欲驗證這一假設(shè)，需要進行的實驗是___________________。解析：(1)用SacⅡ等限制酶切割含目的基因的DNA片段，與經(jīng)相同酶切割后的pENTR-L16質(zhì)粒具有相同的黏性末端，再用DNA連接酶連接，構(gòu)建重組pENTR-L16。(2)分析題圖可知，兩個質(zhì)粒都有SacⅡ和KpnⅠ的酶切位點，故經(jīng)SacⅡ和KpnⅠ酶將含目的基因的片段切出并連接到載體pORE04上構(gòu)建重組pORE04。(3)將重組pORE04導(dǎo)入馬鈴薯細胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，T-DNA是可轉(zhuǎn)移DNA，能夠最終使目的基因整合到馬鈴薯細胞染色體的DNA上。經(jīng)轉(zhuǎn)化后得到5個品系，命名為1、2、3、4和5。①A表示馬鈴薯基因相對表達量分析，據(jù)圖A分析，只有轉(zhuǎn)基因品系5的表達量顯著低于野生型(WT)和其余4個轉(zhuǎn)化品系，因此后續(xù)試驗不再檢測此品系。②B表示馬鈴薯接種致病疫霉后病原菌相對生物量分析，C表示150mmol·L－1的NaCl處理對馬鈴薯快繁生根率的影響，圖中的**表示組別間差異達到極顯著水平。據(jù)圖B和圖C分析，與野生型馬鈴薯比較，轉(zhuǎn)基因馬鈴薯品系的致病疫霉相對生物量低，說明具有抗病性；而生根率高，故存活能力強。(4)引物需要與模板鏈的3′端互補配對，即—OH端，故根據(jù)StproNPR4基因兩端堿基序列可知，采用PCR技術(shù)獲取和擴增StproNPR4基因，需要使用的引物2序列為5′－CTTGGATGAT－3′，則引物1的序列為5′－TCTGTT－3′。②依據(jù)TaqMan探針的結(jié)構(gòu)圖可知，由于探針有堿基互補配對的片段，導(dǎo)致游離探針上的熒光素會與淬滅劑結(jié)合無法發(fā)出熒光。③分析題意，實驗?zāi)康臑轵炞CL儀器檢測通過激活SA途徑提升抗病能力，自變量為有無SA途徑，故欲驗證這一假設(shè)，需要進行的實驗是敲除SA受體基因或抑制SA信號途徑，檢測馬鈴薯的抗病情況。答案：(1)DNA連接(2)SacⅡ和KpnⅠ(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化可轉(zhuǎn)移染色體的DNA①5②抗病性存活能力強(4)①5′－TCTGTT－3′②堿基互補配對③敲除SA受體基因或抑制SA信號途徑，檢測馬鈴薯的抗病情況。13．(2023·廣東深圳二模)人體細胞中的ICF45蛋白與細胞周期調(diào)控、腫瘤發(fā)生過程有關(guān)。為探究ICF45蛋白的相關(guān)作用機制，某研究人員進行了如下實驗?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究人員先通過基因工程技術(shù)構(gòu)建了可表達ICF45蛋白的工程菌大腸桿菌，再通過培養(yǎng)大腸桿菌獲得ICF45蛋白。在構(gòu)建過程中，研究人員從宮頸癌細胞系細胞中提取mRNA，然后以mRNA為模板，在________________酶的作用下合成cDNA。再依據(jù)一段________________的核苷酸序列設(shè)計引物，進行PCR擴增。PCR技術(shù)的一個循環(huán)包括的環(huán)節(jié)是________________。將含有目的基因的表達載體導(dǎo)入大腸桿菌前，一般先用____________處理大腸桿菌細胞，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。(2)研究人員將獲得的ICF45蛋白注射到若干只健康小鼠體內(nèi)，一段適宜時間后從小鼠的脾臟中提取出小鼠B淋巴細胞，將其與________________細胞誘導(dǎo)融合。然后經(jīng)特定的選擇性培養(yǎng)基篩選，對篩選出的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，最終選擇出________________細胞在體外條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)，這樣就可以從培養(yǎng)液中獲得大量的ICF45單克隆抗體。(3)該研究人員利用獲得的ICF45單克隆抗體，通過免疫共沉淀技術(shù)進一步