2025年人教新課標(biāo)選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教新課標(biāo)選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列有關(guān)生物工程的敘述；不正確的有（）

①基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體。

②利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時；需要對離體的莖尖；培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。

③克隆羊的培育涉及細(xì)胞核移植和胚胎移植等技術(shù)。

④PCR技術(shù)需要利用限制性內(nèi)切核酸酶打開DNA雙鏈。

⑤利用核移植技術(shù)可以培育試管嬰兒。

⑥牛胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→卵裂→桑葚胚→囊胚→原腸胚A.一項(xiàng)B.兩項(xiàng)C.三項(xiàng)D.四項(xiàng)2、下圖所示是某動物細(xì)胞培養(yǎng)時；培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計結(jié)果，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.培養(yǎng)至第6d時，新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)B.培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理C.曲線bc段變化的主要原因是培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等D.進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，首先需要在等滲溶液中用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理新鮮的動物組織，但要注意酶溶液的濃度和處理時間3、LY-CovMab是一款重組全人源單抗，以高親和力特異性結(jié)合冠狀病毒表面刺突蛋白受體結(jié)構(gòu)域能有效阻止冠狀病毒與受體細(xì)胞表面結(jié)合。下列相關(guān)敘述，不正確的是（）A.利用動物細(xì)胞融合技術(shù)制備單抗B.抗體是雜交瘤細(xì)胞通過胞吐方式分泌到細(xì)胞外的C.抗體的產(chǎn)生伴隨著ATP水解D.動物細(xì)胞胞吐方式運(yùn)輸?shù)囊欢ㄊ谴蠓肿游镔|(zhì)4、北魏時期的名著《齊民要術(shù)》中總結(jié)了中國古代許多釀酒技術(shù)的原理和技術(shù)路線，例如用酒曲釀酒時不同季節(jié)對浸曲之水的處理不同，冬天的水可以直接浸曲，春天后則需先將水煮沸后再浸曲；酸漿法處理使釀酒容器中先呈現(xiàn)出酸性環(huán)境后再釀酒：釀酒要先晾堂（在糧食中加入酒曲后鋪撒在地面上）再密封到酒窖中。這些原理和技術(shù)對現(xiàn)代釀酒技術(shù)的發(fā)展仍然具有重要的指導(dǎo)意義。下列說法錯誤的是（）A.水煮沸后可直接用于浸曲以提高釀酒效率B.酸漿法利用了較低pH適宜酵母菌的生長而抑制其他雜菌生長的原理C.晾堂的目的是使酵母菌在O2充足的條件下大量繁殖D.密封可以使酵母菌產(chǎn)生酒精的同時避免醋酸的產(chǎn)生5、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所棉花分子遺傳改良創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)成功將甜菜紅素在棉花纖維中富集，創(chuàng)制出纖維呈粉紅色的棉花，下圖是利用基因工程培育粉紅色棉花的示意圖，下列有關(guān)該研究說法錯誤的是（）

A.通過基因工程創(chuàng)制出彩色纖維棉可有效減少化學(xué)染料使用量B.過程①→②完成需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與C.在⑤的植株中檢測到甜菜紅素合成相關(guān)的基因，就代表粉紅色棉花培育成功D.過程④→⑤依據(jù)了植物體細(xì)胞全能性的原理6、當(dāng)前生物技術(shù)發(fā)展非常迅猛，很多生物技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)與我們的日常生活密切相關(guān)。下列有關(guān)生物技術(shù)的說法或做法不正確的是（）A.消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面B.我國堅(jiān)決反對克隆人，不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)C.對囊胚進(jìn)行胚胎分割時，必須對整個胚胎進(jìn)行均等分割D.胚胎工程繁育良種時，供體和受體母畜都要進(jìn)行同期發(fā)情處理評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵過程中會生成大量的谷氨酸，經(jīng)加工后可制成味精。在其發(fā)酵過程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4：1時，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3：1時，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，有利于獲得更多的優(yōu)質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)品C.由題干信息可推知發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營養(yǎng)成分的比例D.在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵無需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件8、科研人員利用甲、乙兩種植物的各自優(yōu)勢，通過植物細(xì)胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物的過程中，相關(guān)操作不合理的是（）A.利用胰蛋白酶分別處理甲、乙植物以獲得原生質(zhì)體B.利用電激或滅活的病毒誘導(dǎo)甲、乙原生質(zhì)體的融合C.利用秋水仙素誘導(dǎo)組織培養(yǎng)中愈傷組織細(xì)胞壁再生D.將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株9、下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過程，在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會以隨機(jī)方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?，F(xiàn)檢測細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上D.胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上10、研究人員用無機(jī)鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關(guān)表述正確的是（）A.培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對微生物的生長越有利B.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤D.相對于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌11、在中國的傳說中，醋最早是由“酒圣”杜康之子發(fā)明。杜康的兒子墨塔在-．次釀酒時發(fā)酵過頭，直至第21天開缸時，發(fā)現(xiàn)酒液已變酸，但香氣撲鼻，且酸甜可口，于是墨塔便把“廿一日”加一“西”字，給這種酸水起名為“醋”。下列敘述正確的是（）A.酒發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量增殖B.酒精是在酵母菌細(xì)胞的線粒體中產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測C.墨塔釀酒反成醋的原因可能是發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)或發(fā)酵裝置沒有清洗干凈D.釀酒時糖類未耗盡，酵母菌的發(fā)酵也會停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多12、全球首個鼻噴新冠肺炎疫苗已獲準(zhǔn)臨床試驗(yàn)，該疫苗是在流感病毒載體上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒載體疫苗，模擬呼吸道病毒天然感染途徑，激活局部免疫應(yīng)答和全身性免疫應(yīng)答，從而發(fā)揮保護(hù)作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.疫苗制備過程中，對流感病毒進(jìn)行改造利用的原理是基因突變B.從接種方式來看，該疫苗的優(yōu)點(diǎn)是通過鼻噴接種，無針、無痛C.該疫苗需侵入人體細(xì)胞中經(jīng)基因表達(dá)后才能發(fā)揮作用D.該疫苗可通過激活淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)13、動物基因工程：______。14、去除DNA中的雜質(zhì)，可以在濾液中加入2mol/L濃度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再調(diào)節(jié)NaCL溶液濃度為0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用濃度為2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________15、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。16、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細(xì)胞融合前需用______和______除去細(xì)胞壁17、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()評卷人得分四、判斷題(共4題，共40分)18、目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯誤19、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。()A.正確B.錯誤20、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。（選擇性必修3P111）()A.正確B.錯誤21、我國對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)22、某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基；成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題。

（1）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是__________，這種培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的__________。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”呼吸作用的類型是__________。

（3）在上述實(shí)驗(yàn)操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是__________。

（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時，常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種，此過程中所用的接種工具是__________，操作時采用__________滅菌的方法。

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是____________________。

（6）某同學(xué)計劃統(tǒng)計污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用104、105、106倍稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實(shí)驗(yàn)的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對照實(shí)驗(yàn)是__________，此對照實(shí)驗(yàn)的目的是____________________。23、單克隆抗體在防治H7N9型禽流感上具有顯著療效。下圖是科研人員制備H7N9病毒的單克隆抗體X的過程?；卮鹣铝袉栴}：

（1）上圖中B淋巴細(xì)胞是取自______________的動物或人。融合的M細(xì)胞先用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_______________以得到符合要求的N細(xì)胞，N細(xì)胞的名稱是______________。

（2）為了進(jìn)一步研究H7N9病毒的單克隆抗體X（以下簡稱抗體X）的效果及作用機(jī)制；科學(xué)家開展了如下實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)一：在體外將抗體X與HA蛋白（H7N9病毒表面的一種蛋白）混合，檢測抗體X對HA蛋白的親和力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。（注：KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；機(jī)體Y為一種已知的H7N9病毒的抗體。）。抗體種類KD抗體X5．32×10-9M抗體Y1．95×10-9M

實(shí)驗(yàn)二：以一定濃度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分別注射一定劑量的抗體X；Y；14天后測定小鼠存活情況和體重變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y。

①實(shí)驗(yàn)一結(jié)果表明：對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是__________。

②分析實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二的結(jié)果差異，研究人員提出假說：抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細(xì)胞表面的受體相結(jié)合，從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，進(jìn)而清除被病毒感染的靶細(xì)胞。請以巨噬細(xì)胞、感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)液、抗體X、抗體Y和無關(guān)抗體等為材料，設(shè)計實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證上述假說。寫出實(shí)驗(yàn)思路__________。24、科研人員進(jìn)行了土壤中某種固氮菌的分離和純化培養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)流程如圖1所示。農(nóng)藥；除草劑的長期使用，會使土壤受到嚴(yán)重污染。某科研小組為篩選能分解除草劑草甘膦的微生物，其流程示意圖如圖2所示。回答下列問題：

(1)圖1中，“？”處是__________，純化培養(yǎng)時采用的接種方法是_______________，該方法可用于菌落數(shù)的統(tǒng)計，原因是_________________________。

(2)圖1中純化培養(yǎng)所利用的培養(yǎng)基在營養(yǎng)成分和物理性質(zhì)上的特點(diǎn)分別是____________________，圖1和圖2中的兩個培養(yǎng)基在用途方面的共同點(diǎn)是____________________。

(3)圖2中的接種方法需要連續(xù)劃線，且除第一次劃線外，后面的每一次劃線都要從上一次劃線的末端開始，目的是_________________。結(jié)果有的菌落周圍有透明圈而有的沒有，原因是________________。評卷人得分六、綜合題(共2題，共8分)25、CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可以按照人們的意愿精準(zhǔn)剪切；改變?nèi)我獍谢虻倪z傳信息；對該研究有突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家被授予2020年諾貝爾化學(xué)獎。科學(xué)家正設(shè)想利用基因編輯技術(shù)將豬基因組中“敲入”某種調(diào)節(jié)因子，抑制抗原決定基因的表達(dá)，培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的豬器官，解決人類移植器官短缺的難題。請回答下列問題：

（1）欲獲得大量的調(diào)節(jié)因子；可以利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。在PCR反應(yīng)體系中需要加入一定的Taq酶和足量的引物（循環(huán)次數(shù)越多，引物加入量越大）等，引物需要足量的原因是_____。

（2）CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)中；SgRNA是根據(jù)靶基因設(shè)計的引導(dǎo)RNA，準(zhǔn)確引導(dǎo)Cas9切割與SgRNA配對的靶基因DNA序列，由此可見，Cas9在功能上屬于_____酶，切割的是DNA中的_____鍵。

（3）在相關(guān)實(shí)驗(yàn)過程中；為了確認(rèn)豬細(xì)胞中抗原決定基因是否表達(dá)出蛋白質(zhì)，常用的檢測方法是_____。若檢測結(jié)果為_____，則表明調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用。

（4）將含有調(diào)節(jié)因子的豬細(xì)胞在體外培養(yǎng)時；會出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象。為了使細(xì)胞更好地貼壁生長，要求培養(yǎng)瓶內(nèi)表面_____。

（5）為了獲得沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因豬，需要將調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用的豬細(xì)胞的細(xì)胞核移入_____中，用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成_____，再進(jìn)行胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。26、多不飽和脂肪酸（PUFAs）是人體必需脂肪酸；豬肉是我國最主要的肉類消費(fèi)品，提高其PUFAs含量對居民健康具有重要意義。為解決豬肉中PUFAs含量不足的問題，研究者從線蟲中獲得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育轉(zhuǎn)fat1基因豬，操作過程如圖1。

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增fat1基因時，應(yīng)在兩種引物的一端分別加上限制酶_____和_____識別與切割的序列。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體一般選用兩種限制酶，選擇的原則是_____。

a；目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中有兩種限制酶切割位點(diǎn)。

b；表達(dá)載體內(nèi)；每種限制酶只有一個切割位點(diǎn)。

c；酶切后；目的基因兩端的黏性末端序列相同。

d；酶切后；載體形成的兩個黏性末端序列不同。

(2)圖1中的連接產(chǎn)物需先導(dǎo)入大腸菌中的原因是_____；所構(gòu)建的重組基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有_____。

(3)將重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)染豬成纖維細(xì)胞，另設(shè)一組空白對照。48小時后于熒光顯微鏡下觀察到_____；說明轉(zhuǎn)染成功。然后以轉(zhuǎn)基因細(xì)胞為核供體構(gòu)建克隆胚胎，最終獲得轉(zhuǎn)fat1基因豬。

(4)研究者提取轉(zhuǎn)基因豬的基因組DNA，利用限制酶DraⅢ將其完全酶切并電泳分離。然后用探針通過_____的方法；檢測fat1基因是否成功整合在豬基因組DNA中，酶切方式及檢測結(jié)果如圖2。

①轉(zhuǎn)基因豬1、2、3中分別被轉(zhuǎn)入了_____個fat1基因。

②請解釋圖2檢測結(jié)果中4條雜交帶位置不同的原因：_____。

③該實(shí)驗(yàn)_____（填“能”或“不能”）說明成功培育轉(zhuǎn)基因豬，理由是_____。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

1；將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體．用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

2；植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）。

3；植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。

4；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

①基因工程的核心步驟是第二步；即構(gòu)建基因表達(dá)載體，①正確；

②利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時；需要對離體的莖尖；培養(yǎng)基等進(jìn)行消毒，不能進(jìn)行滅菌，否則會導(dǎo)致外植體失活，②錯誤；

③克隆羊的培育涉及細(xì)胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)；③正確；

④PCR技術(shù)需要利用高溫打開DNA雙鏈；④錯誤；

⑤利用體外受精；胚胎移植技術(shù)可以培育試管嬰兒；⑤錯誤；

⑥牛胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體；⑥正確；

綜上正確的選項(xiàng)有①③⑥；共三項(xiàng)，C正確，ABD錯誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】2、A【分析】【分析】

分析曲線圖可知，表示某動物細(xì)胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計結(jié)果．a(chǎn)b段表示活細(xì)胞和死細(xì)胞密度都在增加，bc段表示活細(xì)胞密度減少而死細(xì)胞密度增加；培養(yǎng)第6天時，活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)。

【詳解】

A；培養(yǎng)第6天時；活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)，A錯誤。

B；培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理；防止對實(shí)驗(yàn)造成污染，B正確；

C、曲線bc段表示活細(xì)胞密度減少而死細(xì)胞密度增加；產(chǎn)生的主要原因是培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等，C正確；

D；進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時；首先需要在等滲溶液中用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理新鮮的動物組織，但要注意酶溶液的濃度和處理時間，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備，雜交瘤（hybridoma）抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上；將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。

【詳解】

A；用動物細(xì)胞融合技術(shù)構(gòu)建雜交瘤細(xì)胞；制備單抗，A正確；

B；抗體屬于分泌蛋白；是雜交瘤細(xì)胞通過胞吐方式分泌到細(xì)胞外的，B正確；

C；抗體的產(chǎn)生；也就是蛋白質(zhì)合成過程需要消耗能量，由ATP水解提供的，C正確；

D；動物細(xì)胞胞吐方式運(yùn)輸?shù)牟灰欢ㄊ谴蠓肿游镔|(zhì)；比如氨基酸這種神經(jīng)遞質(zhì)，就是以胞吐方式釋放，但氨基酸不是大分子物質(zhì)，D錯誤。

故選D。4、A【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。醋酸菌是種好氧性細(xì)菌，只有當(dāng)氧充足時，才能進(jìn)行旺盛的生理活動。變酸的酒的表面觀察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。

【詳解】

A；水煮沸后直接用于浸曲；會使酵母菌失活，A錯誤；

B；在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中；酵母菌能大量繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制，B正確；

C、晾堂的目的是使酵母菌在O2充足的條件下大量繁殖；C正確；

D；酒精發(fā)酵實(shí)際上利用酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精的過程；而醋酸菌是需氧菌，無氧環(huán)境下不能生存，D正確。

故選A。5、C【分析】【分析】

過程①→②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建；過程②→③→④為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法），過程④→⑤為植物組織培養(yǎng)。

【詳解】

A；通過基因工程將甜菜紅素在棉花纖維中富集；創(chuàng)制出纖維呈粉紅色的棉花，可有效減少化學(xué)染料使用量，A正確；

B；過程①→②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建；完成該過程需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與，B正確；

C；在⑤的植株中檢測到甜菜紅素合成相關(guān)的基因；該基因不一定能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯，故檢測到甜菜紅素合成相關(guān)的基因粉紅色棉花不一定能培育成功，C錯誤；

D；過程④→⑤為植物組織培養(yǎng)；植物組織培養(yǎng)的原理是植物體細(xì)胞具有全能性，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

生物技術(shù)的安全性主要集中在生物安全；食物安全和環(huán)境安全三個方面。

【詳解】

A；生物武器威脅巨大；消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面，A正確；

B；我國對待克隆人的態(tài)度：堅(jiān)決反對克隆人；不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，B正確；

C；對囊胚進(jìn)行胚胎分割時；必須對內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，C錯誤；

D；胚胎工程繁育良種時；供體和受體母畜都要進(jìn)行同期發(fā)情處理，保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境，D正確；

故選C。二、多選題(共6題，共12分)7、A:C【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，為異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過程；B錯誤；

C；由題意可知“在其發(fā)酵過程中；發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，說明在發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營養(yǎng)成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌，在獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物的目的，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌；其發(fā)酵過程需要適宜的溫度和pH，所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D錯誤。

故選AC。8、A:B:C【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交的過程：在融合前需要使用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除植物的細(xì)胞壁；再用化學(xué)法（聚乙二醇）或物理法（振動；離心、電刺激）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，需要注意的是誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合時不用生物方法（滅活的病毒）；細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是融合細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁；獲得融合細(xì)胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株，故植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種。

【詳解】

A；由于植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠；根據(jù)酶的專一性特點(diǎn)，應(yīng)利用纖維素酶和果膠酶處理甲乙植物以獲得原生質(zhì)體，A錯誤；

B；滅活的病毒是誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的特有方法；不能用于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合，B錯誤；

C；秋水仙素可以抑制紡錘體的形成從而誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目加倍；不能用于誘導(dǎo)愈傷組織細(xì)胞壁的再生，C錯誤；

D；因本操作的目的是培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物；故將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株，屬于個體生物學(xué)水平的檢測，D正確。

故選ABC。9、A:C:D【分析】【分析】

分析題干信息：Ⅰ保留X；11號染色體；Ⅱ保留2、11號染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號染色體上。

【詳解】

A；動物細(xì)胞融合過程中；可以利用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進(jìn)細(xì)胞融合，A正確；

B；細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號染色體；故不會是鼠-鼠融合細(xì)胞，B錯誤；

CD；根據(jù)分析可知；芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上，胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。

故選ACD。10、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機(jī)鹽。

【詳解】

A；培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高會導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水；將出現(xiàn)失水過多而死亡的現(xiàn)象，對生長不利，A錯誤；

B；這種培養(yǎng)基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養(yǎng)基上正常存活，因此是一種選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤，C正確；

D；根據(jù)生物與其生存環(huán)境相適應(yīng)的特點(diǎn)；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。11、A:C:D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；酵母菌是兼性厭氧型微生物；所以發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量增殖，A正確；

B；酒精是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物；在酵母菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生，可以用酸性重鉻酸鉀試劑檢測酒精的產(chǎn)生，B錯誤；

C；酒變酸是醋酸桿菌發(fā)酵的結(jié)果；墨塔釀酒反成醋的原因可能是：發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)，發(fā)酵裝置沒有清洗干凈，導(dǎo)致醋酸菌混入發(fā)酵液中，C正確；

D；在釀酒的過程中；糖類即使未耗盡，酵母菌的發(fā)酵過程也會停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，對發(fā)酵起抑制作用，導(dǎo)致酵母菌發(fā)酵停止，D正確；

故選ACD。12、B:C:D【分析】【分析】

分析題文描述：題述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重組。疫苗屬于抗原，在抗原的刺激下，機(jī)體可以產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。特異性免疫包括體液免疫與細(xì)胞免疫。

【詳解】

A；該疫苗是在流感病毒載體上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是屬于基因重組，A錯誤；

B；鼻噴疫苗都配有鼻噴裝置；以鼻噴接種方式外用，是一種無針、無痛的接種方式，B正確；

C；該疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)表達(dá)產(chǎn)生蛋白質(zhì)后，才能發(fā)揮作用，C正確；

D；該疫苗可以侵入到人體細(xì)胞中；使機(jī)體既能產(chǎn)生細(xì)胞免疫，又能產(chǎn)生體液免疫，D正確。

故選BCD。三、填空題(共5題，共10分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不容的雜質(zhì)析出DNA過濾溶液中的雜質(zhì)DNA15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞膜流動性植物細(xì)胞全能性纖維素酶果膠酶17、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤。【解析】錯誤四、判斷題(共4題，共40分)18、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜，所以錯誤。19、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。20、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。故該說法正確。21、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。我國對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。

該說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)22、略

【分析】【分析】

微生物的培養(yǎng)；培養(yǎng)基的成分必須含有碳源；氮源、水和無機(jī)鹽。獲取純凈微生物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。

【詳解】

（1）本實(shí)驗(yàn)是分離出降解的有機(jī)化合物A的菌種；所以培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機(jī)化合物A的菌種，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）分析培養(yǎng)基的配方可知；該培養(yǎng)基由化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制而成，其他成分中為體現(xiàn)出提供碳源和氮源，因此化合物A為目的菌提供了碳源和氮源；在培養(yǎng)過程中應(yīng)該振蕩培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的類型是有氧呼吸。

（3）獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是無菌技術(shù)；防止外來雜菌入侵。

（4）平板劃線操作的工具是接種環(huán)；對于接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)該是灼燒滅菌。

（5））實(shí)驗(yàn)結(jié)束后；使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉，以殺死培養(yǎng)基上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

（6）實(shí)驗(yàn)設(shè)計過程應(yīng)遵循對照原則；該實(shí)驗(yàn)還應(yīng)增設(shè)一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照，以證明培養(yǎng)基制備是否被雜菌污染，檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌合格。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記無菌技術(shù)操作方法及接種微生物接種常用的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題?！窘馕觥亢Y選目的菌選擇化合物A有氧呼吸防止外來雜菌入侵接種環(huán)灼燒防止造成環(huán)境污染不接種的空白培養(yǎng)基檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌合格23、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：小鼠骨體瘤細(xì)胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合；M表示融合細(xì)胞，N表示篩選出的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）分析題圖：小鼠骨體瘤細(xì)胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，M表示融合細(xì)胞，N表示篩選出的雜交瘤細(xì)胞；B淋巴細(xì)胞是取自感染H7N9病毒的動物或人；隨后將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，對融合后的細(xì)胞用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，挑選出B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞，然后再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，以得到符合要求的N細(xì)胞，N細(xì)胞的名稱是雜交瘤細(xì)胞；

（2）①據(jù)題中圖表分析，KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；抗體Y的KD值小于抗體X的KD值，故對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y；

②抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y，但對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y，驗(yàn)證抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細(xì)胞表面的受體相結(jié)合，從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，進(jìn)而清除被病毒感染的靶細(xì)胞，需要進(jìn)行抗體X和抗體Y的對照實(shí)驗(yàn)，并與無關(guān)抗體進(jìn)行比較，可以將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A；B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中；并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比。

【點(diǎn)睛】

對單克隆抗體制備流程、抗體效果檢測原理和實(shí)驗(yàn)?zāi)康募坝闷返姆治?，是解決本題的關(guān)鍵?！窘馕觥竣?感染過H7N9病毒②.抗體檢測③.雜交瘤細(xì)胞④.Y⑤.將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A、B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中，并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比。24、略

【分析】【分析】

將微生物接種到固體培養(yǎng)基常用稀釋涂布平板法；接種前先要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在一定的稀釋度的菌液里，聚集在一起的微生物能分散成單個細(xì)胞，在適宜的條件下培養(yǎng)讓菌體進(jìn)行繁殖，能夠在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。稀釋涂布平板操作：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡。②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡冷卻8-10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基上，涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。

【詳解】

（1）圖1中是將土壤懸浮液取1mL；加入9mL無菌水進(jìn)行稀釋10倍。圖1中微生物接種方式為稀釋涂布平板法。該方法可以用于對菌落數(shù)進(jìn)行計數(shù)，因?yàn)楫?dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面可以獲得由單個細(xì)菌繁殖而成的單菌落，通過統(tǒng)計菌落的數(shù)量可以推測所涂菌液中細(xì)菌的數(shù)量。

（2）土壤中某種固氮菌的分離和純化培養(yǎng)；培養(yǎng)基需要采用固體培養(yǎng)基，才可用于稀釋涂布平板法，且因?yàn)槭欠蛛x固氮菌，所以培養(yǎng)基中不加氮源。圖1和圖2中的兩個培養(yǎng)基都是用于從多種微生物中分離目的菌種。

（3）圖2中接種方法為平板劃線法，且除第一次劃線外，后面的每一次劃線都要從上一次劃線的末端開始，目的是將聚集的菌種逐步稀釋，分散到培養(yǎng)基表面，最終達(dá)到分離的效果。圖2中培養(yǎng)基時為了篩選出能分解除草劑草甘膦的微生物，所以有的菌落中的細(xì)菌能分解草甘膦，菌落周圍因?yàn)椴莞熟⒈环纸舛霈F(xiàn)透明圈，有的菌落中的細(xì)菌不能分解草甘膦，菌落周圍不能形成透明圈?！窘馕觥?1)無菌水稀釋涂布平板法當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面可以獲得由單個細(xì)菌繁殖而成的單菌落，通過統(tǒng)計菌落的數(shù)量可以推測所涂菌液中細(xì)菌的數(shù)量。

(2)沒有氮源；屬于固體培養(yǎng)基從多種微生物中分離出目的菌。

(3)將聚集的菌種逐步稀釋，分散到培養(yǎng)基表面，最終達(dá)到分離的效果有的菌落中的細(xì)菌能分解草甘膦，菌落周圍因?yàn)椴莞熟⒈环纸舛霈F(xiàn)透明圈，有的菌落中的細(xì)菌不能分解草甘膦，菌落周圍不能形成透明圈六、綜合題(共2題，共8分)25、略

【分析】【分析】

1；PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因：

（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制；

（2）過程：第一步：加熱至90～95℃；DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。

2；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）PCR擴(kuò)增時需要根據(jù)目的基因的一段核苷酸序列設(shè)計一對引物；每一條子鏈的形成都需要一個引物，這個引物就成為子鏈的一部分，不能再重復(fù)利用，因此在PCR反應(yīng)體系中需要加入足量的引物。

（2）根據(jù)題干信息可知；Cas9能切割與SgRNA配對的特定靶基因DNA序列，Cas9在功能上屬于限制性核酸內(nèi)切酶，切割的是DNA中的磷酸二酯鍵。

（3）檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)；常用原-抗體雜交技術(shù)，若沒有出現(xiàn)雜交帶，則說明抗原決定基因被抑制沒有表達(dá)，進(jìn)而表明調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用。

（4）為了使細(xì)胞更好地貼壁生長；在培養(yǎng)時要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑；無毒，易于貼附。

（5）為了獲得沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因豬；需要將調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用的豬細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中，用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程（分裂和分化），再進(jìn)行胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。

【點(diǎn)睛】

本題綜合考查PCR技術(shù)，基因工程和細(xì)胞工程的知識，考生需要識記PCR技術(shù)和基因工程的基本操作，意在考查考生運(yùn)用所學(xué)基礎(chǔ)知識，結(jié)合所學(xué)知識解決相關(guān)的生物學(xué)問題的能力?！窘馕觥棵恳粭l子鏈的形成都需要一個引物，這個引物就成為子鏈的一部分，不能再重復(fù)利用限制性核酸內(nèi)切磷酸二酯抗原—抗體雜交沒有出現(xiàn)雜交帶光滑、無毒，易于貼附去核卵母細(xì)胞細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程（分裂和分化）26、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和