2025年牛津譯林版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年牛津譯林版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列關(guān)于生物工程發(fā)展中的科學(xué)史實(shí)或理論基礎(chǔ)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.我國(guó)成功培育的克隆猴適合用作研究人類(lèi)疾病的模型動(dòng)物B.體外成功培養(yǎng)神經(jīng)元為動(dòng)物細(xì)胞全能性提供了證據(jù)支持C.密碼子的通用性是轉(zhuǎn)基因得以實(shí)現(xiàn)的理論基礎(chǔ)之一D.DNA分子半保留復(fù)制機(jī)制是PCR技術(shù)的理論基礎(chǔ)2、英國(guó)科學(xué)家維爾穆特首次用羊的體細(xì)胞（乳腺細(xì)胞）成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，這一方法被稱(chēng)之為“克隆”，以下四項(xiàng)中與此方法在本質(zhì)上最相近的是（）A.將兔的早期胚胎分割后，分別植入兩只母兔子宮內(nèi)，并最終發(fā)育成兩只一樣的兔子B.將人抗病毒基因嫁接到煙草DNA分子上，培育出具有抗病毒能力的煙草新品種C.將鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D.將人的精子與卵細(xì)胞在體外受精，待受精卵在試管內(nèi)發(fā)育到囊胚期時(shí)，再植入女性子宮內(nèi)發(fā)育成“試管嬰兒”3、下列關(guān)于生物武器的敘述中，不正確的是（）A.《禁止生物武器公約》已于1975年3月生效B.經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌可用于制造生物武器C.生物武器比其它先進(jìn)武器更昂貴，技術(shù)更復(fù)雜D.生物武器一但使用，將大規(guī)模殺傷軍隊(duì)和平民4、Sanger法（雙脫氧鏈終止法）是核酸序列測(cè)定的一種方法。實(shí)驗(yàn)所用的反應(yīng)體系包括待測(cè)序的單鏈DNA模板；引物、四種脫氧核苷酸（其中一種用放射性同位素標(biāo)記）和DNA聚合酶。整個(gè)實(shí)驗(yàn)分為四組；每組按一定比例加入一種底物類(lèi)似物（ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP），它能隨機(jī)摻入合成的DNA鏈，一旦摻入后DNA合成立即終止，獲取DNA片段的電泳（其分離原理僅依據(jù)分子量大小）結(jié)果如圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是。

A.該測(cè)定過(guò)程需要借助PCR技術(shù)完成B.圖中①②處分別為ddTTP和ddATPC.據(jù)圖可知，本次測(cè)序凝膠電泳的方向?yàn)閺纳贤翫.終止DNA合成的原因是底物類(lèi)似物不能與下一個(gè)脫氧核苷酸形成磷酸二酯鍵5、從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程如圖所示，表中記錄了在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

稀釋度（倍）106107108平板123123123平板菌落數(shù)（個(gè)）432421445786774968

注：表中各平板上均接種稀釋土壤樣品溶液0.1mLA.取土樣時(shí)用的鐵鏟和取樣紙袋在使用前都需要滅菌B.進(jìn)行逐級(jí)稀釋操作時(shí)不需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行C.培養(yǎng)基①②的作用分別是篩選和鑒定D.應(yīng)選擇稀釋度為107倍的平板估算土壤樣品中細(xì)菌數(shù)6、如下圖所示，a表示現(xiàn)代生物工程技術(shù)，b表示其結(jié)果；下面說(shuō)法正確的是（）

A.如果a是核移植技術(shù)，b的產(chǎn)生說(shuō)明了動(dòng)物細(xì)胞具有全能性B.如果a是體外受精技術(shù)，則形成的b屬于克隆動(dòng)物C.如果a是胚胎分割技術(shù)，b中個(gè)體的基因型和表型一定相同D.如果a是基因工程，b是乳腺生物反應(yīng)器，則需對(duì)移植的胚胎進(jìn)行性別選擇7、科學(xué)家體外誘導(dǎo)小鼠的成纖維細(xì)胞，使其具有很高的全能性，并稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱(chēng)iPS細(xì)胞）。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.iPS細(xì)胞類(lèi)似于胚胎干細(xì)胞，具有分化成各種組織或器官的潛能B.iPS細(xì)胞若來(lái)源于病人自身的細(xì)胞，將其移植回病人體內(nèi)可避免免疫排斥反應(yīng)C.iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞且安全無(wú)風(fēng)險(xiǎn)D.已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)，將人凝血因子基因?qū)肷窖虻氖芫阎校嘤錾窖蛉橄偕锓磻?yīng)器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入山羊的受精卵B.在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他細(xì)胞C.人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAD.科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因重組在一起，從而使人凝血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)9、哺乳動(dòng)物的造血干細(xì)胞具有以下哪些性質(zhì)？（）A.分化為骨骼肌細(xì)胞B.分化為紅細(xì)胞C.分化為嗜中性粒細(xì)胞D.分化為神經(jīng)細(xì)胞10、近年來(lái)；全人源化單克隆抗體技術(shù)發(fā)展迅速，利用轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)進(jìn)行全人源化單克隆抗體的制備流程如圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）

A.該技術(shù)能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應(yīng)B.過(guò)程①②采用核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性C.過(guò)程⑧要經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選、克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)等過(guò)程D.體外培養(yǎng)B細(xì)胞也可以大量獲得針對(duì)該抗原的單克隆抗體11、人群中有部分人體內(nèi)缺乏乳糖分解酶,飲用鮮牛奶后會(huì)導(dǎo)致腸胃不適；消化不良?！暗腿樘悄膛！钡恼Q生,有望給患有“乳糖不耐癥”的人群提供“放心奶”。如圖是“低乳糖奶牛”的培育過(guò)程,相關(guān)敘述不正確的是（）

A.犢牛的性狀和黑白花奶牛的性狀完全一致B.卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期然后用離心法去核C.犢牛的出生體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性D.體細(xì)胞核移植技術(shù)可用于人類(lèi)組織器官的移植和保護(hù)瀕危動(dòng)物12、利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中，然后通過(guò)核移植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程，下列敘述不正確的是（）

A.對(duì)1號(hào)豬使用促性腺激素處理，可使其超數(shù)排卵B.采集到的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期才能用于核移植C.產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來(lái)自2號(hào)與3號(hào)豬D.為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號(hào)豬并正常表達(dá)，可采用DNA測(cè)序的方法13、科學(xué)家在蛙的核移植實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，腸上皮核移植實(shí)驗(yàn)中有1％～2％能形成蝌蚪，囊胚核移植實(shí)驗(yàn)中有50％能形成蝌蚪或成蛙。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.核移植得到的重組細(xì)胞須立即移植到蛙體內(nèi)B.由于科技的進(jìn)步，用猴進(jìn)行體細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)的成功率與用蛙的相當(dāng)C.該實(shí)驗(yàn)說(shuō)明胚胎細(xì)胞分化程度較低，全能性的表達(dá)更容易D.核移植得到的克隆蛙的遺傳性狀與供核蛙的完全相同14、下圖為科學(xué)家培育克隆猴的基本步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性B.對(duì)A猴卵母細(xì)胞去核是為了保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來(lái)自B猴C.必須將重組細(xì)胞培育到一定程度后才能植入代孕動(dòng)物體內(nèi)D.A猴的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)B猴體細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。16、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③______。17、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的____________條件下，將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免__________________的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。18、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就______，稱(chēng)為_(kāi)_____。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面______時(shí)，細(xì)胞就會(huì)_____，這種現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi)_____。19、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過(guò)蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請(qǐng)教或通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____評(píng)卷人得分四、判斷題(共3題，共12分)20、胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯(cuò)誤21、如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因源于自然界，則不會(huì)存在安全性問(wèn)題。()A.正確B.錯(cuò)誤22、中國(guó)政府禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共16分)23、普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱；有人將地衣芽孢桿菌的a-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過(guò)程如圖甲所示）。請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）圖甲中為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以______________作為唯一碳源。②③過(guò)程需重復(fù)幾次，目的是______________。

（2）某同學(xué)嘗試過(guò)程③的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是_____________；推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是___________________________。

（3）以淀粉為原料，用等量的工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵一段時(shí)間，接種_____________菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是______________。

（4）用凝膠色譜法分離a-淀粉酶時(shí)，在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量較_____________。24、如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的一些重要操作示意圖；請(qǐng)分析回答有關(guān)問(wèn)題：

（1）正確的操作順序是_______________________（用字母和箭頭表示）。

（2）圖中C、E步驟都加入了蒸餾水，但其目的不同，分別是_______________________和_______________________。

（3）為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可將其溶解后，滴加________________試劑后沸水浴加熱，如果出現(xiàn)___________________；則證明該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是_________________________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共20分)25、2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了兩位開(kāi)發(fā)出CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的科學(xué)家；該技術(shù)在實(shí)體瘤研究中得到廣泛應(yīng)用。

（1）Cas9是一種來(lái)自細(xì)菌的核酸內(nèi)切酶；由相關(guān)基因指導(dǎo)在_____上合成，它與sgRNA構(gòu)成的復(fù)合體能與DNA分子特定堿基序列結(jié)合，如圖1.作用原理是sgRNA與DNA單鏈進(jìn)行_____，并在PAM序列（幾乎存在于所有基因中）上游切斷DNA雙鏈的_____鍵。

（2）結(jié)直腸癌是常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤；研究發(fā)現(xiàn)APC基因發(fā)生突變引起的結(jié)腸和直腸腺瘤性息肉與結(jié)直腸癌密切相關(guān)。將_____基因及靶向小鼠APC基因的16號(hào)外顯子的雙鏈sgRNA拼接后形成_____與慢病毒載體結(jié)合，導(dǎo)入小鼠結(jié)腸細(xì)胞，獲得APC基因缺失的結(jié)腸細(xì)胞，通過(guò)粘膜注射，將APC基因缺失結(jié)腸細(xì)胞原位移植入免疫缺陷小鼠，生成腺瘤，獲得結(jié)直腸癌小鼠模型，請(qǐng)寫(xiě)出該模型的一種應(yīng)用_____。

（3）CRISPR/Cas9技術(shù)還可用于結(jié)直腸癌相關(guān)基因功能的研究。研究人員通過(guò)CRISPR/Cas9技術(shù)在人結(jié)腸癌細(xì)胞HRT18中敲除產(chǎn)促紅細(xì)胞生成素人干細(xì)胞A1受體基因（EPHA1基因）；進(jìn)行細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)。

注：細(xì)胞在新更換的培養(yǎng)基中無(wú)法增殖。

補(bǔ)充圖中步驟①_____；②_____，③_____。

由圖可知；與另外兩組相比，48h后c組細(xì)胞劃痕的寬度較_____，說(shuō)明_____。

（4）請(qǐng)寫(xiě)出CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)其他可能的一項(xiàng)應(yīng)用_____。26、科學(xué)家通過(guò)基因工程；培育出能抗棉鈴蟲(chóng)的植株——抗蟲(chóng)棉，其過(guò)程大致如下圖所示：

（1）上述基因工程的目的基因是________，細(xì)菌的基因之所以能在棉花細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，其原因是所有生物共用__________________________。

（2）上述基因工程中的核心步驟是__________________，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，該過(guò)程完成需要的兩種酶是_____________________。

（3）上述過(guò)程中，將目的基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)常用的方法是__________。目的基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是目的基因是否插入到受體細(xì)胞____________上，這需要通過(guò)檢測(cè)才能知道，檢測(cè)采用的方法是__________，若要檢測(cè)目的基因是否表達(dá)，用的方法是________________________。

（4）棉株細(xì)胞到抗蟲(chóng)棉幼苗必須有的兩個(gè)過(guò)程是____________和____________。

（5）轉(zhuǎn)基因食品帶來(lái)的安全問(wèn)題有_________________________________________。27、科學(xué)家利用RNA干擾原理發(fā)展出了寄主誘導(dǎo)的基因沉默（HIGS）技術(shù)；通過(guò)在植物細(xì)胞中產(chǎn)生小干擾RNA（siRNA）進(jìn)而靶向沉默病原菌的關(guān)鍵基因。當(dāng)病原菌侵染寄主植物時(shí)；植物寄主能將siRNA轉(zhuǎn)入病原菌細(xì)胞內(nèi)使其與靶基因的mRNA結(jié)合，并將后者進(jìn)行特異性的降解。由稻瘟菌引起的稻瘟病是水稻上危害最嚴(yán)重的病害之一，科研人員選取稻瘟菌的SEC11為靶基因（圖1），查找SEC11基因中最佳的干擾序列，并將該序列導(dǎo)入質(zhì)粒構(gòu)建SEC11基因的HIGS表達(dá)載體（圖2），然后將該載體導(dǎo)入水稻，檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因水稻植株對(duì)稻瘟病菌的抗性水平顯著升高。相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列及切點(diǎn)見(jiàn)圖3，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)siRNA轉(zhuǎn)入病原菌細(xì)胞內(nèi)可阻止目標(biāo)基因的__________過(guò)程。

(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)通常選用雙酶切，其好處是__________（至少答出兩點(diǎn)）。據(jù)圖可知，應(yīng)最好選擇__________切割質(zhì)粒，同時(shí)將兩種限制酶的識(shí)別序列分別加在引物1和引物2的__________端，經(jīng)過(guò)________次擴(kuò)增；在PCR體系中即可出現(xiàn)兩端帶上酶切序列的干擾序列。

(3)據(jù)圖可知，應(yīng)選SECl1基因中的__________區(qū)段作為干擾序列，原因是__________。

(4)通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將SECl1基因的HIGS表達(dá)載體導(dǎo)入水稻的愈傷組織，并用含有__________的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，由于__________，因此篩選出的愈傷組織不一定具有SEC11基因的干擾序列。28、科學(xué)家將CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)導(dǎo)入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒并進(jìn)行改造；通過(guò)同源重組實(shí)現(xiàn)目的基因的精確插入，利用該方法已培育出了耐寒的玉米新品種(轉(zhuǎn)入CXE-20耐寒基因)。下圖1表示構(gòu)建轉(zhuǎn)基因耐寒玉米重組質(zhì)粒的過(guò)程，其中Cas9-gRNA是CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)基因，HRA是抗除草劑基因，HR1和HR2是同源重組序列，圖2表示重組質(zhì)粒與受體細(xì)胞核DNA重組的過(guò)程。請(qǐng)回答問(wèn)題：

(1)過(guò)程①的原料是_______，需要_______催化。

(2)限制酶BamHⅠ、SacⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ的識(shí)別序列分別是GGATCC、GAGC.AAGCTT、GAATTC，過(guò)程①所用引物如下，則過(guò)程②使用的限制酶是_______和_______。

5′-CGCGAGCTCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3′

5′-CGGAATTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3′

(3)如圖表示Cas9-gRNA復(fù)合體切割DNA的示意圖，其靶序列是5′-CGAAAGCGTATCAGTATGCGTACGT-3′，根據(jù)圖中靶序列設(shè)計(jì)的gRNA中相應(yīng)序列是5′-_______-3′，Cas9-gRNA復(fù)合體切割DNA的_______鍵使其斷裂。

(4)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化玉米幼胚后，在培養(yǎng)基中加入_______篩選出導(dǎo)入目的基因幼胚。提取培養(yǎng)后的植株DNA，設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR、電泳，基因長(zhǎng)度及結(jié)果如下圖。設(shè)計(jì)引物的依據(jù)是_______，其中_______號(hào)玉米中成功插入了外源基因，研究人員認(rèn)為這些植株自交后會(huì)發(fā)生性狀分離，其判斷依據(jù)是_______。

參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

遺傳密碼的特性：

一；連續(xù)性。

編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列的各個(gè)三聯(lián)體密碼連續(xù)閱讀；密碼間既無(wú)間斷也無(wú)交叉。

二；簡(jiǎn)并性。

遺傳密碼中；除色氨酸和甲硫氨酸僅有一個(gè)密碼子外，其余氨基酸有2；3、4個(gè)或多至6個(gè)三聯(lián)體為其編碼。

三；通用性。

蛋白質(zhì)生物合成的整套密碼；從原核生物到人類(lèi)都通用。已發(fā)現(xiàn)少數(shù)例外，如動(dòng)物細(xì)胞的線粒體；植物細(xì)胞的葉綠體。密碼的通用性進(jìn)一步證明各種生物進(jìn)化自同一祖先。

四；擺動(dòng)性。

轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的tRNA的反密碼需要通過(guò)堿基互補(bǔ)與mRNA上的遺傳密碼反向配對(duì)結(jié)合；但反密碼與密碼間不嚴(yán)格遵守常見(jiàn)的堿基配對(duì)規(guī)律，稱(chēng)為擺動(dòng)配對(duì)。

五；方向性。

起始密碼總位于編碼區(qū)5′末端；而終止密碼位于3′末端，每個(gè)密碼的三個(gè)核苷酸也是5′至3′方向閱讀，不能倒讀。

【詳解】

A；人與猴的親緣關(guān)系較近；我國(guó)成功培育的克隆猴適合用作研究人類(lèi)疾病的模型動(dòng)物，A正確；

B；細(xì)胞全能性是指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后仍具有形成完整有機(jī)體的潛能或特性。體外成功培養(yǎng)神經(jīng)元不能為動(dòng)物細(xì)胞全能性提供了證據(jù)支持；B錯(cuò)誤；

C；蛋白質(zhì)生物合成的整套密碼；從原核生物到人類(lèi)都通用密碼子的通用性是轉(zhuǎn)基因得以實(shí)現(xiàn)的理論基礎(chǔ)之一，C正確；

D、pcr技術(shù)原理：DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈；在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子拷貝，D正確。

故選B。2、A【分析】【分析】

克隆原意是指以幼苗或嫩枝插條；以無(wú)性繁殖或營(yíng)養(yǎng)繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接；克隆是指生物體通過(guò)體細(xì)胞進(jìn)行的無(wú)性繁殖，以及由無(wú)性繁殖形成的基因型完全相同的后代個(gè)體組成的種群，通常是利用生物技術(shù)由無(wú)性生殖產(chǎn)生與原個(gè)體有完全相同基因組織后代的過(guò)程。

【詳解】

A；來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；因此胚胎分割可以看作動(dòng)物的無(wú)性繁殖或克隆，A正確；

B；將人抗病毒基因嫁接到煙草DNA分子上；采用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)，其原理是基因重組，不屬于克隆，B錯(cuò)誤；

C；將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞；雜交瘤細(xì)胞具備兩個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不屬于克隆，C錯(cuò)誤；

D；“試管嬰兒”是體外受精和胚胎移植形成的；屬于有性生殖，不是克隆，D錯(cuò)誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】3、C【分析】【分析】

生物武器種類(lèi)：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等．把這些病原體直接或者通過(guò)食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果．

生物武器的特點(diǎn)：1；單位面積效應(yīng)大；2、有特定的傷害對(duì)象；3、具有傳染性；4、危害時(shí)間久；5、不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；6、使用者本身易受傷害；7、生物武器造價(jià)低；技術(shù)難度不大，隱秘性強(qiáng)，可以在任何地方研制和生產(chǎn)．

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它們的生存、繁殖、死亡易受環(huán)境條件（如溫度）的影響．2、還受地形、風(fēng)向等多種條件影響．3、生物武器使用時(shí)不易控制，使用不當(dāng)可危害本方安全．

【詳解】

根據(jù)分析A；B、D都正確；

C；生物武器造價(jià)低；技術(shù)難度不大，隱秘性強(qiáng)，可以在任何地方研制和生產(chǎn)，C錯(cuò)誤。

故選C。4、B【分析】【分析】

基因檢測(cè)是指通過(guò)檢測(cè)生物體中的DNA序列，以了解生物體基因狀況的技術(shù)手段。Sanger雙脫氧鏈終止法是DNA測(cè)序的基本方法；其原理是：核酸模板在核酸聚合酶；帶有3′-OH末端的單鏈核苷酸引物、四種dNTP存在的條件下復(fù)制或轉(zhuǎn)錄時(shí)，如果在反應(yīng)系統(tǒng)中分別引人單一種類(lèi)的ddNTP（即2、3雙脫氧核苷三磷酸，在脫氧核糖的3′位置缺少一個(gè)羥基，故不能同后續(xù)的dNTP形成磷酸二酯鍵），只要ddNTP摻入鏈端，該鏈就停止延長(zhǎng)，鏈端摻入dNTP的片段可繼續(xù)延長(zhǎng)。

【詳解】

A；該過(guò)程需要借助DNA擴(kuò)增的技術(shù)和原理；故需要借助PCR技術(shù)完成，A正確；

B；結(jié)合題意“組按一定比例加入一種底物類(lèi)似物；它能隨機(jī)摻入合成的DNA鏈，一旦摻入后DNA合成立即終止”，且據(jù)圖可知，ddCTP會(huì)在C位點(diǎn)終止，ddGTP會(huì)在G位點(diǎn)終止，故①對(duì)應(yīng)的終止字母為A，故①為ddATP，同理②為ddTTP，B錯(cuò)誤；

C、Sanger法測(cè)序中；通過(guò)電泳將不同長(zhǎng)度的片段分開(kāi)，DNA片段越小，距離起點(diǎn)越遠(yuǎn)，故據(jù)圖可知，本次測(cè)序凝膠電泳的方向?yàn)閺纳贤?，C正確；

D；終止DNA合成的原因是底物類(lèi)似物的碳上不是羥基；不能與下一個(gè)脫氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯鍵，D正確。

故選B。5、B【分析】【分析】

稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的操作：a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確；一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=(c÷V)×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

A；為了防止雜菌污染；取土樣時(shí)用的鐵鏟和取樣紙袋在使用前都需要滅菌，A正確；

B；逐級(jí)稀釋操作應(yīng)在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行；以防止雜菌污染，B錯(cuò)誤；

C；據(jù)圖可知培養(yǎng)基①為選擇培養(yǎng)基；初步篩選的產(chǎn)脲酶細(xì)菌還應(yīng)該進(jìn)行鑒定，培養(yǎng)基②的作用是鑒定，C正確；

D、計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)選擇菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此應(yīng)選擇稀釋度為107倍的平板估算土壤樣品中細(xì)菌數(shù)；D正確。

故選B。6、D【分析】【分析】

體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是：將供體體細(xì)胞核導(dǎo)入受體去核卵母細(xì)胞；形成重組細(xì)胞，用電脈沖刺激形成早期胚胎，導(dǎo)入代孕母羊的子宮，妊娠；出生后即克隆動(dòng)物。胚胎移植概念：是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體叫供體（遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀），接受胚胎的個(gè)體叫受體（有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力）。

【詳解】

A、如果a是核移植技術(shù)，b的產(chǎn)生說(shuō)明了動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；A錯(cuò)誤；

B、如果a是體外受精技術(shù)，則形成的b屬于有性生殖產(chǎn)生的動(dòng)物；B錯(cuò)誤；

C、如果a是胚胎分割技術(shù)，b中個(gè)體的基因型一定相同；表型由于受到環(huán)境影響不一定相同，C錯(cuò)誤；

D、如果a是基因工程，b是乳腺生物反應(yīng)器；目的基因表達(dá)的產(chǎn)物在雌性動(dòng)物的乳汁中提取，則需對(duì)移植的胚胎進(jìn)行性別選擇，D正確。

故選D。7、C【分析】【分析】

科學(xué)家已嘗試采用多種方法來(lái)制備iPS細(xì)胞；包括借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中，直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來(lái)誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的，后來(lái)發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞；B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。

【詳解】

A；iPS細(xì)胞全稱(chēng)為誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞；是由體細(xì)胞誘導(dǎo)而成的干細(xì)胞，具有和胚胎干細(xì)胞類(lèi)似的發(fā)育的全能性，具有分化成各種組織或器官的潛能，A正確；

B；iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞；將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，B正確；

C；誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱(chēng)iPS細(xì)胞）優(yōu)勢(shì)：誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)須破壞胚胎；應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞，但也存在一些安全性問(wèn)題，C錯(cuò)誤；

D；iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的；后來(lái)發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞，D正確。

故選C。二、多選題(共7題，共14分)8、B:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物：

(1)基因來(lái)源：藥用蛋白基因+乳腺組織特異性表達(dá)的啟動(dòng)子(原理：基因的選擇性表達(dá))。

(2)成果：乳腺生物反應(yīng)器。

(3)過(guò)程：將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，最終培育的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，可以通過(guò)分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物。(只有在產(chǎn)下雌性動(dòng)物個(gè)體中，轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá))。

【詳解】

A；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；因此可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵，A正確；

B；在該轉(zhuǎn)基因羊中；人凝血因子存在于所有細(xì)胞中，但只在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C；人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后；RNA聚合酶以DNA分子一條鏈為模板合成mRNA，C錯(cuò)誤；

D；科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；從而使人凝血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)，D錯(cuò)誤。

故選BCD。9、B:C【分析】【分析】

該題主要考察了細(xì)胞的分化；干細(xì)胞是一類(lèi)仍然保留有分裂和分化能力的細(xì)胞，其可以分為全能干細(xì)胞；多能干細(xì)胞和專(zhuān)能干細(xì)胞，其中造血干細(xì)胞屬于多能干細(xì)胞。

【詳解】

造血干細(xì)胞屬于多能干細(xì)胞；其可以分化為血液中的多種細(xì)胞，例如紅細(xì)胞；血小板和白細(xì)胞，白細(xì)胞包括嗜中性粒細(xì)胞，B、C正確；骨骼肌細(xì)胞不是造血干細(xì)胞分化來(lái)的，神經(jīng)細(xì)胞是由神經(jīng)干細(xì)胞分化而來(lái)，A、D錯(cuò)誤；

故選BC。10、A:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞，將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；利用轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)進(jìn)行全人源化單克隆抗體；能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應(yīng)，A正確；

B；過(guò)程①②利用的是轉(zhuǎn)基因技術(shù)；B錯(cuò)誤；

C；融合后的細(xì)胞需要用選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞；還要經(jīng)過(guò)克隆化培養(yǎng)、（專(zhuān)一性）抗體檢測(cè)等，C正確；

D；B細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下不能無(wú)限增殖；體外培養(yǎng)B細(xì)胞不能獲得大量的單克隆抗體，D錯(cuò)誤。

故選AC。11、A:B【分析】分析題圖：圖示為“低乳糖奶?！钡呐嘤^(guò)程；首先采用基因工程技術(shù)將“乳糖分解酶基因”導(dǎo)入受體細(xì)胞，再采用核移植技術(shù)；早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；犢牛的細(xì)胞核基因來(lái)自黑白花奶牛；但其細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自卵母細(xì)胞，因此其性狀與黑白花奶牛的性狀不完全一致，A錯(cuò)誤；

B；核移植的受體細(xì)胞一般選用MⅡ期卵母細(xì)胞；進(jìn)行去核時(shí)，通過(guò)顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核，用微型吸管可一并吸出細(xì)胞核與第一極體，B錯(cuò)誤；

C；犢牛的出生屬于細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用；體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，C正確；

D；體細(xì)胞核移植技術(shù)可用于人類(lèi)組織器官的移植和保護(hù)瀕危動(dòng)物；D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】12、C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖示基因編輯豬培育過(guò)程涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)；核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將病毒外殼蛋白基因（目的基因）導(dǎo)入2號(hào)豬的體細(xì)胞核中，然后將2號(hào)豬的體細(xì)胞核移植到1號(hào)豬的去核卵母細(xì)胞中，再將重組細(xì)胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號(hào)豬的子宮中去，最后分娩產(chǎn)生了4號(hào)轉(zhuǎn)基因克隆豬。

【詳解】

A；對(duì)供體母豬使用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，A正確；

B；獲得的卵母細(xì)胞去核后；需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進(jìn)行核移植，B正確；

C；染色體位于細(xì)胞核；則產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來(lái)自于2號(hào)豬，C錯(cuò)誤；

D；為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否正常表達(dá)；可采用的方法是抗原-抗體雜交，D錯(cuò)誤。

故選CD。13、A:B:D【分析】【分析】

1.細(xì)胞核移植技術(shù)；是指將一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核移植至去核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。

2.高度分化的植物細(xì)胞具有全能性；已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。

【詳解】

A；蛙是體外受精；生殖發(fā)育過(guò)程都是在體外完成的，所以實(shí)驗(yàn)中用到核移植技術(shù)得到的重組細(xì)胞，不用移植到蛙體內(nèi)，A錯(cuò)誤；

B；蛙是體外受精；生殖發(fā)育過(guò)程都是在體外完成的，猴子是體內(nèi)受精、體內(nèi)發(fā)育的，用猴進(jìn)行體細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)的成功率與用蛙無(wú)可比性，B錯(cuò)誤；

C；題意顯示；腸上皮核移植實(shí)驗(yàn)中有1%～2%能形成蝌蚪，囊胚核移植實(shí)驗(yàn)中有50%能形成蝌蚪或成蛙，該實(shí)驗(yàn)說(shuō)明胚胎細(xì)胞分化程度較低，全能性的表達(dá)更容易，C正確；

D；蛙的性狀有些是核基因控制；有些是質(zhì)基因控制，核移植得到的克隆蛙的遺傳性狀與供核蛙的不完全相同，D錯(cuò)誤。

故選ABD。14、B:C:D【分析】【分析】

動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱(chēng)克隆動(dòng)物，克隆動(dòng)物的核基因完全來(lái)自供體動(dòng)物，而細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自受體細(xì)胞。核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，因?yàn)轶w細(xì)胞的全能性低于胚胎細(xì)胞。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)；不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，而是體現(xiàn)動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A錯(cuò)誤；

B；去除A猴卵母細(xì)胞的細(xì)胞核；目的是排除A猴核遺傳物質(zhì)的干擾，保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來(lái)自B猴，B正確；

C；必須將重組細(xì)胞培育到桑椹胚或囊胚階段后才能植入代孕動(dòng)物體內(nèi)；才可正常繼續(xù)發(fā)育，C正確；

D；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)；故體細(xì)胞的細(xì)胞核需移植到去核卵母細(xì)胞后才能表現(xiàn)出全能性，D正確。

故選BCD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫、16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】無(wú)菌毛霉其他菌種18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細(xì)胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細(xì)胞的接觸抑制。19、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過(guò)蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過(guò)程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥。【解析】根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥四、判斷題(共3題，共12分)20、A【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細(xì)胞，稱(chēng)為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)，為胚胎的發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)，故該表述正確。21、B【分析】【詳解】

來(lái)源于自然界的目的基因?qū)胫参矬w后，可能破壞原有的基因結(jié)構(gòu)，具有不確定性，外源基因也可能通過(guò)花粉傳播，使其他植物成為“超級(jí)植物"等，所以如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來(lái)源于自然界，也可能存在安全性問(wèn)題。本說(shuō)法錯(cuò)誤。22、A【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。治療性克隆：指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類(lèi)個(gè)體。中國(guó)政府：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆人。

【詳解】

據(jù)分析可知；中國(guó)政府禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆。

故正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共16分)23、略

【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖甲為可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種的培育過(guò)程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，是基因工程的關(guān)鍵步驟；②③表示分離純化工程酵母菌菌種。乙圖為稀釋涂布平板法得到的菌落，但是其菌落沒(méi)有均勻分布，說(shuō)明其涂布是不均勻的。

【詳解】

（1）該實(shí)驗(yàn)的目的是獲得可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種；因此其培養(yǎng)基應(yīng)該以淀粉為唯一碳源；②；③過(guò)程為分離純化工程酵母菌菌種，多次重復(fù)篩選可以提高分解淀粉能力強(qiáng)的工程酵母菌菌種的純度。

（2）圖乙顯示平板培養(yǎng)后；形成了多個(gè)菌落，因此該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；但是菌落分布不均勻，集中分布在一定區(qū)域，說(shuō)明是涂布不均勻?qū)е碌摹?/p>

（3）與普通酵母菌相比；在以淀粉為原料的培養(yǎng)條件下，工程酵母菌更能夠高效地利用淀粉，其分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力更強(qiáng)，呼吸作用產(chǎn)生二氧化碳速率更快，所以需要先排氣。

（4）凝膠色譜法分離的原理是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子；不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過(guò)的路程較短，移動(dòng)的速度較快；相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，通過(guò)的路程較長(zhǎng)，移動(dòng)的速度較慢。因此，在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量較小。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的基本步驟、微生物的培養(yǎng)和分離、蛋白質(zhì)的分離等相關(guān)知識(shí)，能夠根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆治雠囵B(yǎng)基成分，并能夠根據(jù)工程菌的特點(diǎn)分析其代謝情況。【解析】淀粉進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌（或高效利用利用淀粉的工程酵母菌）稀釋涂布平板法涂布不均勻工程酵母工程菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng)，工程菌呼吸強(qiáng)度大，產(chǎn)生CO2多小24、略

【分析】【分析】

1；利用動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理：①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的．當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低．利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液．利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水浴）會(huì)染成藍(lán)色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

2；利用動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)步驟是：①制備雞血細(xì)胞液；②提取雞血細(xì)胞和物質(zhì)，③細(xì)胞核物質(zhì)中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤過(guò)濾獲取紗布上的粘稠物，⑥D(zhuǎn)NA的再溶解，⑦加冷卻酒精使DNA析出，⑧二苯胺鑒定DNA分子。

【詳解】

（1）DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水；破碎細(xì)胞→過(guò)濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質(zhì)→DNA的析出→鑒定．所以正確的操作順序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破；釋放細(xì)胞核物質(zhì)；E步驟甲蒸餾水是降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出。

（3）鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA；可滴加二苯胺試劑，在沸水浴加熱的條件下如果出現(xiàn)藍(lán)色則該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是獲取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查DNA的粗提取和鑒定，要求考生識(shí)記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實(shí)驗(yàn)中采用的試劑及試劑的作用等，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，難度適中。【解析】C→B→E→D→A使雞血細(xì)胞吸水漲破，釋放出細(xì)胞核物質(zhì)降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出二苯胺藍(lán)色提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA六、綜合題(共4題，共20分)25、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）Cas9是一種來(lái)自細(xì)菌的核酸內(nèi)切酶；其成分是蛋白質(zhì)，由相關(guān)基因指導(dǎo)在核糖體上合成的。作用原理是sgRNA與DNA單鏈進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，并在PAM序列（幾乎存在于所有基因中）上游切斷DNA雙鏈的磷酸二酯鍵。

（2）研究發(fā)現(xiàn)APC基因發(fā)生突變引起的結(jié)腸和直腸腺瘤性息肉與結(jié)直腸癌密切相關(guān)；通過(guò)基因工程獲得結(jié)直腸癌小鼠模型的過(guò)程：將Cas9基因及靶向小鼠APC基因的16號(hào)外顯子的雙鏈sgRNA拼接后形成目的基因與慢病毒載體結(jié)合；導(dǎo)入小鼠結(jié)腸細(xì)胞，獲得APC基因缺失的結(jié)腸細(xì)胞，通過(guò)粘膜注射，將APC基因缺失結(jié)腸細(xì)胞原位移植入免疫缺陷小鼠，生成腺瘤，獲得結(jié)直腸癌小鼠模型。利用該模型小鼠可研究藥物對(duì)結(jié)直腸癌小鼠的治療效果，研究結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)理。

（3）根據(jù)圖2細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)流程；圖中①表示空質(zhì)粒；②表示胰蛋白酶、③表示貼壁。由圖3細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，與另外兩組相比，48h后c組細(xì)胞劃痕的寬度較小，說(shuō)明EPHA1基因可抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。

（4）CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)還可用于基因治療；動(dòng)植物品種改良等方面。

【點(diǎn)睛】

熟知基因工程的相關(guān)知識(shí)及其應(yīng)用是解答本題的關(guān)鍵，本題主要考查考生識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)并能靈活援用把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力?！窘馕觥亢颂求w堿基互補(bǔ)配對(duì)磷酸二酯Cas9目的基因研究藥物對(duì)結(jié)直腸癌小鼠的治療效果，研究結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)理空質(zhì)粒胰蛋白酶貼壁小EPHA1基因可抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞擴(kuò)散轉(zhuǎn)移基因治療、動(dòng)植物品種改良26、略

【分析】【分析】

1；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：

①農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物；對(duì)單子葉植物沒(méi)有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。

②轉(zhuǎn)化：目的基因插人Ti質(zhì)粒的T-DNA上導(dǎo)入農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→目的基因整合↓到植物細(xì)胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

2；目的基因的檢測(cè)和表達(dá)：

首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因；方法是采用DNA分子雜交(DNA-DNA)技術(shù)。

其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA；方法是采用分子雜交(DNA-RNA)技術(shù)。

最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)；方法是采用抗原-抗體雜交技術(shù)。

有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。如生物抗蟲(chóng)或抗病的鑒定等。

（1）

分析圖可知Bt毒蛋白基因是目的基因；細(xì)菌的基因之所以能在棉花細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，其原因是所有生物共用一套密碼子。

（2）

在基因工程中最核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，該過(guò)程完成需要的兩種酶分別是限制性核酸內(nèi)內(nèi)切酶；DNA連接酶。

（3）

由圖示可知；將目的基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這種導(dǎo)入方法經(jīng)濟(jì)有效。目的基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是目的基因是否插入到受體細(xì)胞內(nèi)的染色體上的DNA上，通過(guò)DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，就可知道目的基因是否插入到受體細(xì)胞內(nèi)的染色體上的DNA上。若要檢測(cè)目的基因是否表達(dá)，采用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（4）

由棉株細(xì)胞發(fā)育成為抗蟲(chóng)棉幼苗個(gè)體；需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其中必須經(jīng)過(guò)脫分化和再分化兩個(gè)過(guò)程。

（5）

轉(zhuǎn)基因食品帶來(lái)的安全問(wèn)題有：轉(zhuǎn)基因植物的DNA經(jīng)過(guò)重組后；有可能合成出對(duì)人體有直接毒性或潛在毒性的蛋白質(zhì)；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物所表達(dá)的某些蛋白質(zhì)，可能會(huì)潛移默化地影響人的免疫系統(tǒng)，從而對(duì)人體健康造成隱形的傷害，食用者在過(guò)了若干年或者一兩代，問(wèn)