2025年人教五四新版選修1生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教五四新版選修1生物下冊階段測試試卷973考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、圖是微生物平板劃線示意圖；劃線順序?yàn)?2345，下列說法正確的是（）

A.劃線操作需在火焰上進(jìn)行B.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落C.劃線結(jié)束后倒置培養(yǎng)，利于培養(yǎng)基中水分盡快揮發(fā)D.在12345區(qū)域中畫線前后都要對接種環(huán)滅菌2、發(fā)酵技術(shù)現(xiàn)在已經(jīng)在生產(chǎn)和生活中廣泛應(yīng)用，下列敘述正確的是A.腐乳制作中起主要作用的微生物代謝類型是異養(yǎng)需氧型，生殖方式是分裂生殖B.在果酒制作的后期，只需加入醋酸桿菌即可制作果醋C.在微生物的發(fā)酵過程中，所用原料中有機(jī)物的總量和種類都會減少D.在果酒果醋的發(fā)酵制作過程中生物間的關(guān)系有種內(nèi)互助、種內(nèi)斗爭、競爭等3、下列關(guān)于酶在生活中的應(yīng)用，敘述錯(cuò)誤的是（）A.溶菌酶能夠溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁，具有抗菌消炎的作用B.果膠酶能分解果肉細(xì)胞壁中的果膠，提高果汁產(chǎn)量C.相同溫度下加酶洗衣粉比普通洗衣粉去污能力更強(qiáng)D.利用脂肪酶處理廢油脂，既保護(hù)環(huán)境又使其合理利用4、下列關(guān)于傳統(tǒng)果酒、果醋和泡菜制作的說法中，正確的是（）A.只有在糖原和氧氣充足時(shí)，醋酸菌才能發(fā)酵產(chǎn)生醋酸B.在果酒發(fā)酵過程中，需要適時(shí)排出發(fā)酵裝置中的CO2C.在果醋和泡菜制作過程中，發(fā)酵液pH逐漸降低，在果酒制作過程中正好相反D.果酒、果醋和泡菜發(fā)酵的主要微生物均為原核生物5、下列有關(guān)血紅蛋白提取和分離的敘述，正確的是（）A.洗滌紅細(xì)胞的目的是除去血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽B.透析能使小分子自由出入，而將大分子保留在袋內(nèi)C.純化過程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來配制凝膠懸浮液D.蛋白質(zhì)的純化使用最多的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)6、菜籽粕含有35%～45%蛋白質(zhì)，是畜禽飼料的重要原料，但其中的單寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子限制了菜籽粕的應(yīng)用。研究者將不同菌種接種到菜籽粕與麩皮制成的固體培養(yǎng)基中發(fā)酵48h，測定菜籽粕中單寧的含量，結(jié)果如下圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.乳酸菌和黑曲霉菌均屬于原核生物B.為防雜菌污染，接種后需對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌C.黑曲霉菌對單寧的去除效果最為理想D.可用不接種微生物的固體培養(yǎng)基作對照組7、下列有關(guān)發(fā)酵工程及其應(yīng)用表述正確的是（）A.發(fā)酵工程的菌種，可以從自然界中篩選出來，也可以通過誘變育種和基因工程育種獲得B.發(fā)酵罐培養(yǎng)的環(huán)境條件會影響微生物的生長繁殖，不會影響微生物代謝產(chǎn)物的形成C.分離、提純產(chǎn)物可以獲得微生物細(xì)胞本身或者其代謝產(chǎn)物，這是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)D.發(fā)酵工程生產(chǎn)的各種各樣的食品添加劑可以增加食品營養(yǎng)，改善食品口味、色澤和品質(zhì)8、塑料是“白色污染”的“主要元兇”，降解塑料微生物的篩選有助于解決該難題。如圖1是研究人員從蠟螟消化道中分離高效降解聚乙烯細(xì)菌的操作流程，圖2是菌種篩選的結(jié)果。下列有關(guān)敘述正確的是（）

注：聚乙烯是某些塑料的主要成分，菌種篩選所用固體培養(yǎng)基中因含有聚乙烯微粒而不透明。A.應(yīng)選擇菌落A1進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)B.擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選擇固體培養(yǎng)基C.培養(yǎng)基中聚乙烯的作用是篩選目的菌和為目的菌提供碳源D.與焚燒相比，利用目的菌降解聚乙烯塑料具有不造成二次污染的優(yōu)點(diǎn)9、地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，這是因?yàn)樗麄兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。研究者從牛的瘤胃中篩選產(chǎn)生纖維酶的纖維素分解菌，其篩選過程如圖1所示。將丙中的菌懸液轉(zhuǎn)接于含有稻草作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用剛果紅處理，看到如圖2所示情況，下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.②過程是涂布器取乙中的菌液均勻的涂布在Ⅰ號培養(yǎng)表面B.甲、乙試管中的液體都屬于液體培養(yǎng)基，主要作用是稀釋菌種C.Ⅰ號、Ⅱ號培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基，配置時(shí)先滅菌后調(diào)節(jié)pHD.可挑取圖2中周圍出現(xiàn)透明圈的菌落，用平板劃線法繼續(xù)純化10、某研究性學(xué)習(xí)小組以葡萄為材料進(jìn)行果酒果醋發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.先隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵，然后供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵B.果醋發(fā)酵比果酒發(fā)酵所需的最適溫度要高C.接種量的多少對發(fā)酵速率和發(fā)酵產(chǎn)品的品質(zhì)沒有多大影響D.與自然發(fā)酵相比，人工接種的發(fā)酵實(shí)驗(yàn)獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好11、下列關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是（）A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分，利于毛霉生長B.勤向腐乳坯表面噴水，有利于毛霉菌絲的生長C.將長滿毛霉的豆腐塊放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些D.實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳不宜直接食用12、下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)儀器、材料的使用和實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.在解離液中加入適量的纖維素酶，有利于提高洋蔥根尖組織的解離效果B.制作泡菜時(shí)常將壇口用水封好，一段時(shí)間后水面會不斷出現(xiàn)氣泡C.使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，需先蓋上蓋玻片再滴培養(yǎng)液D.常溫下體積分?jǐn)?shù)為95％的酒精可以更好的析出雜質(zhì)較少的DNA評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)13、紅細(xì)胞的洗滌。

①目的：去除________。

②方法：采用________離心，如500r·min－1離心2min，然后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色______，將下層______的紅細(xì)胞液體倒入______，再加入五倍體積的________，緩慢攪拌________，低速短時(shí)間離心，如此重復(fù)洗滌三次，直至上清液中沒有______，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。14、為了加速膨脹，可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，這樣做的目的是___________15、固定化酶技術(shù)是指將酶固定在不溶于水的________上，使酶既能與_________接觸，又能與__________分離。16、橘皮在石灰水的浸泡時(shí)間為__________________以上，橘皮要浸透，這樣壓榨時(shí)不會滑脫，出油率____________，并且壓榨液的粘稠度不會太高，過濾時(shí)不會堵塞篩眼。17、新鮮的柑橘皮中含有大量的果蠟、果膠和水分，如果直接壓榨，出油率較低。為了提高出油率，需要將柑橘皮____________去水，并用______________浸泡。為了使橘皮油易于與水分離，還要分別加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0．25%的_____和5%的_______________，并調(diào)節(jié)pH至___________________。18、溫度和pH對酶活性的影響、探究果膠酶的用量注意：探究溫度的影響時(shí)，溫度設(shè)置可以選_____________為溫度梯度，設(shè)置：10℃、20℃、至60℃。也可以選5℃為溫度梯度。在混合果泥與果膠酶前，二者應(yīng)分別放在不同試管中_________處理，以保證底物與酶在混合時(shí)溫度是_________的。此實(shí)驗(yàn)中，溫度是______________，保持不變的有：果泥量、酶的濃度和用量、水浴時(shí)間和混合物的pH等所有其他條件不變。探究pH時(shí)，可將溫度梯度改成___________梯度，再選定一個(gè)適宜的____________即可。此實(shí)驗(yàn)中，不同pH梯度之間就是____________。可能通過測定濾出的_____________來判斷果膠酶的活性高低。因?yàn)樾》肿游镔|(zhì)可以通過濾紙，果膠酶活性越大，濾出的果汁的體積就越大。19、血紅蛋白的釋放。

將洗滌好的紅細(xì)胞倒入燒杯中，加________到________體積，再加40%體積的______，置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?0min。在________和________的作用下，紅細(xì)胞______，釋放出血紅蛋白。評卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共18分)20、某培養(yǎng)基可用于分離土壤中特定的微生物；成分見表。回答下列問題：

。葡萄糖。

K2HPO4

K2SO4

NaCl

CaCO3

MgSO4?7H2O

蒸餾水。

10g

0.2g

0.2g

0.2g

5g

0.2g

1000mL

（1）該培養(yǎng)基能為微生物提供的營養(yǎng)物質(zhì)是______。在該培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種等量稀釋的土壤浸出液；若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)______，則說明該培養(yǎng)基具有選擇作用。

（2）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是______；實(shí)驗(yàn)室中常使用______（設(shè)備）對培養(yǎng)基滅菌。為了獲得單個(gè)的菌落并計(jì)數(shù)，應(yīng)在該培養(yǎng)基中加入______并采用______法接種。

（3）恰當(dāng)?shù)南♂尪仁怯?jì)數(shù)成功的關(guān)鍵，若樣品濃度過高，會出現(xiàn)的問題是______。某同學(xué)將不同稀釋度的菌液均取n毫升，分別接種在多個(gè)平面上，進(jìn)行適宜條件的培養(yǎng)，待菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)記錄結(jié)果，得到m倍稀釋度的三個(gè)平板菌落數(shù)分別為32、42和52，則每升菌液中的細(xì)菌數(shù)為______個(gè)。21、酸奶是人們喜愛的一種飲品；為檢測市售的鮮牛奶是否適合用于制作酸奶，某實(shí)驗(yàn)小組研究了抗生素對乳酸菌的影響，并鑒別了市售酸奶中的菌種。

（1）將滅菌的濾紙圓片（大小相同）分別浸潤在經(jīng)過不同方法處理的牛奶中；一段時(shí)間后，取出濾紙圓片，放置在涂布了乳酸菌的平板上（如下圖），在37℃下培養(yǎng)24h。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表。

。組別。

牛奶處理方法。

抑菌圈寬度（mm）

1

含抗生素的消毒鮮牛奶。

4.5

2

不含抗生素的消毒鮮牛奶。

0

3

含抗生素的鮮牛奶。

4.6

4

不含抗生素的鮮牛奶。

0

5

待測奶樣。

5.8

通過1；3組實(shí)驗(yàn)可得出的結(jié)論為_______；通過3、4組實(shí)驗(yàn)可得出的結(jié)論為______；第5組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明；市售的鮮牛奶_______（填“適合”或“不適合”）用于制作酸奶。

（2）為鑒別市售酸奶中的菌種，應(yīng)該采用平板劃線法或______法，在________培養(yǎng)基上進(jìn)行接種，觀察所獲單菌落的特征進(jìn)行鑒定。還要對菌落中的菌種進(jìn)行涂片，并用________進(jìn)行進(jìn)一步觀察和鑒定。某同學(xué)在配制培養(yǎng)基時(shí)加入從而成功篩選出高效產(chǎn)生乳酸的菌株，其篩選依據(jù)的原理是_____________________。22、根據(jù)相關(guān)知識；回答關(guān)于下列果酒；果醋、腐乳和泡菜制作的相關(guān)問題：

（1）葡萄汁裝入瓶中時(shí)要留出大約1/3的空間。在以后的過程中，每隔12h左右將瓶蓋擰松一次（不是打開瓶蓋），此后再擰緊，這樣做的目的是________________。所使用的發(fā)酵液能使酵母菌生長繁殖而絕大多數(shù)其他微生物無法適應(yīng)，因?yàn)檫@種發(fā)酵液具有_____________________的特點(diǎn)。

（2）下面為腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程示意圖；據(jù)圖回答下列問題：

①圖中A代表________，其主要目的是_______________，同時(shí)還能___________________。

②在配制的鹵湯中酒的含量一般控制在________左右，酒精含量過高腐乳成熟時(shí)間將會________；酒精含量過低，______________；可能導(dǎo)致豆腐塊腐敗變質(zhì)。

（3）泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵過程即為乳酸菌進(jìn)行__________________的過程。評卷人得分五、非選擇題(共4題，共24分)23、請回答下列有關(guān)問題。

（1）辣椒中產(chǎn)生辣味的物質(zhì)是辣椒素；不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，可以用____的方法提取，其效率主要取決于______________，同時(shí)還受到原料顆粒的大??；緊密程度、含水量等條件的影響。

（2）在對具有優(yōu)良性狀的辣椒進(jìn)行組織培養(yǎng)；對培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí)，應(yīng)采取的滅菌方法是_________，外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是____，用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí)，常用的酶是___和纖維素酶。

（3）若組織培養(yǎng)過程中感染了某種霉菌；可采用___________法接種進(jìn)行分離并計(jì)數(shù)。與這種方法相比，顯微鏡直接計(jì)數(shù)的不足是__________________。

（4）使用以下微生物發(fā)酵生產(chǎn)特定產(chǎn)物時(shí)，所利用的主要微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌相同的是__。A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳24、乳酸菌等微生物與我們生活息息相關(guān)。請回答下列相關(guān)問題。

（1）若要純化培養(yǎng)乳酸菌，在配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，一般還要加入瓊脂，它是一種從紅藻中提取的多糖，加入瓊脂作為_______。在制作此培養(yǎng)基時(shí)還要滿足微生物對特殊營養(yǎng)物質(zhì)的需求，例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加_______，制備培養(yǎng)基的操作順序是：計(jì)算→稱量→_______→倒平板，培養(yǎng)基中的(NH4)2CO3是否能為乳酸菌提供碳源并說明原因___________________________。

（2）純化微生物時(shí)；可采用___________________兩種最常用的方法進(jìn)行接種。為了能鑒別乳酸菌菌落，往往在配制培養(yǎng)基時(shí)加入碳酸鈣，推測其原因是______________________________________。有些鑒別培養(yǎng)基可在培養(yǎng)基中加入指示劑，例如分解尿素的細(xì)菌在添加_____指示劑的培養(yǎng)基上會顯示出特定的顏色；在鑒定大腸桿菌時(shí)在培養(yǎng)基中加入_______。制作泡菜時(shí)，要檢測亞硝酸鹽的含量，其原理為在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生_____反應(yīng)，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成______色染料。純化后的菌可在-20℃長期保存時(shí)，應(yīng)采用______的方法對菌種進(jìn)行長期保藏。

（3）若甲同學(xué)選取一定體積的乳酸菌菌液，進(jìn)行梯度稀釋，若將103倍的稀釋樣液接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板上菌落數(shù)分別是200、180、220。如果需要據(jù)此計(jì)算出乳酸菌的密度，還需要知道的一個(gè)重要數(shù)據(jù)是_______。另一同學(xué)乙涂布了4個(gè)平板，數(shù)值為177,193,185；其中一個(gè)空白對照平板出現(xiàn)了12個(gè)菌落，乙同學(xué)將173（185-12）個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法是否正確，并說明你的原因。___________________________________________。25、在調(diào)查和分離湖水中耐鹽細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中；先將10升湖水水樣濃縮至10毫升，然后各取濃縮水樣1毫升，涂布到多個(gè)培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請回答：

（1）可以通過提高培養(yǎng)基中____的濃度，篩選被調(diào)查細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為____培養(yǎng)基。

（2）要提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應(yīng)該設(shè)置的對照組是____。為檢驗(yàn)（1）中篩選方法的效果，可以設(shè)置的對照組是____。

（3）在微生物的培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是____。為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長，需將培養(yǎng)皿____培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個(gè)菌落在生態(tài)學(xué)中可以被稱為____。

（4）根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)可以計(jì)算湖水中該種細(xì)菌的密度，但計(jì)算的數(shù)據(jù)要比實(shí)際活菌的數(shù)目少，原因是____。26、下圖為果酒的生產(chǎn)工藝流程簡圖；據(jù)圖回答問題。

選料→沖洗→①→滅菌→接種→發(fā)酵→②→果酒。

（1）流程中①；②處的內(nèi)容應(yīng)為___________、___________。

（2）果酒制作離不開___________；與醋酸菌相比，前者在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是___________。

（3）果酒制作過程中；接種完成后要先向發(fā)酵液中通入一段時(shí)間的無菌空氣，目的是___________。

（4）果酒制作是否成功；需發(fā)酵后用____溶液來鑒定，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)___________色。

（5）若是制作果醋時(shí)，需要在___________供應(yīng)和糖源充足時(shí)，醋酸菌將糖分解成醋酸；在糖源不充足時(shí)，也可以利用___________生成醋酸。評卷人得分六、綜合題(共4題，共36分)27、愛玉是臺灣特有的一種植物；愛玉子經(jīng)搓洗于水中后可制成好吃的愛玉凍，愛玉凍的主要成分為果膠。愛玉子也含有淀粉。請回答下列有關(guān)問題：

（1）愛玉制愛玉凍后的剩余物可制作果汁。將汁液用蛋白酶和纖維素酶處理后，發(fā)現(xiàn)汁液仍渾濁，同時(shí)還含有少量沉淀，此時(shí)可添加___________使果膠分解成可溶性的___________，再使用___________，使愛玉子中的淀粉分解，使果汁更加澄清。在生產(chǎn)過程中，須嚴(yán)格控制好_________________（答出2點(diǎn)即可）等條件。

（2）在生產(chǎn)中通過一種專門技術(shù)；能使α-淀粉酶被反復(fù)多次利用。已知α-淀粉酶的最適溫度為50℃。某同學(xué)為探究使用這種專門技術(shù)后，α-淀粉酶的最適溫度是否發(fā)生了改變，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)原理：

①海藻酸鈉在CaCl2溶液中可以交聯(lián)為網(wǎng)狀大分子；使酶被包埋于微格內(nèi)形成凝膠珠（可回收的酶）。

②α-淀粉酶活性的測定：直鏈淀粉遇I-KI溶液后會呈現(xiàn)藍(lán)色，可以采取比色法（比色法是利用被測溶液本身的顏色，或加入試劑后呈現(xiàn)的顏色，比較溶液顏色深度）定量測定______________________；以表示酶活性大小。

③比較凝膠珠與游離酶活性時(shí)，將二者在___________℃條件下進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)步驟：

①將α-淀粉酶制成凝膠珠并初步檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)制成的凝膠珠并未改變游離酶的活性。

②取試管若干分為兩組，每組再取若干試管分別放在30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃溫度條件下。向同一溫度條件下的試管中分別加入等量的___________進(jìn)行水浴保溫5min。

③把凝膠珠倒入相應(yīng)溫度的淀粉溶液中；充分混勻，在相應(yīng)的溫度下反應(yīng)5min。

④取出凝膠珠終止反應(yīng)并在4℃冰箱中儲存；以備下次使用。

⑤用比色法測定淀粉酶的活性。并以__________代替凝膠珠作為空白對照組；重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

以50℃時(shí)反應(yīng)測得的顏色為標(biāo)準(zhǔn)；測定各溫度條件下凝膠珠中酶的相對活性，結(jié)果如下圖。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：____________________________________________________。28、紙片擴(kuò)散法（K-B法）是藥敏試驗(yàn)的一種常用方法；其原理是將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間后在紙片周圍會形成透明的抑菌圈。請回答下列問題：

(1)藥敏試驗(yàn)的目的是_______，因變量是________。

(2)K-B法接種測試菌的方法是______，獲得純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_____。接種后的平板在培養(yǎng)時(shí)倒置的原因是______。

(3)某研究小組將含有相同濃度抗生素Ⅰ~Ⅳ的四個(gè)紙片分別貼放在生長有測試菌的瓊脂平板上，在合適的溫度條件下孵育16h，結(jié)果如圖所示。

MIC是藥敏試驗(yàn)中評價(jià)抗生素藥效的常用指標(biāo)，其定義為某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。對該測試菌而言，抗生素Ⅰ的MIC______（選填“大于”“小于”或“等于”）抗生素Ⅲ的MIC；在相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作均嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范的情況下，在含有抗生素Ⅳ的紙片周圍出現(xiàn)了較大的抑菌圈，但抑菌圈中存在有個(gè)別菌落。試對上述現(xiàn)象的成因做出分析：_____。29、在農(nóng)業(yè)用地中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解；長期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度一定，該除草劑的培養(yǎng)基不透明）。

(1).對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常采用的方法是_________________________

(2).要在長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從營養(yǎng)成分和用途分析，上述培養(yǎng)基應(yīng)該是___________固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑。培養(yǎng)基調(diào)節(jié)PH是在____________前進(jìn)行。

(3).在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明圈菌落利用的氮源主要是___________，有透明圈菌落利用的氮源主要是________________；據(jù)此可篩選出目的菌。

(4).為了計(jì)數(shù)微生物的數(shù)量，一位同學(xué)在4個(gè)平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0．1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為152、158、142、148個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為___________________。

(5).第二次及其以后劃線總從上次劃線的末端開始的原因是________________________。

(6).最后一次灼燒接種環(huán)的目的分別是什么？_______________________________________。30、貴州知名品牌“老干媽”系列產(chǎn)品一直沿用傳統(tǒng)工藝精心釀造；其中風(fēng)味豆豉深受大眾喜愛，遠(yuǎn)銷國內(nèi)外。風(fēng)味豆豉的主要工藝流程是：黃豆→洗凈浸泡→煮熟→加適量鹽→發(fā)酵→加入配料→裝壇密封→成品。請回答下列問題：

（1）黃豆煮熟的目的主要是破壞黃豆內(nèi)部結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，同時(shí)起到__________作用；如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵裝置內(nèi)上層黃豆的發(fā)酵效果比底層好，推測該發(fā)酵菌的新陳代謝類型是______________。

（2）制作豆豉前期發(fā)酵的目的是讓霉菌產(chǎn)生相應(yīng)的酶，如蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樾》肿与暮桶被?，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開_____________，使豆豉營養(yǎng)更加豐富，有利于健康。發(fā)酵過程中需采用人工培養(yǎng)純凈菌種，接種前隨機(jī)選取若干滅菌后的平板，先培養(yǎng)一段時(shí)間目的是_______________________________________。

（3）研究發(fā)現(xiàn)，適宜條件下，24h內(nèi)豆豉發(fā)酵效果與時(shí)間成正比，但無法確定發(fā)酵最佳時(shí)間，若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間，還需要做的事情是__________________________________________。

（4）豆豉制成成品后，需測定其亞硝酸鹽含量，原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與_____________發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成_____________色染料。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

劃線分離操作中的有關(guān)問題：

a；在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)；在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)。每次灼燒的目的：

。第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染或感染操作者b；在灼燒接種環(huán)之后；要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

c；在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時(shí)；要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。

【詳解】

A；劃線操作需在火焰旁進(jìn)行；而不是在火焰上，A錯(cuò)誤；

B；由題圖可知；5區(qū)域是最后一個(gè)區(qū)域，有可能在5區(qū)域獲得所需要的菌落，也可能在5區(qū)域之間就能獲得所需要的菌落，B錯(cuò)誤；

C；劃線結(jié)束后倒置培養(yǎng)；既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快的蒸發(fā)，C錯(cuò)誤；

D；在12345區(qū)域中畫線前后都要對接種環(huán)滅菌；D正確。

故選D。2、D【分析】【分析】

制作果酒的主要菌種是酵母菌；兼性厭氧型微生物；果醋發(fā)酵的菌種是醋酸菌，異養(yǎng)需氧型；腐乳制作的主要微生物是毛霉，異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

腐乳制作起主要作用的微生物是毛霉，生殖方式是孢子生殖，A錯(cuò)誤；果酒制作后期，需要打開發(fā)酵裝置的充氣口并適當(dāng)提高溫度，進(jìn)行果醋發(fā)酵，B錯(cuò)誤；微生物發(fā)酵過程中，有機(jī)物總量會減少，種類會增多，C錯(cuò)誤；果酒和果醋制作過程中，有種內(nèi)互助、種內(nèi)斗爭、競爭等，D正確。故選D。3、C【分析】【分析】

果膠是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一。

【詳解】

A；溶菌酶能夠溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁；具有抗菌消炎的作用，A正確；

B；果膠酶能分解果肉細(xì)胞壁中的果膠和胞間層的果膠；提高果汁產(chǎn)量，B正確；

C；酶具有專一性和高效性；在相同且適宜的條件下，加酶洗衣粉才能比普通洗衣粉去污能力更強(qiáng)，C錯(cuò)誤；

D；利用脂肪酶處理廢油脂；既保護(hù)環(huán)境又使其合理利用，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】

了解酶在生活中的應(yīng)用是解答本題的關(guān)鍵。4、B【分析】【分析】

1；在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖；再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖原時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。

【詳解】

A；當(dāng)氧氣、糖原充足時(shí)；醋酸菌可將葡萄中的糖分分解為醋酸；當(dāng)缺少糖原時(shí)和有氧條件下，醋酸菌可將乙醇（酒精）氧化成醋酸，A錯(cuò)誤；

B；果酒發(fā)酵過程中；酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生了酒精和二氧化碳，需要適時(shí)排出發(fā)酵裝置中的二氧化碳，以防止瓶子破裂，B正確；

C；在果醋和泡菜制作過程中；發(fā)酵液pH逐漸降低；在果酒發(fā)酵過程中，酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生了酒精和二氧化碳，其發(fā)酵液的pH也會逐漸降低，C錯(cuò)誤；

D；果酒發(fā)酵的主要微生物為酵母菌；屬于真核生物，D錯(cuò)誤。

故選B。5、B【分析】【分析】

蛋白質(zhì)的提取和分離：

1.原理：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法；相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。

2.血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有：

（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌；②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白溶液。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。

（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。

【詳解】

A；洗滌紅細(xì)胞的目的是除去血漿中的雜蛋白；A錯(cuò)誤；

B；透析能使小分子自由出入；而將大分子保留在袋內(nèi)，這樣可以去除小分子雜質(zhì)，B正確；

C；純化過程中要用緩沖液充分溶脹凝膠來配制凝膠懸浮液；C錯(cuò)誤；

D；蛋白質(zhì)的純化使用最多的方法是凝膠色譜法；D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】

本題考查蛋白質(zhì)的提取和分離，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累。二、多選題(共7題，共14分)6、A:B【分析】【分析】

由柱形圖分析可知；枯草芽孢桿菌處理的組總單寧含量最高，黑曲霉菌處理的組中單寧含量最低，根據(jù)單寧含量推測可知，對單寧分解能力由強(qiáng)到弱的排序?yàn)椋篐＞R＞N＞K，這說明黑曲霉菌對單寧的分解作用最強(qiáng)。

【詳解】

A；乳酸菌為細(xì)菌；屬于原核生物，黑曲霉為真菌，屬于真核生物，A錯(cuò)誤；

B；對培養(yǎng)基滅菌應(yīng)在接種前；接種后再滅菌，菌種將被全部殺死，B錯(cuò)誤；

C；據(jù)圖可知；與對照組相比，黑曲霉菌發(fā)酵菜籽粕中單寧含量最低，說明黑曲霉菌對單寧的去除效果最為理想，C正確；

D；對照組為不接種微生物的固體培養(yǎng)基；目的是作為對照，說明微生物去除單寧的作用，D正確。

故選AB。7、A:D【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的菌種可以從自然界中篩選；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵罐培養(yǎng)的環(huán)境條件會影響代謝的途徑從而影響產(chǎn)物的形成；例如谷氨酸發(fā)酵過程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增，B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過程；C錯(cuò)誤；

D；發(fā)酵工程生產(chǎn)的各種各樣的食品添加劑可以增加食品營養(yǎng)；改善食品口味、色澤和品質(zhì)，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】8、A:C:D【分析】【分析】

按照物理狀態(tài)對培養(yǎng)基進(jìn)行分類；可以分為固體培養(yǎng)基；半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，一般在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇、鑒定等操作，液體培養(yǎng)基用于擴(kuò)大培養(yǎng)，增加目的菌濃度。

【詳解】

A、降解聚乙烯的細(xì)菌將固體培養(yǎng)基中的聚乙烯微粒分解后，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)透明圈，透明圈直徑與菌落直徑之比越大，分解塑料的能力越強(qiáng)，因此應(yīng)選擇菌落A1進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；A正確；

B；擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選擇液體培養(yǎng)基；B錯(cuò)誤：

C；聚乙烯是某些塑料的主要成分；培養(yǎng)基中聚乙烯的作用是篩選目的菌和為目的菌提供碳源，C正確：

D；與焚燒相比；利用目的菌降解聚乙烯塑料具有不造成二次污染的優(yōu)點(diǎn)，D正確。

故選ACD。9、A:B:C【分析】分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理：①土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；根據(jù)Ⅰ號培養(yǎng)基上菌落分布均勻可知；②過程是用涂布器取乙中的樣品稀釋液均勻的涂布在Ⅰ號培養(yǎng)表面，即乙中是分解纖維素菌的樣品稀釋液，不是菌液，A錯(cuò)誤；

B；液體培養(yǎng)基的作用是讓菌體增殖；而不是稀釋菌種，甲、乙試管中的液體都是樣品稀釋液，捕食液體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C；配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板；故需要先調(diào)pH，再滅菌，C錯(cuò)誤；

D；剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物；若菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明纖維素分解菌將纖維素進(jìn)行了分解，可挑取該菌落用平板劃線法繼續(xù)純化該菌體，D正確。

故選ABC。10、A:B:D【分析】【分析】

1；酵母菌在有氧和無氧的條件下都能生活：在有氧時(shí)；酵母菌大量繁殖，但是不起到發(fā)酵的效果；在無氧時(shí)，繁殖速度減慢，但是此時(shí)可以進(jìn)行發(fā)酵。在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣，在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；20℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。

【詳解】

A；酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精；而醋酸菌產(chǎn)生醋酸需要氧氣，因此應(yīng)該先隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵，然后供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵，A正確；

B；果醋發(fā)酵的適宜溫度為30℃～35℃；果酒發(fā)酵的適宜溫度為18℃～25℃，B正確；

C；接種量的多少對發(fā)酵速率和發(fā)酵產(chǎn)品的品質(zhì)都有一定的影響；C錯(cuò)誤；

D；與自然發(fā)酵相比；人工接種過程中利用了嚴(yán)格的滅菌措施，可以防止其它雜菌污染，所以發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好，D正確。

故選ABD。11、C:D【分析】【分析】

腐乳是用豆腐發(fā)酵制成；多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達(dá)的白色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；加鹽主要是為了抑制微生物生長；防止豆腐腐敗變質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；勤向腐乳坯表面噴水；會導(dǎo)致豆腐含水量過高，不利于毛霉菌絲的生長，B錯(cuò)誤；

C；加鹽腌制時(shí)；為防止污染，將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中，同時(shí)逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增高鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些，C正確；

D；實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳可能滅菌不徹底；不宜直接食用，D正確。

故選CD。12、A:B:D【分析】【分析】

1；觀察細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的步驟：解離（解離液由鹽酸和酒精組成；目的是使細(xì)胞分離開）、漂洗（洗去解離液，便于染色）、染色（用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料）、制片（該過程中壓片是為了將根尖細(xì)胞壓成薄層，使之不相互重疊影響觀察）和觀察（先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察）；

2；DNA不溶于酒精溶液；但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。

【詳解】

A；在解離液中加入纖維素酶；纖維素酶會變性失活，不會提高洋蔥根尖組織的解離效果，A錯(cuò)誤；

B；制作泡菜時(shí)常將壇口用水封好；可以提供無氧的環(huán)境，乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，一段時(shí)間后水面不會出現(xiàn)氣泡，B錯(cuò)誤；

C；使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板記數(shù)前；先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓其自行滲入，C正確；

D；DNA不溶解于酒精；而其它雜質(zhì)能溶解于酒精，則用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精能更好的析出雜質(zhì)較少的DNA，D錯(cuò)誤。

故選ABD。三、填空題(共7題，共14分)13、略

【分析】【詳解】

①紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白；故紅細(xì)胞的洗滌需要去除雜蛋白。

②方法：采用低速短時(shí)間離心，如500r·min－1離心2min，然后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色血漿，將下層暗紅色的紅細(xì)胞液體倒入燒杯，再加入五倍體積的生理鹽水，緩慢攪拌10min，低速短時(shí)間離心，如此重復(fù)洗滌三次，直至上清液中沒有黃色，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。【解析】雜蛋白低速短時(shí)間血漿暗紅色燒杯生理鹽水10min黃色14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不但可以節(jié)約時(shí)間，而且可以除去凝膠中可能帶有的微生物，排除凝膠內(nèi)的空氣15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】載體反應(yīng)物產(chǎn)物16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】10h高17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】干燥石灰水NaHCO3Na2SO47~818、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】10℃恒溫相同變量pH溫度對照果汁的體積大小19、略

【分析】【詳解】

血紅蛋白的釋放。

將洗滌好的紅細(xì)胞倒入燒杯中，加蒸餾水到原血液體積，再加40%體積的甲苯，置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?0min。在蒸餾水和甲苯的作用下，紅細(xì)胞裂，釋放出血紅蛋白。【解析】蒸餾水原血液甲苯蒸餾水甲苯破裂四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共18分)20、略

【分析】【分析】

1；微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基根據(jù)功能可以分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基兩種；該培養(yǎng)基按照功能來分屬于選擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分主要包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)、酸堿度以及氧氣的要求。

2；微生物培養(yǎng)過程中；實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。

3；常用的微生物接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法；稀釋涂布平板法需要將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋；然后進(jìn)行涂布平板培養(yǎng)，可形成由單個(gè)細(xì)胞形成的單個(gè)菌落，所以該方法可以用于微生物的純化培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。

【詳解】

（1）微生物培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源；氮源、水和無機(jī)鹽；有的還需要特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，如：生長因子等。據(jù)表分析可知，該培養(yǎng)基缺少氮源，在該培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種等量稀釋的土壤浸出液，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)較多，說明了該培養(yǎng)基確實(shí)有選擇作用。

（2）獲得微生物純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是無菌操作；防止雜菌污染，實(shí)驗(yàn)室中常用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。為了獲得單個(gè)的菌落并計(jì)數(shù)，應(yīng)該用稀釋涂布平板法在添加了瓊脂的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行接種。

（3）若樣品濃度過高，進(jìn)行涂布培養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí)會出現(xiàn)微生物聚集在一起，不能在培養(yǎng)基表面形成單菌落。根據(jù)題意，每升水樣中的活菌數(shù)為（32+42+52）÷n×1000×m=4.2×104mn個(gè)。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的培養(yǎng)的過程以及滅菌方法的知識點(diǎn)。要求學(xué)生掌握培養(yǎng)基的成分和類型，識記微生物的接種方法和操作過程是解決該題的重點(diǎn)；掌握稀釋涂布平板法是突破第（3）問的關(guān)鍵，尤其是計(jì)數(shù)方法考查是該題的難點(diǎn)?！窘馕觥刻荚础⑺?、無機(jī)鹽明顯更多防止外來雜菌的污染高壓蒸汽滅菌鍋瓊脂稀釋涂布平板微生物聚集在一起，不能在培養(yǎng)基表面形成單菌落42000m/n21、略

【分析】【分析】

1；無菌技術(shù)的主要內(nèi)容：

①對實(shí)驗(yàn)操作的空間；操作者的衣著和手；進(jìn)行清潔和消毒；

②將用于微生物培養(yǎng)的器皿；接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌；

③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染；實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；

④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

2；微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

（1）分析表格可知；1；3組實(shí)驗(yàn)的自變量為是否經(jīng)過消毒處理，結(jié)果中抑菌圈寬度并沒有明顯區(qū)別，因此消毒不會使牛奶中的抗生素減少或消除；3、4組實(shí)驗(yàn)的自變量為鮮牛奶中是否含有抗生素，結(jié)果含抗生素的鮮牛奶中出現(xiàn)了抑菌圈，不含抗生素的鮮牛奶中沒有出現(xiàn)抑菌圈，可得出的結(jié)論為抗生素能夠殺死乳酸菌。第5組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，市售的鮮牛奶中出現(xiàn)很大的抑菌圈，乳酸菌不能存活，因此不適合用于制作酸奶。

（2）微生物常見的接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。鑒別培養(yǎng)基中，一般需要加入瓊脂作為凝固劑制成固體培養(yǎng)基，然后觀察所獲單菌落的特征。還要對菌落中的菌種進(jìn)行涂片，并用顯微鏡進(jìn)行進(jìn)一步的觀察和鑒定。因?yàn)槿樗釙cCaCO3反應(yīng)形成透明圈，透明圈直徑越大，說明乳酸菌產(chǎn)生乳酸能力越強(qiáng)，因此某同學(xué)在配制平板時(shí)加入CaCO3可以篩選出高效產(chǎn)生乳酸的菌株。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物的培養(yǎng)，解答本題的關(guān)鍵有兩個(gè)：一是熟悉微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識；二是讀懂表格信息，明白其中的自變量、因變量和無關(guān)變量，并能從中歸納得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論?！窘馕觥肯静粫古Ｄ讨械目股販p少或消除抗生素能夠殺死乳酸菌不適合稀釋涂布平板固體顯微鏡乳酸會與反應(yīng)形成透明圈，透明圈直徑越大，產(chǎn)生乳酸能力越強(qiáng)22、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌，代謝類型是兼性厭氧型真菌，條件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧，利用的是酵母菌在無氧條件下進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳；果醋制作的菌種是醋酸菌，代謝類型是需氧型細(xì)菌，溫度條件是30～35℃，利用的原理是：當(dāng)氧氣和糖源充足時(shí)醋酸菌將糖分解成醋酸：C6H12O6+2O22CH3COOH+2CO2+H2O；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變成乙醛，再將乙醛變成醋酸，相關(guān)反應(yīng)式為：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量；參與腐乳制作的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉，其代謝類型為異養(yǎng)需氧型，適宜溫度為15℃～18℃。

【詳解】

（1）酵母菌在無氧條件下進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2，使培養(yǎng)瓶內(nèi)氣體增多，所以每隔12h左右將瓶蓋擰松一次，此后再擰緊，目的是放出發(fā)酵產(chǎn)生的CO2，同時(shí)盡量不讓O2進(jìn)入瓶中。所使用的發(fā)酵液缺氧；呈酸性；酵母菌能生長繁殖而絕大多數(shù)其他微生物無法適應(yīng)。

（2）①圖中A代表加鹽腌制；其主要目的是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時(shí)還能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。

②在配制鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右；加酒含量過高腐乳成熟時(shí)間將會延長；酒精含量過低，不足以抑制微生物的生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。

（3）泡菜制作原理是乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸。

【點(diǎn)睛】

本題考查了果酒、果醋和腐乳制作的相關(guān)知識，學(xué)生要能夠識記使用的菌種，要求學(xué)生能夠掌握腐乳制作的過程以及相關(guān)注意點(diǎn)，如豆腐的含水量、鹽的用量、鹵湯中酒的含量等?！窘馕觥糠懦霭l(fā)酵產(chǎn)生的CO2，同時(shí)盡量不讓氧氣進(jìn)入瓶中缺氧、呈酸性加鹽腌制析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)12%延長不足以抑制微生物的生長無氧呼吸五、非選擇題(共4題，共24分)23、略

【分析】【分析】

1；實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：①灼燒滅菌：將微生物的接種工具；如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。

2；微生物常見的接種的方法。

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

（1）辣椒中產(chǎn)生辣味的物質(zhì)是辣椒素；不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，可以用萃取的方法提取。萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量，同時(shí)還受到原料顆粒的大?。痪o密程度、含水量等條件的影響。

（2）對培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí)；應(yīng)采取高壓蒸汽滅菌法；外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是70%；植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí)，常用的酶是果膠酶和纖維素酶。

（3）接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法；其中稀釋涂布平板法可用于對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，若組織培養(yǎng)過程中感染了某種霉菌，可采用稀釋涂布平板法接種進(jìn)行分離并計(jì)數(shù)．與這種方法相比，顯微鏡直接計(jì)數(shù)的不足是不能區(qū)別活細(xì)胞與死細(xì)胞。

（4）大腸桿菌屬于原核生物；由原核細(xì)胞構(gòu)成。制作果酒的微生物是酵母菌，酵母菌屬于真核生物，與大腸桿菌的結(jié)構(gòu)區(qū)別較大，故A錯(cuò)誤；制作果醋的微生物是醋酸桿菌，屬于原核生物，與大腸桿菌結(jié)構(gòu)相同，故B正確；制作泡菜的微生物是乳酸菌，屬于原核生物，與大腸桿菌結(jié)構(gòu)相同，故C正確；制作腐乳的微生物主要是毛霉，屬于真核生物，與大腸桿菌結(jié)構(gòu)區(qū)別較大，故D錯(cuò)誤。

【點(diǎn)睛】

注意熟記一些常見發(fā)酵產(chǎn)品的制作所需的微生物種類：

果酒——酵母菌（真核）；果醋——醋酸桿菌（原核）；腐乳——主要是毛霉（真核）；泡菜和酸奶——乳酸菌（原核）；味精——谷氨酸棒狀桿菌（原核）?！窘馕觥枯腿≥腿┑男再|(zhì)和使用量高壓蒸汽滅菌70%果膠酶稀釋涂布平板不能區(qū)別活細(xì)胞與死細(xì)胞BC24、略

【分析】【分析】

1；微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求，對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。

2；微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

（1）在配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，一般還要加入瓊脂，其目的是作為凝固劑；乳酸桿菌的培養(yǎng)基中需要加入維生素；制備培養(yǎng)基的操作順序是：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板；異養(yǎng)生物只能利用含碳有機(jī)物，因此(NH4)2CO3是不能為乳酸菌提供碳源。

（2）微生物常見的接種的方法有①平板劃線法；②稀釋涂布平板法；乳酸呈酸性；乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，形成透明圈，故在配制培養(yǎng)基時(shí)加入碳酸鈣就能鑒別乳酸菌菌落；分解尿素的細(xì)菌在添加酚紅的指示劑的培養(yǎng)基上會顯示出特定的顏色；在鑒定大腸桿菌時(shí)在培養(yǎng)基中加入伊紅-美藍(lán)，呈現(xiàn)黑色菌落的即為大腸桿菌；亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。純化后的菌可在-20℃長期保存時(shí)，應(yīng)采用甘油管藏的方法對菌種進(jìn)行長期保藏。

（3）統(tǒng)計(jì)出平板上的菌落數(shù)量后還需知道接種時(shí)所用樣液的體積；兩者相除才能求出密度；乙同學(xué)一個(gè)空白對照平板出現(xiàn)了12個(gè)菌落，空白培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落說明被污染需重新制作培養(yǎng)并計(jì)數(shù)，用來計(jì)數(shù)是不正確的。

【點(diǎn)睛】

易錯(cuò)點(diǎn)：亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料；純化后的菌可在-20℃長期保存時(shí)，采用的是甘油管藏的方法對菌種進(jìn)行保藏?！窘馕觥磕虅┚S生素溶化→滅菌不能，乳酸菌為異養(yǎng)生物只能利用含碳有機(jī)物平板劃線法或稀釋涂布平板法乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，形成透明圈酚紅伊紅-美藍(lán)重氮化玫瑰紅甘油管藏接種時(shí)所用樣液的體積不正確，空白培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落說明被污染需重新制作培養(yǎng)并計(jì)數(shù)25、略

【分析】（1）耐鹽細(xì)菌需要在含較高濃度的NaCl溶液的培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選；這種培養(yǎng)基叫選擇培養(yǎng)基。（2）為了排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應(yīng)該設(shè)置的對照組是未接種（或接種等量無菌水）的培養(yǎng)皿。為檢驗(yàn)（1）中篩選方法的效果，可以設(shè)置的對照組是未加高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)。（3）實(shí)驗(yàn)室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長，需將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個(gè)菌落是一種細(xì)菌產(chǎn)生的群體，在生態(tài)學(xué)中稱為種群。（4）由于培養(yǎng)過程中當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)在平板上觀察到的是一個(gè)菌落，可導(dǎo)致計(jì)算的數(shù)據(jù)要比實(shí)際活菌的數(shù)目少。

【考點(diǎn)定位】微生物的分離和培養(yǎng)【解析】（1）鹽（NaCl）（1分）選擇（2）未接種（或接種等量無菌水）的培養(yǎng)皿未加高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)（3）高壓蒸汽滅菌倒置種群（4）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)在平板上觀察到的是一個(gè)菌落26、略

【分析】試題分析：果酒生產(chǎn)的工藝流程為：選料→沖洗→粉碎→滅菌→接種→發(fā)酵→過濾→果酒；所以題中①表示粉碎，②表示過濾。

（1）根據(jù)以上分析已知；流程中①；②處分別為粉碎、過濾。

（2）果酒制作離不開酵母菌；為真核生物，而醋酸菌為原核生物，兩者的主要區(qū)別是酵母菌含有核膜包被的成形的細(xì)胞核。

（3）果酒制作過程中；接種完成后要先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無菌空氣，目的是在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，增加酵母菌數(shù)量，有利于后期發(fā)酵。

（4）酸性條件下；重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。

（5）醋酸菌在糖源和氧氣充足時(shí)，能將葡萄糖分解成醋酸；當(dāng)糖源不足時(shí)，醋酸菌可將酒精變成乙醛，再將乙醛最終轉(zhuǎn)變成醋酸?！窘馕觥糠鬯檫^濾酵母菌有核膜包被的細(xì)胞核在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，增加數(shù)量酸性重鉻酸鉀灰綠氧氣酒精六、綜合題(共4題，共36分)27、略

【分析】【分析】

果膠是植物細(xì)胞壁以及胞層的主要組成成分之一；它是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物，不溶于水。在果汁加工中，果膠不僅會影響出汁率，還會使果汁渾濁。果膠酶能夠分解果膠，分解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得更容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。

（1）

細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠；因此如果用蛋白酶和纖維素酶處理后，發(fā)現(xiàn)汁液仍渾濁，同時(shí)還含有少量沉淀，此時(shí)可添加果膠酶將果膠分解為小分子半乳糖醛酸，提高出汁率；再加入淀粉酶將淀粉分解；

酶促反應(yīng)的速率與溫度；pH、酶濃度、底物濃度等有密切關(guān)系；因此在生產(chǎn)過程中，須嚴(yán)格控制好溫度、pH等條件。

（2）

）實(shí)驗(yàn)原理：②α-淀粉酶活性的測定：直鏈淀粉遇Ⅰ-KI溶液后會呈現(xiàn)藍(lán)色；可以采取比色法定量測定單位時(shí)間內(nèi)底物淀粉的水解量，以表示酶活性大小。

③由題意可知；α-淀粉酶的最適溫度為50℃，比較凝膠珠與游離酶活性時(shí)，應(yīng)在最適溫度（50℃）下進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)步驟：②取試管若干分為兩組；每組再取若干試管分別放在30℃；35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃溫度條件下。向同一溫度條件下的試管中分別加入等量的淀粉溶液和凝膠珠進(jìn)行水浴保溫5min。

⑤用比色法測定淀粉酶的活性；并以蒸餾水（沒有酶）代替凝膠珠作為空白對照組。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：由曲線圖可知；在50℃下酶的活性最高，說明使用這種專門技術(shù)后，α-淀粉酶的最適溫度沒有發(fā)生改變。

【點(diǎn)睛】

了解果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用、固定化酶的制備及酶活力測定是解答本題的關(guān)鍵?！窘馕觥浚?）果膠酶半乳糖醛酸淀粉酶酶的含量；溫度、pH和反應(yīng)時(shí)間。

（2）單位時(shí)間內(nèi)底物淀粉的水解量50淀粉溶液和凝膠珠蒸餾水使用這種專門技術(shù)后，α-淀粉酶的最適溫度沒有發(fā)生改變28、略

【分析】【分析】

平板劃線法操作過程：①將接種環(huán)放在火焰上灼燒；直到接種環(huán)燒紅。②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。③將試管口通過火焰。④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。⑤將試管通過火焰，并塞