DB46T-海水 氰化物的測定 流動注射-異煙酸-巴比妥酸分光光度法編制說明

《海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法（征求意見稿）》編制說明《海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法》標準編制組二〇二四年十二月項目名稱：海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法項目編號：2022-Z057承擔(dān)單位：海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心項目負責(zé)人：蒙健嬌技術(shù)負責(zé)人：何書海編制組成員：蒙健嬌、吳華、鐘悅、何書海、楊大順、顏為軍、陳表娟目錄TOC\o"1-3"\h\u5873一、項目簡況 《海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法》編制說明一、項目簡況（一）標準名稱《海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法》。（二）項目來源（項目計劃號）海南省市場監(jiān)督管理局《關(guān)于下達海南省2022年第二批地方標準制修訂項目計劃的通知》（瓊市監(jiān)函[2022]572號），項目編號：2022-Z057。（三）起草單位海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心。（四）單位地址海南省?？谑邪遵x大道98號。（五）參與起草單位海南省環(huán)境科學(xué)研究院、?？谑猩鷳B(tài)環(huán)境監(jiān)測站、五指山市生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站、陵水黎族自治縣生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站、澄邁縣生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站、樂東黎族自治縣生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站。（六）標準起草人表1標準起草人序號姓名單位職務(wù)職稱任務(wù)分工聯(lián)系方式1何書海海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心科室主任研究員技術(shù)負責(zé)人，負責(zé)項目設(shè)計，技術(shù)指導(dǎo)、編寫編制說明及文本等180897626012蒙健嬌海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心/工程師項目負責(zé)人，負責(zé)編寫實施方案、跟進項目實施、組織方法驗證、編寫編制說明及文本等183894852453吳華海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心/工程師負責(zé)查閱資料、條件優(yōu)化、編寫實施方案、編制說明及文本等151030814894鐘悅海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心/助理工程師負責(zé)查閱資料、條件優(yōu)化、數(shù)據(jù)整理、文本編寫等152899228205楊大順海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心/助理工程師負責(zé)樣品采集與保存、條件優(yōu)化、組織方法驗證、數(shù)據(jù)整理等189761781526顏為軍海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心中心主任正高級工程師技術(shù)指導(dǎo)133220646467陳表娟海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心中心副主任正高級工程師技術(shù)指、編制情況（一）編制標準的必要性和意義及背景1.氰化物的環(huán)境危害1.1氰化物的基本理化性質(zhì)氰化物是指帶有氰基（-CN）的化合物，其中碳原子和氮原子通過叁鍵相連接，因此，其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，常以陰離子的形式存在。各種氰化物結(jié)晶或粉末，遇酸、酸霧分解并產(chǎn)生極易燃的劇毒氣體——氰化氫。根據(jù)與氰基連接的元素或基團是有機物還是無機物，氰化物可分為無機氰化物和有機氰化物兩大類，其中，無機氰化物按其性質(zhì)與組成又分為兩種，即簡單氰化物和絡(luò)合氰化物，詳見表2。表2氰化物的分類氰化物無機氰化物簡單氰化物易溶氰化物HCN、NaCN、KCN、NH4CN、Ca（CN）2難溶氰化物Zn（CN）2、Cd（CN）2、CuCN絡(luò)合氰化物弱絡(luò)合物Zn（CN）2-2、Cd（CN）2-2、Pb（CN）2-4較強絡(luò)合物Cu（CN）-2、Ag（CN）-2、Ni（CN）2-4強絡(luò)合物Fe（CN）4-6、Fe（CN）3-6、Co（CN）4-6有機氰化物//乙腈、丁腈、丙烯腈等氰化物在標準方法中根據(jù)蒸餾條件的不同分為兩種：總氰化物（totalcyanide），指在pH＜2介質(zhì)中，在磷酸和EDTA的存在下，通過加熱蒸餾，能形成氰化氫的氰化物。這里包括全部簡單氰化物，比如堿金屬和堿土金屬的氰化物，銨的氰化物，以及絕大部分絡(luò)合氰化物，比如鋅氰絡(luò)合物、鐵氰絡(luò)合物、鎳氰絡(luò)合物、銅氰絡(luò)合物等，但是不包括鈷氰絡(luò)合物?？偳杌锊⒉皇亲置嫔系那杌锟偤汀６且粋€條件指標，只是在規(guī)定的條件下被測定的氰化物。易釋放氰化物（easilyliberatablecyanide）指在pH為4介質(zhì)中，硝酸鋅存在下，加熱蒸餾形成氰化氫氣體的氰化物，包括全部簡單氰化物（多為堿金屬和堿土金屬的氰化物）和鋅氰絡(luò)合物，不包括鐵氰絡(luò)合物、亞鐵氰絡(luò)合物、銅氰絡(luò)合物、鎳氰絡(luò)合物、鈷氰絡(luò)合物。在現(xiàn)行的地表水、海水水質(zhì)評價標準中所指氰化物為易釋放氰化物。1.2氰化物的危害及來源氰化物在電鍍、煉金、焦化、制革、照相以及農(nóng)藥等的工業(yè)生產(chǎn)過程中都被廣泛地應(yīng)用。環(huán)境中的氰化物主要來自工業(yè)“三廢”，也有含氰的殺蟲劑或藥劑污染的，但以前者為主。汽車尾氣和香煙的煙霧中都含有氰化氫，某些塑料制品的燃燒也會產(chǎn)生氰化氫。在自然界中，動植物體內(nèi)都含有一些氰類物質(zhì)，如苦杏仁、木薯等。在土壤微生物作用下，有些腐殖質(zhì)被分解生成氰化物和酚化物。氰化物是劇毒物質(zhì)，具有揮發(fā)性，危害極大，影響范圍廣，是水環(huán)境優(yōu)先監(jiān)測的污染物。其可通過呼吸道或消化道等進入人體，與體內(nèi)細胞色素氧化酶中的Fe3+結(jié)合，從而使細胞失去了傳遞氧的作用，使機體缺氧死亡。對魚類、微生物等水生生物也均有較大毒性。（1）氰化物對人的毒性大、作用快。氰化物進入生物體后，可迅速分解出游離的氰離子，它可抑制細胞內(nèi)多種酶的活性而阻斷生物氧化過程中的電子傳遞，引起細胞內(nèi)窒息。據(jù)相關(guān)報道，氰化氫對人的吸入毒性，見表3。表3氰化氫對人的吸入毒性暴露時間/min傷害濃度C/(mg/L)半致死濃度C/(mg/L)致死濃度C/(mg/L)0.251.5～2.02.5～2.753.0～3.510.4～50.150.2～0.30.4～0.5150.10.15～0.20.3（2）氰化物對水生物毒性很大。為了防止水生物氰化物中毒，國家規(guī)定漁業(yè)水體氰化物濃度不得超過0.005mg/L。有研究表明，當氰離子濃度為0.02~1.0mg/L時，24h內(nèi)就會使魚類致死。當氰化物濃度為3.4mg/L時，48h水蚤亞目致死。浮游生物和甲殼類對水中的氰化物的最大容許濃度為0.01mg/L。（3）氰化物對牲畜的毒性癥狀為麻痹、昏迷、痙攣、窒息最后死亡。據(jù)介紹，牛一次攝入氰化物的致死量為0.39~0.92g，羊為0.04~0.10g，馬為0.39g，狗為0.03~0.04g。牲畜由于攝入含氰廢水中毒死亡的事件相對較多，其原因主要是含氰廢水因跑、冒、滴、漏或超標排放，流入河流或低洼地方形成積水，牛、羊等牲畜飲此水導(dǎo)致中毒死亡。（4）氰化物對植物生長也有很大影響。國家規(guī)定農(nóng)田灌溉水體氰化物濃度不得超過0.5mg/L。據(jù)報道，灌溉水中氰化物的濃度在1mg/L以下時，小麥、水稻生長發(fā)育正常；濃度為10mg/L時，水稻開始受害，產(chǎn)量為對照組的78%，小麥受害不明顯；濃度為50mg/L時，水稻和小麥都明顯受害，但水稻受害更為嚴重，產(chǎn)量僅為對照組的34.7%，小麥為對照組的63%。水培時氰化物含量為1mg/L時，水稻生長發(fā)育開始受到影響；濃度在10mg/L時，水稻生長明顯受到抑制，產(chǎn)量比對照組低50%；在50mg/L時，大部分受害致死，少數(shù)殘存植株已不能結(jié)果實。含氰廢水污染嚴重的土地，果樹產(chǎn)量降低，果實變小。另外，用含氰廢水灌溉水稻、小麥和果樹時，其果實中會含有一定量氰化物。2.相關(guān)環(huán)保標準和環(huán)保工作的需要2.1環(huán)境保護和管理對氰化物的監(jiān)測需求氰化物是劇毒物質(zhì)，易溶于水，具有揮發(fā)性，對人體、水生物等危害極大，影響范圍廣，為了控制污染、提高環(huán)境監(jiān)測水平、保障人民群眾的身心健康，測定飲用水源、海水、地下水、生活污水及工業(yè)廢水等水體中的氰化物顯得尤為重要。因此，氰化物成為環(huán)境監(jiān)測工作中水環(huán)境優(yōu)先監(jiān)測的第一類污染物。目前國家環(huán)境監(jiān)測網(wǎng)、國家地下水監(jiān)測網(wǎng)、海水水質(zhì)監(jiān)測及典型海洋生態(tài)系統(tǒng)健康狀況監(jiān)測等均涵蓋水環(huán)境中氰化物項目，涉及地表水、地下水和海水等環(huán)境介質(zhì)的監(jiān)測。2.2生態(tài)環(huán)境質(zhì)量標準、污染物排放標準對氰化物的監(jiān)測要求我國現(xiàn)行的質(zhì)量標準《海水水質(zhì)標準》（GB3097-1997）和《地表水環(huán)境質(zhì)量標準》（GB3838-2002）對水中氰化物的限值均有規(guī)定。且在《污水綜合排放標準》（GB8978-1996）、《污水海洋處置工程污染控制標準》（GB18486-2001）中也規(guī)定了（總）氰化物允許排放限值。我國對氰化物的排放不僅有嚴格的限制，針對氰化物的生產(chǎn)、運輸、存儲、使用單位的安全管理，先后發(fā)布了《氰化鈉安全規(guī)程》（GB/Z24783-2009）、《氰化物泄漏的處理處置方法第1部分氰化鈉》（HG/T4333.1-2012）、《氰化物泄漏的處理處置方法第2部分氰化鈉》（HG/T4333.2-2012）、《黃金工業(yè)用固體氰化鈉安全管理技術(shù)規(guī)范》（YS/T3017-2012）、危險化學(xué)品使用量的數(shù)量標準（2013年版）、《固體氰化物包裝》（GB19268-2021）等規(guī)定，提出了《氰化物安全生產(chǎn)管理規(guī)范》（征求意見稿）（20173376-Q-450）等管理辦法。然而，我國現(xiàn)行的海水氰化物的分析方法標準《海洋監(jiān)測規(guī)范第4部分：海水分析（20.1氰化物異煙酸-吡唑啉酮分光光度法）（GB17378.4-2007）》、《海洋監(jiān)測規(guī)范第4部分：海水分析（20.2氰化物吡啶-巴比土酸分光光度法）（GB17378.4-2007）》、《海洋監(jiān)測技術(shù)規(guī)程第1部分：海水16氰化物的測定便攜式光譜儀法》（HY/T147.1-2013），仍處在手工蒸餾、手工比色階段，存在操作步驟繁瑣、分析周期長、重現(xiàn)性差，二次污染等不足，難以滿足大批量海水樣品監(jiān)測分析的要求。因此，開展針對海水中氰化物的流動注射法預(yù)研究，旨在探索并建立一種適用于海水環(huán)境的氰化物分析方法。本研究采用流動注射法測定海水中氰化物，能夠解決傳統(tǒng)分析方法的不足。流動注射-分光光度法，集自動進樣、在線蒸餾、在線顯色與分析于一體，具有簡便快速、正確度高、精密度高、靈敏度高、樣品和試劑用量小等優(yōu)勢，樣品全封閉在線蒸餾、吸收和檢測，減少了氰化物對環(huán)境的污染和人體的危害，尤其在大批量樣品的分析上優(yōu)勢更為明顯，在水質(zhì)檢測中應(yīng)用廣泛，既能夠應(yīng)用于實驗室分析也能應(yīng)用于野外環(huán)境分析。這一研究不僅將填補現(xiàn)有技術(shù)空白，確保監(jiān)測數(shù)據(jù)“真、準、快”，為海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測提供更加準確可靠的數(shù)據(jù)支持；還將進一步完善海洋環(huán)境監(jiān)測標準體系，為海洋環(huán)境保護和生態(tài)治理提供強有力的技術(shù)保障。（二）編制過程簡介1.成立編制組2022年9月，收到《關(guān)于下達海南省2022年第二批地方標準制修訂項目計劃的通知》（瓊市監(jiān)函[2022]572號）后，成立了標準編制小組。編制小組成員有何書海、蒙健嬌、吳華、鐘悅、楊大順、顏為軍、陳表娟，成員長期在環(huán)境監(jiān)測一線，經(jīng)驗豐富，專業(yè)基礎(chǔ)扎實，可滿足《海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法》標準編制的要求。2.標準起草2.1查閱國內(nèi)外資料2022年10月～11月，標準編制組成員按照《國家生態(tài)環(huán)境標準制修訂工作規(guī)則》（國環(huán)規(guī)法規(guī)〔2020〕4號））和《地方標準制修訂工作規(guī)劃》（BD46/T74-2021）的相關(guān)要求。查閱并梳理了國內(nèi)外相關(guān)標準和文獻資料，確立了建立標準修訂的指導(dǎo)思想，結(jié)合本中心的實際情況以及已有的相關(guān)工作經(jīng)驗，確定了本方法標準制訂擬采用的原則、方法和技術(shù)路線，制訂了初步的實驗方案。2.2召開技術(shù)研討會2023年1月，標準編制小組組織召開了《海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法》的技術(shù)研討會，重點討論方法的制訂及驗證、適用性、以及性能指標研究（方法檢出限、精密度、正確度）等內(nèi)容。2.3開展儀器市場調(diào)研2023年2月~3月，在省內(nèi)外進行調(diào)研，了解各氰化物監(jiān)測分析儀器設(shè)備配備及其市場占比情況、各實驗室能力資質(zhì)持有情況、工作人員監(jiān)測分析技術(shù)能力情況、試劑藥品使用情況以及日常監(jiān)測分析情況，為標準的方法驗證、條件優(yōu)化、標準實施應(yīng)用等提供支持。2.4建立方法2023年3月~8月，本中心實驗室開展試驗工作，通過有證標準物質(zhì)、空白加標等方式確定方法條件，再通過流動注射-分光光度法（本研究）與傳統(tǒng)手工法（GB17378.4）進行比對，經(jīng)過數(shù)據(jù)匯總與整理，擬定方法的檢出限、精密度、正確度等性能指標，并通過加標等方式進行干擾物質(zhì)的影響分析及消除試驗，建立海水中氰化物的測定方法——《海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法》。2.5開展驗證2023年8月~12月，標準編制組按照《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ168-2020）要求，選擇了6家有資質(zhì)的實驗室開展方法驗證工作。驗證單位按照驗證方案要求，在方法檢出限、精密度、正確度等方面開展驗證工作。驗證人員對驗證數(shù)據(jù)進行匯總與整理，并形成方法驗證報告，提交標準編制組。2.6編寫編制說明及標準文本2024年1月~5月，標準編制組嚴格遵循《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫》（GB/T1.1-2020）、《標準編寫規(guī)則第4部分：試驗方法標準》（GB/T20001.4-2015）和海南省地方標準《地方》所規(guī)定的標準編寫要求和格式，對標準的格式、內(nèi)容、術(shù)語表達方式等進行了深入學(xué)習(xí)，在調(diào)查研究及大量試驗工作基礎(chǔ)上將所有資料歸類分析，形成海南省地方標準《海水氰化物的測定流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法》征求意見稿及標準文本。3.征求意見過程2024年10月，由海南省生態(tài)環(huán)境廳牽頭負責(zé)通過網(wǎng)站、會議等方式公開征求意見，共向25個有關(guān)行業(yè)單位、科研院所、大專院校及有代表性的標準利益方發(fā)函征求意見。截止2024年11月，征求意見共收到3家單位5條意見，最終4條采納，1條未采納。（三）制定標準的原則和依據(jù)，與現(xiàn)行法律法規(guī)、標準的關(guān)系1.制定的原則與依據(jù)1.1分析儀器與方法等研究進展目前，測定海水中氰化物的標準方法以分光光度法為主，現(xiàn)行的分析方法HJ823-2017中適用范圍不包含海水。流動注射分析法具有方法簡便而快速、正確度及精密度高、靈敏度高、自動進樣、樣品和試劑消耗量小等特點，樣品全封閉在線蒸餾、吸收和檢測，減少了氰化物對環(huán)境的污染和對人體的危害，尤其在檢測大批量的樣品上有突出的優(yōu)勢，在水質(zhì)檢測中較為適用，適用于實驗室也能適用于野外環(huán)境檢測。隨著國內(nèi)科學(xué)儀器技術(shù)的不斷發(fā)展，國產(chǎn)流動注射分析儀逐漸崛起，在激烈的科學(xué)儀器市場占據(jù)了一席之地。我國生產(chǎn)流動分析儀的廠家主要有北京歐潤科學(xué)儀器有限公司、北京寶德儀器有限公司、北京海光儀器有限公司、北京吉天儀器有限公司、上海安杰智創(chuàng)科技有限公司等等。據(jù)不完全統(tǒng)計，全國流動注射分析儀（氰化物模塊）數(shù)量眾多，應(yīng)用領(lǐng)域主要涉及疾控、環(huán)保、水文、自來水廠、第三方環(huán)境監(jiān)測機構(gòu)、食品檢測所、海關(guān)、高校科研、酒廠、農(nóng)業(yè)等等行業(yè)，產(chǎn)品型號主要為歐潤ORFIA-608、吉天iFIA-7、吉天6000+、寶德BDFIA-8000、安杰AJ-1000系列等；環(huán)境監(jiān)測應(yīng)用中，監(jiān)測站均有配置流動注射分析儀，且儀器狀態(tài)良好。這些流動注射分析儀具有相同的分析技術(shù)，把一定體積的試樣溶液注入到一個流動著的載流中，被注入的試樣溶液流入反應(yīng)盤管，形成一個區(qū)域，并與載流中的試劑混合、反應(yīng)，再進入到流通檢測器進行測定分析及記錄。關(guān)于水質(zhì)氰化物的分析方法標準及相關(guān)研究眾多，均以分光光度法為主，但，缺乏采用流動注射分析儀測定海水中氰化物得標準分析方法及其相關(guān)研究，本標準研究旨在制定出適用于海水中氰化物測定的流動注射-分光光度法，確保監(jiān)測數(shù)據(jù)“真、準、快”，為海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測提供更加準確可靠的數(shù)據(jù)支持。1.2本標準制訂的基本原則與依據(jù)本標準的制訂符合《國家環(huán)境保護標準制修訂工作管理辦法》和《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ168-2020）的相關(guān)要求。參考分析方法標準《海洋監(jiān)測規(guī)范第4部分：海水分析》（GB17378.4-2007）、《水質(zhì)氰化物的測定流動注射-分光光度法》（HJ823-2017）、《生活飲用水標準檢驗方法第5部分：無機非金屬指標》（GB/T5750.5-2022）、《水質(zhì)氰化物的測定容量法和分光光度法》（HJ484-2009），考慮我省現(xiàn)有監(jiān)測機構(gòu)的監(jiān)測能力和實際情況。查閱流動注射法相關(guān)研究、相關(guān)標準開展制訂工作程序。確保方法標準的科學(xué)性、先進性、可行性和可操作性。制定出符合海洋生態(tài)環(huán)境保護工作要求、適用于海水中氰化物測定的標準方法。標準制訂的基本原則如下：1.2.1方法的檢出限和測定范圍滿足相關(guān)生態(tài)環(huán)境標準和環(huán)境工作管理的要求目前，我國生態(tài)環(huán)境評價標準中關(guān)于海水中氰化物的標準和標準限值有：《海水水質(zhì)標準》（GB3097-1997）規(guī)定各類使用功能海域第一類、第二類水體中氰化物限值為0.005mg/L，《污水海洋處置工程污染控制標準》（GB18486-2001）規(guī)定利用進入放流管向海域或向排放點含鹽度大于5‰的年概率大于10%的河口水域中氰化物日均限值為0.5mg/L。本標準中氰化物的方法檢出限為0.001mg/L，低于《海水水質(zhì)標準》（GB3097-1997）中氰化物第一類、第二類評價標準，方法適用于海水中氰化物的測定，能夠滿足國內(nèi)相關(guān)生態(tài)環(huán)境標準和環(huán)境工作管理的要求。1.2.2方法準確可靠，滿足方法各項特性指標的要求6家實驗室對統(tǒng)一發(fā)放的海水中氰化物實際樣品進行正確度和精密度測試，同時開展6家實驗室間的方法適用性檢驗實驗。確保本標準的方法檢出限等指標滿足監(jiān)測要求。1.2.3方法具有普遍適用性，易于推廣使用流動注射法操作簡便、檢出限低、正確度和精密度高，已被廣泛應(yīng)用檢測分析行業(yè)，我省環(huán)境監(jiān)測及相關(guān)檢測實驗室均配備了流動注射分析儀，具有普遍性和易推廣性。2.與現(xiàn)行標準的關(guān)系目前，我國現(xiàn)行的各類水質(zhì)評價標準中，均規(guī)定了水中氰化物的分析方法及限值，見表4。水中氰化物現(xiàn)行的分析方法及其局限性，見表5。在分析方法標準中，水中氰化物根據(jù)不同的前處理方式分為總氰化物和易釋放氰化物，在GB17378.4中，采用“乙酸鋅-酒石酸”蒸餾的方式測得“易釋放氰化物”，在HJ823中，采用“磷酸”蒸餾的方式測得“總氰化物”，在GB/T5750.5中，采用“乙酸鋅-酒石酸”蒸餾的方式測得“易釋放氰化物”。本標準旨在旨在研究流動注射-分光光度法測定海水中“易釋放氰化物”，采用“乙酸鋅-酒石酸”蒸餾的方式進行在線蒸餾前處理。表4水質(zhì)評價標準中氰化物的分析方法及限值評價標準名稱評價標準編號分析方法標準項目名稱蒸餾試劑實測項目名稱控制限值（mg/L）海水水質(zhì)標準GB3097-1997GB17378.4-2007氰化物乙酸鋅-酒石酸易釋放氰化物Ⅰ類、Ⅱ類≤0.005；Ⅲ類≤0.10；Ⅵ類≤0.20生活飲用水衛(wèi)生標準GB5749-2022GB/T5750.5-2023氰化物乙酸鋅-酒石酸易釋放氰化物≤0.05地下水質(zhì)量標準GB/T14848-2017HJ484-2009氰化物硝酸鋅-酒石酸易釋放氰化物Ⅰ類≤0.001；Ⅱ類≤0.01；Ⅲ類≤0.05；Ⅵ類≤0.10；Ⅴ類＞0.10磷酸-EDTA總氰化物地表水環(huán)境質(zhì)量標準GB3838-2002氰化物硝酸鋅-酒石酸易釋放氰化物Ⅰ類≤0.005；Ⅱ類≤0.05；Ⅲ類、Ⅵ類、Ⅴ類≤0.20漁業(yè)水質(zhì)標準GB11607-89氰化物磷酸-EDTA總氰化物≤0.005污水海洋處置工程污染控制標準GB18486-2001總氰化物磷酸-EDTA總氰化物一級標準、二級標準、三級標準≤0.5污水綜合排放標準GB8978-1996總氰化合物磷酸-EDTA總氰化物電影洗片（鐵氰化合物）一級標準、二級標準≤0.5；三級標準≤5.0其他排污單位一級標準、二級標準≤0.5；三級標準≤1.0（1998年1月1日起建設(shè)的單位）一切排污單位一級標準、二級標準≤0.5；三級標準≤1.0城鎮(zhèn)污水處理廠污染物排放標準GB18918-2002總氰化物磷酸-EDTA總氰化物≤0.5（日均值）農(nóng)田灌溉水質(zhì)標準GB5084-2021氰化物硝酸鋅-酒石酸易釋放氰化物水田作物、旱地作物、蔬菜≤0.5磷酸-EDTA總氰化物GB5084-2021HJ823-2017氰化物磷酸總氰化物表5國內(nèi)水中氰化物現(xiàn)行的標準分析方法及其局限性標準名稱標準編號方法名稱適用范圍檢出限（mg/L）局限性海洋監(jiān)測規(guī)范第4部分：海水分析GB17378.4-2007異煙酸-吡唑啉酮分光光度法大洋、近岸、河口及工業(yè)排污口水體0.0005樣品分析過程繁瑣、周期長、重現(xiàn)性差，存在二次污染及職業(yè)危害隱患（吡啶惡臭，毒性大）吡啶-巴比土酸分光光度法大洋、近岸、河口及沿岸排污口水體0.0003海洋監(jiān)測技術(shù)規(guī)程第1部分：海水HY/T147.1-2013便攜式光譜儀法河口及入海排污口水體0.0135檢出限高于海水水質(zhì)標準一類限值0.005mg/L水質(zhì)氰化物的測定流動注射-分光光度法HJ823-2017異煙酸-巴比妥酸分光光度法地表水、地下水、生活污水和工業(yè)廢水0.001適用范圍未涵蓋大洋、河口、近岸海域水體吡啶-巴比妥酸分光光度法0.002水質(zhì)氰化物的測定容量法和分光光度法HJ484-2009異煙酸-巴比妥酸分光光度法地表水、地下水、生活污水和工業(yè)廢水0.001樣品分析過程繁瑣、周期長、重現(xiàn)性差，存在二次污染及職業(yè)危害隱患（吡啶惡臭，毒性大）吡啶-巴比妥酸分光光度法0.002異煙酸-吡唑啉酮分光光度法0.004硝酸銀滴定法0.250生活飲用水標準檢驗方法第5部分：無機非金屬指標GB/T5750.5-2022異煙酸-吡唑酮分光光度法生活飲用水及其水源水0.002其樣品分析過程繁瑣、周期長、重現(xiàn)性差，存在二次污染及職業(yè)危害隱患。適用范圍未涵蓋大洋、河口、近岸海域水體。異煙酸-巴比妥酸分光光度法流動注射法連續(xù)流動法0.0010水質(zhì)氰化物等的測定真空檢測管-電子比色法HJ659-2013真空檢測管-電子比色法地下水、地表水、生活污水和工業(yè)廢水0.009檢出限高于海水水質(zhì)標準一類值0.005mg/L流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法*（擬制訂）海水0.001檢出限低、正確度高、精密度高、分析速度快；操作簡便、試劑用量少、適用于海水分析。3.國內(nèi)外相關(guān)的研究3.1國內(nèi)相關(guān)分析方法研究目前，關(guān)于水中氰化物的測定有光度法、光譜法、連續(xù)流動法、流動注射法等。然而，采用流動注射-分光光度法分析海水中氰化物的研究不多，相關(guān)分析方法研究，見表6。本研究主要參考分析方法標準GB17378.4、HJ823及GB/T5750.5，進行了分析條件優(yōu)化，并通過方法性能指標（檢出限、精密度、正確度、實際樣品加標測定、方法比對、儀器比對）等方面進行試驗，以獲得適合海水水質(zhì)標準的流動注射-分光光度法。表6國內(nèi)水中氰化物相關(guān)研究名稱文獻來源分析方法分析儀器與本標準相關(guān)內(nèi)容水質(zhì)氰化物流動注射儀法—進口儀器和國產(chǎn)儀器比較科研開發(fā)，2021年第10期流動注射法BDFIA-8000、HACHQuickchem8500流動注射法測定水質(zhì)氰化物氰化物測定標準方法探討安全與環(huán)保，2019年第6期//明確區(qū)分為易釋放氰化物和總氰化物異煙酸-巴比妥酸連續(xù)流動水質(zhì)分析儀（AA3）法測定近岸海域海水中氰化物含量資源節(jié)約與環(huán)保，2017年第9期異煙酸-巴比妥酸連續(xù)流動法AA3連續(xù)流動水質(zhì)分析儀①顯色劑為異煙酸-巴比妥酸混合試劑；②海水氰化物檢測流動注射-分光光度法測定近岸海域海水總氰化物廣東化工，2019年第17期流動注射-分光光度法San++型流動注射分析儀①流動注射-分光光度法；②海水總氰化物檢測流動注射分析海水中氰化物山東化工，2017年第20期流動注射分析法AA3流動注射分析儀海水氰化物檢測異煙酸-吡唑啉酮比色法測定海水氰化物實驗條件的選擇海洋環(huán)境科學(xué)，2017年第4期異煙酸—吡唑啉酮分光光度法分光光度計海水國標方法樣品保存時間、氯胺T量、水浴時間與溫度等對顯色反應(yīng)的影響有待完善異煙酸—吡唑啉酮分光光度法測定海水中氰化物方法改進干旱環(huán)境監(jiān)測，2008年第3期異煙酸—吡唑啉酮分光光度法分光光度計海水國標方法存在精密度和準確度不高、效率低的問題測定水中氰化物時樣品蒸餾體系的選擇城鎮(zhèn)供水，2013年第3期異煙酸-吡唑酮分光光度法分光光度計蒸餾試劑為乙酸鋅和酒石酸異煙酸-吡唑啉酮分光光度法測定海水中氰化物的改進中國環(huán)境管理于部學(xué)院學(xué)報，2004年第3期異煙酸—吡唑啉酮分光光度法分光光度計海水國標方法存在精密度和準確度不高、效率低的問題海水中微量氰化物的氣相色譜測定法海洋與湖沼，1990年第5期氣相色譜測定法氣相色譜儀海水氰化物檢測3.2國外及地區(qū)相關(guān)分析方法研究目前，國外關(guān)于水中氰化物測定的相關(guān)標準及研究，見表7。表7國外關(guān)于氰化物的研究國家、地區(qū)及國際組織標準或文章適用范圍檢出限（mg/L）分析儀器與本標準相關(guān)內(nèi)容日本流動分析用通用規(guī)則（JISK0126-2019）///提出適合于（流動注射）FIA的各種方法，只要反應(yīng)體系、進液方法及測定方法按分析目的進行有效的組合，便能得到各種適宜的分析方法。美國Sequentialdeterminationoffreeandtotalcyanidebyflowinjection廢水0.0008流動注射儀研究提出使用流動注射法測定游離氰化物和總氰化物。日本水質(zhì)氰化物的定量分析第2部分：易游離氰化物的測定（JISK0400-38-20-1999）地表水0.0025分光光度計該標準規(guī)定了測定水中易游離的氰化物測定的三種方法，方法測定范圍：0~50mg/L（易釋放氰化物），0~100mg/L（總氰化物），濃度更高的可以適當稀釋試樣后進行再測定。西班牙Photodissociation/gas-diffusionseparationandfluorimetricdetectionfortheanalysisoftotalandlabilecyanideinaflowsystem地表水0.0004連續(xù)流動注射儀采用流動注射法測定了氰化物的總種類，該方法包括紫外光解、氣體擴散分離和熒光光譜檢測。美國《Cyanide,Total(Colorimtric,AutomatedUV)》(EPAMETHOD335.3)生活飲用水和地表水、生活和工業(yè)廢水0.005連續(xù)流動注射儀方法使用斷續(xù)流動的方法分析飲用水、地表水、生活污水及工業(yè)廢水中的總氰化物，樣品在線消解，在線檢測。美國《StandardMethodsfortheExaminationofWaterandWastewater》（20thEdition）地表水、地下水、生活和工業(yè)廢水0.005流動注射儀4500-CN-O及4500-CN-N推薦使用流動注射法測定水中總氰化物。前者是利用流動注射在線處理樣品，在線檢測；后者是將樣品預(yù)蒸餾后將各類氰化物轉(zhuǎn)變?yōu)榍杌瘹?，用一定濃度的氫氧化鈉吸收液收集后，再用流動注射方法測定。（四）主要條款的說明，主要技術(shù)指標、參數(shù)、試驗驗證的論述1.主要條款本文件的章節(jié)由方法研究目標、規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、方法原理、干擾與消除、試劑與材料、儀器與設(shè)備、樣品采集與保存、實驗部分、方法比對、結(jié)果計算與表示、檢出限、精密度、正確度、質(zhì)量保證與質(zhì)量控制、注意事項組成。其中，“實驗部分”與“方法比對”是本文件的主要技術(shù)內(nèi)容。本標準規(guī)定了海水中氰化物的流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法。2.主要技術(shù)指標、參數(shù)本標準規(guī)定了海水中氰化物的流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法。利用流動注射分析儀自動進樣、在線蒸餾、在線顯色與光度測定等特點，直接取樣上機測定。通過完整樣品采集與保存方法、試樣制備、樣品干擾及消除、儀器條件等適用性驗證，以及本研究方法與國標方法比對驗證，完成性能指標（方法檢出限、精密度、正確度）、質(zhì)量保證與質(zhì)量控制等內(nèi)容試驗驗證，確定各項關(guān)鍵技術(shù)指標如方法檢出限、精密度、正確度等。并開展外部實驗室驗證，確定本方法的可行性和正確性。從而制定出能夠滿足海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測要求的流動注射法。本研究的制定技術(shù)路線如圖1。圖1方法研究技術(shù)路線圖3.試驗驗證的論述本方法采用流動注射法測定海水中氰化物。參考標準方法HJ823-2017、GB/T5750.5-2023與GB17378.4-2007，選擇乙酸鋅-酒石酸作為蒸餾試劑，通過對方法的適用性、配套的評價標準以及性能指標（方法檢出限、精密度、正確度）等內(nèi)容的驗證、條件優(yōu)化的研討、干擾的排除及選取6家實驗室對海南省遠海海域、近岸海域、趕潮河段、入海河口海水樣品和有證標準品進行檢出限、精密度、正確度等驗證。驗證結(jié)果表明，流動注射-異煙酸-巴比妥酸分光光度法具有較好的重復(fù)性和再現(xiàn)性，方法各項特性指標達到預(yù)期要求，能夠應(yīng)用于測定海水氰化物。4.方法研究報告4.1方法研究的目標4.1.1適用范圍本文件規(guī)定了流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法測定海水中氰化物。本文件適用于海水中氰化物的測定。4.1.2指標要求為了滿足生態(tài)環(huán)境標準和環(huán)境工作管理的需要，本標準擬達到：方法檢出限和正確度等指標要滿足《海水水質(zhì)標準》（GB3097-1997）、《漁業(yè)水質(zhì)標準》（GB11607-89）等標準中規(guī)定的氰化物一、二類水質(zhì)限值要求。4.2規(guī)范性引用文件GB17378.3海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運輸GB17378.4海洋監(jiān)測規(guī)范第4部分：海水分析GB/T5750.5生活飲用水標準檢驗方法第5部分：無機非金屬指標HJ442.4近岸海域環(huán)境監(jiān)測規(guī)范HJ823水質(zhì)氰化物的測定流動注射-分光光度法4.3術(shù)語和定義易釋放氰化物easilyliberatablecyanide在pH為4左右的弱酸條件中，硝酸鋅存在下，加熱蒸餾形成氰化氫的氰化物，包括全部簡單氰化物（多為堿金屬和堿土金屬的氰化物）和鋅氰絡(luò)合物，不包括鐵氰絡(luò)合物、亞鐵氰絡(luò)合物、銅氰絡(luò)合物、鎳氰絡(luò)合物、鈷氰絡(luò)合物。4.4方法原理在弱酸性條件下，水中氰化物經(jīng)過流動注射分析儀在線蒸餾，通過膜分離器分離，釋放出的氰化氫氣體被連續(xù)流動的氫氧化鈉溶液吸收，吸收液中的氰化物與氯胺T反應(yīng)轉(zhuǎn)化成氯化氰；氯化氰與異煙酸-巴比妥酸試劑反應(yīng)，生成藍紫色化合物，再進行比色測定。4.5干擾和消除根據(jù)GB17378等相關(guān)要求，海水試樣中若存在活性氯等氧化性物質(zhì)干擾測定，應(yīng)在蒸餾前加亞硫酸鈉（NaSO3）溶液消除干擾；存在硫化物干擾測定，應(yīng)在蒸餾前加碳酸鎘（CdCO3）或碳酸鉛（PbCO3）固體粉末消除干擾；低濃度樣品，鐵氰化物或亞鐵氰化物會干擾樣品測定，可通過加大乙酸鋅的濃度去除。4.6試劑與材料除非另有說明，分析時均使用符合國家標準的分析純試劑。實驗所用試劑和水均需用超聲除氣，可以使用超聲波振蕩30min除氣或其他等效方法。4.6.1氯化鈉（NaCl）。4.6.2氫氧化鈉（NaOH）。4.6.3酒石酸（H2C4H4O6）。4.6.4無水磷酸二氫鉀（KH2PO4），優(yōu)級純。4.6.5氯胺-T[C7H7ClNNaO2S·3H2O]。4.6.6巴比妥酸（C4H4N2O3)。4.6.7異煙酸（C6H5NO2)。4.6.8乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O]。4.6.9乙酸鋅溶液（3.3g/L），pH≈4。稱取3.3g乙酸鋅（4.6.8），溶于800ml去離子水中，待完全溶解完全后，加入13.21g酒石酸（4.6.3），攪拌至完全溶解，用水定容至1000ml，若有沉淀形成，應(yīng)棄去。臨用時測定pH值。4.6.10氫氧化鈉溶液（1g/L）。稱取1.0g氫氧化鈉（4.6.2）溶于適量去離子水中，溶解后移至1000ml容量瓶中，加水至標線，混勻。該溶液移至聚乙烯瓶中保存。4.6.11磷酸二氫鉀溶液（97g/L）。稱取97.0g無水磷酸二氫鉀（4.6.4）溶于800ml去離子水中（磁力攪拌至完全溶解），加水定容至1000ml。若有沉淀形成，應(yīng)棄去。4.6.12氯胺-T溶液（2g/L）。稱取2.0g氯胺-T（4.6.5）溶于適量去離子水中，溶解后移至1000ml容量瓶中，加水至標線，混勻。該溶液移至棕色容器中保存。臨用時現(xiàn)配。4.6.13異煙酸-巴比妥酸溶液（13.6g/L）。稱取12g氫氧化鈉（4.6.2）于700ml去離子水中，待完全溶解后，邊攪拌邊加入13.6g巴比妥酸（4.6.6）和13.6g異煙酸（4.6.7），溶解后加水定容至1000ml。臨用現(xiàn)配。4.6.14氰化鉀（KCN）標準溶液（市售）ρ（CN-）=50.0mg/L。4.6.15氰化鉀標準使用溶液：ρ（CN-）=1.00mg/L。準確吸取2.00ml氰化鉀標準溶液（5.6.14）于100ml棕色容量瓶中，用氫氧化鈉溶液（4.6.10）稀釋至標線，搖勻，避光，臨用現(xiàn)配。4.7儀器和設(shè)備4.7.1流動注射儀：包括自動進樣器、化學(xué)反應(yīng)模塊（注入泵、反應(yīng)通道及檢測池，光程一般為10mm）、蠕動泵、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。4.7.2分析天平：精度為0.1mg。4.7.3超聲波儀：頻率40kHz。4.7.4一般實驗室常用儀器和設(shè)備。4.8樣品的采集與保存根據(jù)GB17378.3、HJ442進行樣品采集、保存及運輸。采集的水樣貯存于玻璃容器中；水樣采集后立即加入氫氧化鈉固定，使水樣pH＞12，水樣應(yīng)盡快測定，若不能及時測定，必須將水樣在4℃以下冷藏，并在采樣后24h內(nèi)完成樣品分析。注:有明顯顆粒物的樣品應(yīng)用超聲儀超聲粉碎后進樣。4.9實驗部分4.9.1方法實驗條件研究樣品保存海水樣品的采集與保存參考GB17378，本方法采用35‰人工海水、某海域海水（33‰）加標樣品測定的方式進行pH影響試驗，試樣均在24h內(nèi)完成測定，分析結(jié)果見圖2。結(jié)果表明，樣品采集后須立即加入氫氧化鈉使pH＞12。圖2樣品保存條件—pH值試樣制備流動注射分析儀具有自動進樣、分析速度快等特點，但其管路孔徑較小，若試劑或是試樣中存在明顯顆粒物，則容易造成管路堵塞。因此，本方法對某近岸海域海水樣品加標后通過直接進樣、濾膜過濾以及超聲處理3種方式進行試驗，分析結(jié)果見圖3。由此可知，混勻后直接進樣、經(jīng)0.45μm濾膜過濾后進樣、微波超聲30min后進樣等3種樣品前處理方式測定結(jié)果的加標回收率無明顯差異（回收率范圍在100%~108%），因此，若海水樣品中存在明顯顆粒物，為避免管路堵塞，可通過濾膜過濾或微波超聲方式進行處理后再上機測定。圖3試樣制備方式在線蒸餾與顯色反應(yīng)體系研究（1）氰化物蒸餾試劑試驗因酒石酸根能與多種金屬離子相絡(luò)合，減少CN—與金屬離子絡(luò)合的機會，使CN—易于釋出。酒石酸本身易發(fā)生縮合反應(yīng)，對CN—有一定的吸附作用，但在pH為4條件下，縮合反應(yīng)不易發(fā)生，所以預(yù)蒸餾時加酒石酸較好。蒸餾時加入乙酸鋅，也可防止S2—的干擾以及阻止鐵氰化物與亞鐵氰化物等部分絡(luò)合氰化物的分解。這是由于生成的硫化鋅、鐵化鋅和亞鐵氰均不溶于弱酸（酒石酸）而不被蒸餾出來，從而消除干擾。若不加乙酸鋅，在酸性條件下S2—將生成黑色硫化銀，不便比色?？傊尤胍宜徜\可以去除部分硫化物的干擾，同時可以抑制部分絡(luò)合氰化物的解離。本方法參照標準GB/T5750.5，選用了其乙酸鋅-酒石酸溶液配比進行試驗。通過水質(zhì)氰化物有證標準物質(zhì)（QCM-SW0502301，濃度：0.197±0.029mg/L）和海水實際樣品加標2種方式進行測定，測定結(jié)果見表8，由此可知，本研究選用的乙酸鋅-酒石酸蒸餾試劑能夠滿足監(jiān)測要求。表8乙酸鋅-酒石酸蒸餾體系驗證—有證標準物質(zhì)試驗（QCM-SW0502301）測定結(jié)果（mg/L）平均值（mg/L）相對誤差%0.1990.2030.2040.1900.1980.2000.1991.0表9乙酸鋅-酒石酸蒸餾體系驗證—海水樣品加標試驗測定結(jié)果（mg/L）加標量（mg/L）平均值（mg/L）加標回收率%0.00830.00830.00790.00860.00810.00820.0080.00821020.02030.02040.02060.02020.01990.02050.0200.02031020.04120.04180.04110.04200.04010.04080.0400.0411103（2）氯胺T濃度試驗氯胺T是一種弱氧化劑，能夠釋放出活性氯，從而氧化氰化氫氣體。其在潮濕環(huán)境中或光照下，可能會分解，從而失去氧化活性。因此，開封后的氯胺T需要定期進行有效氯成分的檢測。據(jù)相關(guān)研究了解到，氯胺T濃度過高或過低均會影響反應(yīng)。參照HJ823及GB/T5750.5，本方法對不同濃度梯度的氯胺T進行試驗，采用測定水質(zhì)氰化物有證標準物質(zhì)（QCM-SW0502301，濃度：0.197±0.029mg/L）和實際樣品的加標2種方式進行試驗，分析結(jié)果見表10、圖4。由此可知，有證標準物質(zhì)的測定結(jié)果均在標準范圍內(nèi)，實際樣品的加標回收率能滿足監(jiān)測要求。但，隨著氯胺T濃度的增加，同一濃度的標準樣品的響應(yīng)值在降低，尤其對高濃度試樣影響更為明顯。因此，本方法選定2g/L為最適濃度。（3）異煙酸-巴比妥酸顯色劑選擇據(jù)相關(guān)研究了解到，流動注射法測定水質(zhì)氰化物，選用堿性異煙酸-巴比妥酸作為顯色劑。參照HJ823及GB/T5750.5，本方法對兩種配比的顯色劑進行試驗，采用水質(zhì)氰化物有證標準物質(zhì)（QCM-SW0502301，濃度：0.197±0.029mg/L）和3個濃度的標準溶液的方式進行試驗，分析結(jié)果見表11、圖5。由測定結(jié)果可知，兩者的有證標準物質(zhì)的測定結(jié)果均在標準范圍內(nèi)，標準溶液的相對偏差也在范圍內(nèi)，但是較高濃度顯色劑的響應(yīng)值較大，由于海水中氰化物濃度很低，為了提高方法的靈敏度。因此，本方法選定的顯色劑含量比為每升水中異煙酸：巴比妥酸=13.6g:13.6g。4.9.2鹽度影響試驗研究測定水中氰化物方法標準有HJ823-2017與GB/T5750.5-2023。前者的適用范圍包括地表水、工業(yè)廢水、生活污水，后者用于測定生活飲用水中易釋放氰化物。采用流動注射法測定海水中氰化物尚無國家標準。基于試樣基體的不同，為研究鹽度是否影響流動注射—異煙酸-巴比妥酸分光光度法測定海水中氰化物，本方法通過對不同鹽度的人工海水樣品進行加標試驗，分析結(jié)果見表12。結(jié)果表明，鹽度不影響本方法測定海水中氰化物。表12鹽度影響試驗鹽度（‰）加標量（mg/L）測定均值（mg/L）相對偏差（%）加標回收率（%）50.0020.00192.796.1100.00223.3110250.00192.792.5350.00194.392.650.0100.00972.396.8100.01071.5107250.00911.591.3350.01041.710450.0800.08114.0101100.08630.8108250.07741.096.7350.08740.81094.9.3儀器上機測試過程試劑脫氣處理在儀器運行測定樣品前，需要通過微波超聲等方式去除氣泡，否則流通式的檢測器輸出信號受干擾而無法進行樣品測定，氣泡干擾情況見圖6。圖6脫氣處理對測定的影響流動注射分析儀的調(diào)試按照說明書安裝分析系統(tǒng)、調(diào)試儀器及設(shè)定工作參數(shù)。按儀器規(guī)定的順序開機后，以純水代替所有試劑，檢查整個分析流路的密閉性及液體流動的順暢性。待基線穩(wěn)定后，系統(tǒng)開始泵入試劑，待基線再次穩(wěn)定后，開始校準和測定。標準系列的校準于一組容量瓶中分別移取適量的氰化物標準使用液（4.6.15），用氫氧化鈉溶液（4.6.10）稀釋至標線并混勻，制備6個濃度點的標準系列，氰化物質(zhì)量濃度（以CN—計，mg/L）分別為：0.000、0.002、0.005、0.010、0.020、0.050、0.100。注：校準曲線應(yīng)包含零點在內(nèi)的至少6個濃度點。在滿足監(jiān)測要求的前提下，可根據(jù)樣品的實際情況調(diào)節(jié)濃度范圍。取適量的上述標準系列溶液于樣品管中，從低濃度到高濃度依次進樣分析，得到不同濃度氰化物的信號值（峰面積）。以信號值（峰面積）為縱坐標，對應(yīng)的氰化物質(zhì)量濃度（以CN—計，mg/L）為橫坐標，繪制曲線?；貧w方程按公式（1）計算。y=bx+a(1)式中：y——測定信號值（峰面積）；x——氰化物的質(zhì)量濃度，mg/L；a——校準曲線的截距；b——校準曲線的斜率。試樣測定按照與繪制校準曲線相同的測定條件，取適量的試樣于樣品管中進行測定，記錄信號值（峰面積）。若濃度高于校準曲線的最高點，須對樣品進行稀釋?？瞻自囼炄?0ml氫氧化鈉溶液（1g/L）代替樣品，按照與樣品分析相同步驟進行測定，記錄信號值（峰面積）。4.10方法比對將有證標準物質(zhì)（QCM-SW0502301）稀釋不同倍數(shù)，分別用流動注射法和國標手工法（GB17378.4-2007）測定，比對兩者測定結(jié)果的相對誤差和相對標準偏差，測定結(jié)果見表13。由實驗數(shù)據(jù)可知，兩種方法的測定結(jié)果均在標準物質(zhì)的誤差范圍內(nèi)，其中流動注射法的誤差為-1.0%~1.0%，相對標準偏差為1.9%~4.8%；國標手工分光光度法的誤差為-7.1%~1.5%，相對標準偏差為1.9%~7.3%。同時，對6次平行測定的結(jié)果進行t檢驗，經(jīng)計算得知t值均小于t0.05（10）=2.23，表明兩種方法測定海水中氰化物的結(jié)果無顯著差異。對海水實際樣品及其加標樣品，分別按照本標準方法和國標手工法（GB17378.4-2007）進行比對實驗，表14列出了6次平行測定的結(jié)果，并進行t檢驗，經(jīng)計算得知兩組t值分別為0.877及1.507均小于t0.05（10）=2.23，表明兩種方法測定海水中氰化物的結(jié)果無顯著差異。表13方法比對—標準物質(zhì)比對試驗方法稀釋倍數(shù)測定結(jié)果（mg/L）平均值（mg/L）相對誤差%相對標準偏差%t檢驗A50倍0.2000.1880.2120.1890.1960.1880.195-1.04.8/B0.1890.1810.1790.1840.1760.1860.183-13C0.1820.1900.1940.1900.2120.2040.195-1.05.10.978A20倍0.1970.1960.2020.1970.1940.1900.196-0.51.9/B0.2000.2110.2190.2080.1880.1760.20032C0.1780.1890.1960.1860.2040.1890.190-83A5倍0.1990.2030.2040.1900.1980.2000.1991.02.3/B0.1920.1790.1850.1830.1870.1910.186-01C0.1960.1880.1870.1980.1900.1950.192-37注：1、標準樣品（QCM-SW0502301，濃度0.197±0.029mg/L）；2、方法名稱：A指流動注射—異煙酸-巴比妥酸法、B指異煙酸-吡唑啉酮分光光度法（GB17378.4-2007）、C指吡啶-巴比土酸分光光度法（GB17378.4-2007）。表14方法比對—實際樣品加標比對試驗方法測定結(jié)果（mg/L）加標量（mg/L）平均值（mg/L）相對標準偏差（%）加標回收率%t檢驗A0.00830.00830.00790.00860.00810.00820.0080.00822.4102.5/B0.00650.00650.00680.00690.00670.00720.00684.485.00.000C0.00700.00680.00650.00730.00680.00750.00705.787.50.268A0.02030.02040.02060.02020.01990.02050.0200.02031.0101.5/B0.01770.01790.01780.01650.01700.01730.01742.987.00.000C0.01730.01810.01710.01710.01820.01730.01752.987.50.629A0.04120.04180.04110.04200.04010.04080.0400.04121.7103.0/B0.03580.03520.03510.03650.03380.03350.03503.487.50.000C0.03610.03330.03480.03600.03330.03550.03483.787.00.835注：1、海水實際樣品中氰化物未檢出；2、方法名稱：A指流動注射—異煙酸-巴比妥酸法、B指異煙酸-吡唑啉酮分光光度法（GB17378.4-2007）、C指吡啶-巴比土酸分光光度法（GB17378.4-2007）。4.11結(jié)果計算與表示4.11.1結(jié)果計算樣品中的氰化物濃度（以CN-計，mg/L），按式（2）計算。（2）式中：ρ—樣品中氰化物的質(zhì)量濃度，mg/L；y—測定信號值（峰面積）；a—校準曲線方法的截距；b—校準曲線方法的斜率；f—稀釋倍數(shù)。4.11.2結(jié)果表示當測定結(jié)果小于1mg/L時，保留小數(shù)點后3位，測定結(jié)果大于等于1mg/L時，保留3位有效數(shù)字。4.12檢出限根據(jù)HJ168-2020中關(guān)于檢出限的有關(guān)規(guī)定，空白試樣中未檢測出目標物的檢出限確定法，配制濃度為0.005mg/L的氰化物空白加標樣品，按照樣品的全部分析步驟進行測定，平行測定7次，按公式（3）計算檢出限。如果連續(xù)測定7個樣品，在99%的置信區(qū)間，此時t(n-1,0.99)=3.143。以4倍的樣品檢出限作為測定下限，即RQL=4×MDL，測定結(jié)果見表15。當檢測光程為10mm時，本方法檢出限為0.001mg/L，測定下限為0.004mg/L。該方法檢出限滿足各標準限值要求。MDL=t(n-1,0.99)×S（3）式中：MDL——方法檢出限；n——樣品的平行測定次數(shù)；t——自由度為n-1，置信度為99%時的分布（單側(cè)）；S——n次平行測定的標準偏差。表15方法檢出限（mg/L）目標物測定值平均值標準偏差檢出限測定下限氰化物12345670.00520.00480.00500.00530.00530.00530.00480.00510.000230.0010.0044.13精密度實驗室內(nèi)分別1種有證標準物質(zhì)和空白加標樣品進行精密度測試，平行測定了6次，測定結(jié)果見表16。由表中結(jié)果可知，測定值的相對標準偏差在1.6%~4.4%之間，本方法精密度良好。表16方法精密度-標準物質(zhì)及空白加標測定平行號空白加標（mg/L）質(zhì)控樣（0.197±0.029mg/L）0.00500.04000.0800稀釋50倍稀釋25倍稀釋5倍測定值（mg/L）10.00520.04200.07990.2000.1970.20420.00510.04120.08180.1880.2050.19430.00520.04000.08010.2120.1920.19140.00490.04110.07890.1890.1850.19050.00500.04050.08230.1880.1950.19160.00500.03970.07970.1960.1900.195平均值（mg/L）0.00510.04080.08050.1950.1940.194標準偏差S0.000120.000850.001310.0090.0060.005相對標準偏差%2.42.11.64.14正確度由表16可知，對氰化物有證標準物質(zhì)進行6次平行測定，其相對誤差在2.4%~4.4%；此外，分別對4種不同類型的海水及其樣品加標進行實際樣品加標回收測定，結(jié)果見表17。由表中結(jié)果可知，測定的加標回收率在92.5%~105%之間，本方法正確度良好。表17方法正確度-不同類型海水樣品測定（mg/L）樣品測定結(jié)果加標量平均值加標回收率%a0.00010.00020.00010.00000.00010.0003（本底值）0.0001/0.00430.00420.00440.00400.00380.00430.00400.00421020.01100.01100.01060.01020.01050.01020.01000.01061050.07600.07610.07640.07200.07300.07100.08000.074192.5b0.00010.00010.00020.00000.00000.0003（本底值）0.0001/0.00430.00430.00440.00400.00410.00400.00400.00421020.01060.01040.01070.01060.01020.00970.01000.01041030.08330.07940.08200.08080.08080.07940.08000.0810101c0.00020.00020.00010.00000.00010.0000（本底值）0.0001/0.00440.00380.00410.00410.00420.00420.00400.0041100.00.00960.00970.00930.00980.00930.00940.01000.009594.00.08070.08160.08020.07910.08060.07880.08000.0802100注：a—遠海海域海水，b—近岸海域海水；c—入海河口海水4.15方法的適用性研究海南省地處熱帶，位于北緯19度20分至20度10分，東經(jīng)108度21分至111度3分之間，屬于熱帶季風(fēng)氣候，四面環(huán)海，陸域面積3.44萬km2，近岸海域面積2.37萬km2，擁有海岸線長約180km。海南省地勢中高周低，河流眾多，從中心向四周呈放射狀流入南海。為驗證方法的適用性，本方法結(jié)合海南省海域廣闊、海岸線長、海水類型多樣等特點，選取了遠海、近海、趕潮河段、入海河口等四個基體不同的海水樣品（四種不同海水基體差異見表18，2023年秋季海南省近岸海域水質(zhì)狀況見圖7）對其樣品及加標樣品進行測定，測定結(jié)果見表19。由表中結(jié)果可知，四類海水加標樣品均具有較高的回收率。因此，本方法適用于海南省區(qū)域內(nèi)海水中氰化物的測定，適用性廣。表18四種不同海水基體的差異海水樣品名稱定義鹽度范圍鹽度變化情況水質(zhì)影響因素遠海海域樣品指距海岸線200海里以外的海域海水樣品。35%～36%穩(wěn)定，基本無變化降水量和蒸發(fā)量、溫度等自然因素近海海域樣品通常指距海岸線200海里以內(nèi)的海域海水樣品。30%～34.5%變化幅度較小河川徑流入海、人類活動等趕潮河段樣品指河口至潮區(qū)界的河段海水樣品。<30%空間內(nèi)劇烈變化潮汐影響入海河口樣品指河或者川流入海里的入口，即淡水和海水混合的區(qū)域海水樣品<30%空間內(nèi)劇烈變化徑流和外海潮流圖72023年秋季海南省近岸海域水質(zhì)狀況圖表19方法精密度-不同類型海水樣品測定平行號遠海海域海水（33‰）近岸海域海水（30‰）趕潮河段海水（13‰）入海河口海水（20‰）本底值加標樣本底值加標樣本底值加標樣本底值加標樣測定結(jié)果（mg/L）10.00010.01110.00010.01030.00010.01990.00010.021020.00020.01000.00020.00920.00020.01910.00000.022830.00000.00980.00010.01150.00000.02010.00010.021040.00010.00950.00010.01090.00020.02220.00010.021550.00020.00970.00020.00990.00020.02030.00020.023060.00000.01100.00000.01070.00010.01970.00000.0190平均值（mg/L）0.00010.01020.00010.01040.00010.02020.00010.0214加標量（mg/L）0.01000.01000.02000.0200標準偏差0.00060.00080.00110.0010相對標準偏差（%）6.8加標回收率（%）1011031001064.16質(zhì)量保證和質(zhì)量控制4.16.1空白試驗每20個樣品或每批次（少于20個樣品/批）至少分析2個空白試樣，空白試樣的測定值應(yīng)低于方法檢出限。4.16.2標準曲線每批樣品分析均須繪制校準曲線，校準曲線的相關(guān)系數(shù)應(yīng)≥0.9990。每分析20個樣品需用一個校準曲線的中間濃度校準溶液進行校準核查，其測定結(jié)果與校準曲線該點濃度的相對偏差應(yīng)＜±10%。4.16.3精密度和正確度控制根據(jù)HJ442要求，每批樣品應(yīng)至少測定10%的平行雙樣，應(yīng)至少測定10%的加標樣品（或有證標準物質(zhì)），實驗室內(nèi)精密度和正確度的參考標準，見表20。表20實驗室質(zhì)量控制參考標準分析結(jié)果所在數(shù)量級（mg/L）精密度（%）準確度（%）平行雙樣相對偏差實驗室內(nèi)相對標準偏實驗室間相對標準偏加標回收率實驗室內(nèi)相對誤差實驗室間相對誤差1001.0≤5≤1095～105±5±10102.5≤5≤1090～110±5±1015≤10≤1590～110±10±150.110≤10≤1580～110±10±150.0120≤15≤2060～110±15±200.00130≤15≤2060～120±15±200.000150≤20≤2560～120±20±254.17注意事項（1）應(yīng)注意流動注射儀管路系統(tǒng)的保養(yǎng)，樣品分析結(jié)束后，及時進行管路清洗及排空。（2）為避免鹽分晶體堵塞管路，建議分析15~20個海水樣品后進行管路酸洗2~3次。（3）在廢液收集瓶中，應(yīng)加入氫氧化鈉使得pH＞12，以防止氣態(tài)氰化物逸出。應(yīng)定期搖動廢液瓶，以防在瓶中形成濃度梯度。（4）有明顯顆粒物或沉淀的樣品進行適當處理后才上機分析。（5）須經(jīng)常檢查氯胺T溶液是否失效，檢查方法：取配成的氯胺T溶液若干毫升，加入鄰甲聯(lián)苯胺，若呈血紅色，則氯胺T含量充足，若呈淡黃色，則說明氯胺T含量不足，應(yīng)重新配制。（6）接觸氰化物時務(wù)必小心，要防止噴濺在任何物體上，嚴禁氰化物與酸接觸，不可用嘴直接吸取氰化物溶液，若操作者手上有破傷或潰爛，必須帶上膠皮手套保護。5.方法驗證5.1方法驗證方案5.1.1驗證單位情況本標準按照《國家生態(tài)環(huán)境標準制修訂工作規(guī)則》（國環(huán)規(guī)法規(guī)〔2020〕4號）、《標準編寫規(guī)則第4部分：試驗方法標準》（GB/T20001.4-2015）及《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ/T168-2020）的規(guī)定。選取6家通過計量認證或?qū)嶒炇艺J可的實驗室進行方法驗證，各實驗室均具有氰化物測定的儀器設(shè)備，儀器設(shè)備覆蓋我省主流儀器品牌，通過驗證以確保本標準方法采用的分析技術(shù)、規(guī)定的各項技術(shù)指標準確可靠。參與方法驗證的實驗室分別是：海南省環(huán)境科學(xué)研究院、?？谑猩鷳B(tài)環(huán)境監(jiān)測站、五指山市生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站、陵水黎族自治縣生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站、澄邁縣生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站、樂東黎族自治縣生態(tài)環(huán)境監(jiān)測站。5.1.2方法驗證內(nèi)容按照《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修定技術(shù)導(dǎo)則》（HJ/T168-2020）的規(guī)定，組織六家有資質(zhì)的實驗室進行驗證。驗證樣品為標準編制組統(tǒng)一分發(fā)給各驗證實驗室。根據(jù)影響方法的精密度和正確度的主要因素和數(shù)理統(tǒng)計學(xué)的要求，編制方法驗證方案，確定樣品類型、含量水平、分析人員、分析設(shè)備、分析時間及重復(fù)測試次數(shù)等，驗證單位按《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ168-2020）的要求完成方法驗證報告。方法驗證報告主要包括檢出限、精密度、正確度等驗證數(shù)據(jù)。儀器參考條件不同型號儀器的最佳測試條件不同，根據(jù)儀器使用說明書優(yōu)化測量條件或參數(shù)，將儀器調(diào)節(jié)至最佳工作狀態(tài)。標準曲線的建立量取適量標準系列溶液分別置于樣品管中，從低濃度到高濃度依次進樣分析，得到不同濃度氰化物的信號值（峰面積）。以信號值（峰面積）為縱坐標，對應(yīng)的氰化物質(zhì)量濃度（以CN—計，mg/L）為橫坐標，繪制曲線?；貧w方程按公式（1）計算，曲線及相關(guān)系數(shù)為y=bx+a，實際標準曲線應(yīng)包含0點在內(nèi)的至少6個濃度點，可根據(jù)樣品的實際情況調(diào)節(jié)濃度范圍。y=bx+a(1)式中：y——測定信號值（峰面積）；x——氰化物的質(zhì)量濃度，mg/L；a——標準曲線截距；b——標準曲線斜率。方法檢出限和測定下限根據(jù)HJ168-2020中關(guān)于檢出限的有關(guān)規(guī)定，空白試樣中未檢測出目標物的檢出限確定法，配制濃度為0.005mg/L的氰化物標準溶液，按照樣品的全部分析步驟進行測定，平行測定7次，按公式（3）計算檢出限。如果連續(xù)測定7個樣品，在99%的置信區(qū)間，此時t(n-1,0.99)=3.143。以4倍的樣品檢出限作為測定下限，即RQL=4×MDL。MDL=t(n-1,0.99)×S（3）式中：MDL——方法檢出限；n——樣品的平行測定次數(shù)；t——自由度為n-1，置信度為99%時的分布（單側(cè)）；S——n次平行測定的標準偏差。方法精密度各驗證實驗室按實驗步驟分別對人工海水及其加標樣品進行測定，每個樣品平行測定6次，并對測定值、實驗室內(nèi)相對標準偏差、實驗室間相對標準偏差、重復(fù)性限、再現(xiàn)性限等各項參數(shù)進行了計算。方法正確度及適用性驗證各驗證實驗室按實驗步驟對有證標準物質(zhì)（QCM-SW0502301）、4類不同海水樣品及其加標樣品進行測定，平行測定6次，并對測定值、實驗室內(nèi)相對誤差、實驗室間相對誤差、相對誤差最終值等參數(shù)進行了計算。各驗證實驗室通過在實際海水樣品中加入一定量的氰化物標準溶液，進行加標回收試驗，計算其加標回收率。5.2方法驗證過程5.2.1主要工作過程首先，通過篩選確定方法驗證單位。按照方法驗證方案準備實驗用品，與驗證單位確定驗證時間。在方法驗證前，參加驗證的分析人員應(yīng)熟悉和掌握方法原理、操作步驟及流程。方法驗證過程中所用的試劑和材料、儀器和設(shè)備及分析步驟符合方法相關(guān)要求。方法驗證過程中所用的試劑和材料、儀器和設(shè)備及分析步驟應(yīng)符合方法相關(guān)要求。六家驗證實驗室依據(jù)《海水氰化物的測定異煙酸-巴比妥酸—分光光度法》驗證方案，進行精密度、正確度驗證實驗，同時進行了檢出限的相關(guān)實驗。確定驗證報告提交時間。驗證過程中遇到問題及時溝通、交流和解決。5.2.2方法驗證結(jié)論《方法驗證報告》見附件。各實驗室驗證結(jié)果表明，方法檢出限低于各類海水控制標準限值，能夠滿足測定需求，方法精密度和正確度統(tǒng)計結(jié)果能滿足方法特性指標要求。（五）標準中如果涉及專利，應(yīng)有明確的知識產(chǎn)權(quán)說明本標準未涉及專利。（六）采用國際標準或國外先進標準的，說明采標程度，以及國內(nèi)外同類標準水平的對比情況目前，關(guān)于水中氰化物的測定方法許多，有光度法、光譜法、連續(xù)流動法、流動注射法等。國內(nèi)水中氰化物測定現(xiàn)行的標準分析方法見表5，國內(nèi)相關(guān)分析方法研究見表6。本標準主要海洋監(jiān)測規(guī)范第4部分：海水分析》（GB17378.4-2007）、《水質(zhì)氰化物的測定流動注射-分光光度法》（HJ823-2017）、《生活飲用水標準檢驗方法第5部分：無機非金屬指標》（GB/T5750.5-2023）、《水質(zhì)氰化物的測定容量法和分光光度法》（HJ484-2009）。對蒸餾試劑由“乙酸鋅-酒石酸溶液”代替“磷酸溶液”等條件進行了實驗論證，在方法性能指標（檢出限、精密度、正確度、實際樣品加標測定、方法比對）等方面進行試驗，以獲得適合海水水質(zhì)標準的流動注射分析方法。驗證結(jié)論顯示，該方法具有普遍適用性，易于推廣使用，且與主要國際組織和國家推薦使用的技術(shù)方法具有可比性。保證方法標準的科學(xué)性、先進性、可行性和可操作性。（七）重大分歧意見的處理依據(jù)和結(jié)果由于本標準為地方性基本要求，在制定過程中經(jīng)常與行業(yè)專家、地方有關(guān)部門、科研機構(gòu)、高等院校、有關(guān)企業(yè)及其他單位等進行溝通，本標準文本未見重大分歧意見。（八）貫徹標準的要求和措施建議（包括組織措施、技術(shù)措施、過渡辦法、實施日期等）1.組織措施由省生態(tài)環(huán)境廳牽頭，加強組織領(lǐng)導(dǎo)和監(jiān)督檢查，確保標準的落實。2.技術(shù)措施開展對相關(guān)部門和人員的標準宣貫和培訓(xùn)工作，介紹本標準制訂的原因、過程及意義，講解本標準的主要技術(shù)內(nèi)容及本標準實施過程中可能遇到的問題及解決辦法，以求逐步在海南省各級有關(guān)單位及企業(yè)推廣實施。3.過渡方法針對不同階段的工作，制定合理的過渡措施，確保各項工作的順利銜接。4.實施日期本文件正式發(fā)布實施之日起。（九）預(yù)期效果1.社會效益流動注射分析法準確、快速地測定海水中氰化物，能更好的為環(huán)境保護和治理工作提供真實可靠的依據(jù)，為海南省海水質(zhì)量管理提供決策支持，為海南自由貿(mào)易試驗區(qū)和美好新海南建設(shè)提供重要技術(shù)保障，對促進海南島的經(jīng)濟發(fā)展，具有重要的社會效益。2.生態(tài)效益開展海水中氰化物流動分析監(jiān)測技術(shù)研究可為海南省海水污染治理提供科學(xué)依據(jù)，提升我省在海水氰化物監(jiān)測、生態(tài)風(fēng)險評估和管控方面的綜合能力，積極地應(yīng)對海洋污染，推進海南國家生態(tài)文明試驗區(qū)建設(shè)，具有重要的生態(tài)效益。（十）其他應(yīng)予說明的事項無。參考文獻[1]HJ484水質(zhì)氰化物的測定容量法和分光光度法.[2]HJ823水質(zhì)氰化物的測定流動注射-分光光度法.[3]GB17378海洋監(jiān)測規(guī)范第4部分：海水分析.[4]郭玉文,李在田,丁鑄昌.異煙酸-吡唑啉酮分光光度法測定海水中氰化物的改進.[J].中國環(huán)境管理干部學(xué)院學(xué)報,2004,14(3):55-57.[5]HJ168環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制訂技術(shù)導(dǎo)則.[6]METHOD335.3Cyanide,Total(Colorimtric,AutomatedUV).[7]LenoreS.Clesceriet.al,StandardMethodsfortheExaminationofWaterandWastewater,20thEdition.[8]IS014403-2002Waterquality-Determinationoftotalcyanideandfreecyanidebycontinuousflowanalysis.[9]EPAMethod9013(AppendixtoMethod9010)CyanideExtractionProcedureforSolidsandOils.[10]李銳,李彥懿,肖得力.氰化物定量檢測方法應(yīng)用研究進展[J].藥物分析雜志,2016,36(12):2075-2083.[11]宗燕平,張秋豐,劉森.異煙酸-吡唑啉酮比色法測定海水氰化物實驗條件的選擇[J].海洋環(huán)境科學(xué),2017,36(4):566-570.[12]羅龍娟，張勇，王海宇.異煙酸-巴比妥酸連續(xù)流動水質(zhì)分析儀（AA3）法測定近岸海域海水中氰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