DB52∕T 1254-2017 生物安全柜檢測技術(shù)規(guī)范

DB52DB52/T1254—2017生物安全柜檢測技術(shù)規(guī)范TechnicalPracticeforTestingBiosafetyCabinets2017-10-08發(fā)布2017-05-08實(shí)施貴州省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I 1 1 1 2 2 3 1生物安全柜檢測技術(shù)規(guī)范本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生物安全柜檢測的術(shù)語和定義、分級及類型和特點(diǎn)、要求、檢測方法、檢測記錄及報(bào)告、檢測規(guī)則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于I級、Ⅱ級生物安全柜安裝及維護(hù)后的檢測。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。YY0569Ⅱ級生物安全柜3術(shù)語和定義YY0569界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。生物安全柜Biologicalsafetycabinet;BSC防止操作著和環(huán)境暴露于實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的生物氣溶膠而設(shè)置的負(fù)壓過濾排風(fēng)柜。生物安全柜柜體內(nèi)正常運(yùn)行狀態(tài)下含生物氣溶膠的懸浮粒子數(shù)。從生物安全柜前窗操作口流入的氣流。下降氣流Downflowair從生物安全柜上方經(jīng)高效過濾器過濾的垂直向下流向工作區(qū)的氣流。下降氣流Downflowair從生物安全柜上方經(jīng)高效過濾器過濾的垂直向下流向工作區(qū)的氣流。2前窗操作口向內(nèi)吸入的負(fù)壓氣流用以保護(hù)人員的安全；氣流經(jīng)高效過濾4.2.2Ⅱ級生物安全柜是有前窗操作口的安全柜，操作者可以通過前窗操作口在安全柜內(nèi)進(jìn)行操作。5.1.1應(yīng)有完整的生物安全標(biāo)識、名稱、型號、出廠編號、制造廠名、制造日期、額定工作3表1技術(shù)要求I級一柜)m/s—全柜)m/s一各區(qū)域下降的平均流速在其區(qū)域下降氣流標(biāo)稱值±0.015之間噪聲dB(A)≤照度lx≥650(每個(gè)測量點(diǎn)不小于430)紫外輻射強(qiáng)度uW/m2≥高效過濾器完整性(漏過率)≤0.01%(可掃描檢測)人員保護(hù)≤0.005%(不可掃描檢測)6檢測方法6.1外觀及標(biāo)識目測檢查和運(yùn)行觀察檢測外觀。6.2潔凈度6.2.1檢測設(shè)備塵埃粒子計(jì)數(shù)器：粒徑分辨率為0.5μm起始，流量為28.3L/min或者2/83L/min,經(jīng)檢定校準(zhǔn)合6.2.2檢測方法6.2.2.1生物安全柜置于正常工作條件下運(yùn)行30min。6.2.2.2潔凈度的測量邊界距離內(nèi)表面或前窗100mm。6.2.2.3操作步驟如下：a)粒子計(jì)數(shù)器的采樣口置于工作臺(tái)面向上200mm高度位置，每次的采樣量不低于1L;b)按圖1布置的每個(gè)測量點(diǎn)進(jìn)行測量，記錄并計(jì)算其平均值。工作面寬度●一測點(diǎn)圖1測量點(diǎn)布置圖46.3噪音聲級計(jì)：測量范圍為(0～130)dB,精確度±1dB,分辨率為1dB,有“A”計(jì)權(quán)模6.3.2.1將聲級計(jì)設(shè)置為“A”計(jì)權(quán)模式。6.3.2.2打開生物安全柜的風(fēng)機(jī)和照明燈，在生物安全柜前壁面中心水平向外300mm,工作臺(tái)面上方6.3.2.3關(guān)閉生物安全柜風(fēng)機(jī)和照明燈，在相同的位置測量背景噪聲。當(dāng)背景噪聲大于57dB時(shí)，實(shí)測值參照儀器操作手冊提供的曲線或表進(jìn)行修正，如果不適用按照噪聲測量值修正表表2進(jìn)行修正。測量噪聲與背景噪聲的差值(dB)降低背景噪聲，重新測試33210照度計(jì)：測量范圍為(0～20000)lx,精確度為±8%。6.4.2.2在工作臺(tái)面上，沿工作臺(tái)面內(nèi)側(cè)壁中心連線設(shè)置照度測量點(diǎn)，測量點(diǎn)之間的距離不超過5300mm,與側(cè)壁最小距離為150mm,檢測圖見圖3。6.4.2.3用照度計(jì)檢測各測量點(diǎn)，測量點(diǎn)不少于5點(diǎn)，記錄各測量點(diǎn)數(shù)據(jù)并計(jì)算照度的算術(shù)平均值。QQ圖3照度檢測圖6.5流入氣流6.5.1檢測設(shè)備風(fēng)速計(jì)：測量范圍為(0～10)m/s,精確度為±0.15m/s。6.5.2檢測方法6.5.2.1將工作窗開口高度開到指定的操作高度，運(yùn)行安全柜，待生物安全柜處于穩(wěn)定狀態(tài)時(shí)。6.5.2.2將風(fēng)速計(jì)在前窗操作開口平面的兩排點(diǎn)測量氣流流速，第一排在前窗操作開口上沿下約開啟高度25%的位置，第上排在前窗操作開口上沿下約開啟高度75%的位置，每排測量間距約100mm,距前窗操作口側(cè)邊接近但不小于100mm,檢測圖見圖4。6.5.2.3測量點(diǎn)不少于7點(diǎn)，每點(diǎn)測試1min讀取風(fēng)速計(jì)數(shù)據(jù)，記錄并計(jì)算出流入氣流流速的平均值。二25置膏二圖4流入氣流檢測圖6風(fēng)速計(jì)：測量范圍為(0～10)m/s,精確度為±0.15m/s。a)將工作窗開口高度開到指定的操作高度，運(yùn)行安全柜，待生物安全柜處于穩(wěn)b)按下列方式在工作區(qū)上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上確定測量點(diǎn)位置，多點(diǎn)測量2)測量點(diǎn)等距分布，形成的正方形柵格不大于(150×150)mm,測試點(diǎn)最少應(yīng)有3排，每排應(yīng)有7個(gè)測量點(diǎn)；a)將工作窗開口高度開到指定的操作高度，運(yùn)行安全柜，待生物安全柜處于穩(wěn)b)在工作區(qū)上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上多點(diǎn)測量穿過該平面各區(qū)域的氣流各區(qū)域的測試按照廠商使用說明書明確的各均勻下降氣流區(qū)的范圍進(jìn)行測量，測量點(diǎn)等距分布，形成的正方形柵格不大于(150×150)mm,測試點(diǎn)最少應(yīng)有3排，每排應(yīng)有7個(gè)測量點(diǎn)；5算出各區(qū)域的下降氣體平均值。76.7.2方法選擇人員保護(hù)測試有碘化鉀法和微生物法，仲裁法為微生物法，微生物法見YY0569標(biāo)準(zhǔn)中6.3、6.3.2。6.7.3碘化鉀法6.7.3.1基本原理用碘化鉀模擬安全柜內(nèi)所生成的污染氣體與逃逸氣體，用氣霧發(fā)生器在生物安全柜里特定位置輸送碘化鉀溶液產(chǎn)生霧狀的碘化鉀微小液滴，形成挑戰(zhàn)氣霧劑，利用向心工作原理采用空氣采樣器捕捉窗口逃逸的碘化鉀氣霧，采樣結(jié)束后，取出采樣器內(nèi)的過濾薄膜，放到裝有氯化鈀溶液的培養(yǎng)皿中。過濾薄膜上的碘化鉀液滴會(huì)展開，形成清晰可見的棕色小圓點(diǎn)。通過清點(diǎn)過濾薄膜上圓點(diǎn)的個(gè)數(shù)，來評價(jià)安全柜的防護(hù)能力。(安全柜的操作者防護(hù)因子在1.5×10?以上)6.7.3.2.1碘化鉀：15g/L碘化鉀乙醇溶液。6.7.3.2.2氯化鈀：1.0g/L氯化鈀的0.1mol/L鹽酸溶液(配置見附錄A)。6.7.3.3檢測設(shè)備6.7.3.3.1生物安全柜質(zhì)量檢測儀：由氣溶膠發(fā)生器、空氣采樣器、干擾圓筒組成。6.7.3.3.2氣溶膠發(fā)生器：轉(zhuǎn)速28000r/min,可以產(chǎn)生氣溶膠。6.7.3.3.3空氣采樣器：流量100L/min,利用負(fù)壓采集樣品。6.7.3.3.4干擾圓筒：直徑(60～65)mm,表面光滑。6.7.3.3.5過濾膜：孔徑3μm。6.7.3.3.6皮氏培養(yǎng)皿：直徑55mm。6.7.3.4檢測方法6.7.3.4.1在遠(yuǎn)離被測試安全柜的地方擺放兩只皮氏培養(yǎng)皿。一只培養(yǎng)皿內(nèi)裝入半皿氯化鈀溶液，另一只內(nèi)裝入半皿蒸餾水，將蓋子蓋回到培養(yǎng)皿上。準(zhǔn)備兩張濾紙，用于干燥過濾膜。6.7.3.4.2將生物安全柜質(zhì)量檢測儀中的干擾圓筒放在安全柜工作區(qū)域的側(cè)壁之間的中部，一端伸入到安全柜內(nèi)部，緊貼安全柜后壁，干擾圓筒下沿距安全柜工作臺(tái)面65mm~75mm。干擾圓筒的另一端伸出安全柜至少150mm,見圖6)。6.7.3.4.3將四只空氣采樣器(X即左下，X1即左上，Y即右下，Y1即右上)放到安全柜前方中間部位，使采樣器的空氣進(jìn)氣口距安全柜前部開口平面150mm~160mm。兩只采樣器(X1即左上，Y1即右上)的進(jìn)氣口與干擾圓筒頂部水平，并在前部開口中線兩側(cè)各距中線150mm。另外兩只采樣器(X即左下、Y即右下)的進(jìn)氣口與前部開口平面之后100mm。調(diào)節(jié)發(fā)生器高度至渦流盤與前部開口頂沿水平，見圖7)。6.7.3.4.4在每只空氣采樣器上安裝一塊過濾膜，依照廠家說明書調(diào)節(jié)每只采樣器的壓差至可產(chǎn)生100L/min的吸入氣流流量。8O0溪流盤96.7.3.5檢測步驟6.7.3.5.1啟動(dòng)安全柜，使其運(yùn)行至正常操作狀態(tài)。6.7.3.5.2使空氣采樣器吸氣，啟動(dòng)渦流盤。等待15s后，使碘化鉀進(jìn)入渦流盤中部，允許20mL的碘化鉀氣溶膠化。氣溶膠化結(jié)束15s后空氣采樣器停止吸氣。等到抽氣泵完全停下來后，移去過濾6.7.3.5.3將一只采樣器上取下的過濾膜放到盛有氯化鈀溶液的皮氏培養(yǎng)皿內(nèi)，對移去過濾膜的那只采樣器進(jìn)行標(biāo)記。6.7.3.5.4過濾膜將在30s~50s內(nèi)被氯化鈀飽和，所有碘化鉀微粒將變?yōu)樽厣目梢姲唿c(diǎn)。將過濾膜放入蒸餾水內(nèi)浸透3s~4s,然后將過濾膜放在清潔的濾紙上干燥。6.7.3.5.5其他空氣采樣器上取下來的過濾膜也做相同的處理，將蓋子蓋回培養(yǎng)皿。6.7.3.5.6用一只10倍的放大鏡檢查每個(gè)過濾膜，對過濾膜上的棕色斑點(diǎn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。以直徑為0.1mm的斑點(diǎn)作為可記錄的最小斑點(diǎn)，當(dāng)斑點(diǎn)直徑達(dá)到0.2mm時(shí)記錄為2個(gè)斑點(diǎn)，以此類推。6.7.3.5.7每臺(tái)生物安全柜重復(fù)檢測3次，分別記錄檢測儀四個(gè)采集器(X即左下，X1即左上，Y即右下，Y1即右上)中濾膜上的棕色斑點(diǎn)數(shù)，取每個(gè)采集器平均值作為測試結(jié)果。比較四個(gè)采集器，測試結(jié)果最大的為最終結(jié)果。6.7.3.6算人員保護(hù)并表達(dá)測試結(jié)果計(jì)算釋放的碘化鉀粒子數(shù)N:N=3.1×10?×V....................................(1)式中：V———一氣溶膠發(fā)生器分散的碘化鉀溶液的體積，單位為mL;3.1×10?——由液滴尺寸、采樣流量和渦流盤轉(zhuǎn)速導(dǎo)出的一個(gè)常數(shù)。計(jì)算由每個(gè)過濾膜得到的開口防護(hù)因子A:A=NF/10?n......................................(2)式中：F——采樣流量，單位為L/min;N——過濾膜上的斑點(diǎn)數(shù)。6.7.4微生物法檢測參照YY0569中6.3、6.3.2條款。6.8紫外線輻射6.8.1檢測設(shè)備紫外照度計(jì)：測量波長：254±10nm,準(zhǔn)確度為誤差小于5%。6.8.2.2在工作臺(tái)面上，沿工作臺(tái)面內(nèi)側(cè)壁中心連線設(shè)置照度測量點(diǎn)，測量點(diǎn)標(biāo)示為100%，能檢測0.001%同一氣溶膠微粒。氣溶膠發(fā)生器6.9.4.1運(yùn)行安全柜的風(fēng)機(jī)和燈，去掉過濾器的散流裝置和保護(hù)蓋（如果有）。將6.9.4.3對含有氣溶膠的高效過濾器上游氣流進(jìn)行測試，證實(shí)該濃度氣溶膠的光散），6.9.4.5對于經(jīng)管道排氣的安全柜，不能進(jìn)行排氣過濾器的掃描檢測，過濾器下游7.1檢測記錄7.1.1檢測應(yīng)按附錄A的記錄表格，現(xiàn)場填寫原始記錄。7.1.2檢測數(shù)據(jù)應(yīng)按規(guī)定進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，修約至規(guī)定的位數(shù)。7.2檢測報(bào)告7.2.1檢測報(bào)告應(yīng)客觀公正、信息齊全、7.2.2檢測報(bào)告內(nèi)容至少包括：實(shí)驗(yàn)室名稱和地址、送檢單位的名稱和地址、檢測日期、檢測人員、8檢測規(guī)則過1年。會(huì)省省到A.1.1.1電子天平：最大稱量不大于200A.1.3配制方法A.1.3.115g/L碘化鉀的乙醇溶液A.1.3.20.1mol/L鹽酸溶液A.1.3.31.0g/L氯化鈀的0.1mol/L鹽酸溶(資料性附錄)生物安全柜檢測原始記錄表表B.1生物安全柜檢測原始記錄表儀器地點(diǎn)型號規(guī)格出廠編號溫度：℃型號規(guī)格1、潔凈度懸浮粒子數(shù)右后中點(diǎn)左后2、噪聲噪聲測量值3、光照度123567890皿