DB12T 1012-2020 食用菌液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范

DB12Techniquestandardforliquidspawnproductionofediblemushroom天津市市場(chǎng)監(jiān)督管理委員會(huì)發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》給出的規(guī)本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：羅瑩、周永斌、錢磊、劉連強(qiáng)、王文治、李鳳美、訾惠君、李淑1食用菌液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范NY5099無(wú)公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程24.1生產(chǎn)場(chǎng)地4.1.1基本要求4.1.2環(huán)境衛(wèi)生要求4.2生產(chǎn)設(shè)備設(shè)施4.2.1廠房設(shè)置和布局應(yīng)符合NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程要求。消毒和干手設(shè)施；車間設(shè)封閉式廢物桶，安裝排4.2.4主要儀器設(shè)備應(yīng)配備水處理設(shè)備、液體菌種培養(yǎng)器、空氣壓縮機(jī)、空氣過(guò)濾器、液體菌種接種4.2.5主要生產(chǎn)用具應(yīng)配備玻璃三角瓶、接種器、試管、量杯量瓶、玻璃漏斗、定量定性濾紙、精密4.3培養(yǎng)基質(zhì)原材料應(yīng)符合NY5099無(wú)公害食品食用菌栽培基質(zhì)4.4生產(chǎn)品種4.4.1選用高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗逆性強(qiáng)、商品性好的食用菌品種，使用經(jīng)省級(jí)以上農(nóng)作物品種審定委員會(huì)登記的品種，并且從具有相應(yīng)技術(shù)資質(zhì)的供種單位引4.4.2菌種生產(chǎn)過(guò)程應(yīng)符合NY/T528食用菌菌5.1工藝流程3↓原料→培養(yǎng)基配制→空消→實(shí)消→冷卻→種子罐→發(fā)↑5.2制備母種5.2.1容器使用18mm×180mm或20mm×200mm玻璃試管,試管應(yīng)保持清潔5.2.2培養(yǎng)基根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基，常用的配方參見(jiàn)附5.2.3滅菌5.2.4接種在超凈工作臺(tái)上嚴(yán)格按無(wú)菌操作接種。接種完成后，在試管上注明菌種名稱、接種時(shí)間。5.2.5培養(yǎng)根據(jù)食用菌菌種的生長(zhǎng)要求，給予其適宜的培養(yǎng)溫度22℃~28℃,保持空氣相對(duì)濕度在65%～75%，菌種應(yīng)留樣備查，留樣的數(shù)量應(yīng)以每個(gè)批次母種3支～5支。草菇在13℃~16℃貯存，其他種類于4℃~6℃下貯存，貯存至該批菌種出第一潮菇。5.3制備搖瓶液體種5.3.1容器5.3.3培養(yǎng)基5.3.4滅菌5.3.5接種45.3.6培養(yǎng)溫度22℃~28℃,保持空氣相對(duì)濕度在65%～75%，避光培養(yǎng)。頻率隨具體品種而定。5.4發(fā)酵罐檢查與清洗5.4.2清洗對(duì)罐體內(nèi)、外和全部閥門用流水進(jìn)行沖洗，達(dá)到無(wú)死角、內(nèi)5.5煮罐和空消棒的培養(yǎng)器加水至容積的80%加熱至121℃,滅菌40min。用外源蒸汽滅菌的培養(yǎng)器，蒸汽壓力達(dá)到0.11Mpa～0.12Mpa、溫度121℃~124℃、滅菌40min。5.6液體菌種培養(yǎng)基配方泡劑。用水應(yīng)符合GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。常用5.7投料與定容5.8培養(yǎng)器實(shí)消和培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)器內(nèi)蒸汽壓力達(dá)到0.11Mpa～0.12Mpa，培養(yǎng)基溫度達(dá)到121℃~124℃、保持時(shí)間40min。5.9冷卻降溫滅菌結(jié)束通過(guò)冷卻系統(tǒng)，使培養(yǎng)基降溫至24℃~28℃。保持壓力平穩(wěn)，防止罐壓回零。5.10接種菌種罐接種處設(shè)置百級(jí)層流罩，用帶有手柄的內(nèi)徑略大于接種口的鐵絲圈纏繞紗布，蘸上95%的酒5.11液體菌種培養(yǎng)條件5.11.1通風(fēng)量通過(guò)進(jìn)氣閥和排氣閥將通風(fēng)量調(diào)節(jié)至1：0.5V／V～1：1.2V／V(料液體積／空5.11.2罐壓55.11.3溫度常見(jiàn)品種培養(yǎng)溫度調(diào)節(jié)在24℃~28℃,少數(shù)品種根據(jù)特殊需求具體設(shè)定。5.11.4培養(yǎng)時(shí)間5.12.2無(wú)菌檢測(cè)5.12.4菌絲濕重5.12.5鏡檢5.13液體菌種放罐指標(biāo)5.13.1經(jīng)鏡檢和其它理化指標(biāo)等方法檢驗(yàn)質(zhì)量合格即可放罐接種。菌液稍粘稠，有大量片狀或球狀菌絲體懸浮、分布均勻、6>8可見(jiàn)食用菌菌種液體培養(yǎng)中特有的菌絲形態(tài)，球狀和叢狀菌絲體大量分布，菌絲粗壯，菌絲內(nèi)原生質(zhì)分布均勻、染有食用菌菌絲生長(zhǎng)，劃痕處無(wú)霉菌、酵母菌、細(xì)菌菌落生注明菌種種類、級(jí)別、品種、生產(chǎn)單位、接15℃~20℃室溫可保存1天～2天。7馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱PDA培養(yǎng)基)馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂(凝固劑)20g，