T-GXAS 523-2023 污泥 糞大腸菌群的測定 酶底物法

GXASSludge—Determinationoffecalcoliforms—EnzymesubstratemI 2 2 3 4 5 6 6 6 7 9 本文件參照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》和HJ南寧市水安全工程技術(shù)研究中心、南寧市城鄉(xiāng)供水排水工程研究中心、廣西標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)本文件主要起草人：王莉莉、韋純忠、吳家勇、何東明、潘尚麗、管運(yùn)濤、蒙金燕、蔣嚴(yán)波、李世龍、曹珊、王紹艷、李洪、莫婉湫、申學(xué)安、凌威、羅皓百、吳章雁、朱高俊、冉琪、勞靜丹、1污泥糞大腸菌群的測定酶底物法本文件描述了使用酶底物法測定污泥中糞大腸菌群本方法檢出限為10MPN/g。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格GB/T24188城鎮(zhèn)污水處理廠污GB/T24600城鎮(zhèn)污水處理廠污泥處置土地改良用泥質(zhì)HJ1001水質(zhì)總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定酶底物法GB24188、GB/T24600、HJ1001界3.1城鎮(zhèn)生活污水處理廠污泥經(jīng)過減量化、穩(wěn)定化、無害化3.2在103℃~105℃下烘干至恒重的污泥樣品。3.3糞大腸菌群菌值valuesoffecalco檢出一個糞大腸菌菌落形成單位的最小樣本量。2N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸鈉鹽（HEN-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸（HEPES）5.5無菌水：取適量實(shí)驗(yàn)用水，經(jīng)高壓蒸汽滅菌器（26.1采樣瓶：經(jīng)過滅菌處理的耐高壓塑6.4恒溫培養(yǎng)箱：允許溫度偏差44.5℃±0.5℃。36.8移液管：1mL±0.01mL、10mL±0.1mL。也可采用計(jì)量合格的可調(diào)式移液器。6.12刮板。6.13鑷子。注：采樣瓶（6.1）、樣品瓶（6.2）、移液管（6.8）、三角瓶（6.97.1.3系統(tǒng)采樣法：在污泥處置車間，污泥通過壓濾機(jī)、輸送帶等形式連續(xù)排出的移動過程中，按一7.1.4污泥樣品應(yīng)采集瞬時樣品，采用系統(tǒng)采樣法連續(xù)采樣時，單獨(dú)采集，不應(yīng)混合采集。污泥樣品注1：若樣品為經(jīng)過氯消毒的污泥，在采樣），7.2.1將樣品置于無菌托盤（6.11）內(nèi)，用無菌注2：經(jīng)過石灰處理的樣品在稀釋均質(zhì)后，調(diào)整pH值至4定量盤背面，趕除孔內(nèi)氣泡，然后用程控定量封口機(jī)（6.5）封口，使每個孔格內(nèi)都有液體。觀察9定量盤顏色，若出現(xiàn)類似或深于標(biāo)準(zhǔn)陽性比色盤（5.11）的顏色或者其他異色，在排查樣品、培養(yǎng)基（5.2）、無菌水（5.5）等因素后，終7.4培養(yǎng)將封口后的97孔定量盤放入恒溫培養(yǎng)箱（6.4）中，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h。7.5對照試驗(yàn)每次試驗(yàn)都用無菌水（5.5）按照步驟7.2～7.4進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室空白測定。若有陽性結(jié)果出現(xiàn)，該次樣克雷伯氏菌屬（Klebsiellatrevisan耐熱型）糞鏈球菌（Streptococcusfaecal性菌株應(yīng)呈現(xiàn)陽性反應(yīng)；陰性菌株應(yīng)呈現(xiàn)陰性反應(yīng)，否則，注：可先制備較高濃度菌懸液，釆用血球計(jì)數(shù)器在顯微鏡下對其濃度進(jìn)行初步測定，然后根據(jù)實(shí)際情況用無菌水），8.1.1計(jì)算原始（濕）污泥的糞大腸菌按照附錄B，從97孔定量盤法MPN表中査得每100mL稀釋樣品中糞大腸菌群的MPN值后（置信區(qū)間見5······························································MPN值——每100mL稀釋樣品中糞大腸菌群濃度，單位為最大可能數(shù)每一百毫升（MPN/100mLf——每100mL稀釋樣品代表的樣品實(shí)際接種量，單位為克每一百毫升（g/100mL）。8.1.2計(jì)算絕干污泥的糞大腸菌群··································································報告為糞大腸菌群未檢出或＜10MPN/g。通常報告原始（濕）污泥中糞大腸菌群濃度。對采用連續(xù)采樣······································································9精密度為0.44、0.39、0.43和0.27；再現(xiàn)性限為0.44、0.49、0.81和0.31；實(shí)驗(yàn)室間置信區(qū)間63家實(shí)驗(yàn)室6個實(shí)驗(yàn)組對有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制的樣品（參考室內(nèi)的相對誤差范圍為0.912.8相對誤差最終值為1.9%±1.5％。注：微生物測定數(shù)據(jù)為偏態(tài)分布，上述精密度、準(zhǔn)確度均為對測定結(jié)果以10取對數(shù)后進(jìn)行計(jì)算。11.3宜選用市售商品化培養(yǎng)基。11.4定期使用有證標(biāo)準(zhǔn)菌株或標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行質(zhì)量控制。11.5每20個樣品或每批次樣品(≤20個/批）測定一個平行雙樣，測定結(jié)果以算術(shù)平均值計(jì)。7A.1圖A.1給出了糞大腸菌群酶底物法陰性、陽性結(jié)果參考圖，結(jié)果以實(shí)物比色判斷為準(zhǔn)。）；）；）；）；）；8A.2圖A.2