微生物知識培訓

微生物學基礎知識1、微生物概況在自然界中，用肉眼無法直接看到的，必須用光學顯微鏡或電子顯微鏡放大幾百倍、幾千倍甚至幾萬倍才能觀察到的微小生物的總稱。微生物的種類繁多，至少在十萬種以上。包括病毒、細菌、霉菌及酵母菌等。2、微生物與藥品質量的關系有些藥品的生產是依靠微生物來完成的。如神曲、淡豆豉是通過微生物發(fā)酵后制成的；而青霉素是微生物的代謝產物等。對大部分藥品生產來說，微生物會污染藥品，使藥品變質，

對人體產生危害。為此，我們要盡量控制生產環(huán)境的微生2024/12/311物數(shù)量，避免藥品受到污染。3、細菌簡介細菌是原核細胞生物中的一類單細胞微生物。因此所有細菌均具有普通細胞的結構，包括細胞壁，細胞膜，細胞漿等，但無真正的細胞核結構。細菌的特殊結構：主要有莢膜、芽孢、鞭毛和菌毛。芽孢：某些細菌，在其生活的某一階段可于細胞漿內形成圓形或卵圓形的特殊結構稱為芽孢。芽孢對干燥、熱和化學藥品的抵抗力較強。2024/12/312衛(wèi)生學基礎知識一、消毒1、概念（1）消毒：是指對病原微生物繁殖體的殺滅作用，但不能殺死芽孢等全部微生物。（2）消毒劑：是指用于消毒的化學藥品。2、常用的消毒劑2024/12/313類別名稱濃度消毒用途性質酚類甲酚皂2%水溶液皮膚溶于水，呈堿性反應，有除垢作用，殺菌力強，有毒性，消毒手有麻木感。3%-—5%地漏濃煤焦油溶液0.16%環(huán)境消毒消毒力中等醇類乙醇70%—75%皮膚、工具、設備、容器能使蛋白質變性，有揮發(fā)性，無殘留，作用時間短，對芽孢無效。醛類甲醛每立方米用37—40%甲醛液8—9ml，加4—5克高錳酸鉀熏蒸無菌室能破壞細菌繁殖體及許多芽孢、病毒、真菌；有揮發(fā)性，對眼睛及皮膚有刺激性。氧化劑過氧乙酸0.5%皮膚消毒廣譜殺菌劑，能殺死細菌繁殖體，芽孢、真菌與某些病毒；強氧化劑，20%時對皮膚、金屬有較強的腐蝕性，稀釋液只能存放三天。表面活性劑新潔爾滅0.1—0.2%皮膚、工具、設備、容器破壞細胞膜，使蛋白質變性，對革蘭氏陰性菌不敏感，具清潔與消毒雙生作用，對皮膚刺激性少，遇合成洗滌劑活性減弱。杜滅芬0.05—0.1%水溶液皮膚性質穩(wěn)定，易溶于水，抗菌譜窄，遇合成洗滌劑活性減弱。洗必泰0.02—0.05%水溶液皮膚對革蘭氏陽、陰性菌有效，能快速殺滅繁殖體，無毒性，但不能與陰離子清潔劑等物質、升汞、肥皂合用。2024/12/3143、影響化學消毒劑作用的因素（1）消毒劑的化學結構、濃度、消毒能力，協(xié)同作用和拮抗作用，接觸時間；(2)微生物的類型、數(shù)量和環(huán)境；（3）溶液的氫離子濃度、表面張力、有機物或其他鈍化劑的存在；（4）被消毒物表面的性質是光滑還是多孔粗糙等。4、選擇消毒劑原則（1）在使用條件下高效、低毒無腐蝕性，無特殊的嗅味和顏色，不對設備、物料、產品產生污染。（2）在有效抗菌濃度時，易溶或混溶于水，與其他消毒劑無配伍禁忌。2024/12/315(3)對大幅度溫度變化顯示長效穩(wěn)定性，貯存過程中穩(wěn)定。（4）消毒劑品種應定期更換，防止產生耐藥菌株。（5）價格便宜二、滅菌1、概念滅菌是指對所有微生物的殺滅作用，包括所有微生物的繁殖體和芽孢或孢子。細菌的芽孢具有較強的抗熱能力，因此滅菌效果，常以殺滅芽孢為準。2、滅菌的方法基本上分為二大類：物理方法（干熱滅菌、濕熱滅菌、射線滅菌、濾過滅菌）和化學方法（氣體滅菌、藥液滅菌）。下面將分別介紹幾種常用的滅菌方法。（1）干熱滅菌法滅菌條件為160～170℃，2小時或170～180℃，60分鐘或250℃，45分鐘。干熱可用于能耐受較高溫度，卻不宜被蒸汽穿透，或者易被濕熱破壞的物品的滅菌。同時干熱也是制藥工業(yè)中用于除熱原的方法之一。由于在相同的溫度下，干熱對微生物的殺滅效果遠低于飽和蒸汽，故干熱滅菌需要較高的溫度或較長的滅菌時間。2024/12/316（2）濕熱滅菌是在飽和蒸汽或沸水或流通蒸汽中進行滅菌的方法。由于蒸汽潛熱大，穿透強、容易使蛋白質變性或凝固，所以滅菌效率比干熱滅菌法高。高壓蒸汽滅菌法是最為可靠的滅菌方法，一般為121℃，30分鐘或者115℃，40分鐘，使用時需將空氣排盡。影響濕熱滅菌的因素有：1.細菌的種類與數(shù)量：不同細菌，同一細菌的不同發(fā)育階段對熱的抵抗力有所不同，細菌數(shù)越少，滅菌時間越短。2.藥物性質與滅菌時間：一般來說，滅菌溫度越高滅菌時間越短，但考慮到藥物的穩(wěn)定性，應在達到有效滅菌的前提下可適當降低滅菌溫度或縮短滅菌時間。3.蒸汽的性質：蒸汽有飽和蒸汽、濕飽和蒸汽和過熱蒸汽。飽和蒸汽熱含量較高，熱穿透力較大，因此滅菌效果高，濕飽和蒸汽帶有水分，熱含量較低，穿透力差，滅菌效力較低。過熱蒸汽溫度高于飽和蒸汽，但穿透力差，滅菌效率低。2024/12/3174.介質的性質：制劑中含有營養(yǎng)物質，如糖類、蛋白質等，增強細菌的抗熱性。細菌的生存能力也受介質pH值的影響。一般中性環(huán)境耐熱性最大，堿性次之，酸性不利于細菌發(fā)育。（3）紫外線滅菌法是指用紫外線照射殺滅微生物方法。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性，同時空氣受紫外線照射后產生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。紫外線進行直接傳播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但較易穿透潔凈及純凈的水，因此本法適用于照射物體表面之滅菌、無菌室的空氣及水的滅菌，不適用于藥液的滅菌、固體物質深部的滅菌；普通玻璃可吸收紫外線，因此裝于玻璃容器中的藥物不能用此法滅菌。紫外線對人體照射過久會發(fā)生結膜炎，紅斑及皮膚燒灼等現(xiàn)象，故一般在人入室前開啟紫外線燈1-2小時，關閉后人才進入潔凈室，如果必須在人進去后仍要開紫外線滅菌，則人的皮膚及眼睛應有有效的防護措施。2024/12/318用紫外線照射滅菌時要注意下列問題：1、紫外線的殺菌力，隨使用時間增加而減退，一般使用時間達到額定時間70%時應更換紫外線燈管，以保證殺菌效果，國產紫外燈平均壽命一般為2000h2、紫外線的殺菌作用隨菌種不同而不同3、紫外線照射通常按相對濕度為60%的基礎設計，室內溫度增加時，照射量應相應增加。4、紫外線滅菌效果與照射的時間長短有關，這需要通過驗證來確定照射時間。5、紫外線滅菌照射的時間應視空間大小而定，而且距離不能太遠，一般為30cm-1m左右。（4）臭氧滅菌法臭氧的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結構不穩(wěn)定，很快自行分解成氧和單個氧原子，后者具有很強的活性，對細菌有極強的氧化作用，臭氧氧化分解了細菌內部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會自行重新結合成為普遍氧分子，不存在任何有毒殘留物。2024/12/319無污染消毒劑。它不但對各種細菌（包括大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強的殺滅能力，而且對霉菌也很有效。生產臭氧的原料主要是電能和空氣，一般通過高頻臭氧發(fā)生器（電子消毒器）來獲得，消毒時，直接將臭氧發(fā)生器直于房間中間即可。臭氧消毒效果的驗證中需驗證和校正的臭氧發(fā)生器技術指標有：臭氧產量、臭氧濃度的時間定時器，并通過驗證檢查細菌數(shù)來確定消毒時間。（5）過濾滅菌過濾滅菌法是用濾過方法除去活的或死的微生物方法，是一種機械除菌方法，這種機械叫除菌過濾器。主要用于對熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水的滅菌。繁殖型細菌很少小于1um的，芽孢大小為0.5um或更小些。所以，對于以過篩作用濾過的濾器，其孔徑大小必須小到足以阻止細菌和芽孢進入濾孔之內，常用除菌過濾器有微孔薄膜器，折疊式纖維素濾棒，一般選用孔徑0.22um。2024/12/3110

潔凈作業(yè)知識一、潔凈室基本知識1.潔凈室（區(qū)）的概念潔凈室（區(qū)）是指需要對塵粒及微生物含量進行控制的房間（區(qū)域）。其建筑結構、裝備及其使用均具有減少該區(qū)域內污染源的介入、產生和滯留的功能。藥品生產潔凈室（區(qū))空氣潔凈度級別分四級：100級、10000級、100000級和300000級。無特殊要求時，溫度應控制在18℃—26℃，相對濕度控制在45％—65％。2、潔凈室（區(qū)）有害物質的來源（1）粉塵粉塵是指懸浮在空氣中的固體顆粒。潔凈室內的粉塵除來自外界之外，生產中固體物料的機械粉碎、研磨、粉塵無聊的混合、篩粉、收集、包裝、運輸、物質的燃燒等都會產生粉末狀微粒子。機械運動產生的氣流，受熱設備表面產生的熱空氣上升、2024/12/3111操作人員和固體物料在空間運動等都帶動著周圍空氣運動，運動著的空氣流帶動粉末狀的微粒子擴散，從靜態(tài)變成懸浮于空氣中的粉塵。有報道，一般的潔凈室內，人是最大的污染源，約占80％。主要是人體把外界的塵粒帶入，人體本身散發(fā)大量的皮屑、衣服也帶進塵粒。（2）有害蒸汽和氣體藥品生產中使用的原輔料、溶劑如氯仿、苯、乙醚、酒精、氯化氫等，具有一定的毒性，由于空氣的流動，造成在室內擴散。（3）余熱和余濕加熱設備、熱物料等散發(fā)出的熱量以及煎煮、洗滌等散發(fā)的蒸汽是車間余熱、余濕的主要來源，影響室內空氣的溫度和濕度。人體亦散發(fā)熱量和水汽。外界通過外墻、門窗和隔斷等護圍結構向潔凈室（區(qū)）傳遞熱量。2024/12/31123、空氣過濾器過濾器是實現(xiàn)空氣凈化的主要手段，是潔凈空調的主要設備之一。空氣過濾器一般按其過濾效率的高低分為初（粗）效、中效、亞高效、高效。過濾器的性能指標有：效率、阻力、容塵量以及風速和濾速。類別捕集的塵粒（粒徑um）計數(shù)效率（％）（對粒徑為0.3um的塵粒）用途初效過濾器≥10及異物＜20（對≥10um大塵為70）作高一級以上過濾前的預過濾中效過濾器≥120—90用在初效過濾器后面，提高凈化效率；用在高效過濾器前面，延長高效過濾器壽命。亞高效過濾器＜190—99.9用于空氣潔凈度級別在100000級或低于100000級的潔凈室。高效過濾器0.3—1≥99.91用于一般潔凈廠房和局部凈化設備的最后一級過濾—終端過濾。過濾器性能參數(shù)、濾料用途表2024/12/31132024/12/31144、氣流組織形式潔凈的空氣組織形式按氣流流動狀態(tài)有亂流和層流。層流又分垂直層流和水平層流。因而潔凈室有亂流潔凈室、垂直層流潔凈室和水平層流潔凈室。（1）亂流潔凈室這種潔凈室，從送風口經(jīng)散流器進入室內的潔凈空氣氣流迅速向四周擴散，與室內空氣混合，稀釋室內污染的空氣，并與之進行熱交換，混合后的氣流帶著室內的塵粒，在正壓作用下，從下側回風口排走。室內氣流因擴散、混合作用而非常雜亂，有渦流，故有亂流潔凈室之稱；亂流潔凈室自凈能力較低，只能達到較低的空氣潔凈度級別，通常在10000級至300000級范圍。2024/12/3115（2）層流潔凈室層流潔凈室的進風面布滿高效過濾器，整個送風面是一個大送風口，送風氣流經(jīng)靜壓箱和高效過濾器的均壓均流作用，從送風口到回風口氣流流線彼此平行，充滿全室斷面，以均速向前推進，就像個大活塞，把室內原污染空氣排入回風口，從而達到凈化室內空氣的目的。5、其他要求（1）《藥品生產質量管理規(guī)范》（1998年修訂）規(guī)定空氣潔凈級別不同的相鄰房間之間的靜壓差大于5Pa，潔凈區(qū)與室外的靜壓差大于10pa.（2）潔凈室內產生粉塵量大和有毒害氣體的設備應設局部排風和防塵裝置，還應采取相對負壓措施。2024/12/3116（3）排氣系統(tǒng)要有防倒灌措施。如安置中效過濾器；單向閥等。（4）潔凈室送風口與連接體的接縫要密封。（5）有靜壓差要求的潔凈室應設有差壓裝置。二、潔凈室（區(qū)）內人員衛(wèi)生要求1、人是潔凈室最大的污染源之一。（1）人及其活動產生大量的塵埃粒子污染潔凈室。人在自然活動時，人體散發(fā)出的熱量可形成一股熱流，使大于0.3um的微小粒子擴散，擴散量可達到每分鐘近千百萬粒。粒子中大部分是10-300um的皮屑。粒子由衣服、皮膚、頭發(fā)、嘴巴、鼻腔及化妝品等途徑往外散發(fā)污染了潔凈室。2024/12/3117人體所散發(fā)的粒子數(shù)（≥0.3um）體態(tài)、動作散發(fā)的粒子數(shù)（萬個/分鐘）站10坐50坐下站起100——250走500——1000爬1000運動1500——30002024/12/3118（2）人身上攜帶的各種微生物污染潔凈室。人體給微生物生長繁殖創(chuàng)造了良好的環(huán)境，人體各部分都生長著各類微生物，甚至某些部位存在著“常居細菌”，它們的存在對人體可能無害，但對于生產藥品的潔凈室，尤其是無菌室卻是不允許的，甚至是致命的。人體各部位的正常微生物部位部分常見微生物舉例皮膚葡萄球菌、枯黃桿菌、大腸桿菌、真菌口腔乳酸桿菌、綠色鏈球菌、螺旋體、真菌腸道葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、雙歧桿菌、腺病毒、真菌鼻炎腔葡萄球菌、奈氏菌屬、綠膿桿菌、腺病毒、真菌外耳道葡萄球菌、類白喉桿菌、綠膿桿菌眼結膜 葡萄球菌、結膜干燥桿菌尿道大腸桿菌、擬桿菌、革蘭氏陽性球菌2024/12/3119（3）手是一個重要的污染源手部的汗毛、油脂、表層、皮膚只要與污染物接觸，就會沾上污垢、油脂、化學物、塵粒及微生物等，微生物會在手上生存，若有創(chuàng)傷，微生物還會在手的傷口上大量繁殖，被污染的手便會把污染物帶給手所接觸的物品上，從而污染潔凈室。（4）口腔、鼻腔、頭發(fā)也是污染源口腔與鼻腔的粘膜內存在著大量的微生物，講話、咳嗽、噴嚏時都會散發(fā)大量含微生物的粒子，每一次咳嗽可產生＞0.5um的粒子700000粒，每一次噴嚏可產生＞0.5um粒子1400000粒。頭發(fā)及胡須具有很強的吸附性，藏有大量的灰塵、細菌及頭屑、皮屑。2024/12/31202、減少人對潔凈室的污染從測定結果顯示，在潔凈室人員的數(shù)量、人員的動作及其幅度、潔凈服材質、樣式及其穿戴方式、手部的清潔消毒等都對潔凈室的潔凈度造成明顯的影響。（1）養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習慣，勤洗澡、洗頭、勤理發(fā)、剃胡須，勤剪指甲，勤更衣。（2）嚴格控制進入潔凈室人數(shù)，只有潔凈室工作人員和經(jīng)授權人員方可進入，并且進出潔凈室要進行登記。（3）進入潔凈室的人員，不能患傳染病、皮膚病，包括隱形傳染?。后w表有傷口、感冒、咳嗽、腹瀉者不宜進入潔凈室。（4）不攜帶個人物品進入生產區(qū)，不在生產區(qū)內吃東西。2024/12/3121（5）工作前洗干凈手，不涂化妝品，上崗時不佩戴飾物、手表。（6）潔凈室內隨時保證手的清潔，注意消毒。手在消毒以后，不再接觸與工作無關的物品，不裸手直接接觸藥品。（7）工作時，不要快速走動，操作的動作要輕，幅度要小，講話要少、聲音要細，避免不必要的走動和動作，不要頻繁進出潔凈室。（8）行走時，不要穿過層流罩，不可避免時，應離層流罩外一米以外。（9）休息時，若站著，手臂沿身體下垂，不要兩臂交叉；若坐著，把手放在膝蓋上，不要兩臂交叉或雙腿交叉。（10）離開工作場地（包括吃飯、上廁所），必須脫掉工作服裝。2024/12/3122三、潔凈室（區(qū)）物料衛(wèi)生要求1、進入生產的原輔料必須符合標準，不洗即用的內包裝材料、容器，其生產環(huán)