DB51T 2665-2019 種雞場(chǎng)雞白痢沙門氏菌凈化技術(shù)規(guī)范

DB51四川省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I I 1 1 1 1 2 2 4本標(biāo)準(zhǔn)起草人：王紅寧、張安云、雷昌偉、唐藝芝、楊鑫、1種雞場(chǎng)雞白痢沙門氏菌凈化技術(shù)規(guī)范GB4789.4食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門GB/T5750.2生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法水樣的采NY/T2838禽沙門氏菌病診斷技術(shù)NY/T536雞傷寒和雞白痢診斷技術(shù)是由雞白痢沙門氏菌引起的以2-3周齡雛雞下痢和敗血癥為特征的傳染病。初期病雞僅表現(xiàn)食欲減4種雞場(chǎng)雞白痢沙門氏菌凈化程序4.1.1持續(xù)開展雞白痢沙門氏菌病原學(xué)檢測(cè)、抗4.1.3采取嚴(yán)格的生物安全措施，24.2轉(zhuǎn)群、開產(chǎn)前雞白痢沙門氏菌抗體檢測(cè)祖代雞100%進(jìn)行檢測(cè)。父母代公雞100%全檢，父母代母雞的檢測(cè)比例如下：養(yǎng)殖規(guī)?！?0萬(wàn)只按3%比所有抗體陽(yáng)性雞或可疑陽(yáng)性雞用NY/T2838中微量凝集法進(jìn)行第二次抗體復(fù)檢，兩次均呈抗體陽(yáng)性，則淘汰。若抗體陽(yáng)性率高于5%，則抽檢比例升至30%，淘汰陽(yáng)性雞。若抗體陽(yáng)性率高于進(jìn)行PCR檢測(cè)，確定是否有雞白痢沙門氏菌感染（若同時(shí)出現(xiàn)260bp，570bp左右兩條條帶，則判斷為雞白痢沙門氏菌陽(yáng)性）。對(duì)雞白痢沙門氏菌陽(yáng)性雞進(jìn)行淘5種雞場(chǎng)雞白痢沙門氏菌抗體陰性雞群的維持5.1種雞場(chǎng)消毒及雞白痢沙門氏菌檢測(cè)種雞場(chǎng)日常消毒按照DB51/T1286進(jìn)行。引進(jìn)雛雞前對(duì)雞舍及周邊環(huán)境進(jìn)行系統(tǒng)消毒，消毒后采集雞舍內(nèi)墻角、雞籠、地面棉拭子樣品按照GB4789.4對(duì)雞白痢沙門氏菌進(jìn)行分離鑒定，確保無(wú)雞白痢沙門氏菌污染。采集雞舍外鼠、蒼蠅等樣品按照GB4789.4對(duì)雞白痢沙門氏菌進(jìn)行分離鑒定，確保雞舍周5.2飲用水微生物指標(biāo)檢測(cè)在雞群飲水乳頭處采集水樣進(jìn)行檢測(cè)，每半個(gè)月檢測(cè)一次。飲水取樣方法按照GB/T5750.2進(jìn)行，對(duì)沙門氏菌的檢測(cè)方法按照GB4789.4進(jìn)行。對(duì)不達(dá)標(biāo)的飲水通過(guò)凈化處理，可采用酸化劑（酸性電解水等）進(jìn)行飲水消毒，使飲水達(dá)到NY5027要求。不同企業(yè)水的凈化處理方案必要時(shí)根據(jù)實(shí)際情況，通5.3飼料中沙門氏菌檢測(cè)5.4空氣中細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)對(duì)雞舍空氣中細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，取樣及檢測(cè)方法按照DB51/T1286進(jìn)行，空氣中細(xì)菌數(shù)不超過(guò)25000CFU/m3為合格。并根據(jù)雞場(chǎng)實(shí)際情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果制定出個(gè)性化的消5.5沙門氏菌抗體檢測(cè)536進(jìn)行初篩，陽(yáng)性樣本采用NY/T2838進(jìn)行確診。陽(yáng)性率若高于2%，則抽檢比例升至10%，淘汰陽(yáng)性3白痢血清學(xué)全部為陰性；雞白痢沙門氏菌PCR檢測(cè)全部為陰性；連續(xù)兩年以上無(wú)臨床病例，即認(rèn)為達(dá)到4(資料性附錄)雞白痢沙門氏菌PCR檢測(cè)流程采集新鮮肛拭子樣品放入裝有3mL緩沖蛋白胨水的無(wú)菌EP管中，于36℃,160r/min培養(yǎng)18h。輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)物，移取1mL接種于10mL氯化鎂孔雀綠增菌液中，42℃培養(yǎng)24h。取1mL增菌液采用煮沸法制備細(xì)菌DNA模板，PCR特異性引物見表1,PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件見表2。取2μLPCR產(chǎn)物用1%瓊脂糖凝膠于0.5×TAE緩沖液中進(jìn)行電泳檢測(cè)。雞白痢沙門氏菌可見573、260bp兩條帶，其余沙門氏菌僅見260bp一條帶，非沙門氏菌無(wú)擴(kuò)增條帶(圖1)。表A.1沙門氏菌及雞白痢血清型特異性引物序列表目標(biāo)序列引物序列擴(kuò)增片段長(zhǎng)度(bp)沙門氏菌屬特異性序列5'-TGCCCAAAGCAGAGAG雞白痢/雞傷寒特異性序列表A.2沙門氏菌及雞白痢血清型特異性PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件57℃退火30s72℃終延伸10min;4℃保存。圖A.1沙門氏菌PCR電泳結(jié)果(1-2:雞白痢沙門氏菌；3-10依次為腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、德爾卑沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、海德堡沙門氏菌、都柏林沙門氏菌、紐波特沙門氏菌、印第安納沙