DB45T 2537-2022 白及組培苗菌根化育苗技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB3845TechenicalregulationsofcultivationIDB45/T2537—2022前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4菌劑 25育苗圃和基質(zhì) 26菌根化育苗技術(shù) 2DB45/T2537—2022本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生健康委員會提出、歸口并宣貫。本文件起草單位：廣西壯族自治區(qū)藥用植物園。本文件主要起草人：譚小明、周雅琴、夏祥華、周小雷、韋瑩、李力、王碩、余麗瑩。DB45/T2537—2022白及Bletillastriata(Thunb.)Reichb.f.為蘭科植物，兼具藥用與觀賞等多種價值，但其野生資源瀕臨枯竭。組織培養(yǎng)繁殖白及種苗，是其目前主要的繁殖方式，但白及組培苗面臨移栽后易爛根、移栽成活率低、生長緩慢等諸多問題。因此，項目組基于蘭科菌根技術(shù)的應(yīng)用，開展了白及組培苗菌根化研究，并以此研究為基礎(chǔ)，制定了白及組培苗菌根化育苗技術(shù)規(guī)程，以期為白及菌根化育苗實踐提供參考。1DB45/T2537—2022白及組培苗菌根化育苗技術(shù)規(guī)程本文件確立了廣西產(chǎn)白及Bletillastriata(Thunb.)Reichb.f.組培苗菌根化育苗程序，規(guī)定了菌劑制備、育苗圃和基質(zhì)、菌根化育苗技術(shù)的操作要求。本文件適用于白及菌根苗的培育。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB3095環(huán)境空氣質(zhì)量標準GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標準GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準則GB36600土壤環(huán)境質(zhì)量標準3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1白及Bletillastriata(Thunb.)Reichb.f.為蘭科植物白及。3.2蘭科菌根orchidmycorrhiza真菌的菌絲體與蘭科植物根系形成的互利共生聯(lián)合體，在形態(tài)上表現(xiàn)為根皮層內(nèi)形成典型的菌絲圈結(jié)構(gòu)。3.3白及菌根真菌mycorrhizalfungiofB.striata能與白及根系共生形成菌根結(jié)構(gòu)的真菌。3.4液體菌根菌劑liquidmycorrhizalfungiinoculant以白及菌根真菌為生產(chǎn)菌種制成的液體真菌菌劑。3.5固體菌根菌劑solidmycorrhizalfungiinoculant以白及菌根真菌為生產(chǎn)菌種制成的固體真菌菌劑。3.6無菌種子苗asepticseedseedlings白及蒴果經(jīng)過表面消毒后，在無菌條件下取出種子播種于培養(yǎng)基上培育而成的帶根種子苗。2DB45/T2537—20224菌劑4.1菌劑種類選擇能夠促進白及種苗生長發(fā)育且能夠形成菌根結(jié)構(gòu)的蘭科菌根真菌。4.2菌劑制備4.2.1真菌活化將菌根真菌接種于馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基上，進行活化培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為28℃±2℃,暗培養(yǎng)7d。4.2.2液體菌劑的制備將活化的菌根真菌瓊脂塊（直徑為10mm）接種3塊到液體培養(yǎng)基中振蕩暗培養(yǎng)(轉(zhuǎn)速為120r/min)7d，培養(yǎng)條件為28℃±2℃,用勻漿機打碎菌絲體備用。4.2.3固體菌劑的制備將活化的菌根真菌接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)28d，培養(yǎng)條件為28℃暗培養(yǎng)，備用。固體培養(yǎng)基由78%殼斗科植物的鋸末、20％麥麩和2％玉米粉組成，營養(yǎng)液（葡萄糖20g/L、MgSO41.5g/L、KH2PO43g/L）的量為上述3種固體原料重量的1～5倍；pH值5.5～6.5。采用菌種瓶或聚丙烯袋等容器裝料，121℃滅菌1h，冷卻后接菌備用。5育苗圃和基質(zhì)5.1育苗圃的選擇選擇背風(fēng)向陽、水源方便的地塊。5.2設(shè)施設(shè)備在育苗圃搭建遮陽大棚，覆蓋單層薄膜（厚度約為0.10mm），上面再加蓋遮陽率為90％的遮陽網(wǎng)。5.3基質(zhì)處理在大棚內(nèi)起壟建設(shè)育苗床，育苗基質(zhì)厚約10cm，由3份滅菌后的殼斗科植物碎屑、3份泥炭土和4份土壤組成。土壤滅菌方法應(yīng)按GB/T6001的要求執(zhí)行。6菌根化育苗技術(shù)6.1煉苗將培養(yǎng)的白及無菌種子苗移至育苗大棚內(nèi)，打開培養(yǎng)袋或培養(yǎng)瓶，自然條件下煉苗10d～15d。光照度約為2500Lx，避免直射光。6.2移栽取出白及種子苗，沖洗掉培養(yǎng)基后移栽。3DB45/T2537—20226.3種苗菌根化將整理好的育苗床開出深2cm～3cm的溝，在溝底施入菌根真菌劑，再將白及種子苗按照株距5cm、行距5cm的規(guī)格進行擺放，并用菌根菌劑（施入量為液體菌根真菌劑每株3mL或固體菌根真菌劑每株2g）覆蓋根部，覆蓋厚約1cm的育苗基質(zhì)。6.4水、肥管理6.4.1水分白及組培種子苗移栽后，及時噴霧補水，使苗床濕度保持在75％以上。6.4.2施肥白