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文檔簡介
實(shí)驗(yàn)室及管理——植物工廠化育苗
植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)及主要儀器設(shè)備
組培技術(shù)需要依托實(shí)驗(yàn)室及相關(guān)儀器設(shè)備進(jìn)行生產(chǎn)操作實(shí)驗(yàn)室怎樣選址,怎樣布置合適?實(shí)驗(yàn)室環(huán)境有什么要求?儀器怎么使用,注意事項(xiàng)?
(一)實(shí)驗(yàn)室選址實(shí)驗(yàn)室選址原則:1.周圍沒有污染源(沒有利于微生物滋生的條件)。如養(yǎng)雞場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)等;2.沒有工廠等的有毒氣體排放、污染水源,不利于組培苗移栽;3.不要組建在市中心;但又交通方便的城市近郊。應(yīng)在城市常年主風(fēng)向的上風(fēng)向,避開各種污染源;4.選在樓層中的高層較好,微生物在地面或近地面的地方易于生長。實(shí)驗(yàn)室布局工藝流程通常按自然工作程序先后,安排成一條連續(xù)的生產(chǎn)線,避免有的環(huán)節(jié)倒排,增加日后工作的負(fù)擔(dān)或引起混亂。按照工藝流程進(jìn)行布局,組培苗生產(chǎn)環(huán)節(jié)為主線合理布局。
工作流程相匹配實(shí)驗(yàn)室洗滌間:洗瓶玻璃器皿容器及存放藥品室配培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)室:培養(yǎng)基配置、分裝滅菌室:培養(yǎng)基的滅菌工作
無菌操作室(接種室與緩沖間)用于植物初代、繼代、生根培養(yǎng)的接種過程培養(yǎng)室用于初代、繼代、生根培養(yǎng)階段的組培苗的培養(yǎng)溫室組培苗的煉苗、移栽等過程
苗圃
成形的商品大苗商品組培苗培養(yǎng)基的配置接種
組培苗培養(yǎng)移植
小苗培養(yǎng)組培的幾道主要工序如下:培養(yǎng)器皿的洗滌;培養(yǎng)基的配制、分裝、包扎和高壓滅菌;無菌操作---材料的表面滅菌和接種;組培苗培養(yǎng)(初代繼代生根培養(yǎng));試管苗移栽與初期管理。理想的包括:洗滌室、準(zhǔn)備室、藥品室、緩沖室、滅菌室、無菌操作室(接種室)培養(yǎng)室、溫室或大棚。規(guī)模大條好的,幾道工序可以分別在好幾間實(shí)驗(yàn)室里完成。規(guī)模小,條件有限的可以合并實(shí)驗(yàn)室使用。
(二)實(shí)驗(yàn)室的基本組成1.化學(xué)藥品室
植物組織培養(yǎng)需要幾十種化學(xué)藥品,這些藥品的質(zhì)量和保存直接影響到培養(yǎng)效果。保存藥品的環(huán)境條件嚴(yán)重影響到藥品的質(zhì)量和可用期限,如環(huán)境溫度、濕度和光照等,為了滿足這些條件,建立一個(gè)單獨(dú)的藥品室是必要的。
藥品櫥:注意事項(xiàng):將固體藥品和液體藥品分開,大包裝與小包裝分開,常用藥品與不常用藥品分開,危險(xiǎn)、易燃、易爆、有腐蝕性的藥品與普通藥品分開。藥品櫥的設(shè)計(jì)以內(nèi)部階梯式結(jié)構(gòu)較為合理,藥品的擺放應(yīng)按一定的順序,每一階梯層上擺放一行,這樣看起來一目了然,十分便于工作。建立藥品購進(jìn)和使用檔案,記錄藥品的購進(jìn)日期、數(shù)量,取用的數(shù)量、日期及使用人員等,以利于工作的開展。實(shí)驗(yàn)臺(tái)設(shè)置必須牢固、平穩(wěn),具有較好的抗震性能。試驗(yàn)臺(tái)配置防腐蝕臺(tái)面。
實(shí)驗(yàn)臺(tái)上要擺放一臺(tái)萬分之一的電子天平和一臺(tái)百分之一的電子天平。在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的抽屜內(nèi)存放稱量藥品用的藥匙、稱量紙(光滑濾紙)、毛刷、衛(wèi)生紙等。
藥品室內(nèi)還可存放一些干燥的、暫時(shí)不用或利用率較低的玻璃器皿或其他實(shí)驗(yàn)用品,如脫脂棉、濾紙、紗布等,這些物品應(yīng)單獨(dú)存放在一個(gè)櫥子內(nèi)或在藥品櫥內(nèi)設(shè)置獨(dú)立的隔層。培養(yǎng)基配置室面積至少40平方米,空間足夠大,操作方便。配制培養(yǎng)基區(qū)應(yīng)有大型實(shí)驗(yàn)臺(tái)若干個(gè),數(shù)量多少由工作人員多少和工作量的大小以及房間的面積而定。實(shí)驗(yàn)臺(tái)的高度最好以人站著操作比較舒服為宜。該區(qū)還應(yīng)配備常規(guī)配培養(yǎng)基所使用的設(shè)備及儀器:冰箱一臺(tái),電爐(1000W,2000W)或電磁爐,放置移液管、微量移液器的架子,酸度計(jì)、燒杯、量筒等儀器設(shè)備。2.培養(yǎng)基配制實(shí)驗(yàn)室
用途:
配制培養(yǎng)基的各種母液,包括大量元素、微量元素、有機(jī)溶液、鐵鹽、各種激素
應(yīng)配置的儀器:
蔗糖、瓊脂和粗天\分析平也放在此區(qū)。量取各種母液所用的移液管、吸耳球、量筒、微量移液器的吸頭等都應(yīng)盡量干凈,以防止在量取母液時(shí)污染母液。
注意:配制培養(yǎng)基時(shí),使用過的玻璃器皿、容器、用品等需要清洗的要及時(shí)送到清洗區(qū)進(jìn)行清洗,一時(shí)來不及清洗的也應(yīng)加上自來水,以防剩余的培養(yǎng)基、化學(xué)溶液等干結(jié)在器皿上。
3、滅菌室功能:培養(yǎng)基、器皿、工具等滅菌。環(huán)境:耐濕,耐通風(fēng),安置排風(fēng)扇以保證通風(fēng)良好。墻面地面耐潮濕
最好與配制培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室相鄰或盡量靠近,因配制好的培養(yǎng)基和一些器皿需要盡快進(jìn)行高溫高壓滅菌,如果兩處相距太遠(yuǎn)會(huì)給工作帶來諸多不便。室內(nèi)需備有高壓滅菌鍋及烘箱等設(shè)備。4.洗滌室
完成培養(yǎng)容器、玻璃器皿、用具的清洗、干燥和貯存以及初代培養(yǎng)中外植體材料的清洗。環(huán)境:地面注意防滑,排水通暢,墻壁防濕防潮設(shè)置:洗滌室應(yīng)設(shè)置大型水槽,工作臺(tái)面、上下水管道、落水架、干燥箱等。洗滌室配備手推車用于運(yùn)輸培養(yǎng)器皿?;瘜W(xué)實(shí)驗(yàn)室(置天平和藥品)與洗滌滅菌室分開。
無菌工作的場(chǎng)所,如材料的滅菌接種,無菌材料的繼代,叢生苗的增殖或切割嫩莖插植生根等,它是植物組織培養(yǎng)研究或生產(chǎn)工作中的最關(guān)鍵的部分關(guān)系到培養(yǎng)物的污染率、接種工作效率等重要指標(biāo)。
環(huán)境:干凈、干爽、安靜、清潔明亮,墻壁光滑平整不易積染灰塵,地面平坦無縫,便于清洗和滅菌。最好采用水磨石地面或水磨石砌塊地面,白瓷磚墻面或防菌漆天花板板面等結(jié)構(gòu)。門窗要密閉,一般安裝滑動(dòng)門,減少空氣對(duì)流,以防外界菌類及塵埃的侵入。設(shè)備:
紫外燈,用于紫外線滅菌,保持良好的無菌或低密度有菌狀態(tài)。
空調(diào),調(diào)整保持無菌室內(nèi)合適溫度,可以門窗緊閉,保持與外界相對(duì)隔絕的狀態(tài),盡量減少塵埃與微生物侵入。密閉的空間,經(jīng)常采用滅菌措施,就可達(dá)到較高的無菌水平,以利安全操作,提高工作的質(zhì)量與效率。操作臺(tái)和擱架,分別用以放置組培的操作器具和滅菌后待接種的培養(yǎng)瓶等。5.無菌操作室(接種室)設(shè)置:超凈工作臺(tái)、醫(yī)用小平車。超凈工作臺(tái)上放酒精燈和裝有刀、剪、鑷子的工具合(常用飯盒或搪瓷盤),滅菌用的酒精(75%與95%兩種)、外植體表面滅菌劑(0.1%HgCl2等)以及吐溫、無菌水等。醫(yī)用小平車6.緩沖室
功能:
輔助無菌接種的準(zhǔn)備工作,
操作人員在緩沖間更衣、換鞋洗手進(jìn)入無菌室。配置超凈臺(tái)滅菌藥品。防止帶菌空氣進(jìn)入接種室及工作人員進(jìn)出接種室時(shí)帶進(jìn)去雜菌。最好安裝1盞紫外燈,用以滅菌。
墻上設(shè)衣帽鉤,門邊擺拖鞋或設(shè)1鞋箱。
安裝水池。功能:培養(yǎng)離體材料場(chǎng)所,一般30-40平方米。位置:最好與接種室相鄰。環(huán)境要求:無菌培養(yǎng)室最重要的是要恒溫、恒濕,無塵且空氣流通,空間微生物含量低。溫度應(yīng)維持在(25±2)℃,相對(duì)濕度應(yīng)在50%—60%。向陽或加大窗戶利于接收自然光線。7.培養(yǎng)室培養(yǎng)架:年產(chǎn)4~10萬苗需培養(yǎng)架4~6個(gè),年產(chǎn)苗10~20萬約需8~10個(gè)。培養(yǎng)架的高度可以根據(jù)培養(yǎng)室的高度來定,每個(gè)架子分為若干層,每層的層高應(yīng)在40cm左右,太高浪費(fèi)空間,太低則上下層溫度影響太大,架寬應(yīng)在45cm左右。最下一層距地面0.2米。層間距30厘米。每盞燈有開關(guān)、每個(gè)架子有個(gè)總開關(guān),以便隨時(shí)隨地視具體情況來調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度;而每天光照時(shí)間的長短則由緩沖室配電板上安裝定時(shí)器控制。紫外燈:
定時(shí)對(duì)整個(gè)房間進(jìn)行殺菌處理,夏天潮濕、霉雨季節(jié),最好每天在晚上用紫外燈殺菌30min以上。培養(yǎng)室內(nèi)的地面、墻壁、培養(yǎng)架及所有器物的表面都應(yīng)經(jīng)常清洗、擦拭以防過多灰塵和微生物滋生。尤其是培養(yǎng)架頂端以及培養(yǎng)架底端容易被忽視
進(jìn)入培養(yǎng)室最好穿戴干凈拖鞋或穿一次性塑料鞋套,非工作人員最好少進(jìn)入培養(yǎng)室。出入人員出入所帶的塵埃,拖地掃地,空調(diào)揚(yáng)起的灰塵都會(huì)造成感染。9.馴化移栽室當(dāng)試管苗長出一定量的不定根,根長在0.5cm~1cm時(shí),及時(shí)移栽馴化。馴化室通常是在溫室的基礎(chǔ)上營建。
馴化室要求清潔無菌,配有空調(diào)機(jī)、加濕器、恒溫恒濕控制儀、噴霧器、光照調(diào)節(jié)裝置、通風(fēng)口以及必要的殺菌劑。面積大小視生產(chǎn)規(guī)模而定。馴化溫室10.溫室
為了保證試管苗不分季節(jié)地周年地生產(chǎn),必須有足夠面積的溫室與之配套。溫室內(nèi)應(yīng)配有溫度控制裝置、通風(fēng)口、噴霧裝置、光照調(diào)節(jié)裝置。一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)立原則各實(shí)驗(yàn)室分布要按照(工作流程或工藝)進(jìn)行布局標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行設(shè)置包括哪些實(shí)驗(yàn)室,其環(huán)境要求,及特別需要注意的幾個(gè)事項(xiàng)(洗滌室、準(zhǔn)備室、藥品室、滅菌室、緩沖室與無菌操作室、培養(yǎng)室)準(zhǔn)備室和藥品、洗滌室和滅菌、常用儀器配備。儀器使用時(shí)一些注意事項(xiàng)天平分為(分析天平)(粗天平),稱量時(shí)稱量重量精確到(),稱量的濾紙應(yīng)使用()濾紙,連續(xù)稱藥品時(shí)注意稱重前需要(清零)
再繼續(xù)稱量高溫滅菌器使用時(shí)注意的細(xì)節(jié):
玻璃器皿使用,常用的器皿有哪些,用途是什么,一些注意事項(xiàng):燒杯、量筒、定容瓶、玻璃棒、移液管、大試劑瓶調(diào)pH值與培養(yǎng)基軟硬程度。均衡、水解、下降0.2-0.4.余熱水解-培養(yǎng)基稀。二、什么是植物激素、人工調(diào)節(jié)劑,具體包括哪幾類逆境激素。生理活性物質(zhì)是移動(dòng)的。下-上IAA類生長素類的藥品:IAA、IBA、NAA
\
2,4D鹽酸溶解95%CK類藥品有哪些,用什么溶解,作用ZT\KT\BA溶解Hcl,zt
乙醇上-下嫩莖。衰老赤霉素怎樣溶解,注意冷水,酒精分解冷藏抗生素作用:外植體滅菌表面,不容易誘導(dǎo)分化,生根可以嘗試用(天然復(fù)合物)嘗試調(diào)節(jié)組培中提供碳源的是:糖-蔗糖-維持滲透壓,低滲透,植物吸水
,易吸收
,抑制微生物繁衍
便宜綿白糖實(shí)驗(yàn)臺(tái)擱架培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架藥品及儀器柜無菌臺(tái)無菌臺(tái)擱架拉窗冰箱擱架水槽電爐門4.5m3.0m3.5m4.0m準(zhǔn)備室緩沖室無菌室培養(yǎng)室基本實(shí)驗(yàn)室布局平面圖Ⅱ、一般的組培實(shí)驗(yàn)室包括:一、設(shè)置二、準(zhǔn)備三、注意事項(xiàng)
二、設(shè)備儀器1、準(zhǔn)備室①天平,1/10000、1/1000的分析天平、粗天平②電爐(放燒杯)、電磁爐(鍋)③高溫滅菌鍋小型手提式1000-2000W25L
中型立式大型臥式④電冰箱⑤蒸餾水器⑥玻璃器皿、備品、雜品、藥品(移液管、燒杯)⑦干燥箱⑧培養(yǎng)容器(培養(yǎng)瓶)試管→小三角瓶→代用瓶→專用平(塑料瓶、玻璃瓶等)效率低昂貴果汁瓶等,成本低2、接種室①超凈工作臺(tái)---單人/雙人垂直風(fēng)幕,直接吹到材料上,材料易風(fēng)干水平風(fēng)幕②紫外滅菌燈—打開后,5分鐘內(nèi),局限于照射到的范圍;5分鐘后,紫外光激發(fā)空氣中氧氣→臭氧,臭氧本身滅菌,③操作工具—手術(shù)刀(可換刀片)、鑷子、手術(shù)間(不用碳鋼,因?yàn)橐咨P)、酒精燈。3、培養(yǎng)室空調(diào)(工作時(shí)舒服、避免流汗污染)20平方米以下1P1臺(tái);20-40平方米,2P,1臺(tái)/1P、2臺(tái);培養(yǎng)架(木制、金屬焊接、金屬組合)150瓶/層。培養(yǎng)架
三、注意事項(xiàng)(一)準(zhǔn)備室----保證安全1、水電的相對(duì)安全2、易燃、易爆藥品(新潔爾滅)要遠(yuǎn)離熱源,避光儲(chǔ)存;易揮發(fā)、易腐蝕、易吸潮的藥品要小心存放。(二)接種室
1、使用前注意清掃、除塵、滅菌、熏蒸。(0.2克高錳酸鉀+2毫升福爾馬林)/立方米,2毫升福爾馬林加入到0.2克錳酸鉀中,倒過去后發(fā)煙,煙起到熏蒸的效果,密閉24小時(shí),殺滅門窗縫隙的微生物,打開門窗散味,一周后使用。
2、平時(shí)管理
①不能堆放與工作無關(guān)的物品和人;②高度潔凈無塵,地面、墻面、工作臺(tái)面保持潔凈;
③經(jīng)常進(jìn)行常規(guī)滅菌---紫外燈照射、化學(xué)滅菌75%酒精或2%新潔爾滅噴灑,對(duì)天花板噴灑,細(xì)霧滴滴落,殺滅空氣中的細(xì)菌,但只是一部分,一般情況下一個(gè)月處理一次。(三)培養(yǎng)室1、同接種室(初次使用時(shí))2、平時(shí)管理①光照定時(shí)器要注意調(diào)節(jié)(尤其停電時(shí)候②污染的培養(yǎng)物及時(shí)清除(溫度適合菌的生長,等孢子擴(kuò)散,使培養(yǎng)時(shí)內(nèi)全部培養(yǎng)物污染)③經(jīng)常檢查溫度、空調(diào)、光照條件④分門別類放置培養(yǎng)物(品種、培養(yǎng)階段)二、實(shí)驗(yàn)室的常用設(shè)備1.超凈工作臺(tái):用于培養(yǎng)材料的消毒及接種。
使用:將超凈工作臺(tái)上面的排風(fēng)和殺菌按鈕開啟,滅菌15min后,關(guān)閉殺菌按鈕,打開照明按鈕,即可在上面進(jìn)行操作。1.超凈工作臺(tái)
根據(jù)風(fēng)幕形成的方式,可分為垂直式和水平式兩種;按大小又可分為單人單面、雙人單面、雙人雙面。垂直風(fēng)幕,直接吹到材料上,材料易風(fēng)干。水平風(fēng)幕,
工作原理:
超凈工作臺(tái)裝有小型鼓風(fēng)機(jī),使空氣通過雙層細(xì)菌過濾裝置,除去大于0.3μm的塵埃、細(xì)菌和真菌孢子
以固定不變的速率從工作臺(tái)面上流出,在操作人員與操作臺(tái)之間形成無菌風(fēng)幕。超凈空氣的流速為每分鐘24-30m,可以防止附近空氣襲擾而引起的污染,也不會(huì)妨礙采用酒精燈對(duì)器械等的灼燒消毒。6.烘箱
可以用80
C~100
C的溫度,迅速干燥洗凈后的玻璃器皿。
也可以用160
C~180
C的溫度,進(jìn)行1h~3h的高溫干燥滅菌。
7.高壓滅菌器
用于培養(yǎng)基、蒸餾水和接種器械的滅菌消毒。分類:大型臥式、中型立式、小型手提式等多種。可根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模選用,大型效率高,小型方便。工作原理:
在密閉的蒸鍋內(nèi),其中的蒸氣不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點(diǎn)不斷提高,從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸氣溫度下,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。構(gòu)造:立式滅菌器主要由總閥、氣壓表、放氣閥、絲杠扳手、緊定絲母、水碗、進(jìn)水閥、水位線標(biāo)志、排水閥、夾層壓力表等零部件構(gòu)成。使用①加水:打開進(jìn)水閥,向水碗注入清水直至水位到標(biāo)志線為止,然后關(guān)閉進(jìn)水閥;②移開上蓋裝入物品;逆時(shí)針方向旋動(dòng)絲杠扳手使上蓋離開上口后,推動(dòng)橫梁移開上蓋,裝入滅菌物品,注意留有空隙以利消毒徹底;③關(guān)閉上蓋;順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)絲杠扳手直至緊到不能轉(zhuǎn)為止;④接通電源,使滅菌器開始工作。當(dāng)壓力表指針升到0.05MPa時(shí),打開放氣閥放出冷氣,直至回零,關(guān)閉放氣閥,使滅菌器繼續(xù)工作。⑤當(dāng)壓力達(dá)到0.10MPa時(shí),開始計(jì)算時(shí)間,使壓力表保持0.10-0.15的范圍,維持一定滅菌時(shí)間,不同消毒物品所需時(shí)間不同,一般滅菌20~30min。⑥放氣取物。當(dāng)滅菌到所需時(shí)間時(shí),斷開電源,讓壓力自然下降。當(dāng)達(dá)到0.05MPa時(shí)可放出蒸氣,至零時(shí),打開鍋取出物品。注意事項(xiàng):①對(duì)高壓滅菌后不變質(zhì)的物品,如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具,可以延長滅菌時(shí)間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間,既要保壓徹底,又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低,不能隨意延長時(shí)間;②對(duì)于一些布制品,如實(shí)驗(yàn)服、口罩等也可用高壓滅菌。洗凈晾干后用耐高壓塑料袋裝好,高壓滅菌20-30min;③高壓滅菌前后的培養(yǎng)基,其pH值下降0.2-0.3單位。因此,調(diào)PH值時(shí),可適當(dāng)調(diào)高0.2-0.3個(gè)單位。④當(dāng)壓力不為零時(shí),不能開蓋取物否則由于壓力突然下降,容器內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染而發(fā)生污染,甚至灼傷操作者。⑤高壓滅菌鍋上的安全閥,是保障安全使用的重要部件,不得隨意調(diào)節(jié)。9.天平分析天平和電子天平等。
分析天平:微量、激素藥品粗天平:大量藥品、糖、瓊脂
天平應(yīng)放在干燥的固定操作臺(tái)上,應(yīng)避免振動(dòng)和腐蝕。
注意事項(xiàng):去皮稱量、預(yù)熱30分鐘、誤差0.02mg以內(nèi)、硫酸紙稱取12.搖床(振蕩培養(yǎng)機(jī))在液體培養(yǎng)中,為了改善浸于液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)材料的通氣狀況,可用搖床來振動(dòng)培養(yǎng)容器。振動(dòng)速率每分鐘60~120次為低速,每分鐘120~250次為高速,植物組織培養(yǎng)可用每分鐘100次左右。13.轉(zhuǎn)床(旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)機(jī))
液體培養(yǎng)。由于旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)使植物材料交替地處于培養(yǎng)液和空氣中,所以氧氣的供應(yīng)和對(duì)營養(yǎng)的利用更好。通常植物組織培養(yǎng)用1分鐘1轉(zhuǎn)的慢速轉(zhuǎn)床,懸浮培養(yǎng)需用80~100轉(zhuǎn)/分鐘的快速轉(zhuǎn)床。14.蒸餾水發(fā)生器
植物組織培養(yǎng)中常使用蒸餾水。構(gòu)造:主要由冷凝器、回水管、進(jìn)水閥、蒸餾水出口管、水位表、蒸發(fā)鍋、水碗、放水閥、電源指示燈等零部件構(gòu)成。工作原理:為蒸發(fā)鍋加熱后向上產(chǎn)生水蒸氣,當(dāng)水蒸氣遇到?jīng)龅睦淠鞅隳Y(jié)成水滴從蒸餾水出口管流出。無菌水:已經(jīng)滅菌的自來水及已經(jīng)滅菌的蒸餾水、已經(jīng)滅菌的去離子水三、器皿與用具
(一)組培器皿1.培養(yǎng)器皿是指用于放入培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料進(jìn)行培養(yǎng)的器皿。要求透光度好,能耐高壓滅菌。按其制作材料分:主要有玻璃培養(yǎng)器皿與塑料培養(yǎng)器皿兩種。玻璃培養(yǎng)器皿:透光度好、容易清洗,缺點(diǎn)是容易破碎;塑料培養(yǎng)器皿:不容易破碎、成本較低,但缺點(diǎn)是透光度較玻璃培養(yǎng)器皿差、遇火焰易被熔化。①試管
占空間小,單位面積可容納的數(shù)量較多,所以初代培養(yǎng)及試驗(yàn)處理較多時(shí)使用比較方便。通常以2.0cm×15cm、2.5cm×15cm、4.0cm×15cm為好。試管可在燈光下直立放置,以便更好的利用光能。②三角瓶培養(yǎng)面積大,利于組織生長,受光好。瓶口小,也有利于減少污染。③培養(yǎng)皿適合于游離細(xì)胞、原生質(zhì)體、花粉等的靜止培養(yǎng)。有6、9、12cm等規(guī)格,要求上下能密切吻合。④果醬瓶或罐頭瓶
成本低;瓶口大,大量繁殖時(shí)操作方便、工作效率高;透光性好。生產(chǎn)中應(yīng)用較多的是200ml的果醬瓶,加蓋半透明的塑料蓋。⑤瓶口封塞
要求:要具有一定的通氣性和密閉性,以防止培養(yǎng)基干燥和雜菌污染。1)以前用棉塞。但這種封口辦法夏季極易污染,且不易保持培養(yǎng)基濕度。2)用聚丙烯塑料薄膜,以線繩結(jié)扎或橡皮圈箍扎。為了增加通氣性,可在里面襯一層硫酸紙或牛皮紙。這樣經(jīng)濟(jì)方便,且通氣好。3)也可采用專用的封口膜。2.盛裝容器①試劑瓶包括無色和棕色兩類。細(xì)分為廣口瓶、細(xì)口瓶,規(guī)格從50-1000ml不等。用于盛裝母液。棕色瓶用于見光易分解的藥液的儲(chǔ)存。②滴瓶盛裝酸液或堿液,用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值。③燒杯藥品溶解時(shí)使用,加石棉網(wǎng)電爐使用。
不能用于定容,定容瓶和移液量筒移液管
型號(hào):1000ml\100ml\50ml
3.計(jì)量容器①容量瓶容量瓶主要用于準(zhǔn)確地配制定容量溶液。
細(xì)長頸、梨形的平底玻璃瓶,配有磨口塞。瓶頸上刻有標(biāo)線,當(dāng)瓶內(nèi)液體在所指定溫度下達(dá)到標(biāo)線處時(shí),其體積即為瓶上所注明的容積數(shù)。
一種規(guī)格的容量瓶只能量取一個(gè)量。常用的容量瓶有100、250、500、1000ml毫升等多種規(guī)格。植物組織培養(yǎng)中用于配制培養(yǎng)基母液時(shí)定容。②移液管用于吸取各種母液和激素溶液。規(guī)格有0.1-10ml。③量筒用于量取各種母液。規(guī)格有10-1000ml。(二)器械用具1.鑷子材料的接種以長16-25cm的不銹鋼槍狀鑷子為好。由于鑷子有一定的角度,且尖端圓鈍,所以在培養(yǎng)瓶中操作方便,也不致傷害材料。鑷子過短,容易使手接觸瓶口,造成污染。鑷子太長,使用起來不靈活。2.剪刀
立體快繁時(shí),繼代培養(yǎng)需要在培養(yǎng)瓶內(nèi)大量剪取莖段,進(jìn)行轉(zhuǎn)接,常用醫(yī)用解剖剪刀。3.解剖刀用于切割接種材料。刀片應(yīng)該經(jīng)常更換,以保持鋒利狀態(tài),否則影響接種速度,也會(huì)造成植物材料不必要的損傷;
防止酒精燈長期烘烤刀片氧化,在植物材料切割處留下鐵屑,影響材料吸收養(yǎng)分。1.溫度
溫度決定植物材料的呼吸速率和控制植物組織代謝過程的化學(xué)反應(yīng),也影響其分化增殖以及器官建成等發(fā)育進(jìn)程。培養(yǎng)室一般要求較好
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