《大熊貓主要寄生蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)程》

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團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/CVMAXXXXX—XXXX

大熊貓主要寄生蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)程

Technicalregulationsforsurveillanceonkeyparasitesingiantpandas

（征求意見(jiàn)稿）

在提交反饋意見(jiàn)時(shí)，請(qǐng)將您知道的相關(guān)專利連同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)

a中國(guó)獸醫(yī)協(xié)會(huì)發(fā)布

大熊貓主要寄生蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了監(jiān)測(cè)目標(biāo)、監(jiān)測(cè)范圍、采樣對(duì)象與樣品類型、采樣時(shí)間、采樣數(shù)量、樣品檢測(cè)方法、

檢測(cè)結(jié)果與報(bào)告等內(nèi)容和要求。

本文件適用于四川、陜西、甘肅等大熊貓主要分布區(qū)保護(hù)機(jī)構(gòu)及全國(guó)飼養(yǎng)大熊貓的單位和研究機(jī)構(gòu)

開(kāi)展大熊貓常見(jiàn)寄生蟲(chóng)病的監(jiān)測(cè)、流行病學(xué)調(diào)查等。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

LY/T1959陸生野生動(dòng)物疫病分類與代碼

LY/T2015大熊貓飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)程

LY/T2359陸生野生動(dòng)物疫源疫病監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范

LY/T2360野生動(dòng)物疫病危害性等級(jí)劃分

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

大熊貓蛔蟲(chóng)病giantpandabaylisascariasis

大熊貓蛔蟲(chóng)病是由蛔科（Ascarididae）、貝蛔屬（Baylisascaris）的西氏貝蛔蟲(chóng)（Baylisascaris

schroederi）寄生于大熊貓小腸及小腸相連的其它器官所引起的一種寄生性線蟲(chóng)?。▍⒁?jiàn)附錄A）。

3.2

蛔蟲(chóng)感染Baylisascarisschroederiinfection

蛔蟲(chóng)感染是大熊貓西氏貝蛔蟲(chóng)幼蟲(chóng)在大熊貓?bào)w內(nèi)移行和成蟲(chóng)寄生于大熊貓腸道。

3.3

大熊貓足螨病choriopticmangeofthegiantpanda

大熊貓足螨病是由癢螨科（Psoroptidae）、足螨屬（Ｃhorioptes）的大熊貓足螨（Chorioptespanda）

主要寄生于大熊貓頭面部等皮膚表面所引起的一種體外寄蟲(chóng)病。

4監(jiān)測(cè)范圍

4.1野生種群

4

四川、陜西、甘肅等省的大熊貓自然棲息地。

4.2圈養(yǎng)種群

全國(guó)飼養(yǎng)大熊貓的單位。

5樣品采集

5.1蛔蟲(chóng)采樣種類

蛔蟲(chóng)卵、幼蟲(chóng)或（雌雄）成蟲(chóng)。

5.2螨蟲(chóng)采樣種類

（第一或第二）若螨、（雌雄）成螨。

5.3采樣時(shí)間

5.3.1野外大熊貓：蛔蟲(chóng)3個(gè)月采樣1次。

5.3.2圈養(yǎng)大熊貓：蛔蟲(chóng)每2個(gè)月采樣1次，每次連續(xù)采樣三天，足螨每1個(gè)月采樣1次。

5.4采樣數(shù)量

采用95%置信區(qū)間，根據(jù)如下公式：

計(jì)算出的具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的理論數(shù)值，其中n為抽樣個(gè)數(shù)，CL為置信水平（即95%），N為群內(nèi)個(gè)

體數(shù)，D為群中的陽(yáng)性動(dòng)物數(shù)，D=N×p，p為預(yù)設(shè)的最低流行率。

5.5樣品運(yùn)輸和保存

大熊貓蛔蟲(chóng)和足螨檢測(cè)樣品的運(yùn)輸和保存具體操作，應(yīng)符合附錄B的規(guī)定。

6大熊貓蛔蟲(chóng)樣品檢測(cè)

6.1診斷依據(jù)

6.1.1流行病學(xué)史

大熊貓生活環(huán)境是否存在食物被糞便污染、圈養(yǎng)個(gè)體是否存在過(guò)往感染史。食物糞便污染或過(guò)往感

染史（參見(jiàn)附錄C）。

6.1.2臨床表征

6.1.2.1幼蟲(chóng)期

幼蟲(chóng)期臨床癥狀參見(jiàn)附錄D.1。

6.1.2.2成蟲(chóng)期

4

成蟲(chóng)期臨床癥狀參見(jiàn)附錄D.2。

6.1.3實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

6.1.3.1病原學(xué)檢測(cè)

1）糞便檢查中檢出蛔蟲(chóng)蟲(chóng)卵或成蟲(chóng)（參見(jiàn)附錄E）。

2）嘔吐物中查到蛔蟲(chóng)蟲(chóng)體。

6.1.3.2影像學(xué)檢測(cè)

1）X線檢測(cè)：胸片見(jiàn)肺門擴(kuò)大、肺葉有點(diǎn)狀、絮狀或片狀陰影；嚴(yán)重感染時(shí)腹部平片上除小腸充

氣或有液平面以外可以看到腸腔內(nèi)成團(tuán)的蟲(chóng)體陰影或呈現(xiàn)平行的線狀陰影。

2）超聲檢測(cè)：如蛔蟲(chóng)移行或寄生于膽囊或膽總管時(shí)，超聲檢測(cè)可表現(xiàn)為膽囊或膽總管內(nèi)具有兩條

平行的光帶。

6.2診斷

根據(jù)流行病學(xué)、臨床表征及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果等予以診斷。

6.2.1蛔蟲(chóng)感染

同時(shí)符合本規(guī)程第6.1.1條和第6.1.3條。

6.2.2蛔蟲(chóng)病

6.2.2.1疑似病例

同時(shí)符合本規(guī)程第6.1.1條和第6.1.2條中任一條。

6.2.2.2臨床診斷病例

符合疑似病例和第6.1.3.2條中任何一條。

6.2.2.3確診病例

符合疑似病例和第6.1.3.1條中任何一條或符合臨床診斷病例和第6.1.3.1條中任何一條。

7大熊貓足螨樣品檢測(cè)

7.1病原學(xué)檢測(cè)方法

7.1.1主要器具及材料：

光學(xué)顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、甘油、無(wú)水酒精、恒溫培養(yǎng)箱。

7.1.2樣品采集與處理：

根據(jù)臨床癥狀（參見(jiàn)附錄F）可以做出初步診斷。確認(rèn)時(shí)可以取疑似蟲(chóng)體、痂皮、皮屑，或者刮取

感染部位的贅生物，浸泡于無(wú)水酒精中。

7.1.3直接鏡檢法（參見(jiàn)附錄G和H）：

4

滴加1滴500mL/L甘油透明液于載玻片上，挑取一定數(shù)量的疑似蟲(chóng)體或病理樣品置于透明液中，蓋

上蓋玻片。放置30min，置于光學(xué)顯微鏡下觀察。

7.1.4溫水檢查法：

將病料沒(méi)入40℃~45℃的水中，置于37℃恒溫箱內(nèi)。在溫?zé)崴淖饔孟拢x(chóng)由皮屑內(nèi)爬出。集成

團(tuán)而沉入水底，1~2h后，將浸過(guò)病料的液體倒出，沉渣傾入表皿中鏡檢。

7.1.5螨蟲(chóng)濃集法

為了在較多的病料中，檢出其中較少的蟲(chóng)體，而提高檢出率，可采用濃集法。此法先取較多的病料，

置于試管中，加入10％NAOH溶液，浸泡過(guò)夜（如急待檢查右在酒精燈上煮數(shù)分鐘），使皮屑溶解，蟲(chóng)

體自皮屑中分離出來(lái)，而后待其自然沉淀（或以2000轉(zhuǎn)/分離心沉淀5分鐘），蟲(chóng)體即沉入管底，棄去

上層液，吸取沉渣檢查；或向沉渣中加入60％硫代硫酸鈉溶液，直立待蟲(chóng)體上浮，再取表面液體檢查。

7.2結(jié)果判定

用光學(xué)顯微鏡對(duì)取樣標(biāo)本片進(jìn)行仔細(xì)檢查，綜合臨床觀察結(jié)果。凡發(fā)現(xiàn)蟲(chóng)卵、幼螨、若螨、成螨（任

一形態(tài)）均為陽(yáng)性。

7.3記錄與報(bào)告

檢測(cè)結(jié)果匯總的報(bào)告表見(jiàn)附件I。

5

附錄A

(資科性附錄)

蛔蟲(chóng)病原學(xué)

A.1種類

大熊貓西氏貝蛔蟲(chóng)（Baylisascarisschroederi）是大熊貓蛔蟲(chóng)病病原，其幼蟲(chóng)存在于大熊貓的肝

肺等臟器，成蟲(chóng)寄生于大熊貓腸道，可引起消化道西氏貝蛔蟲(chóng)病。

A.2形態(tài)

A.2.1蟲(chóng)卵

西氏貝蛔蟲(chóng)受精卵呈黃色至黃褐色，橢圓或長(zhǎng)橢圓形，兩端鈍圓，基本對(duì)稱，長(zhǎng)67.50μm-83.70

μm，寬54.00μm-70.07μm；卵殼由3層膜構(gòu)成，由里到外依次為薄而透明的內(nèi)膜、厚而透明的幾丁

質(zhì)中膜和蛋白質(zhì)外殼；外殼布滿棘狀突起，電鏡下呈圓錐形，是區(qū)別于其它蛔蟲(chóng)卵的主要特征。

A.2.2幼蟲(chóng)

2期幼蟲(chóng)蟲(chóng)體細(xì)長(zhǎng)，頭端突起，三片唇明顯，口腔狹窄，食道呈柱狀，中間相對(duì)較細(xì)，食道兩端可

見(jiàn)粒狀的排泄細(xì)胞，腸道似線樣，尾部側(cè)面可見(jiàn)直腸及肛孔。3期幼蟲(chóng)較2期有所增大，側(cè)翼膜增寬且

邊緣變薄，食道靠背側(cè)前端呈漏斗狀結(jié)構(gòu)，神經(jīng)環(huán)、排泄孔清楚可見(jiàn)，腸腔為圓形，假體腔兩側(cè)可見(jiàn)橢

圓形的排泄細(xì)胞柱，排泄細(xì)胞柱的中央有排泄管，表皮具橫紋。

A.2.3成蟲(chóng)

西氏貝蛔蟲(chóng)成蟲(chóng)寄生于大熊貓腸道，蟲(chóng)體粗大，呈白色或灰褐色，頭端具3片唇，一片背唇和兩片

亞腹唇，唇內(nèi)緣含細(xì)小的唇齒，頭乳突和頭感器與豬蛔蟲(chóng)的相似。雌蟲(chóng)：體長(zhǎng)139.00mm-189.00mm，

最寬處2.50mm-4.00mm；唇部與體部交界處寬為0.43mm-0.62mm；排泄孔距頭端0.90mm-1.20mm，頸

乳突距頭端約1.30mm，神經(jīng)環(huán)距頭端0.85mm-1.02mm；食道長(zhǎng)5.50mm-7.80mm；陰門位于蟲(chóng)體前端，

距頭端31.00mm-43.50mm；肛門寬0.60mm-0.86mm，尾長(zhǎng)0.78mm-1.075mm；直腸長(zhǎng)0.65mm-0.83mm；

尾感器位于距尾端0.14mm-0.23mm處的兩側(cè)。雄蟲(chóng)：體長(zhǎng)76.00mm-100.00mm，最寬處為

1.40mm-1.90mm，尾部向腹側(cè)彎曲；唇部與體部交界處寬為0.40mm-0.43mm；排泄孔距頭端0.78mm

-0.93mm，頸乳突距頭端約0.94mm，神經(jīng)環(huán)距頭端0.65mm-0.80mm；食道長(zhǎng)4.80mm-6.40mm，最大寬

6

處為0.48mm-0.60mm；泄殖腔距尾端0.37mm-0.46mm；泄殖腔四周有約0.16×0.16mm2-0.25×0.25mm2

面積的隆起，并在泄殖腔上、下方各具一帶鱗片狀的小棘，上方由8-10列新月?tīng)钔黄鹦〖M成，下方

由11-14列半圓形突起小棘組成；泄殖腔兩側(cè)各具一個(gè)單乳突，自此向前共具52-60對(duì)泄殖腔前乳突，

分布于蟲(chóng)體后1/5內(nèi)；交合刺一對(duì)，等長(zhǎng)，末端鈍圓不分枝,尾端向腹面彎曲，在肛門前、后有多對(duì)乳突，

生殖器官為單管型，有一對(duì)鐮刀狀可伸縮的交合刺。

A.3生活史

西氏貝蛔蟲(chóng)是直接發(fā)育的土源性寄生蟲(chóng)，其生活史可大致分為自由生和寄生兩個(gè)階段，前者包含蟲(chóng)

卵胚胎期、蟲(chóng)卵幼蟲(chóng)1期和蟲(chóng)卵幼蟲(chóng)2期（感染性期），后者包含組織移行3期和4期幼蟲(chóng)以及腸道5

期幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)。由于異宿主（如小鼠）感染試驗(yàn)證實(shí)西氏貝蛔蟲(chóng)無(wú)法完成上述生活史，因此大熊貓是西

氏貝蛔蟲(chóng)的專性宿主。在自然條件下，西氏貝蛔蟲(chóng)蟲(chóng)卵經(jīng)過(guò)4d-5d便可發(fā)育成1期幼蟲(chóng)，經(jīng)9d便可形

成感染性2期幼蟲(chóng)；含感染性2期幼蟲(chóng)蟲(chóng)卵經(jīng)大熊貓食入后，在腸道孵出幼蟲(chóng)，幼蟲(chóng)穿過(guò)腸壁，經(jīng)血液

和組織移行，逐步蛻皮，由2期變成3期、4期及5期幼蟲(chóng)并最終回到腸道，發(fā)育形成雌、雄異體的成

蟲(chóng)，成蟲(chóng)交配、產(chǎn)卵；通常整個(gè)生活史的完成只需77d-93d。另外，西氏貝蛔蟲(chóng)蟲(chóng)卵具很強(qiáng)的抗逆能力，

新鮮蟲(chóng)卵在-10°C處理30d后，仍可保持活力，因此自然環(huán)境中的蟲(chóng)卵密度極大；待條件適宜時(shí)，大量

蟲(chóng)卵可發(fā)育為感染期蟲(chóng)卵，侵襲大熊貓，造成極高的感染率。

7

附錄B

（規(guī)范性附錄）

樣品運(yùn)輸和保存

B.1樣品編號(hào)和記錄

B.1.1編號(hào)

樣品進(jìn)行統(tǒng)一編號(hào)。監(jiān)測(cè)人員在送檢樣品的同時(shí)，須提供樣品編號(hào)。編號(hào)采用數(shù)字和字母形式進(jìn)行

編號(hào)；采用層次編碼法，由5層17位代碼組成。第一層用三位字母表示地點(diǎn)，以采樣地點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)名稱為

準(zhǔn)，超過(guò)3個(gè)字的，取前三個(gè)字的首字母；第二層用六位數(shù)字表示時(shí)間（年月日）；第三層用一位字母

表示大熊貓譜系號(hào)、性別和年齡，第四層用1-2位字母表示樣品類型，第五層用四位數(shù)字表示樣品序號(hào)。

樣品編號(hào)的寫法：時(shí)間（年月日）+地點(diǎn)（拼音首字母）+譜系號(hào)（呼名）、+樣品類型（皮屑P；

痂皮J；感染部位的贅生物A）+樣品序號(hào)（四位數(shù)）例如：臥龍2020年1月1日成年大熊貓華

美皮屑樣品1份，20200101WL/HM/P0001。

B.1.2記錄

樣品管（袋）外標(biāo)記清楚樣品編號(hào)、采樣時(shí)間與地點(diǎn)、樣品類型等信息，使用鉛筆或永久記號(hào)筆標(biāo)

記，避免潮濕或低溫保存造成記號(hào)標(biāo)記不清。

樣品采集時(shí)需要在樣品記錄表上記錄樣品編號(hào)、采樣時(shí)間、采樣地點(diǎn)、大熊貓性別和年齡、樣品種

類等信息。

B.2樣品運(yùn)輸與保存

B.2.1運(yùn)輸

皮膚樣品應(yīng)立即運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)或于4℃保存，在4℃最多放置12h。在運(yùn)輸時(shí)應(yīng)使用2℃~8℃樣

品保溫運(yùn)輸箱在12h內(nèi)運(yùn)送至目的地。

B.2.2保存

樣本應(yīng)密封于防滲漏的容器中保存，如塑料袋或瓶。包裝材料應(yīng)防水、防破損、防外滲。必須在內(nèi)

包裝的主容器和輔助包裝之間填充充足的吸附材料，確保能夠吸附主容器中所有的液體。多個(gè)主容器裝

入一個(gè)輔助包裝時(shí)，必須將它們分別包裹。外包裝強(qiáng)度應(yīng)充分滿足對(duì)于其容器、重量及預(yù)期使用方式的

要求。包裝好的樣品應(yīng)置于保溫容器中運(yùn)輸，一般使用保溫箱或保溫瓶，保溫容器應(yīng)密封，防止?jié)B漏。

7

附錄C

(資料性附錄)

流行病學(xué)

C.1流行概況

西氏貝蛔蟲(chóng)感染大熊貓的現(xiàn)象十分普遍，在全國(guó)各大熊貓自然棲息地（如四川的青川、北川、汶

川、平武、九寨溝、寶興、天全以及陜西的佛坪、太白、洋縣、寧陜和甘肅的文縣等）及人工飼養(yǎng)或繁

育機(jī)構(gòu)均有發(fā)現(xiàn)。在野生大熊貓中，其感染率更是多達(dá)50%，有時(shí)甚至達(dá)到100%，是造成野生大熊貓

死亡的主要原發(fā)性和繼發(fā)性病因之一。野生大熊貓感染西氏貝蛔蟲(chóng)的情況，按時(shí)間順序統(tǒng)計(jì)如下表。

歷年大熊貓西氏貝蛔蟲(chóng)感染情況統(tǒng)計(jì)（1974—2013）

時(shí)間地點(diǎn)感染率（%）感染強(qiáng)度a

1974-1986四川1002304

1977四川69.2b2236

1981四川—3204

1982-1986陜西91.71-619

1985四川10037-1605

1985-1988四川、甘肅56.2—

1987陜西100b—

1994四川78.0—

2006-2008四川、甘肅、陜西54.0b—

2012-2013四川75.3b—

a范圍表示感染強(qiáng)度，單個(gè)數(shù)值則表示最大感染量；

b蟲(chóng)卵感染率；

“—”無(wú)記錄信息。

C.2流行環(huán)節(jié)

C.2.1傳染源

能排出受精蛔蟲(chóng)卵的西氏貝蛔蟲(chóng)是該病的傳染源。

C.2.2傳播途徑

在流行區(qū)，糞便蛔蟲(chóng)卵污染食物、水源、土壤和地面，大熊貓經(jīng)口吞入感染期蛔蟲(chóng)卵，或者誤食被

蟲(chóng)卵污染的食物而感染。另外，蟲(chóng)卵附在大熊貓被毛上被帶進(jìn)野外棲息地或人工圈養(yǎng)環(huán)境，可污染其生

存環(huán)境以及人工圈養(yǎng)的室內(nèi)外地面、土壤、食具、清掃工具以及排水道等。野生鼠類、鳥(niǎo)類等動(dòng)物和蠅

及蜚蠊等昆蟲(chóng)可機(jī)械性播散蛔蟲(chóng)卵。

8

C.2.3易感群體

無(wú)論野生還是圈養(yǎng)大熊貓均對(duì)西氏貝蛔蟲(chóng)普遍易感，大熊貓種群感染的特點(diǎn)是野生種群高于人工圈

養(yǎng)種群，幼年高于成年。

C.3流行因素

蛔蟲(chóng)生活史簡(jiǎn)單，不需要中間宿主，為直接發(fā)育型；雌蟲(chóng)產(chǎn)卵量大且蟲(chóng)卵對(duì)外界環(huán)境抵抗力強(qiáng)；因

此蟲(chóng)卵可以廣泛存活在土壤和周圍環(huán)境，造成流行。該因素也是影響大熊貓蛔蟲(chóng)病成為流行最廣泛、感

染率最高的腸道寄生蟲(chóng)病的重要原因之一。

9

附錄D

(資料性附錄)

臨床表現(xiàn)

D.1幼蟲(chóng)致病

D.1.1西氏貝蛔蟲(chóng)幼蟲(chóng)所致肺炎

西氏貝蛔蟲(chóng)幼蟲(chóng)在肺內(nèi)移行，患病大熊貓可出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、嗜酸性粒細(xì)胞增多等臨床表現(xiàn)。

D.1.2異位寄生

重度感染時(shí)，幼蟲(chóng)可通過(guò)肺毛細(xì)血管、左心進(jìn)入大循環(huán)，侵入一些組織和器官，如肝、胰腺、脾臟

等臟器，引起相應(yīng)部位的病變。

D.2成蟲(chóng)致病

D.2.1腸蛔蟲(chóng)病

間歇性臍周疼痛或上腹部絞痛是腸蛔蟲(chóng)病的特點(diǎn)，其他癥狀和體征還有腹脹、腹部觸痛、消化不良、

腹瀉或便秘以及食欲不振、嘔吐等。患病大熊貓可出現(xiàn)神經(jīng)沉郁、被毛凌亂、消瘦、貧血，偶可出現(xiàn)異

嗜癥，重度感染者可出現(xiàn)生長(zhǎng)發(fā)育障礙，甚至死亡。

D.2.2膽道蛔蟲(chóng)病

系腸內(nèi)蛔蟲(chóng)進(jìn)入膽管所致。臨床表現(xiàn)為陣發(fā)性上腹部疼痛、煩躁不安。若蟲(chóng)體完全進(jìn)入膽管甚至膽

囊，疼痛反而減輕，但炎癥現(xiàn)象進(jìn)一步發(fā)展，則表現(xiàn)為明顯的固定壓痛，并有肌緊張、反跳痛，伴有發(fā)

熱、寒戰(zhàn)或黃疸。

D.2.3蛔蟲(chóng)性腸梗阻

臨床特點(diǎn)為腹部陣發(fā)性絞痛，嘔吐并常吐出蛔蟲(chóng)，停止排氣和排便。梗阻形成后，疼痛可逐漸加劇，

持續(xù)數(shù)分鐘，間歇短時(shí)可再出現(xiàn)。多數(shù)病例在臍部右側(cè)可觸及軟的、無(wú)痛的、可移動(dòng)團(tuán)塊或香腸形條狀

物，阻塞多見(jiàn)于回腸部。早期可有低熱、白細(xì)胞增多，晚期可出現(xiàn)嚴(yán)重脫水或酸中毒，甚至休克。

D.2.4蛔蟲(chóng)性腸穿孔

西氏貝蛔蟲(chóng)可使病變或正常的腸壁發(fā)生穿孔，病變的腸壁如十二指腸潰瘍、腸梗阻，腸傷寒等臨床

病變表現(xiàn)為亞急性腹膜炎，也可形成彌漫性或局限性腹膜炎。腹腔穿刺有滲出液，并可能檢出蛔蟲(chóng)卵。

10

臨床表現(xiàn)發(fā)熱不明顯，伴有嘔吐，腹脹逐漸明顯，腹部觸診有柔韌感。

11

附錄E

(規(guī)范性附錄)

糞便檢查

E.1漂浮法

飽和氯化鈉或硫酸鎂漂浮法操作步驟：a）將氯化鈉或硫酸鎂緩慢加入盛有沸水的容器內(nèi)，不斷攪

動(dòng)，直至不再溶解為止，冷卻后配制飽和氯化鈉或硫酸鎂溶液備用；b）挑取5-10克的竹葉或竹節(jié)便于

圓形直簡(jiǎn)瓶（高約3.5cm，直徑約2cm）中；c）加入少量飽和溶液，調(diào)勻后再緩慢加入飽和溶液，當(dāng)

液面接近瓶口時(shí)改用滴管滴加，使液面略高于瓶口又不溢出為止；d）在瓶口覆蓋一載玻片，靜置

15~20min后，將載玻片提起并迅速翻轉(zhuǎn)，鏡檢。

E.2改良加藤厚涂片法

改良加藤厚涂片法操作步驟：a）透明液配制量取蒸餾水和純甘油各100ml,混合后再加入3%孔雀

綠或亞甲基藍(lán)1mL，儲(chǔ)瓶備用；b）取親水玻璃紙（25mm×40mm×40μm）放入透明液中浸泡24h以上

即可使用；c）將尼龍娟片（8cm×8cm，80目/時(shí)）置于糞便標(biāo)本上，用刮棒自尼龍絹片刮取糞便使細(xì)糞

渣通過(guò)尼龍絹片濾出至絹片表面；d）將定量板（圓臺(tái)孔上底半徑3mm，下底半徑4mm，高1mm，容

積為38.75mm3，每孔所容糞便重量為41.75mg）小孔朝上置于載玻片中部，用刮棒將尼龍絹片表面的

細(xì)糞渣填入圓臺(tái)形孔中，填滿全孔并抹平；e）垂直向上移去定量板，取1張浸泡好的親水性透明玻璃

紙，抖掉多余浸泡液，蓋在糞樣上，用一張載玻片于親水性透明玻璃紙上重直均勻用力壓制，使糞便均

勻展開(kāi)至親水性透明玻璃紙邊緣；f）靜置0.5h~1h使之透明后鏡檢，記錄觀察到的全部蟲(chóng)卵數(shù)。在流

行病學(xué)調(diào)查中，將每片的全部蟲(chóng)卵數(shù)乘以24即得每克糞便蟲(chóng)卵數(shù)（EPG）。

11

附錄F

（規(guī)范性附錄）

足螨病臨床癥狀

患病大熊貓皮屑脫落?；继幟撁つw發(fā)紅，增厚，有散在小結(jié)節(jié)，水泡或皮痂，被毛常被擦斷

而顯得稀疏、劇癢不安。常用前后肢交替抓癢，特別是被毛較稠密的部位如背部、頸部、頭部和耳根等

處。在眼眶周圍易見(jiàn)脫毛，食欲時(shí)好時(shí)壞，時(shí)間一長(zhǎng)，動(dòng)物進(jìn)行性消瘦。天氣暖和時(shí)，仔細(xì)觀察，可見(jiàn)

大量足螨從被毛密集區(qū)爬到毛尖上，常多個(gè)聚集在一起成團(tuán)狀，肉眼觀察蟲(chóng)體呈褐色，大熊貓活動(dòng)時(shí)，

常常又從毛尖爬回毛根。除螨直接叮咬導(dǎo)致熊貓肌體損害外，叮咬所形成的結(jié)節(jié)和水皰破裂還可引起繼

發(fā)性細(xì)菌感染。

11

附錄G

（規(guī)范性附錄）

足螨形態(tài)與分類

G.1概述

大熊貓足螨（Chorioptespanda），又稱熊貓食皮螨，隸屬節(jié)肢動(dòng)物門（Arthropoda）、螯肢動(dòng)物亞

門（Chelicerata）、蛛形綱（Arachnoidea）、蜱螨亞綱（Acari）、真螨目（Acariformes）、癢螨科（Psoroptibae）、

足螨屬（Chorioptes）。

雌螨：體近圓形，長(zhǎng)326-347μm，最寬處為288-298μm。顎體較小。螯肢粗壯，螯鉗上具有發(fā)達(dá)的

齒。體背面前方無(wú)1對(duì)頂毛。體前部具背板一塊，呈長(zhǎng)鐘形。背板后緣下外側(cè)具1對(duì)長(zhǎng)約245μm的感

毛和1對(duì)短毛。感毛外側(cè)有1對(duì)肩毛。背面中部至體末端共有8對(duì)毛，其中位于亞末端1對(duì)最長(zhǎng)。體表

背腹兩面均具明顯的表皮紋。各足均由6節(jié)組成，各足基節(jié)均具明顯的角化突，足Ⅱ基節(jié)具有1對(duì)胸毛，

足Ⅲ基節(jié)和轉(zhuǎn)節(jié)外側(cè)的體壁上具有1根較長(zhǎng)的毛。足Ⅲ不發(fā)達(dá)，其基節(jié)內(nèi)側(cè)具1根毛，跗節(jié)上具2根最

長(zhǎng)的毛。足IV細(xì)長(zhǎng)，跗節(jié)上也具1根長(zhǎng)毛。除足Ⅲ外，足I、II、IV跗節(jié)末端均具1個(gè)由不分節(jié)的短

柄上生出的膜狀前跗節(jié)。生殖孔開(kāi)口于足II。Ⅲ基節(jié)角化突之間，孔成“n”型。孔兩側(cè)各具1個(gè)角化

突。角化突內(nèi)側(cè)各具1根毛，生殖孔下緣兩側(cè)又具1對(duì)縱生的角化突，其外側(cè)各具2個(gè)微小孔，孔的后

下側(cè)具1對(duì)毛。肛板位于體末端，肛側(cè)毛位于肛孔前緣的水平線上。肛板外側(cè)具2對(duì)毛，分列兩側(cè)。

雄螨：長(zhǎng)272-288μm，寬261-277μm。體末端具一對(duì)后腹葉突。體表的表皮紋明顯，顎體似雌螨。

背板2塊，后背板似矩形，邊緣呈不規(guī)則形狀，后背板向后延伸，蓋住整個(gè)后腹葉突。后背板上具2

對(duì)剛毛，1對(duì)位于板的亞中部，另1對(duì)位于板的后側(cè)角。后腹葉突末端有5根毛。足Ⅲ基節(jié)間有1塊橢

圓形的生殖板。板中央有插入器，生殖板兩側(cè)各具2個(gè)微小圓孔和1根毛。足Ⅲ、IV基節(jié)內(nèi)側(cè)各具1

根毛。肛孔兩側(cè)具一對(duì)肛側(cè)吸盤。足Ⅲ發(fā)達(dá)，足IV退化變小。各足具膜狀前跗節(jié)，足Ⅲ跗節(jié)另具一長(zhǎng)

鞭毛。

第二若螨：體及顎體同成蟲(chóng)，但略小，長(zhǎng)262-279μm，寬232-251μm。背板似雄螨。感毛長(zhǎng)約190μm。

體中部至末端體壁上具有6對(duì)毛。其它同雌螨。無(wú)生殖孔和角突，僅在足Ⅲ和IV基節(jié)內(nèi)側(cè)具4對(duì)毛。

肛板兩側(cè)緣具4對(duì)毛，其中1對(duì)很長(zhǎng)。足IV細(xì)小，不發(fā)達(dá)。足Ⅲ附節(jié)的2根長(zhǎng)毛及足IV附節(jié)長(zhǎng)毛其

長(zhǎng)度各為720μm、410μm和200μm。

第一若螨：形態(tài)與第二若螨極為相似。不同點(diǎn)是：1）體較第二若螨小，長(zhǎng)228μm-236μm，寬208μm

-213μm；2）足Ⅲ基節(jié)間微小孔僅1對(duì)；3）小孔附近僅1對(duì)毛，位于足Ⅲ和足IV基節(jié)的內(nèi)側(cè)。

幼螨：體近圓形，長(zhǎng)187μm-193μm，寬155μm-164μm。顎體似若蟲(chóng)，具有一塊前背板，體中部至末端

具5對(duì)小毛，體腹面足Ⅲ基節(jié)內(nèi)側(cè)僅1對(duì)毛，足Ⅲ跗節(jié)上2根長(zhǎng)毛，缺肛側(cè)毛。

12

G.2生物學(xué)特性

發(fā)育過(guò)程中經(jīng)歷幼螨、若螨（雄螨還分為若一螨和若二螨）、成螨三個(gè)發(fā)育階段。雌螨產(chǎn)卵于患

部皮膚周圍，一般蟲(chóng)卵經(jīng)過(guò)2d~3d孵出幼螨。幼螨采食24h~36h后進(jìn)入靜止期而蛻皮成為若一螨，若

一螨采食24h經(jīng)過(guò)靜止期蛻皮成為雄螨或若二螨，雄螨通常以其肛吸盤與若二螨軀體后部的瘤狀突起

連接，之后若二螨蛻皮成為雌螨，體后瘤狀突起消失。雌雄螨進(jìn)行交配。大熊貓足螨的整個(gè)發(fā)育過(guò)程需

要9d~10d。

13

附錄H

（資料性附錄）

大熊貓足螨的形態(tài)示意圖

圖H.1大熊貓雄性足螨（楊光友攝）

圖H.2大熊貓雌性足螨（楊光友攝）

14

附錄I

（資料性附錄）

大熊貓足螨檢測(cè)結(jié)果匯總報(bào)告表（表格樣式與填報(bào)示例）

填報(bào)日期（單位公章）：聯(lián)系人：辦公電話：手機(jī)：

陽(yáng)性樣品檢測(cè)方法、結(jié)果

樣品信息

檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果

監(jiān)測(cè)對(duì)象

編號(hào)來(lái)源地性別、年齡類別病原分離陰性陽(yáng)性

…碧峰峽雌性成體皮屑√