DB37T 1826-2011 豬圓環(huán)病毒2型環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)_第1頁
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DB37DB37/T1826—2011豬圓環(huán)病毒2型環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)Loop-mediatedisothermalamplificationforporcinecircovirustype22011-04-08發(fā)布2011-06-01實(shí)施山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1):):F3:5’-CTCCAGTGCTGTTATTCTAGATGA-3’B3:5’-TTTCCAGCAGTTTGTAGTCTCA-3’FIP:5’-GAAGGGCTGGGTTATGGTATGGC-TTTT-ACAGCCCTCACCTATGACC-3’BIP:5’-CCGCTACTTTACCCCCAAACCT-TTTT-GCCACAGCTGATTTCTTTTGTTG-3’2將病料剪碎放于滅菌的研磨器中磨碎,用生理鹽水1∶5倍稀釋,取懸液反復(fù)凍融3次,5000g離心BstDNAPolymerase(84.1.11%瓊脂糖凝膠板的制備(見附3稱取0.6g瓊脂糖,加入60mL0.5×TBE緩沖液中,加熱融化,溫度降低后加入1%的EB,倒入電泳槽將LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物5μL與1μL6×LoadingBuffer混),成像系統(tǒng)儀下觀察并拍照。如某一待測樣品擴(kuò)增產(chǎn)物的DNA條帶與陽性對照的條帶在同一直線上,并與4試劑的配制A.210%十二烷基硫酸鈉(SDS溶液,pH7.2)5

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