生物化學(xué)檢驗技術(shù) 課件 第七章 糖代謝紊亂檢驗

職業(yè)教育醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫生物化學(xué)檢驗技術(shù)第七章糖代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE2目錄第一節(jié)糖代謝調(diào)節(jié)1第二節(jié)糖代謝紊亂2第三節(jié)糖代謝紊亂的實驗室檢查3

第一節(jié)糖代謝調(diào)節(jié)一、血糖(bloodglucose，BG)：指血液中的葡萄糖。

糖的主要生理功能

①為機體提供能量，②作為組織細(xì)胞的結(jié)構(gòu)材料

③轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌镔|(zhì)。正常人空腹血糖濃度為：3.9mmol/L～6.1mmol/L，

食物中的糖肝糖原非糖物質(zhì)消化吸收分解糖異生CO2+

H2O肝、肌糖原其他糖或非糖物質(zhì)氧化分解合成轉(zhuǎn)變

空腹血糖3.9mmol/L～6.1mmol/L血糖濃度>腎糖閾（8.89mmol/L～10.00mmol/L）尿糖來源去路

一、

血糖的來源與去路CO2+

H2O其他糖或非糖物質(zhì)雙向調(diào)節(jié)血糖通過下丘腦和神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)激素的分泌降低血糖激素與升高血糖激素作用于肝臟

二、血糖濃度的調(diào)節(jié)（一）神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)

神經(jīng)系統(tǒng)對血糖濃度的調(diào)節(jié)作用，主要通過下丘腦和自主神經(jīng)系統(tǒng)控制其所控激素的分泌，后者再通過調(diào)節(jié)糖代謝關(guān)鍵酶的活性來實現(xiàn)。神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)最終是通過細(xì)胞水平的調(diào)節(jié)來達到目的。（二）激素的調(diào)節(jié)（三）

激素和組織器官的協(xié)同調(diào)節(jié)第二節(jié)糖代謝紊亂一、高血糖與糖尿病高血糖癥(hyperglycemia):是指空腹血糖濃度超過7.0mmol/L。單擊此處添加文本具體內(nèi)容單擊此處添加標(biāo)題病理性糖尿病內(nèi)分泌性疾病應(yīng)激性高血糖脫水所致血液濃縮情感性（情緒激動）飲食性（高糖飲食）生理性高血糖糖尿病(diabetesmellitus，DM):是一組由遺傳和環(huán)境因素引起的胰島素分泌不足或(和)胰島素作用低下所致的以慢性血糖增高為特征的代謝性疾病。臨床表現(xiàn)與癥狀：多尿、多飲、多食、消瘦等，以高血糖為其主要特征，伴有糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂，長期的高血糖可引起功能紊亂、多器官損害甚至衰竭。糖尿病WHO推薦病因?qū)W糖尿病分型：1型糖尿病(T1DM)2型糖尿病(T2DM)特殊類型糖尿病妊娠期糖尿病GDM03040102胰島素絕對不足，存在自身抗體。見于青少年、兒童，易發(fā)生DKA,占DM患者5％～10％，胰島素治療敏感。胰島素抵抗伴有胰島素相對不足。見于中老年肥胖者，DKA發(fā)生低于1型，占我國糖尿病患者90％以上胰島β細(xì)胞基因缺陷；胰島素受體基因異常；內(nèi)分泌疾?。灰认偌膊?；藥物或化學(xué)物質(zhì)所致胰腺損傷妊娠期首次發(fā)生或發(fā)現(xiàn)的糖尿病，含妊娠前已患有，但妊娠期內(nèi)首次診斷的患者（一）糖尿病分型①糖尿病癥狀+隨機血糖濃度≥11.1mmol/L。典型糖尿病癥狀包括多食、多飲、多尿和不明原因的體重下降。隨機血糖是指末次進食后任意時間點測得的血糖濃度;②空腹血糖濃度≥7.0mmol/L?？崭怪赋掷m(xù)8小時以上無任何熱量攝入;③口服葡萄糖耐量試驗中2小時血糖≥11.1mmol/L。注：以上三種方法都可以單獨用來診斷糖尿病，但需要另一天采取靜脈血重復(fù)試驗，兩次的試驗結(jié)果有相關(guān)性才能確診。（二）糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)

妊娠期糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)

方法時間血漿葡萄糖濃度100g葡葡糖耐量試驗空腹<5.3mmol/L1h≤10.0mmol/L2h≤8.6mmol/L3h≤7.8mmol/L75g葡萄糖耐量試驗空腹≤5.3mmol/L1h≤10.0mmol/L2h≤8.6mmol/L注:①妊娠期糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)長期未統(tǒng)一，表7-1為美國糖尿病學(xué)會所推薦;②臨床采用100g和75g葡萄糖耐量試驗均可，后者較為常用;③以上檢測結(jié)果每一個試驗中如果有2項以上陽性，即可診斷，1項陽性為妊娠糖耐量減退，各項均陰性為正常.三）糖尿病的主要代謝紊亂糖尿病酮癥酸中毒昏迷

常見于1型患者伴應(yīng)激時。表現(xiàn)為:嚴(yán)重失水、代謝性酸中毒、電解質(zhì)紊亂和廣泛的功能紊亂。除尿酮癥呈強陽性外，血酮體＞5mmol/L、HCO-3濃度降低、血pH＜7.35，病情嚴(yán)重時可致昏迷。糖尿病非酮癥高滲性昏迷多見于60歲以上老年（2型）輕癥糖尿病及少數(shù)幼年（1型）病者。血糖極高，沒有明顯的酮癥酸中毒，是一種因高血糖引起高滲性脫水和進行性意識改變的臨床綜合癥。糖尿病非酮癥高滲性昏迷糖尿病乳酸酸中毒昏迷糖尿病人，由于胰島素的絕對或相對不足，機體組織不能有效地利用血糖，丙酮酸大量還原為乳酸，使體內(nèi)乳酸堆積增多。（四）糖尿病急性代謝并發(fā)癥低血糖癥(hypoglycemia)：指血糖濃度低于空腹血糖的參考水平下限，也有專家建議2.78mmol/L為低血糖癥的臨界值。低血糖的臨床癥狀：主要是交感神經(jīng)興奮癥狀如出汗、神經(jīng)質(zhì)、顫抖、無力、眩暈、心悸、饑餓感，以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀如意識混亂、行為異常、視力障礙、癲癇等，嚴(yán)重者可出現(xiàn)神志喪失、昏迷甚至死亡。

二、低血糖

新生兒低血糖

早產(chǎn)、母體糖尿病、GDM和妊娠子癇、呼吸窘迫綜合征、其他(冷應(yīng)激，紅細(xì)胞增多癥等)嬰幼兒低血糖

遺傳性代謝缺陷、同性低血糖、先天性酶缺乏、半乳糖血癥餐后低血糖

原因不明的功能性低血糖、T2DM早期、胃腸手術(shù)后、大量攝入半乳糖或果糖等①胰島素或胰島素樣物質(zhì)過多、升高血糖激素缺乏等；②嚴(yán)重肝臟疾病、重度心衰伴肝淤血、肝酶異常等；③高熱、慢性腹瀉、長期饑餓、過度飲酒、腎性糖尿、嚴(yán)重營養(yǎng)不良等；④先天性代謝病:如糖原貯積病等成人空腹低血糖糖尿病性低血糖

胰島素或降糖藥使用過多（一）病因及臨床分型

可以根據(jù)Whipple三聯(lián)征確診:①低血糖癥狀;②發(fā)作時空腹血糖濃度≤2.8mmol/L(60歲以上老人≤3.0mmol/L);③供糖后低血糖癥狀迅速緩解。（二）低血糖的診斷標(biāo)準(zhǔn)

三、糖代謝的先天異常糖原貯積癥(GSD)參與糖原合成或分解的酶缺乏，使糖原在肝、肌肉等臟器中大量堆積，造成這些器官的肥大及功能障礙。半乳糖血癥是機體不能轉(zhuǎn)化利用半乳糖及其中間代謝產(chǎn)物的一種常染色體隱性遺傳性疾病，其特征主要是血和尿中半乳糖增高。Ⅰ型：

葡萄糖6-磷酸酶缺乏癥，最常見，病情最重。Ⅱ型：a-1，4-葡萄糖苷酶缺乏癥，主要影響心臟和骨骼肌。Ⅲ型：淀粉-1，6-葡萄糖苷酶缺乏癥。Ⅳ型：分支酶缺乏癥。V型：肌磷酸化酶缺乏癥。Ⅵ型：肝磷酸化酶或磷酸化酶激酶缺乏癥。Ⅶ型：肌磷酸果糖激酶缺乏癥等。共分13型常用的實驗室檢查項目糖化血紅蛋白、糖化血清蛋白測定反映血糖控制情況酮體、乳酸、丙酮酸測定餐后2小時血糖、口服葡萄糖耐量試驗、胰島素測定及胰島素釋放試驗、C-肽測定及C-肽釋放試驗反映機體對糖負(fù)荷的調(diào)節(jié)能力

第三節(jié)糖代謝紊亂的實驗室檢查體液葡萄糖測定反映體內(nèi)血糖水平反映機體代謝狀態(tài)空腹血糖（FPG)：是在隔夜空腹至少8～10小時未攝入任何食物后，早餐前采血所測定的葡萄糖濃度。FPG是診斷糖尿病最主要的依據(jù)，若兩次重復(fù)測定FPG都≥7.0mmol/L，即可確診為糖尿病。

一、血清（血漿）葡萄糖測定（一）標(biāo)本采集與處理1.標(biāo)本采集空腹靜脈采血。血清和血漿都可以作為血糖檢驗的標(biāo)本，如果用血漿標(biāo)本，最好選擇草酸鉀-氟化鈉抗凝劑。2.標(biāo)本處理標(biāo)本采集后，應(yīng)立即送檢，并迅速分離血清(或血漿)，如果不能及時檢驗，可置2℃～8℃冰箱保存，標(biāo)本中的葡萄糖濃度可穩(wěn)定3天。（二）測定方法目前臨床檢驗主要采用酶法測定已糖激酶(HK)法葡萄糖氧化酶（GOD）法

葡萄糖脫氫酶(GDH)法。常規(guī)方法參考方法干擾最少【實驗原理】1.己糖激酶法NADPH的生成速率與血液中葡萄糖的濃度成正比。NADPH在340nm波長處有吸收峰，通過監(jiān)測其吸光度升高速率，可計算標(biāo)本中葡萄糖濃度?！痉椒ㄔu價】

準(zhǔn)確度、精密度都非常高不受輕度溶血(血紅蛋白小于5g/L)、脂血、黃疸、尿酸、維生素C、氟化鈉、肝素、EDTA和草酸鹽等干擾。線性范圍可達33.31mmol/L適用于自動生化分析目前被認(rèn)為是血糖測定的參考方法【實驗原理】2.葡萄糖氧化酶法(GOD-POD偶聯(lián)法)

紅色醌類化合物在505nm有吸收峰，其生成量在一定范圍內(nèi)與葡萄糖的含量成正比，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)管比較，即可求得標(biāo)本中葡萄糖濃度。是衛(wèi)生部臨床檢驗中心推薦的血糖測定的常規(guī)方法。【方法評價】GOD僅對β-葡萄糖高度特異性，對α-葡萄糖作用弱，延長孵育時間可使其變旋。GOD-POD法準(zhǔn)確度、精密度都能達到臨床要求，操作簡單，可用于自動化分析儀，是目前我國臨檢中心推薦的常規(guī)方法ABPOD的特異性較低，一些還原性物質(zhì)如尿酸、維生素C、膽紅素和谷胱甘肽等可消耗過氧化氫，使測定結(jié)果偏低（引起負(fù)誤差），具有氧化劑作用的化合物參與反應(yīng)，可引起正誤差CGOD-POD法可直接測定腦脊液中葡萄糖的含量，但由于尿液中尿酸等干擾物濃度過高，所以該法不能直接測定尿液中葡萄糖的含量。D【實驗原理】3.葡萄糖脫氫酶法(GDH法)NADH的生成量與葡萄糖濃度成正相關(guān)。NADH在340nm波長處有吸收峰，通過監(jiān)測其吸光度升高速率，可計算標(biāo)本中葡萄糖濃度?！痉椒ㄔu價】(1)GDH對葡萄糖高度特異，其檢測結(jié)果與己糖激酶法有很好的一致性。(2)常規(guī)抗凝劑和血清中的常見物質(zhì)都不會對本法產(chǎn)生干擾。（三）參考區(qū)間血糖增高（四）臨床意義高血糖癥：空腹血糖≥7.0mmol/L生理性高血糖：飲食性(高糖飲食)情感性（情緒激動）病理性高血糖：①糖尿病;②內(nèi)分泌系統(tǒng)的疾?、蹜?yīng)激性高血糖④脫水引起的血液濃縮⑤嚴(yán)重的肝硬化，⑥胰腺病變。（四）臨床意義血糖降低低血糖病理性低血糖：內(nèi)分泌疾病致胰島素分泌絕對或相對過量；對抗胰島素的激素分泌不足；嚴(yán)重肝病生理性低血糖：見于饑餓、劇烈運動等。（四）臨床意義降糖藥、中毒劑量對乙酰氨基酚、抗組胺藥、致毒量阿司匹林、乙醇、胍乙啶、普萘洛爾引起血糖降低的藥物噻嗪類利尿藥、口服避孕藥、兒茶酚胺吲哚美辛、咖啡因、甲狀腺素、腎上腺素引起血糖升高的藥物藥物的影響葡萄糖耐量（耐糖現(xiàn)象）：正常人由于體內(nèi)有一套完善的調(diào)節(jié)血糖濃度的機制，即使一次攝入大量的葡萄糖，血糖濃度也僅暫時升高，且于2h內(nèi)恢復(fù)到正常血糖水平，而不出現(xiàn)糖尿，此即為葡萄糖耐量或耐糖現(xiàn)象。糖耐量降低：若調(diào)節(jié)功能失調(diào),口服或靜脈注射一定量的葡萄糖后、血糖急劇升高，在一定時限內(nèi)不能恢復(fù)到原有水平，此種現(xiàn)象稱為糖耐量降低。糖耐量增加：一次給予大量葡萄糖后，血糖升高不明顯，或緩慢地輕度上升，稱糖耐量增加。

二、口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）什么是OGTT口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）：是一種糖負(fù)荷試驗，即經(jīng)口服給予受試者一定負(fù)荷量的葡萄糖后，通過測定不同時間的血糖和尿糖濃度，了解受試者胰島β細(xì)胞功能和血糖調(diào)節(jié)能力。那些人適合做OGTT?

1.受試者實驗前三天停用胰島素治療及影響實驗的藥物。維持正常飲食及活動(每天食物糖含量不低于150g)。試驗前應(yīng)空腹10～16小時。2.空腹靜脈取血2ml，抗凝，測定血漿葡萄糖(稱空腹血漿血糖，F(xiàn)PG)。3.將75g無水葡萄糖溶于250m1水中（妊娠婦女用量為100g；兒童葡萄糖用量可按1.75g/kg體重計算，總量不超過75g），5分鐘內(nèi)飲完。4.從服第一口糖水開始計時，每隔30分鐘取血1次，共4次，歷時2小時(必要時可延長至6小時)。采血同時每隔1小時留取尿液做尿糖測定。整個試驗過程中不可吸煙、喝咖啡、喝茶或進食。5.繪制糖耐量曲線：以測定血糖的時間為橫坐標(biāo)(空腹時為0時)，血糖濃度為縱坐標(biāo)，繪制糖耐量曲線。

試驗方法【參考區(qū)間】健康成年人正常糖耐量：FPG≤6.1mmol/L；服糖后30～60分鐘血糖升高達高峰，但一般＜10.0mmol/L，2hPG≤7.8mmol/L；同時測定上述各時段的尿糖均應(yīng)為陰性。不同人群葡萄糖耐量曲線C糖耐量減退DFPG≥7.0mmol/L，和（或）2hPG≥11.1mmol/L糖尿病性糖耐量PFG＜7.0mol/L，2hPG介于7.8mmol/L～11.1mol/L正常糖耐量FPG≤6.1mmol/L并且2hPG＜7.8mmol/LFPG介于6.1mmol/L～7.Ommon/L之間，且2hPG＜7.8mmol/L空腹血糖受損OGTT結(jié)合FPG可協(xié)助診斷糖尿病及相關(guān)狀態(tài)結(jié)果判斷

1.OGTT在糖尿病的診斷中并非必須，因此不推薦臨床常規(guī)應(yīng)用。臨床上首先推薦測定FPG。2.雖然OGTT比FPG更靈敏，但它受多種因素影響且重復(fù)性差。除非第一次OGTT結(jié)果明顯異常，否則應(yīng)該在不同時間做兩次OGTT測定以判斷是否異常。3.對不宜作OGTT的患者(如不能承受大劑量口服葡萄糖、胃切除后及其他可致口服葡萄糖吸收不良的患者)，應(yīng)按WHO的方法進行靜脈葡萄糖耐量試驗（IGTT）。但50歲以上者對葡萄糖的耐受力有下降的趨勢，不宜做此試驗。應(yīng)用評價

三、糖化血紅蛋白測定

正常成人血紅蛋白(Hb)HbA(97％)：由α2β2組成HbA2(2.5％)：由α2δ2組成HbF(0.5％)：由α2γ2組成HbA（α2β2）模型圖+葡萄糖分子血紅蛋白分子糖化血紅蛋（GHb）血清中的糖類物質(zhì)通過紅細(xì)胞膜進入紅細(xì)胞內(nèi)與HbA的β鏈N-末端纈氨酸殘基，以非酶促、共價的方式結(jié)合形成的糖化血紅蛋白，稱為HbA1。若糖類物質(zhì)與HbA的β鏈N-末端的賴氨酸殘基或α鏈結(jié)合，形成的糖化血紅蛋白稱為HbA0，但HbA0不能根據(jù)電荷不同而將其與普通血紅蛋白分離。HbA1和HbA0統(tǒng)稱為糖化血紅蛋白（GHb)。這種結(jié)合是一種緩慢的，不可逆的反應(yīng)，糖化血紅蛋白一旦形成就不再解離，在血液中會相對穩(wěn)定的存在。GHb生成速率取決于一段時間內(nèi)血糖的平均含量和紅細(xì)胞的壽命，血糖濃度越高,血糖與紅細(xì)胞接觸時間越長，GHb的生成量也就越多。正常紅細(xì)胞平均壽命約為120天，因此GHb的濃度可以反映測定前2～3個月內(nèi)受試者血糖的平均水平；而與血糖的短期波動無關(guān)，是評價糖尿病患者血糖控制效果的良好指標(biāo)。HbA1aHbA1bHbA1c：葡萄糖與HbA的β鏈N末端纈氨酸殘基縮合而成；占HbA170%～90%HbA1c代表GHb的水平

糖化血紅蛋白（GHb）HbA1HbA0：不能根據(jù)電荷不同而將其與普通血紅蛋白分離（一）測定方法GHb的測定方法根據(jù)電荷差異：離子交換層析、常規(guī)電泳和等電聚焦電泳根據(jù)結(jié)構(gòu)差異:可采用親和層析和免疫測定法化學(xué)分析技術(shù):可采用比色法、分光光度法;質(zhì)譜法酶法離子交換層析法離子交換樹脂微柱法低壓液相層析（LPLC）法高效液相層析（HPLC）法：國際臨床化學(xué)聯(lián)合會（IFCC）推薦的參考方法目前臨床上多采用HPLC和免疫比濁法。（一）測定方法1、HPLC法：【實驗原理】用偏酸緩沖劑處理Bio-Rex70陽離子交換樹脂，使之帶負(fù)電荷，它與帶正電荷的Hb有親和力。HbA及HbA1均帶正電荷，由于HbA1的兩個β鏈N末端正電荷被糖基清除，正電荷較HbA少，兩者對樹脂的附著力不同。用pH6.7磷酸鹽緩沖劑可首先將帶正電荷較少、吸附力較弱的HbA1洗脫下來，再用分光光度計測定洗脫液中的HbA1占總Hb的百分?jǐn)?shù)。（一）測定方法【參考區(qū)間】健康成人HbA15.0%～8.0%（均值6.5%）HbA1c3.6%～6.0%2．HbA1c免疫法【實驗原理】首先用TTAB(四癸基三甲銨溴化物）作為溶血劑(不溶解白細(xì)胞)，用來消除白細(xì)胞物質(zhì)的干擾。將處理好的樣本先加入抗體緩沖液，樣本中的糖化血紅蛋白(HbA1c)和抗HbA1c抗體反應(yīng)形成可溶性的抗原-抗體復(fù)合物，由于在HbA1c分子上只有一個特異性的HbA1c抗體結(jié)合位點，不能夠形成凝集反應(yīng)。然后，加入多聚半抗原緩沖液，多聚半抗原和反應(yīng)液中過剩的抗HbA1c抗體結(jié)合，生成不溶性的抗體-多聚半抗原復(fù)合物，可用比濁法進行測定。同時在另一個通道上測定Hb濃度。在該通道中，溶血液中的血紅蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂刑卣餍晕展庾V的血紅蛋白衍生物，用重鉻酸鹽作標(biāo)準(zhǔn)參照物，進行比色法測定Hb濃度。（一）測定方法【參考區(qū)間】（1）IFCC計算方案：健康成年人:HbA1c：2.8%～3.8%（2）DCCT/NGSP（糖尿病控制和并發(fā)癥試驗/美國糖化Hb標(biāo)準(zhǔn)化方案)計算方案：

健康成年人：HbA1c4.8%～6.0%3、酶法【實驗原理】（一）測定方法【參考區(qū)間】HbA1c4.0％～6.0％(HPLC法)第一步：在蛋白酶的作用下，切斷糖化血紅蛋白的β鏈N末端的糖化甘氨酰谷氨酰胺，通過測定600nm與800nm的吸光度差，求出Hb的濃度;第二步:果糖基氨基酸氧化酶(FPOX)作用于糖化甘氨酰谷氨酰胺，在過氧化物酶的存在下，生成的過氧化氫與顯色劑產(chǎn)生顯色反應(yīng)，通過吸光度求出HbA1c的濃度，進一步計算得出HbA1c(％)。反應(yīng)式如下：1.是糖尿病患者長期血糖控制的評價指標(biāo)：4％～6％:血糖控制正常6％～7％:血糖控制比較理想。7％～8％:血糖控制一般8％～9％:控制較差，需注意飲食結(jié)構(gòu)及運動，在醫(yī)生指導(dǎo)下調(diào)整治療方案。＞9％:血糖控制很差，是慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的危險因素。并有可能出現(xiàn)酮癥酸中毒等急性并發(fā)癥（二）臨床意義

HbA1c≥6.5％：糖尿病患者；HbA1c在5.7％～6.4％之間：屬于糖尿病前期。2．對糖尿病性高血糖和應(yīng)激性高血糖做出鑒別：前者GHb水平多增高，后者正常。3．HbA1c水平低于確定的參考區(qū)間，可能表明最近有低血糖發(fā)作、Hb變異體存在或紅細(xì)胞壽命短，減少或縮短了紅細(xì)胞暴露到葡萄糖中的時間。當(dāng)解釋此類患者的HbA1c結(jié)果時應(yīng)當(dāng)小心。4．GHb對監(jiān)測糖尿病微小血管并發(fā)癥、慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展都有積極的意義。若GHb＞9%說明患者有持續(xù)性高血糖存在，會發(fā)生糖尿病腎病、白內(nèi)障等，同時也是AMI、腦卒中死亡的高危因素。（二）臨床意義

四、糖化血清蛋白測定糖化血清蛋白是指血液中的葡萄糖與血清蛋白的N末端發(fā)生非酶促的糖基化反應(yīng)，形成高分子酮胺化合物，其結(jié)構(gòu)類似果糖胺，總稱為糖化血清蛋白。由于90％以上糖化血清蛋白是糖化白蛋白(glycatedalbumin，GA)，即葡萄糖與白蛋白鏈內(nèi)賴氨酸殘基上的ε-氨基結(jié)合生成，因此GA可以反映糖化血清蛋白的總體水平。什么是糖化血清蛋白？白蛋白的半壽期為17～19天，比血紅蛋白短，轉(zhuǎn)換率快，故可通過測定GA水平來反映受試者2～3周前的血糖控制情況，是一個短期血糖控制的評價指標(biāo)。為什么要測糖化血清蛋白？（一）測定方法目前臨床常用：果糖胺法、酮胺氧化酶法

【實驗原理】血清中的果糖胺，在堿性環(huán)境下能還原硝基四氮唑藍(NBT)為紫紅色甲臜，在530nm波長處有最大吸收峰,與同樣處理的果糖胺標(biāo)準(zhǔn)液進行比較，即可計算出樣本中糖化血清蛋白的含量?！緟⒖紖^(qū)間】成人果糖胺：1.9mmol/L±0.25mmol/L【方法評價】該法經(jīng)濟、快速，適用于自動生化分析儀，但pH、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間，對本實驗影響較大，必須嚴(yán)格予以控制。血液中的膽紅素、乳糜和低分子物質(zhì)會對測定造成干擾。（一）測定方法1、果糖胺法【實驗原理】（一）測定方法2、酮胺氧化酶法藍紫色色素生成量在一定范圍內(nèi)與GA含量成正比，通過測定吸光度值來定量GA；同時采用溴甲酚綠法測定血清總白蛋白的含量，從而計算出糖化白蛋白占總白蛋白的百分比?！緟⒖紖^(qū)間】

成人糖化白蛋白：10.8％～17.1％(引自2011年《中國血糖監(jiān)測臨床應(yīng)用指南》)【方法學(xué)評價】

本法簡便快捷，可運用于自動生化分析儀，精密度、準(zhǔn)確度優(yōu)于果糖胺法，而且膽紅素、甘油三酯、抗壞血酸、尿酸、血紅蛋白及葡萄糖等對其干擾較小。該法與HPLC參考方法有極好的相關(guān)性。（一）測定方法

1、評價短期血糖控制情況：白蛋白在體內(nèi)半壽期較短(約20天左右)，且白蛋白與葡萄糖結(jié)合的速度比血紅蛋白快，故GA可有效地反映糖尿病患者近2～3周內(nèi)血糖控制情況，特別適用于住院調(diào)整藥物的病人。

2、輔助鑒別應(yīng)激性高血糖：急性應(yīng)激如外傷、感染以及急性心腦血管事件等發(fā)生時，非糖尿病會出現(xiàn)高血糖，與糖尿病難以區(qū)分。GA與HbA1c聯(lián)合測定有助于判斷高血糖的持續(xù)時間，可作為既往糖尿病病史的輔助診斷。3、GA≥17.1％可以篩査出大部分未經(jīng)診斷的糖尿病患者，同時測定FPG和GA可提高糖尿病的篩查率。（二）臨床意義

五、胰島素測定及胰島素釋放試驗

它由胰島β細(xì)胞合成、分泌，并以胰島素原的形式儲存在胰島β細(xì)胞中，最終胰島素原被水解成等分子的活性胰島素和無活性的C肽，并釋放入血液中發(fā)揮生物學(xué)作用。胰島素是降低血糖的主要激素胰島素胰島素的主要作用促進肝、骨骼肌和脂肪組織對葡萄糖的攝取抑制肝臟的糖異生促進葡萄糖轉(zhuǎn)換成糖原或脂肪儲存刺激蛋白質(zhì)合成并抑制其分解總效應(yīng):血糖降低

胰島素測定及胰島素釋放試驗是診斷和治療糖尿病的兩個主要試驗。試驗方法和測定對象完全相同，但標(biāo)本的采集方法和觀察目的有所區(qū)別。通過胰島素測定，可以了解胰腺β細(xì)胞的分泌功能。胰島素釋放試驗可反映胰腺β細(xì)胞的儲備能力。標(biāo)本采集方法及注意事項與OGTT完全相同，常與OGTT試驗同時進行。（一）測定方法胰島素檢測方法免疫學(xué)法放射免疫分析(RIA)酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)電化學(xué)發(fā)光免疫分析(ECLIA)時間分辨熒光免疫分析法（TrFIL)非免疫法同位素稀釋法(IDA)高效液相色譜法(HPLC)（一）測定方法現(xiàn)在臨床多采用CLIA或ECLIA標(biāo)本中的胰島素和包被于固相磁珠或固相上的單克隆抗體及標(biāo)記有酶或電化學(xué)發(fā)光物質(zhì)的單克隆抗體形成雙抗體夾心復(fù)合物，通過磁場或沖洗除去未反應(yīng)的標(biāo)記單克隆抗體，加入酶底物使之顯色或通電使電化學(xué)發(fā)光物質(zhì)形成激發(fā)態(tài)并在衰減時發(fā)射光子，底物顯色強度或發(fā)光強度與胰島素含量成正比?！緦嶒炘怼靠崭挂葝u素:4.0U/L～15.6U/L(CLIA法）?？崭挂葝u素:17.8pmol/L～173.0pmol/L(ECLIA法)正常人胰島素分泌常與血糖值呈平行狀態(tài)，服糖后高峰在30～60分鐘，通常為空腹值的5～10倍，達到峰值后的胰島素下降很快，180分鐘的測定值只比空腹值略高?！緟⒖紖^(qū)間】

對存在空腹低血糖的患者進行評估。預(yù)測2型糖尿病的發(fā)展趨勢并可評估患者狀況，也可預(yù)測糖尿病易感性。通過測定血漿胰島素濃度和胰島素抗體水平來評估胰島素抵抗機制。糖尿病的早期檢測和診斷：糖尿病臨床癥狀出現(xiàn)之前，胰島素對服用葡萄糖的反應(yīng)較遲鈍。鑒別需胰島素治療的糖尿病患者和僅靠飲食即可控制的糖尿病患者。如：在口服75g葡萄糖后血漿胰島素水平超過60μU/ml時不可能發(fā)生微血管并發(fā)癥，這時能夠靠飲食控制；但如果胰島素峰值＜40μU/ml，則需要胰島素治療而且很可能發(fā)生微血管病變。（二）臨床意義胰島素測定的主要臨床用途：

ABCDE1型糖尿病空腹胰島素值低，服糖后仍無反應(yīng)或反應(yīng)低下，呈